Resumo A região de Souss em Marrocos é conhecida nacional e internacionalmente pelo seu conhecimento essencial da medicina tradicional à base de plantas e pela herança cultural da nutrição. A espécie endêmica Argania spinosa (L.) Skeels é uma importante planta crucial utilizada pela população local para tratar muitas doenças e preparar alguns alimentos autênticos. Para identificar os usos terapêuticos da árvore de argan [Argania spinosa (L.) Skeels] e seus benefícios na preparação de alimentos autênticos, a pesquisa foi realizada por meio de questionários semiestruturados. Conseguimos 450 entrevistas com profissionais de saúde tradicionais e aldeões experientes na região de Chtouka Aït Baha e Tiznit (Anti-Atlas Ocidental). Paralelamente a esta pesquisa, coletamos alguns manuscritos locais antigos de praticantes convencionais da região. Os dados obtidos foram analisados por meio de índices etnobotânicos específicos, como Valor de Uso (UV), Nível de Fidelidade (FL) e Frequência Relativa de Citação (RFC). Paralelamente, analisamos o valor nutricional de alguns alimentos autênticos derivados do óleo de argan (Amlou, Tagoulla e Labsis). Todos os 450 entrevistados utilizam o óleo de argan na alimentação ou para o preparo de seus autênticos alimentos derivados (Amlou, Tagoulla e Labsis); entre eles, 100 pessoas utilizam o argan, além da alimentação, no tratamento de diversas doenças com UV e RFC a 1,94 e 0,22, respectivamente. Entre oito doenças tratadas pela árvore de argan, o tratamento de doenças de pele e subcutâneas teve um valor muito significativo do índice FL (98%). Da mesma forma, a análise dos manuscritos coletados na área de estudo revelou um antigo uso terapêutico da árvore de argan. Os resultados também mostram que o óleo de argan extraído da semente é utilizado para preparar alimentos autênticos com valor nutricional significativo, especialmente Amlou.

Abstract The Souss region in Morocco is known nationally and internationally for its essential knowledge of traditional herbal medicine and the cultural heritage of nutrition. The endemic species Argania spinosa (L.) Skeels is an important crucial plant used by the local population to treat many diseases and prepare some authentic foods. To identify the therapeutic uses of the Argan tree [Argania spinosa (L.) Skeels] and their benefits in preparing authentic foods, the survey was conducted using semi-structured questionnaires. We have achieved 450 interviews with traditional health practitioners and knowledgeable villagers. In the region of Chtouka Aït Baha and Tiznit (Western Anti-Atlas). In parallel with this survey, we collected some old local manuscripts from conventional practitioners in the region. The data obtained were analyzed using specific ethnobotanical indices such as Use Value (UV), Fidelity Level (FL), and Relative Frequency of Citation (RFC). In parallel, we analyzed the nutritional value of some authentic foods derived the argan oil (Amlou, Tagoulla, and Labsis). All 450 interviewees use the argan oil in food or for the preparation of their authentic foods derived (Amlou, Tagoulla, and Labsis); among them, 100 persons use Argan, in addition to food, in the treatment of various diseases with UV and RFC at 1.94 and 0.22, respectively. Among eight treated diseases by argan tree, the treatment of skin and subcutaneous diseases had a very highly significant value of the FL index (98%). Similarly, the analysis of the manuscripts collected in the study area revealed an ancient therapeutic use of the argan tree. The results also show that the Argan oil extracted from the seed is used to prepare authentic foods with significant nutritional value, especially Amlou.

Resumo As penas representam 7% do peso total das galinhas adultas e a proteína de queratina compõe 85% das penas. Hoje, as enzimas queratinase de algumas cepas de Bacillus são usadas para degradar e processar resíduos de queratina brutos para alimentação de animais e aves. De acordo com vários estudos, as propriedades probióticas de alguns Bacillus em forma de esporos também foram comprovadas. O estudo teve como objetivo o isolamento das bactérias queratinolíticas Bacillus que possuem propriedades probióticas para uso na indústria de ração animal e avícola. Conseguimos isolar 8 cepas de Bacillus licheniformis com propriedades degradantes de creatina do solo do abatedouro de frangos de Baharan (cidade de Qom, Irã) aplicando choque térmico, meio de cultura rico em álcool e queratina e, após análise microscópica e bioquímica, o gene 16S rDNA foi isolado. Os resultados da medição da atividade da queratinase mostraram que as três cepas de Bacillus licheniformis pvkr6, pvkr15 e pvkr41 tiveram a maior atividade com 124,08, 101,1 e 100,18 U/ml. Os resultados da avaliação das propriedades probióticas também revelaram que dentre todos os isolados apenas Bacillus licheniformis pvkr15 e Bacillus licheniformis PTCC 1595 (controle positivo) eram cepas γ-hemolíticas. A porcentagem de hidrofobicidade superficial das cepas foi obtida de 3,27 a 30,57. Também foi demonstrado que, em média, todas as cepas apresentaram suscetibilidade aceitável aos antibióticos testados, exceto penicilina G. Bacillus licheniformis pvkr15 com maior atividade de queratinase (101,1U/ml) foi considerado um probiótico opcional devido às suas habilidades como formação de biofilme, sendo causa segura de atividade γ-hemolítica, alta suscetibilidade a antibióticos como estreptomicina, gentamicina, cefixima, amoxicilina, tetraciclina, vancomicina, eritromicina e ter uma hidrofílica moderada (hidrofobicidade: 19,09%), alta capacidade de sobrevivência em pH 2, 2,5 e 3, forte resistência aos sais biliares e atividade antagonista moderada contra bactérias patogênicas como Proteus mirabilis e a capacidade de crescer em condições anaeróbicas. Ao utilizar esta cepa, após a hidrólise da proteína queratina na estrutura da pena, para substituir parte da proteína da ração de gado e aves, não só não há necessidade de separar as bactérias da ração, mas também a cepa desempenha um papel útil e eficaz aditivo no crescimento animal.

