ABSTRACT. Banana (Musa spp.) is one of the main fruits consumed worldwide. However, finger drop, is a physiological disorder that causes many postharvest problems, which eventually reduces market value and consumer acceptance. Therefore, the objective of the study was to evaluate the anatomical changes that occur in the pedicel rupture area (drop zone) of bananas diploids (BB França) and tetraploid (BRS Pioneira) in three ripening stages. The levels of gene expression involved in the natural ripening process and in the development of finger drop, was also investigated. The accumulation of their mRNAs and those of expansin (EXP1), pectate lyase (PEL1) and xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase protein (XTH4) genes already isolated from bananas were measured by quantitative polymerase chain reaction in three ripening stages. BB França presented a higher resistance to finger drop due to the presence of some specific morphoanatomical characteristics, such as larger parenchymal cells and greater deposition of lignin. In contrast, there was degeneration of the pedicel parenchymal tissue of the BRS Pioneira genotype, forming large empty spaces during the ripening of the fruits, mainly in stage 6, which contributed to the finger drop. The diploid BB França is a strong candidate for use in banana breeding programs aimed at fruit drop resistance. This will certainly improve the quality of banana varieties. Moreover, PEL1 proved to be an excellent candidate gene for functional studies of finger drop in bananas.

ABSTRACT Cenostigma pyramidale [Tul.] has timber, forage and medicinal uses, and due to the exploitation of its natural resources, it may become endangered. This work aimed to induce callus in Cenostigma pyramidale and to identify the embryogenic potential by histomorphological and biochemical analysis. Leaf segments were inoculated in MS culture medium containing different concentrations (0.0; 2.5; 5.0 and 10.0 μM) of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), combined with 6-benzylaminopurine (BAP; 0.0; 2.5 and 5.0 μM) and glutamine (0.0; 0.342 and 0.684 mM). The growth curve was performed at 7-day intervals until day 77, and samples were collected for histomorphological analysis and determination of reducing sugars (RA), sucrose, and total soluble sugars (TSS) content. Callus induction is possible using leaf segments in treatment with 5.0 μM of BAP, 7.0 µM of 2.4-D and 0.684 mM of glutamine. The growth curve shows sigmoidal behavior with five distinct phases: lag, exponential, linear, deceleration and decline. It was verified the presence of cells with meristematic characteristics from the 7th day of induction, suggesting that the calli have embryogenic potential. However, differentiation of somatic embryos was not observed. There was a reduction in RA content and increase in AST and sucrose during the lag phase and beginning of the exponential phase, followed by degradation in the exponential phase until the decline phase, showing the involvement of these carbohydrates with callus growth. These results are unprecedented for the species and suggest future studies related to callus maturation aiming the differentiation of somatic embryos.

RESUMO Cenostigma pyramidale [Tul.] possui utilização madeireira, forrageira e medicinal e, em virtude da exploração de seus recursos naturais, pode acabar em via de extinção. Este trabalho objetivou induzir calos em Cenostigma pyramidale e identificar o potencial embriogênico por análises histomorfológica e bioquímica. Segmentos foliolares foram inoculados em meio de cultura MS contendo diferentes concentrações (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0 μM) de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), combinadas com 6-benzilaminopurina (BAP; 0,0; 2,5 e 5,0 μM) e glutamina (0,0; 0,342 e 0,684 mM). A curva de crescimento foi realizada em intervalos de 7 dias, até o 77º dia, sendo coletadas amostras para análise histomorfológica e determinação do conteúdo de açúcares redutores (AR), sacarose e açúcares solúveis totais (AST). É possível a indução de calos utilizando segmentos foliolares no tratamento com 5,0 μM de BAP, 7,0 µM de 2,4-D e 0,684 mM de glutamina. A curva de crescimento apresenta comportamento sigmoidal com cinco fases distintas: lag, exponencial, linear, desaceleração e declínio. Verificou-se a presença de células com características meristemáticas a partir do 7º dia de indução, sugerindo que os calos possuem potencial embriogênico. Porém, não se observou a diferenciação de embriões somáticos. Verificaram-se redução no conteúdo de AR e aumento de AST e sacarose durante a fase lag e início da fase exponencial, seguido de degradação na fase exponencial até a fase de declínio, mostrando o envolvimento destes carboidratos com o crescimento dos calos. Esses resultados são inéditos para a espécie e sugerem estudos futuros relacionados à maturação dos calos visando a diferenciação de embriões somáticos.