Abstract Feathers make up 7% of the total weight of adult chickens and keratin protein makes up 85% of the feathers. Today, the keratinase enzymes of some Bacillus strains are used to degrade and process raw keratin waste for animal and poultry feed. According to various studies, the probiotic properties of some spore-shaped Bacillus have also been proven. The study aimed to isolation of the keratinolytic Bacillus bacteria that they have probiotic properties for using in the livestock and poultry feed industry. We were able to isolate 8 strains of Bacillus licheniformis with kreatin degrading properties from the soil of Baharan chicken slaughterhouse (Qom city, Iran) applying heat shock, alcohol- and keratin-rich culture medium, and after microscopic and biochemical analysis, 16S rDNA gene was isolated. The measurement results of keratinase activity showed that the three strains of Bacillus licheniformis pvkr6, pvkr 15, and pvkr41 had the highest activity with 124.08, 101.1, and 100.18 U/ml. The results of probiotic properties evaluation also revealed that among all the isolates, only Bacillus licheniformis pvkr15 and Bacillus licheniformis PTCC 1595 (positive control) were γ-hemolytic strains. The percentage of surface hydrophobicity of the strains was obtained from 3.27 to 30.57. It was also shown that, on average, all the strains had acceptable susceptibility to the tested antibiotics except penicillin G. Bacillus licheniformis pvkr15 with highest keratinase activity (101.1U/ml) was considered an optional probiotics due to its abilities such as (biofilm formation, being safe cause of γ-hemolytic activity, high susceptibility to antibiotics such as streptomycin, gentamicin, cefixime, amoxicillin, tetracycline, vancomycin, erythromycin and having a moderate hydrophilic (hydrophobicity: 19.09%), high survivability in pH 2, 2.5 and 3, strong resistance to bile salts and moderate antagonistic activity against pathogenic bacterium like Proteus mirabilis and the ability to grow under anaerobic conditions). By using this strain, after hydrolysis of keratin protein in the feather structure, to replace part of the protein of livestock and poultry feed, not only is no need to separate bacteria from the feed, but also the strain play role of an useful and effective additive in animal growth.

Resumo O conteúdo de dopamina nas estruturas cerebrais tem sido relacionado à excitabilidade neuronal e várias abordagens têm sido utilizadas para estudar este fenômeno durante o período de vulnerabilidade às crises. No presente trabalho, descrevemos os efeitos da depleção de dopamina após a administração de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) na região pars compacta da substância negra de ratos submetidos ao modelo de epilepsia com pilocarpina. A susceptibilidade ao estado de mal epiléptico induzido pela pilocarpina, bem como a frequência de crises espontâneas e recorrentes durante o período crônico do modelo foi determinada. Sendo o hipocampo uma das principais estruturas afetadas no desenvolvimento desse modelo experimental de epilepsia, os níveis de dopamina nessa região foram determinados após a administração da droga. No primeiro experimento, 62% (15/24) dos ratos pré-tratados com 6-OHDA e 45% (11/24) daqueles que receberam ácido ascórbico como solução controle evoluíram para crises límbicas motoras e para o estado de mal epiléptico, após a administração de pilocarpina. A gravidade das crises durante o período agudo do modelo foi significativamente maior nos ratos epilépticos experimentais (56,52%) do que nos ratos controle (4,16%). No segundo experimento, não houve diferença significante entre os grupos quanto à frequência de crises na fase crônica do modelo. Nossos dados mostraram que a dopamina pode desempenhar um papel importante na gravidade das crises na fase aguda da pilo, o que parece ser exercido por sua ação inibitória da dopamina sobre a expressão motora das crises.

Abstract The dopamine content in cerebral structures has been related to neuronal excitability and several approaches have been used to study this phenomenon during seizure vulnerability period. In the present work, we describe the effects of dopamine depletion after the administration of 6-hidroxidopamine (6-OHDA) into the substantia nigra pars compacta of male rats submitted to the pilocarpine model of epilepsy. Susceptibility to pilocarpine-induced status epilepticus (SE), as well as spontaneous and recurrent seizures (SRSs) frequency during the chronic period of the model were determined. Since the hippocampus is one of main structures in the development of this experimental model of epilepsy, the dopamine levels in this region were also determined after drug administration. In the first experiment, 62% (15/24) of 6-OHDA pre-treated rats and 45% (11/24) of those receiving ascorbic acid as control solution progressed to motor limbic seizures evolving to SE, after the administration of pilocarpine. Severeness of seizures during the model´s the acute period, was significantly higher in epileptic experimental rats (56.52%), than in controls (4.16%). In the second experiment, the frequency of seizures in the model’s chronic phase did not significantly change between groups. Our data show that dopamine may play an important role on seizure severity in the pilo’s model acute period, which seems to be due to dopamine inhibitory action on motor expression of seizure.