RESUMO As bromélias são alvo de extrativismo predatório e com isso muitas estão inseridas na lista vermelha de espécies ameaçadas, a exemplo das que pertencem ao gênero Neoregelia. Apesar da Neoregelia mucugensis não ter sido avaliada quanto ao grau de ameaça, sua exploração é exclusivamente extrativista e sua ocorrência na Chapada Diamantina-BA está sujeita à ação das queimadas que afetam a região anualmente. Neste contexto, a aplicação de técnicas que visem proteger este recurso genético é fundamental tanto para manutenção de suas populações naturais quanto para conservação ex situ deste material genético. Técnicas de cultura de tecidos vegetais têm sido aplicadas com êxito para conservação de diversas espécies de bromélias. Um dos métodos utilizados é o crescimento lento que consiste na redução do metabolismo da planta e consequentemente na desaceleração do seu crescimento, o que possibilita a manutenção das coleções de plantas in vitro sem necessidade de subcultivo. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi testar a redução de sais do meio de cultura e a adição de osmorregulador na indução do crescimento lento de N. mucugensis. Plantas foram submetidas a tratamentos compostos por diferentes concentrações do meio MS e de manitol pelo período de 12 meses, quando então foram realizadas as análises de crescimento, teor de clorofila e capacidade de regeneração de brotos in vitro. Constatou-se que o tratamento contendo MS ½ e 7,8 g.L-1 de manitol é indicado para a conservação in vitro de N. mucugensis com manutenção da capacidade regenerativa dos seus tecidos.

ABSTRACT Bromeliads are the target of predatory extractivism and consequently many species are included in the red list of threatened species, such as those belonging to the genus Neoregelia. Although Neoregelia mucugensis has not been evaluated for the degree of threat, its exploitation is exclusively extractive and its occurrence in Chapada Diamantina-BA is subject to the action of fires that affect the region annually. In this context, applying techniques aimed at protecting this genetic resource is fundamental for both the maintenance of its natural populations and the ex situ conservation of this genetic material. Plant tissue culture techniques have been successfully applied for the conservation of several bromeliad species. One of the methods used is slow growth, which consists in reducing plant metabolism and consequently decelerating its growth, which allows the maintenance of in vitro plant collections without the need for subculture. In this context, the objective of this study was to test the reduction of salts in the culture medium and the addition of osmoregulators on the induction of slow growth of N. mucugensis. Plants were subjected to treatments composed of different concentrations of MS medium and mannitol for a period of 12 months, when then analyses were conducted to evaluate growth, chlorophyll content and regeneration capacity of shoots in vitro. It was found that the treatment containing MS ½ and 7.8 g.L-1 of mannitol is indicated for in vitro conservation of N. mucugensis with maintenance of the regenerative capacity of its tissues.

RESUMO O gênero Melocactus (cabeça-de-frade) possui 32 espécies no Brasil, das quais M. glaucescens e M. paucispinus estão ameaçadas de extinção. O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito de diferentes concentrações de sais do meio Murashige e Skoog (MS, MS/2 e MS/4) e sacarose (15 g L-1 e 30 g L-1) na germinação de sementes e crescimento de plantas in vitro de M. glaucescens e a eficiência da esterilização do meio de cultura com hipoclorito de sódio (NaOCl) na germinação de sementes e crescimento de plantas in vitro de M. glaucescens ao utilizar sementes, M. glaucescens e M. paucispinus ao utilizar o segmento apical do cladódio. Para M. glaucescens a germinação final nas diferentes concentrações de MS e sacarose, variou de 53,5 a 68.1% e os melhores resultados para o crescimento in vitro foram observados nas menores concentrações de sais (MS/2 e MS/4) e de sacarose (15 g L-1) com valores de comprimento da parte aérea de 9,70 e 10,76 mm, respectivamente. Não houve diferença na germinação das sementes e crescimento das plantas em meio químico e autoclavado. Conclui-se que, o uso da esterilização química com NaOCl em baixas concentrações de sais (MS/2 e MS/4) e sacarose (15 g L-1) são as mais indicadas para produção de plantas ornamentais germinadas in vitro e /ou segmento apical do cladódio de M. glaucescens e M. paucispinus, o que representa uma redução de custo no cultivo in vitro dessas espécies.