Resumo A presença de bactérias patogênicas em alimentos é considerada a principal causa de doenças transmitidas por alimentos e deterioração da qualidade dos alimentos em todo o mundo. O presente estudo teve como objetivo determinar a eficácia de cinco óleos essenciais (OEs) contra patógenos de origem alimentar multirresistentes. No presente estudo, bactérias Gram-negativas (Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Pseudomonas e Klebsiella) e as bactérias Gram-positivas Staphylococcus foram isoladas do leite cru e caracterizadas bioquimicamente. O efeito antibacteriano de diferentes antibióticos e OEs (tomilho, orégano, capim-limão, hortelã e alecrim) foi determinado usando o método padrão de difusão em disco. O estudo do antibiograma revelou que as bactérias Gram-negativas eram altamente resistentes à penicilina, enquanto o Staphylococcus era resistente à estreptomicina, amoxicilina e lincomicina. Foi observada resistência moderada à doxiciclina, amicacina, enrofloxacina, canamicina e cefixima. Os isolados foram encontrados menos resistentes à gentamicina, cloranfenicol e ciprofloxacina. Os OEs mostraram uma ampla gama de atividade antimicrobiana contra todas as bactérias, exceto P. aeruginosa. Destes, o tomilho foi mais eficaz contra a maioria das cepas bacterianas multirresistentes e formou a maior zona de inibição (26 mm) contra Escherichia seguido de óleo de orégano (18 mm) contra Staphylococcus (p<0,05). Klebsiella spp e Citrobacter spp apresentaram resistência ao óleo de menta e capim-limão, respectivamente. Os OEs como capim-limão, hortelã e alecrim foram menos ativos contra todas as bactérias. Os resultados do estudo recente sugerem o uso de OEs como agentes antibacterianos naturais para conservação de alimentos.

Abstract The presence of pathogenic bacteria in food is considered as a primary cause of food-borne illness and food quality deterioration worldwide. The present study aimed to determine the effectiveness of five essential oils (EOs) against multidrug-resistant foodborne pathogens. In the current study Gram-negative bacteria (Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Pseudomonas, and Klebsiella) and the Gram-positive bacteria Staphylococcus were isolated from raw milk and biochemically characterized. The anti-bacterial effect of different antibiotics and EOs (thyme, oregano, lemongrass, mint, and rosemary) was determined using the standard disc diffusion method. The antibiogram study revealed that Gram-negative bacteria were highly resistant to penicillin while Staphylococcus was resistant to streptomycin, amoxicillin, and lincomycin. Moderate resistance was observed to doxycycline, amikacin, enrofloxacin, kanamycin and cefixime. Isolates were found less resistant to gentamycin, chloramphenicol, and ciprofloxacin. EOs showed a broad range of antimicrobial activity against all bacteria except P. aeruginosa. Of these, thyme was more effective against most of the multi-drug resistant bacterial strains and formed the largest zone of inhibition (26 mm) against Escherichia followed by oregano oil (18 mm) against Staphylococcus (p<0.05). Klebsiella spp and Citrobacter spp showed resistance to mint and lemongrass oil respectively. The EOs such as lemongrass, mint and rosemary were less active against all the bacteria. The findings of the recent study suggest the use of EOs as natural antibacterial agents for food preservation.

Resumo Este artigo descreve os impactos ambientais da produção de uma única muda em viveiros florestais de distritos selecionados (Haripur, Abbottabad e Manshera) da divisão Hazara, de Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão, usando a abordagem de avaliação do ciclo de vida (ACV). Este estudo baseou-se na abordagem “do berço ao portão”, que se inicia na fase pré-viveiro e progride em direção ao viveiro principal antes do transplante das mudas para o local de plantio. Os dados ou inventário de ciclo de vida (ICV) da produção de mudas foram coletados por meio de questionários e reuniões pessoais com o gerente e os trabalhadores dos viveiros florestais sobre o consumo de diferentes insumos, como energia elétrica, diesel, fertilizantes, herbicidas, sacos de polietileno, adubo orgânico e consumo de água. O software SimaPro, versão 8.5, e o modelo ambiental CML2000, v2.05, foram aplicados para realizar a avaliação de impacto do ciclo de vida (AICV) de uma única produção de mudas em viveiros florestais na área de estudo. Em consonância com os objetivos do estudo, os dados primários relativos às entradas e saídas dos viveiros foram coletados de 35 viveiros na área de estudo por meio de um método de questionário aleatório. Além disso, dados secundários foram obtidos de bancos de dados online, como Eco-invent v.3.2 CORRIM e literatura publicada revisada por pares. Para este estudo, foi considerada uma unidade funcional de uma única plântula. Os dados médios ponderados de produção foram modelados no software de modelagem ambiental mais recente, ou seja, SimaPro, v.8.5, para 10 impactos ambientais mais desejados pela US-EPA, como potencial de aquecimento global (PAG), depleção abiótica (DA), potencial de eutrofização (PE), potencial de acidificação (PA), ecotoxicidade de água doce (EAD), ecotoxicidade da água marinha (EAM), ecotoxicidade terrestre (ET), destruição da camada de ozônio (DCO), oxidação fotoquímica (OF) e toxicidade humana (TH). Os resultados mostraram que o maior impacto ambiental causado por uma única muda foi a ecotoxicidade da água marinha (11,31360 kg 1,4-DB eq), seguido pelo potencial de aquecimento global (0,02945 kg CO2 eq) e toxicidade humana (0,01227 kg 1,4-DB eq) eq). A principal razão para esses ônus ambientais foi o uso de fertilizantes sintéticos em viveiros florestais e o consumo de combustíveis fósseis nas atividades de mecanização e transporte de viveiros. A demanda total acumulada de energia para uma única muda foi de 0,800 MJ, com mais de 90% de contribuição de recursos energéticos de combustíveis fósseis, como gasolina e diesel. Portanto, é altamente recomendável usar recursos de energia renovável e fertilizantes orgânicos em vez de fertilizantes químicos em viveiros florestais para evitar e minimizar as emissões de gases de efeito estufa (GEE) e outras emissões tóxicas na área de estudo.

Abstract This article describes the environmental impacts of producing a single seedling in forest nurseries of selected districts (i.e., Haripur, Abbottabad, and Mansehra) of Hazara Division of Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan using the life cycle assessment (LCA) approach. This study was based on the cradle-to-gate approach which begins with the pre-nursery stage and progresses toward the main nursery before transplanting seedlings into the plantation site. Data or life cycle inventory (LCI) of seedling production were collected through questionnaire surveys and personal meetings with forest nurseries managers and workers regarding consumption of different inputs such as electricity, diesel, fertilizers, herbicides, and polyethylene bags, organic manure, and water consumption. The SimaPro software version 8.5 and the CML2000 v2.05 environmental model was applied to perform life cycle impact assessment (LCIA) for a single seedling production in forest nurseries in the study area. In line with the objectives of the study, primary data regarding inputs and outputs of the nurseries were collected from 35 nurseries in the study area by using a random questionnaire method. In addition, secondary data were taken from online databases such as Eco-invent v.3.2 CORRIM and peer-reviewed published literature. For this study, a functional unit of a single seedling was considered. Production weighted average data were modeled in the latest environmental modeling software i.e., SimaPro v.8.5 for ten US-EPA most wanted environmental impacts, such as global warming potential (GWP), abiotic depletion (AD), eutrophication potential (EP), acidification potential (AP), freshwater aquatic eco-toxicity (FAE), marine water eco-toxicity (MWE), terrestrial eco-toxicity (TE), ozone layer depletion (OLD), photochemical oxidation (PO), and human toxicity (HT). The results showed that the highest environmental impact posed by a single seedling was marine aquatic eco-toxicity (11.31360 kg 1,4-DB eq), followed by global warming potential (0.02945 kg CO2 eq) and (0.01227 kg 1,4-DB eq) human toxicity. The primary reason for these environmental burdens was the use of synthetic fertilizers in forest nurseries and the consumption of fossil fuels in nursery mechanization and transportation activities. The total cumulative energy demand for a single seedling was (0.800 MJ) with more than 90% contribution from fossil fuel energy resources such as petrol and diesel. It is therefore highly recommended to use renewable energy resources and organic fertilizers instead of chemical fertilizers in forest nurseries to avoid and minimize greenhouse gas emissions (GHS) and other toxic emissions in the study area.

Resumo Nigella sativa é conhecida pelo perfil de segurança, contendo uma grande variedade de compostos antivirais úteis. A principal protease (Mpro, 3CLpro) da síndrome respiratória aguda grave 2 (SARS-CoV-2) está sendo considerada como um dos alvos virais mais atraentes, processando as poliproteínas durante a patogênese e replicação viral. Na presente investigação analisamos a potência do componente ativo, timoquinona (TQ) de Nigella sativa contra SARS-CoV-2 Mpro. As estruturas de TQ e Mpro foram recuperadas de PubChem (CID10281) e Protein Data Bank (PDB ID 6MO3), respectivamente. O Mpro e o TQ foram acoplados e o complexo foi submetido a simulações de dinâmica molecular (MD) por um período de 50ns. O efeito de dobramento de proteínas foi analisado usando o raio de giração (Rg) enquanto a estabilidade e a flexibilidade foram medidas usando a raiz quadrada média dos desvios (RMSD) e a raiz média quadrada da flutuação (RMSF), respectivamente. Os resultados da simulação mostram que o TQ está exibindo boa atividade de ligação contra o SARS-CoV-2 Mpro, interagindo em muitos resíduos presentes no sítio ativo (His41, Cys145) e também o Glu166, facilitando o formato da bolsa. Além disso, são necessárias abordagens experimentais para validar o papel do TQ contra a infecção pelo vírus. O TQ está interferindo nos resíduos de manutenção do bolso, bem como no sítio ativo do vírus Mpro, que pode ser usado como um potencial inibidor contra o SARS-CoV-2 para um melhor gerenciamento da Covid-19.

Abstract Nigella sativa is known for the safety profile, containing a wealth of useful antiviral compounds. The main protease (Mpro, 3CLpro) of severe acute respiratory syndrome 2 (SARS-CoV-2) is being considered as one of the most attractive viral target, processing the polyproteins during viral pathogenesis and replication. In the current investigation we analyzed the potency of active component, thymoquinone (TQ) of Nigella sativa against SARS-CoV-2 Mpro. The structures of TQ and Mpro was retrieved from PubChem (CID10281) and Protein Data Bank (PDB ID 6MO3) respectively. The Mpro and TQ were docked and the complex was subjected to molecular dynamic (MD) simulations for a period 50ns. Protein folding effect was analyzed using radius of gyration (Rg) while stability and flexibility was measured, using root means square deviations (RMSD) and root means square fluctuation (RMSF) respectively. The simulation results shows that TQ is exhibiting good binding activity against SARS-CoV-2 Mpro, interacting many residues, present in the active site (His41, Cys145) and also the Glu166, facilitating the pocket shape. Further, experimental approaches are needed to validate the role of TQ against virus infection. The TQ is interfering with pocket maintaining residues as well as active site of virus Mpro which may be used as a potential inhibitor against SARS-CoV-2 for better management of COVID-19.

Resumo A produção de plantas transgênicas com características agronômicas e hortícolas desejadas vem ganhando grande importância por atender às demandas da crescente população. A transformação genética também é um passo fundamental para estudar os fundamentos das ciências das plantas. Foram desenvolvidos e utilizados diferentes protocolos de transformação, que são confiáveis e eficientes. Esses protocolos usaram genes de resistência a antibióticos ou herbicidas incorporados ao gene de interesse para identificar plantas transformadas e não transformadas. Esses genes marcadores podem representar uma ameaça ao ser humano e ao meio ambiente. O uso de marcadores visuais permite a observação direta e fácil de plantas transformadas com mais precisão. No estudo atual, foi projetado um cassete de genes com o gene da hidroxilase de produção de pigmentos (PPH) sob promotor específico de fibra (GhSCFP) e terminador NOS a jusante. Após verificar a eficiência estrutural e funcional do gene otimizado por códons usando ferramentas de bioinformática, o cassete foi enviado para síntese química a partir de fonte comercial. O cassete do gene do pigmento (PPH_CEMB), clonado em pCAMBIA-1301, foi transformado em Agrobacterium por eletroporação. O método de imersão floral mediado por Agrobacterium foi usado para transformar a inflorescência de Camelina sativa. Após a formação de sementes, foi observado um total de 600 sementes com mudança de cor, das quais 19 desenvolveram uma coloração marrom-avermelhada, enquanto as 581 restantes permaneceram amarelas. A eficiência de transformação calculada com base na mudança de cor foi de 1%. A análise de PCR das folhas obtidas após a semeadura de sementes avermelhadas confirmou a transformação do gene produtor de pigmentos, enquanto não foi observada amplificação por PCR em folhas de plantas de sementes do tipo selvagem. A partir dos resultados, é evidente que a transformação da inflorescência de C. sativa mediada por Agrobacterium é uma técnica muito eficiente e favorável ao ambiente não só para a detecção de plantas transformadas, mas também para estudar processos celulares básicos.