ABSTRACT The genus Melocactus (“cabeça-de-frade”) comprises 32 species in Brazil, of which M. glaucescens and M. paucispinus are threatened with extinction. The present work evaluated the effects of different concentrations of Murashige & Skoog (MS, MS/2 and MS/4) culture medium and sucrose (15 g L-1 and 30 g L-1) on in vitro seed germination and plant growth of M. glaucescens and the efficiency of sterilization with sodium hypochlorite (NaOCl) on in vitro seed germination and plant growth of M. glaucescens when using seeds and M. glaucescens and M. paucispinus when using apical segment of cladode. In M. glaucescens, the final germination at the different MS and sucrose concentrations varied between 53.5 and 68.1% and the best results for in vitro growth were observed with the lowest mineral salt (MS/2 and MS/4) and sucrose (15 g L-1) concentrations, with lengths of the aerial portion of 9.70 and 10.76 mm, respectively. There was no difference in seed germination and plant growth in chemical and autoclave medium. It is concluded that the use of chemical sterilization with NaOCl at low concentrations of salts (MS/2 and MS/4) and sucrose (15 g L-1) are quite advantageous for producing ornamental plants germinated in vitro and/or apical segment of cladode of M. glaucescens andM. paucispinus, representing a reduction of costs for in vitro cultivation of this species.

Resumo As sempre-vivas são plantas que mantêm o aspecto vivo de suas estruturas mesmo após serem coletadas, e por esta característica são comercializadas como ornamentais de alto valor econômico; contudo, devido à coleta extrativista de suas inflorescências algumas espécies se encontram em perigo de extinção. O gênero Comanthera compreende as sempre-vivas de maior importância econômica para o Brasil. Estudos apontam a cultura de tecidos como estratégia para a propagação e conservação in vitro de espécies deste gênero; entretanto as pesquisas publicadas ainda são incipientes. Diante disso, o objetivo desta revisão foi reunir publicações sobre o cultivo in vitro do gênero Comanthera com o intuito de fundamentar estudos futuros com suas espécies. Para tanto, esta revisão está estruturada em dois tópicos principais: micropropagação e conservação in vitro.

Abstract The term “sempre-viva” denotes plants whose structures retain their natural form and color after being cut and dried. For these reasons, they are commercially valuable for ornamental purposes. However, due to extractive overexploitation of their inflorescences, some of these species are considered endangered. The genus Comanthera includes the sempre-vivas species with greatest economic importance in Brazil. Previous studies have shown that tissue culture is a workable strategy for in vitro propagation and conservation of species of this genus. However, these studies are still incipient. Therefore, the objective of this review is to summarize the findings on the in vitro cultivation of species of the Comanthera genus, to serve as the basis for future research. The text is structured in two main topics: micropropagation and in vitro conservation.

Resumo Este trabalho teve o objetivo de avaliar a resposta morfogênica da micropropagação de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana após diferentes tratamentos com citocinina e auxinas. O estabelecimento in vitro se deu a partir de sementes de plantas adultas, com aproximadamente 2 anos de idade. Após descontaminação as sementes foram inoculadas em meio MS. Após 30 dias da germinação, foram isolados segmentos caulinares com aproximadamente 5 mm, e em seguida, foram transferidos para meio MS suplementado com BAP nas concentrações 4,44; 8,88 ou 13,32 µM. Ao final de 225 dias de cultivo, foi avaliado o número de brotos / explante, altura de brotações, porcentagem de enraizamento, número de raízes e comprimento de raízes. Verificou-se que, para as duas espécies, a concentração 4,44 µM de BAP mostrou maior eficiência para a multiplicação. Para a etapa de enraizamento, os brotos obtidos in vitro foram inoculados em meio MS com metade da concentração salina de macronutrientes, acrescido com 1, 2 e 3 µM de AIB ou ANA. Aos 60 dias, verificou-se que as duas espécies apresentaram 100% de enraizamento em meio de cultura sem a adição de reguladores de crescimento. Após enraizamento as plantas foram transferidas para substrato, e aos 180 dias de cultivo foi verificado sobrevivência superior a 80%, independente da espécie.