Abstract Production of transgenic plants with desired agronomic and horticultural traits has gained great importance to fulfill demands of the growing population. Genetic transformation is also a fundamental step to study basics of plant sciences. Different transformation protocols have been developed and used which are reliable and efficient. These protocols used antibiotic or herbicide resistance genes incorporated along with gene of interest to identify transformed plants from non-transformed ones. These marker genes may pose a threat to human and environment. Use of visual markers enables direct and easier observation of transformed plants with more precision. In current study a gene cassette with ‘pigment production hydroxylase (PPH) gene under fiber specific promoter (GhSCFP) and downstream Nos-terminator was designed. After checking the structural and functional efficiency of codon optimized gene using bioinformatics tools, the cassette was sent for chemical synthesis from commercial source. The pigment gene cassette (PPH_CEMB), cloned in pCAMBIA-1301, was transformed into Agrobacterium through electroporation. Agrobacterium-mediated floral dip method was used to transform Camelina sativa inflorescence. After seed setting a total of 600 seed were observed for change in color and out of these, 19 seeds developed a reddish-brown coloration, while the remaining 581 seeds remained yellow. The transformation efficiency calculated on basis of color change was 1.0%. PCR analysis of leaves obtained after sowing reddish seeds confirmed the transformation of pigment production gene, while no PCR amplification was observed in leaves of plants from wild type seeds. From the results it is evident that Agrobacterium-mediated transformation of C. sativa inflorescence is very efficient and environment friendly technique not only for detection of transformed plants but also to study basic cellular processes.

Resumo Efeito da Inclinação na Estrutura de uma Floresta do Domínio Mata Atlântica no Sul do Brasil. A composição da paisagem em mosaico de fragmentos florestais localizados em encostas altas, solos rasos dificultam as interações ecológicas e a sobrevivência de espécies vegetais. Este estudo teve como objetivo mostrar em um ambiente com essas características o efeito do gradiente ambiental relacionando o solo, a declividade e a vegetação de um fragmento de Floresta Estacional Semidecidual Montana. A estrutura da floresta foi amostrada em 12 parcelas retangulares contínuas, com 30X20m, totalizando 0,72ha. As amostras de solo foram coletadas por perfuração a cada 20m ao longo do divisor hidrográfico e abertura de três trincheiras usadas como locais de amostragem de solo para determinação in situ da cor do solo, horizonte e nutrientes. Os horizontes foram classificados como O/A/Cr na rocha alterada com presença marcante de cascalhos, e o solo foi classificado como Neossolo Litólico. A área apresenta declive acentuado, de 18,05% a 36,99%. A análise de regressão linear destacou o padrão oposto de riqueza de espécies em relação à inclinação e uma relação positiva entre a inclinação e o número de indivíduos mortos em pé. A riqueza de espécies também foi positivamente relacionada à distância das bordas da floresta. A avaliação evidenciou que a forte influência do declive e das atividades antrópicas no remanescente florestal são fatores comuns a diversos remanescentes de altitude, e pequenas ações de conservação podem garantir sua manutenção.

Abstract The mosaic landscape composition of forest fragments located on high slopes, shallow soils hinder ecological interactions and the survival of plant species. This study aimed to show, in an environment with these characteristics, the effect of the environmental gradient relating the soil, slope, and vegetation of a fragment of the Montane Seasonal Semideciduous Forest. The forest structure was sampled in 12 continuous rectangular plots, with 30 X 20m, totaling 0.72ha. Soil samples were taken by drilling every 20m along the hydrographic divisor and opening of three trenches used as soil sampling sites for in situ determination of soil color, horizon, and nutrients. Horizons were classified as O/A/Cr in the altered rock with a marked presence of gravels, and the soil was classified as Litholic Neosol. The area has a steep slope, from 18.05% to 36.99%. Linear regression analysis indicated an opposite pattern for species richness in relation to slope and a positive relationship between slope and the number of standing dead individuals. Species richness was also positively related to the distance from forest edges. The evaluation evidenced the strong influence of slope and human activities in forest remnant as common to several high-altitude remnants, and small conservation actions can guarantee their maintenance.