Abstract The objective of this study was to evaluate the morphogenic response of Aechmea miniata and Aechmea blanchetiana after different treatments with cytokinins and auxins during micropropagation. In vitro cultures were established from seeds of adult plants, approximately 2 years old. After sterilization, the seeds were inoculated in MS médium. 30 days after germination, caulin segments of approximately 5 mm were isolated, then, transferred to MS medium supplemented with BAP at concentrations of 4.44, 8.88, and 13.32 µM. At the end of 225 days of culture, the number of buds/explants, height of shoots, percentage of rooting, number of roots, and length of roots were evaluated. It was found that 4.44 µM BAP induced relatively higher frequency of multiplication in both species. For rooting, the shoots obtained in vitro were inoculated in MS medium with half of the concentration of macronutrient salts, and 1, 2, and 3 µM AIB or ANA. At 60 days, the two species exhibited 100% rooting in the médium without the addition of growth regulators. After rooting the plants were transferred to substrate, and at 180 days of culture, the survival rate was more than 80%, independent of the species.

RESUMO Myracrodruon urundeuva Fr. All. é uma árvore ameaçada de extinção, que possui potencial madeireiro e medicinal. Objetivou-se estudar a regeneração de brotos in vitro de M. urundeuva, visando aumentar a porcentagem de multiplicação da espécie. Foram realizados dois experimentos: 1) concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) (0,0; 2,0; 4,0; 8,0; e 16,0 µM), combinadas com ácido naftalenoacético (ANA) (0,0; 1,5; e 3,0 µM) em explantes (cotilédone, hipocótilo e nó cotiledonar); 2) concentrações de meta-topolina (mT) (0,0; 2,0; 4,0; 8,0; 16,0; e 32,0 µM) sob explantes (segmento nodal basal biaxilar, mediano uniaxilar e apical). Avaliaram-se a porcentagem de explantes responsivos para regeneração de brotações, porcentagem de explantes que formaram calos, número de brotos e comprimento da parte aérea. No primeiro experimento, observou-se regeneração de brotações apenas nos explantes do tipo nó cotiledonar e hipocótilo, sendo a maior porcentagem (76,67 %) de responsividade e número de brotos (1,97 e 1,63) obtidos com o nó cotiledonar na presença de 3,0 µM de ANA, combinado com 2,0 (1,97 brotos/explante) e 4,0 µM (1,63 brotos/explante) de mT. No segundo experimento, a resolução da equação quadrática obtida indica que o maior número de brotos (1,86) é alcançado utilizando-se o explante basal com 24,59 µM de mT adicionado ao meio de cultura. No entanto, apesar de a mT ter elevado o número médio de brotações, observou-se formação de calos em todos os tratamentos contendo essa citocinina. Conclui-se que é possível regenerar brotações em M. urundeuva a partir do nó cotiledonar com o uso de BAP combinado com ANA.