Resumo Esta revisão sistemática integra os dados disponíveis na literatura sobre as atividades biológicas dos extratos de fungos endofíticos isolados de Annona muricata e seus metabólitos secundários. A busca foi realizada em quatro bases de dados eletrônicas e a qualidade dos estudos foi avaliada por meio de instrumento de avaliação adaptado. A pesquisa inicial no banco de dados gerou 436 resultados; dez estudos foram selecionados para inclusão. A folha foi a parte mais estudada da planta (em nove estudos); Periconia sp. foi o fungo mais testado (n = 4); a atividade biológica mais avaliada foi anticâncer (n = 6), seguida de antiviral (n = 3). As atividades antibacteriana, antifúngica e antioxidante também foram testadas. Terpenóides ou compostos híbridos de terpenóides foram os metabólitos químicos mais abundantes. Compostos fenólicos, ésteres, alcalóides, ácidos graxos saturados e insaturados, compostos aromáticos e peptídeos também foram relatados. Os estudos selecionados destacaram a potencialidade biotecnológica dos extratos de fungos endofíticos de A. muricata. Por conseguinte, esta planta pode ser considerada uma fonte promissora de compostos biológicos com efeitos antioxidantes e ativos contra diversos micro-organismos e células cancerígenas. Mais pesquisas são necessárias envolvendo diferentes tecidos vegetais, outros microorganismos, como SARS-CoV-2, e diferentes células cancerosas.

Abstract This systematic review integrates the data available in the literature regarding the biological activities of the extracts of endophytic fungi isolated from Annona muricata and their secondary metabolites. The search was performed using four electronic databases, and studies' quality was evaluated using an adapted assessment tool. The initial database search yielded 436 results; ten studies were selected for inclusion. The leaf was the most studied part of the plant (in nine studies); Periconia sp. was the most tested fungus (n = 4); the most evaluated biological activity was anticancer (n = 6), followed by antiviral (n = 3). Antibacterial, antifungal, and antioxidant activities were also tested. Terpenoids or terpenoid hybrid compounds were the most abundant chemical metabolites. Phenolic compounds, esters, alkaloids, saturated and unsaturated fatty acids, aromatic compounds, and peptides were also reported. The selected studies highlighted the biotechnological potentiality of the endophytic fungi extracts from A. muricata. Consequently, it can be considered a promising source of biological compounds with antioxidant effects and active against different microorganisms and cancer cells. Further research is needed involving different plant tissues, other microorganisms, such as SARS-CoV-2, and different cancer cells.

Resumo Foi avaliado o potencial do extrato aquoso (AME) de Alhagi maurorum (Boiss.), usado na medicina tradicional para tratamento ou prevenção de urolitíase, para dissolver cálculos de oxalato de cálcio in vitro. Para determinar o potencial litolítico do extrato, cálculos urinários de oxalato de cálcio foram incubados durante 12 semanas sob agitação contínua na presença de AME, Rowanix ou solução de NaCl 9 g/mL foram usados como controles. Após o período de incubação, o peso residual dos cálculos tratados foi determinado e a taxa de dissolução foi calculada. A variação do pH médio foi medida e as alterações nos cristais de oxalato de cálcio na superfície da pedra foram avaliadas usando um microscópio eletrônico de varredura (MEV). Os resultados mostraram um efeito de dissolução significativo para o extrato sobre os cálculos renais durante o período de experimentação. Ao final do experimento, os percentuais de diminuição do peso dos cálculos foram de 41,23, 4,97 e 55,67% para o extrato, solução de NaCl e Rowanix, respectivamente. A análise por cromatografia gasosa revelou principalmente a presença dos seguintes fitocompostos: Ciclopropenona, 2,3-difenil; 1-Nonadecanol; metil-alfa-D-manopiranosídeo; cis-9-hexadecenal. Esses compostos indiscutivelmente desempenham papéis cruciais no sistema de saúde, especialmente no tratamento do câncer e de muitas outras doenças, incluindo urolitíase. A dissolução do cálculo urinário, independente do pH médio, pode ser atribuída à formação de complexos entre os compostos fitoquímicos do extrato e os cálculos.

Abstract The potential of Alhagi maurorum (Boiss.) aqueous extract (AME), used in traditional medicine for treatment or prevention of urolithiasis, to dissolve calcium oxalate stones in vitro was evaluated. In order to determine the litholytic potential of the extract, Calcium oxalate urinary stones were incubated during 12 weeks under continuous shaking in the presence of AME, Rowanix or NaCl 9 g/mL solution were used as controls. After the incubation period, the residual weight of the treated calculi was determined and the rate of dissolution was calculated. The medium pH variation was measured and changes in the calcium oxalate crystals at the stone surface were assessed using a scanning electron microscope (SEM). The results showed a significant dissolution effect for the extract on the kidney calculi during the experimentation period. At the end of the experiment, the percentages of calculi weight decrease were 41.23, 4.97 and 55.67% for the extract, NaCl solution and Rowanix, respectively. Gas Chromatography analysis revealed mainly the presence of the following phyto-compounds: Cyclopropenone, 2,3-diphenyl; 1-Nonadecanol; methyl-alpha-D-mannopyranoside; cis-9-Hexadecenal. These compounds unarguably play crucial roles in the health care system especially in cancer treatment and many other diseases including urolithiasis. The urinary stone dissolution, independent of medium pH, could be attributed to formation of complexes between the phytochemical compounds in the extract and the calculi.

Resumo Insetos galhadores são abundantes na natureza, encontrados em muitos ecossistemas globalmente, com espécies atacando plantas de importância econômica. Os efeitos de herbívoros de alimentação livre na abundância de insetos galhadores em árvores de Caryocar brasiliense (Caryocaraceae) no Cerrado brasileiro (Savana) foram estudados. A porcentagem de desfolha e o número de ácaros fitófagos ou de Hemiptera fitófagos correlacionaram-se, negativamente, com a percentagem de folhas galhadas e de adultos do parasitoide Eurytoma sp. (Hymenoptera: Eurytomidae), respectivamente. Porcentagem de folhas galhadas e o número de Eurytoma sp. adultos e ácaros fitófagos correlacionaram-se, positivamente, com o de aranhas. Os números de ácaros e fitófagos Hemiptera correlacionaram-se, positivamente, com os de joaninhas e Sycophila sp. (Hymenoptera: Eurytomidae), respectivamente. O número de adultos de Ablerus magistretti Blanchard (Hymenoptera: Aphelinidae) correlacionou-se, negativamente, com Sycophila sp. O número de Agistemus sp. (Acari: Stigmaeidae) correlacionou-se, negativa e positivamente, com os de joaninhas e ácaros fitófagos, respectivamente. Herbívoros de alimentação livre afetaram a presença de insetos galhadores (Hymenoptera) em árvores de C. brasiliense, competindo por alimento e espaço. O mesmo foi observado entre dois parasitoides de Eurytoma sp., o que pode reduzir o controle biológico natural dessa praga.

Abstract Galling insects are abundant in nature, found in many ecosystems globally, with species attacking plants of economic importance. We studied the effects of free-feeding organisms on the abundance of galling insects on Caryocar brasiliense (Caryocaraceae) trees in the Brazilian Cerrado (Savanna). Percentage of defoliation and the number of phytophagous mites or number of phytophagous Hemiptera correlated negatively with percentage of galled leaves and the parasitoid Eurytoma sp. (Hymenoptera: Eurytomidae) adults, respectively. Percentage of galled leaves and the numbers of Eurytoma sp. adults and phytophagous mites correlated positively with spiders. Numbers of mites and Hemiptera phytophagous correlated positively with those of lady beetles and Sycophila sp. (Hymenoptera: Eurytomidae), respectively. The number of Ablerus magistretti Blanchard (Hymenoptera: Aphelinidae) adults correlated negatively with Sycophila sp. The number of Agistemus sp. (Acari: Stigmaeidae) correlated, negatively and positively, with those of lady beetles and phytophagous mites, respectively. Free-feeding herbivores affected the presence of galling insects (Hymenoptera) on C. brasiliense trees, competing for food and space. The same was observed between two parasitoids of Eurytoma sp. galling insect, which can reduce the natural biological control of this pest.

Resumo O trabalho de pesquisa foi projetado para investigar a densidade e diversidade de rotíferos pelágicos em um lago perto de Marala Headworks. Foram avaliados os parâmetros físico-químicos da água como pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade elétrica, transparência e turbidez. A correlação entre rotíferos e esses parâmetros também foi estudada. A amostragem do plâncton foi realizada mensalmente para verificar a densidade populacional dos rotíferos. No total, foram identificadas 18 espécies de rotíferos pertencentes a 11 gêneros. O maior número de rotíferos e sua diversidade foi demonstrado pelos gêneros Brachionus, Keratella e Filinia. O Brachionus calyciflorus foi a espécie dominante em todas as amostras, com densidade populacional média (41%). A análise de variância dos parâmetros físico-químicos mostrou que a temperatura do ar e da água, condutividade elétrica, transparência, oxigênio dissolvido e saturação de oxigênio foram estatisticamente significantes em todos os meses. Enquanto o pH foi estatisticamente não significativo (p≥0,05), a correlação de Pearson mostrou que o oxigênio e a transparência foram negativamente correlacionados com a densidade e diversidade dos rotíferos. A temperatura do ar e da água, a concentração de íons de hidrogênio (pH), a condutividade elétrica e a salinidade mostraram relação positiva com a densidade e diversidade de rotíferos.

Abstract Research work was designed to investigate the density and diversity of pelagic rotifers in a Lake near Marala Headworks. The physico-chemical parameters of water such as pH, dissolved oxygen, temperature, electrical conductivity, transparency and turbidity were evaluated. Correlation between rotifers and these parameters was also studied. Plankton sampling was done on monthly basis in order to check the population density of rotifers. In total, 18 species of rotifers were identified which belonged to 11 genera. The highest number of rotifers and their diversity was shown by genera namely Brachionus, Keratella, and Filinia. The Brachionus calyciflorus was dominant species in all the samples with mean population density (41%). Analysis of variance of physico-chemical parameters presented that the air and water temperature, electrical conductivity, transparency, dissolved oxygen and oxygen saturation were statistically significant in all the months. While pH was statistically non-significant (p≥0.05. Pearson correlation showed that oxygen and transparency were negatively correlated with rotifers density and diversity. Air and water temperature, concentration of hydrogen ions (pH), electrical conductivity and salinity showed positive relationship with density and diversity of rotifers.

Resumo Tâmaras frescas de 17 variedades e khalts do sul do Marrocos foram analisadas por sua cor, conteúdo de pigmentos e perfil sensorial. Os resultados mostraram diferenças significativas entre os perfis sensoriais das amostras devido à variabilidade do genótipo e suas diferentes origens. Variedades de tâmaras frescas e khalts foram consideradas uma boa fonte de β-caroteno (0,49-10,86 µg de β-caroteno / 100 g FW). Na verdade, os resultados revelaram que as variedades de tâmaras e khalts apresentam uma boa composição funcional e boas características sensoriais. Portanto, essas variedades de tâmaras marroquinas podem ser usadas para consumo in natura e na indústria de processamento, que constituirá uma fonte considerável de antioxidantes.

Abstract Fresh dates of seventeen varieties and khalts from Southern Morocco were analysed for their colour, pigments content, and sensory profile. The results showed significant differences between the sensory profiles of the samples due to the variability of the genotype and their different origin. Fresh date varieties and khalts were a good source of β-carotene (0.49 - 10.86 µg of β-carotene /100 g FW). The results revealed that the date varieties and khalts were found to have an excellent functional composition and good sensory characteristics. Therefore, these varieties of Moroccan dates could be used for fresh consumption and in the processing industry, which will constitute a significant source of antioxidants.