ABSTRACT Myracrodruon urundeuva Fr. All. is a tree threatened with extinction, which has wood and medicinal potential. This study aimed to analyze the in vitro shoot regeneration in M. urundeuva, in order to increase the species multiplication. Two experiments were conducted: 1) concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 2.0, 4.0, 8.0 and 16.0 µM), in association with naphthaleneacetic acid (NAA) (0.0, 1.5 and 3.0 µM), in explants (cotyledon, hypocotyl and cotyledonary node); 2) concentrations of meta-topolin (mT) (0.0, 2.0, 4.0, 8.0, 16.0 and 32.0 µM) in explants (biaxillary, medial uniaxillary and apical basal nodal segment). The percentage of explants responsive to shoot regeneration, percentage of callus explants, number of shoots and shoot length were evaluated. In the first experiment, the shoot regeneration occurred only in explants of the cotyledonary node and hypocotyl type, with the highest responsiveness percentage (76.67 %) and number of shoots (1.97 and 1.63) obtained for the cotyledonary node in the presence of 3.0 µM of NAA in association with 2.0 (1.97 shoots/explant) and 4.0 µM (1.63 shoots/explant) of mT. In the second experiment, the resolution of the obtained quadratic equation indicates that the use of basal explant with 24.59 µM of mT added to the culture medium leads to the highest number of shoots (1.86). However, despite the mT having increased the mean number of shoots, all treatments containing this cytokinin showed callus formation. As a conclusion, it is possible to regenerate shoots in M. urundeuva from the cotyledonary node using BAP in association with NAA.

RESUMO Physalis ixocarpa Brot. ex Horm. é considerada a espécie economicamente mais importante do gênero. A cultura de tecidos é apontada como uma estratégia para a sua propagação; no entanto, pesquisas indicam que as respostas in vitro são genótipo-dependentes. Objetivou-se avaliar a morfogênese in vitro das variedades verde e roxa de P. ixocarpa, tendo-se em vista a propagação massiva da espécie. A capacidade morfogênica dos explantes nó cotiledonar, hipocótilo e cotilédone foi avaliada em meio Murashige & Skoog suplementado com benzilaminopurina - BAP (0,00; 2,5; 5,0; 7,5; ou 10,0 µM) e ácido naftalenoacético - ANA (0,00 ou 2,5 μM), utilizando-se delineamento experimental inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 5 x 2, sendo 30 tratamentos para cada variedade. Foram analisados o número de brotos por organogênese direta e indireta e a porcentagem de explantes com calo. A expressão morfogenética in vitro de P. ixocarpa é influenciada pelo tipo de explante e pelos reguladores vegetais BAP e ANA. O explante nó cotiledonar é eficiente para a produção de brotos via organogênese direta nas duas variedades estudadas.

ABSTRACT Physalis ixocarpa Brot. ex Horm. is considered the most economically important species of the genus. Tissue culture is pointed out as a strategy for its propagation, but researches indicate that in vitro responses are genotype-dependent. This study aimed to evaluate the in vitro morphogenesis of the P. ixocarpa green and purple varieties, in view of the massive propagation of the species. The morphogenic capacity of the explants cotyledonary node, hypocotyl and cotyledon was evaluated in Murashige & Skoog medium supplemented with benzylaminopurine - BAP (0.00, 2.5, 5.0, 7.5 or 10.0 μM) and naphthaleneacetic acid - NAA (0.00 or 2.5 μM), using a completely randomized experimental design, in a 3 x 5 x 2 factorial scheme, with 30 treatments for each variety. The number of shoots per direct and indirect organogenesis and the percentage of explants with callus were analyzed. The in vitro morphogenetic expression of P. ixocarpa is influenced by the type of explant and by the plant regulators BAP and NAA. The cotyledonary node explant is efficient for the production of shoots via direct organogenesis in the two varieties studied.