Resumo A bioacumulação de metais pesados tóxicos no corpo humano pode causar efeitos adversos à saúde, cuja gravidade depende de sua dosagem e duração da exposição. Neste estudo, filhotes de duas espécies diferentes de peixes comestíveis, ou seja, Tor putitora (Mahseer) e Ctenopharyngodon idella (carpa-capim), foram expostos a diferentes concentrações de nitrato de chumbo em um ambiente controlado de aquário por três diferentes períodos de duração (14, 28 e 60 dias). A bioacumulação de chumbo em diferentes órgãos, incluindo brânquias, pele, músculos, fígado, intestino e bexiga natatória dos peixes, foi avaliada por espectrometria de absorção atômica. Geralmente, a maior concentração de chumbo foi observada nas brânquias e a menor nos músculos para ambas as espécies em cada dosagem e duração experimental. Na exposição de 14 dias, o padrão relativo de bioacumulação em diferentes órgãos foi observado como brânquia > fígado > pele > intestino > bexiga natatória > músculo para ambas as espécies de peixes. Da mesma forma, o padrão de bioacumulação observado em 28 dias de exposição foi: brânquia > fígado > intestino > pele > bexiga natatória > músculo em ambas as espécies. Já o padrão de exposição de 60 dias foi observado como brânquia > fígado > intestino > bexiga natatória > músculo > pele. Os dados mostram que a carpa-capim armazenou maiores concentrações de chumbo do que a Mahseer, o que pode ser atribuído ao fato de serem onívoras. Além disso, a menor bioacumulação foi registrada nos músculos até o 56º dia de exposição, após o que a concentração aumentou de forma constante nos músculos. O padrão observado destaca a importância da duração da exposição ao chumbo; a exposição crônica pode resultar em sua bioacumulação em concentrações tóxicas nos músculos, o que é particularmente preocupante porque os músculos dos peixes são muito consumidos como alimento em todo o mundo.

Abstract Bioaccumulation of toxic heavy metals in the human body can give rise to adverse health effects, the severity of which depends upon their dosage and duration of exposure. In this study, yearlings of two different species of edible fish, i.e., Tor putitora (Mahseer) and Ctenopharyngodon Idella (grass carp), were exposed to different concentrations of lead nitrate in a controlled environment of aquarium for three different lengths of duration (14, 28, and 60 days). The bioaccumulation of lead in different organs, including gills, skin, muscles, liver, intestine, and swim bladder of the fish, was assessed using atomic absorption spectrometry. Generally, the highest lead concentration was observed in the gills and lowest in the muscles for both species at each experimental dosage and duration. In 14-days exposure, the relative pattern of bioaccumulation in different organs was observed as gill > liver > skin > intestine > swim bladder > muscle for both fish species. Similarly, the pattern of bioaccumulation observed in 28-days exposure was as: gill > liver > intestine > skin > swim bladder > muscle in both species. Whereas, pattern in 60-days exposure was observed as gill > liver > intestine > swim bladder > muscle > skin. The data shows that grass carp had stored higher concentrations of lead than Mahseer, which may be attributed to the fact that they are omnivorous. Furthermore, the lowest bioaccumulation was recorded in the muscles until the 56th day of the exposure, after which the concentration steadily increased in the muscles. The observed pattern highlights the importance of exposure’s duration to lead; chronic exposure could result in its bioaccumulation at toxic concentrations in the muscles, which is particularly of concern because the fish muscles are heavily consumed as food worldwide.

Resumo Os faisões estão diminuindo em todo o mundo, por isso informações atualizadas sobre sua população e seus habitats são importantes para conservação e manejo. O presente estudo foi realizado no vale Palas, distrito de Kohistan, Paquistão, no final da primavera (maio e junho) de 2020 e início da primavera (março e abril) de 2021 para avaliar a população e o estresse antropogênico. O foco principal foram três espécies simpátricas de faisão, incluindo Tragopan de Chifres Ocidental (Tragopan melanocephalus), Monal-do-Himalaia (Lophophorus impejanus) e Faisão Koklass (Pucrasia macrolopha). Foi utilizado o “Método de Contagem de Chamadas” para avaliar a população em campo, e foi realizada uma pesquisa por questionário para documentar a avaliação de risco dos moradores locais do vale. As avaliações populacionais revelaram que o Faisão Koklass está mais adaptado às crescentes atividades antrópicas e que sua população se mantém mais ou menos semelhante à população de 22 anos atrás. Nos últimos 22 anos, Tragopan de Chifres Ocidental e Monal-do-Himalaia perderam cerca de 40 a 50% de suas populações. A interferência humana, sob a forma de caça ilegal, desmatamento e sobrepastoreio, era comum no vale. O estudo conclui que o habitat do vale Palas é ideal para espécies de faisão; no entanto, a interferência humana, por meio de urbanização, fragmentação de habitat, caça ilegal e desmatamento, está ocorrendo em ritmo acelerado, causando estragos na população de faisões.

Abstract Pheasants are declining everywhere in the world and therefore updated information about their population and habitats are important for conservation and management. The present study was conducted in the Palas Valley, District Kohistan, Pakistan in late spring (May and June) 2020 and early spring (March and April) 2021 to assess the population and anthropogenic stress. The major focus was on three sympatric pheasant species, including Western Horned Tragopan (Tragopan melanocephalus), Himalayan Monal (Lophophorus impejanus), and Koklass Pheasant (Pucrasia macrolopha). We used the “Call Count Method” for the population assessment in the field, and a questionnaire survey was conducted to document the risk assessment of local residents of the valley. The population assessments revealed that the Koklass Pheasant is more adapted to increasing anthropogenic activities and its population appeared more or less similar as 22 years ago. In the past 22 years, Western Tragopan and Himalayan Monal have lost about 40–50% of their populations. Human interference in the form of illegal hunting, deforestation, and overgrazing was found to be common in the valley. The study concludes that the Palas Valley habitat is ideal for pheasant species; however, human interference in the form of urbanization, habitat fragmentation, illegal hunting, and deforestation is occurring at a rapid pace, causing havoc in the pheasant population.