Resumo Myracrodruon urundeuva Fr. All. é uma árvore que pertence à família Anacardiaceae, conhecida popularmente como aroeira-do-sertão; possui potencial para utilização madeireira e medicinal, entretanto está ameaçada de extinção. Este trabalho objetivou estudar a calogênese da aroeira-do-sertão, bem como analisar bioquimicamente os calos produzidos, visando estudos posteriores em embriogênese somática. Explantes foliares foram inoculados em meio de cultura MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) suplementado com diferentes concentrações (0,0; 2,5; 5,0; 10,0 e 20,0 μM) de 2,4-D (2,4-diclorofenoxiacético), (0,0; 2,5 e 5,0 μM) CIN (cinetina) e (0,0; 0,34; 0,68 e 1,37 μM) glutamina. Para a curva de crescimento, pesou-se a massa fresca dos explantes com e sem calos até o 56º dia de cultivo, em intervalos de 7 dias. Foram determinados os açúcares redutores (AR), a sacarose e os açúcares solúveis totais (AST) em cada período da curva de crescimento. A utilização de 2,4-D é eficiente para a indução de calos em Myracrodruon urundeuva e a calogênese é potencializada com a combinação de 2,4-D, CIN e glutamina no meio nutritivo. A curva de crescimento dos calos de Myracrodruon urundeuva apresenta forma sigmoidal com cinco fases: lag, exponencial, linear, desaceleração e estacionária. O conteúdo de sacarose e AST apresentou comportamento distinto de acordo com as diferentes fases de crescimento dos calos, exibindo acúmulo de açúcares no período de preparação para o crescimento, degradação na fase exponencial e nova fase de acumulação nos estágios finais (desaceleração e estacionária). O conteúdo de AR, excetuando o dia “zero”, se manteve estável durante todos os períodos avaliados. Os calos de Myracrodruon urundeuva possuem potencial embriogênico, no entanto sugerem-se novos estudos para obtenção de embriões somáticos, bem como identificação do período em que os mesmos serão formados.

Abstract Myracrodruon urundeuva Fr. All.is a tree belonging to the family Anacardiaceae, popularly known as ‘aroeira-do-sertão’, which has potential for wood production and medicinal purposes but it is threatened with extinction. This work investigated the callogenesis of the species and biochemically analyzed the calli produced, aiming at further studies of somatic embryogenesis. Leaf explants were inoculated in MS culture medium (Murashige and Skoog, 1962) supplemented with different concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (0.0, 2.5, 10.0 and 20.0 μM), kinetin (0.0, 2.5 and 5.0 μM) and glutamine (0.0, 0.34, 0.68 and 1.37 μM). For the growth curve, the fresh mass of explants with and without calli was determined until the 56th day of culture, at intervals of 7 days. Reducing sugars (RS), sucrose and total soluble sugars (TSS) were measured at each growth curve period. The use of 2,4-D was efficient for callus induction in Myracrodruon urundeuva, and callogenesis was enhanced with the combination of 2,4-D, KIN and glutamine in the nutrient medium. The growth curve of the calli presented sigmoidal shape with five distinct phases: lag, exponential, linear, deceleration and stationary. The content of sucrose and TSS presented different behavior according to the different stages of callus growth, exhibiting accumulation of sugars in the period of preparation for growth, degradation in the exponential phase and once again accumulated these carbohydrates in the final stages (deceleration and stationary). The RS content, except day zero, remained stable during all evaluated periods. The calli of Myracrodruon urundeuva have embryogenic potential, but further studies are suggested to obtain somatic embryos, as well as to identify the period in which they are formed.

RESUMO Vernonia condensata Baker tem sido tradicionalmente usada na medicina popular para o tratamento de vários processos inflamatórios e infecciosos. A exploração excessiva dessa espécie de planta tem reduzido drasticamente a sua população em seu habitat natural (Cerrado). Portanto, ferramentas de cultura de tecidos, como a embriogênese somática, podem ser usadas como um método alternativo para a regeneração de plantas de forma rápida e em larga escala. O objetivo do estudo foi induzir a calogênese de Vernonia condensata a partir de diferentes tipos de explantes e avaliar os aspectos estruturais do desenvolvimento de massas pró-embriogênicas desta espécie, por meio de análises histológicas. A formação dos calos foi induzida a partir de segmentos foliares e internodais inoculados em meio EME acrescido de 50 g L-1 de sacarose, 0,5 g L-1 extrato de malte e 2,68 μM ANA, variando-se as concentrações de BAP (0,00; 2,22, 4,44 e 8,88 μM). Após 40 dias avaliou-se os seguintes caracteres morfogenéticos: intensidade de calo formado, intensidade de oxidação, textura do calo e morfogênese. Os calos com massas embriogênicas foram analisadas por microscopia de luz e eletrônica de varredura. Ambos os tipos de explantes são responsivos quanto à calogênese, sendo que a concentração de 4,44 μM BAP promove formação de calos friáveis associada à maior porcentagem de calos com massas embriogênicas. Células de explantes foliares e segmentos internodais foram capazes de desdiferenciarem e se transformar em estruturas embrionárias.

ABSTRACT Vernonia condensata Baker has been traditionally used in folk medicine for the treatment of several inflammatory and infectious processes. Overexploitation of this plant species has drastically reduced its population in its natural habitat (Cerrado). Therefore, tissue culture tools, such as somatic embryogenesis, can be used as an alternative method for rapid and large-scale plant regeneration. The objectives of this study were to induce callogenesis in Vernonia condensata from different types of explants and to evaluate the structural aspects of the development of pro-embryogenic masses of this species by means of histological analyses. The formation of calli was induced from leaf explants and internodal segments, which were inoculated in EME medium supplemented with 50 g L-1 sucrose, 0.5 g L-1 malt extract and 2.68 μM NAA, plus varying concentrations of BAP (0.00, 2.22, 4.44 or 8.88 μM). After 40 days, the following morphogenetic traits were evaluated: intensity of callus formation, intensity of oxidation, callus texture, and morphogenesis. The calli with embryogenic masses were analyzed by light and scanning electron microscopy. Both types of explants were responsive regarding callogenesis, with the BAP concentration of 4.44 μM promoting the formation of friable calli associated with a larger percentage of calli with embryogenic masses. Cells from leaf explants and internodal segments were able to dedifferentiate and change into embryonic structures.

RESUMO: A cultura de tecidos, através do crescimento mínimo, possibilita a conservação in vitro dos recursos genéticos vegetais, tornando-se uma técnica complementar aos métodos convencionais de conservação. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do meio de cultura suplementado com sacarose, manitol e agentes osmóticos sorbitol na indução de crescimento mínimo in vitro de A. cearensis, buscando estabelecer técnicas alternativas para conservação ex situ da espécie. Plantas com 10 dias foram inoculadas em meio de cultura WPM suplementado com diferentes concentrações de sacarose (87,64; 131,46; 175,28 e 262,92 mM) combinado com manitol ou sorbitol nas concentrações (0,0; 43,8; 65,73; 87,64 e 131,46 mM), solidificados com 0,7% de ágar. Foram avaliados a porcentagem de sobrevivência, número de folhas senescentes, comprimento da parte aérea, comprimento da raiz, massa seca da parte aérea, massa seca da raiz e número de brotos. A conservação de A. cearensis mostrou-se viável até 300 dias, em meio de cultura WPM suplementado com 262,92 mM de sacarose ou na combinação de 87.64 mM de sacarose com 43.80 mM de manitol. Assim sendo, além de apresentarem porcentagem de sobrevivência acima de 55.0%, as plantas conservadas nesses meios apresentaram um desenvolvimento normal e com melhores aparências com predomínio de folhas verdes uniformes ao longo do processo de armazenamento.

ABSTRACT: Slow-growth tissue culture allows in vitro conservation of plant genetic resources and is a complementary technique to conventional preservation methods. The objective of this study was to evaluate the effect of the culture medium supplemented with sucrose, mannitol and sorbitol osmotic agents on the induction of in vitro slow growth of A. cearensis, seeking to establish alternative techniques for ex situ conservation of the species. Plants with age of 10 days were inoculated in woody plant medium (WPM) supplemented with different concentrations of sucrose (87.64, 131.46, 175.28 or 262.92 mM) combined with mannitol or sorbitol at varying concentrations (0.0, 43.8, 65.73, 87.64 or 131.46 mM), solidified with 0.7% agar. The following parameters were evaluated: survival percentage, number of senescent leaves, aerial part length, root length, aerial part dry mass, root dry mass; and number of shoots. The conservation of A. cearensis was viable for up to 300 days in WPM supplemented with 262.92 mM of sucrose or the combination of 87.64 mM of sucrose with 43.80 mM of mannitol, because besides achieving a survival percentage greater than 55.0%, the plants conserved in these media presented normal development and the best appearances, with predominance of uniform green leaves during the storage process.

RESUMO: Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND é uma bromélia vulnerável de ocorrência restrita ao município de Mucugê, Chapada Diamantina. Estudos indicam que a cultura de tecidos é uma alternativa viável para a propagação in vitro desta espécie. Contudo, em função das baixas taxas de multiplicação obtidas em estudos anteriores, objetivou-se estabelecer um protocolo de micropropagação via organogênese direta para S. mucugensis. Explantes caulinares foram inoculados em meio de cultura MS ½ contendo diferentes concentrações de BAP (0,00; 6,66; 8,88; 11,10; 13,20 µM) e ANA (0,00; 2,60; 5,20 µM). Os brotos obtidos foram submetidos a diferentes períodos de enraizamento (30 e 60 dias) com carvão ativado; posteriormente as microplantas foram aclimatizadas em casa de vegetação, testando-se o efeito da cobertura com copos plásticos transparentes como estratégias contra perda de água. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias analisadas por regressão ou comparadas pelo Teste de Tukey. Os resultados demonstram que altas taxas de multiplicação de S. mucugensis são geradas a partir de explantes caulinares cultivados em meio contendo ANA (6,42 a 7,43 brotos/explantes); o enraizamento dos brotos é realizado por 30 dias em meio com carvão ativado e a aclimatização é feita com exposição direta das microplantas ao ambiente ex vitro com 95% de sobrevivência.

ABSTRACT: Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND, an endangered bromeliad, is confined to the central region of the Chapada Diamantina, in the municipality of Mucugê, Brazil. From various researches, it is evident that for the propagation of this species, the in vitro technique is a feasible option. However, due to the low multiplication rates reported in various papers, this study aimed to establish a micropropagation protocol of direct organogenesis for S. mucugensis. First, the inoculation of the stem explants was done in MS ½ culture medium which contained different levels of BAP (0.00; 6.66; 8.88; 11.10; 13.20 µM) and NAA (0.00; 2.60; 5.20 µM). These shoots were then subjected to a couple of distinct rooting periods (of 30- and 60-day duration) using activated charcoal; finally, these microplants were transferred to a greenhouse for acclimatization, and covered with transparent plastic cups, as a water loss prevention test method. All the data were submitted to the analysis of variance (ANOVA), and the means were subjected to regression analysis or compared using the Tukey test. The findings revealed that the S. mucugensis stem explants raised in the NAA-rich medium (6.42 to 7.43 shoots/explants) showed high multiplication rates; the shoot rooting was done for 30 days using activated charcoal with the medium. Acclimatization, which was performed by directly exposing the microplants to the ex vitro environment, showed 95% survival rate.

RESUMO Poincianella pyramidalis (Tul.) L.P. Queiroz, é uma espécie endêmica da Caatinga, se destaca pela importância nas atividades madeireira e medicinal. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito dos agentes osmóticos sacarose, sorbitol e manitol e o retardante de crescimento paclobutrazol (PBZ) na indução do crescimento mínimo in vitro de P. pyramidalis, visando o estabelecimento de técnicas alternativas para conservação ex situ da espécie. No primeiro experimento, plântulas com sete dias de idade foram inoculadas em meio WPM suplementado com quatro concentrações de sacarose (87,64, 131,46, 175,28 ou 219,10 mM) combinadas com 0,0 ou 87,64 mM de sorbitol ou manitol. No segundo experimento, essas plântulas foram inoculadas em meio WPM contendo diferentes concentrações (0,0, 1,5, 3,0, 4,5 ou 6,0 µM) de PBZ e suplementadas com 87,64 mM de sacarose. Para ambos os experimentos, foi avaliado a porcentagem de sobrevivência das plantas a cada 60 dias. Ao final de 240 dias, foram analisados o número de folhas verdes e folhas senescentes, comprimento da parte aérea e da maior raiz, e massa seca da parte aérea e da raiz. Os melhores resultados para manter a qualidade das plantas de P. pyramidalis conservadas in vitro foram obtidos em meio suplementado com 219,10 mM de sacarose isolada por até 240 dias sem subcultivo. Com relação ao PBZ, a concentração de 6,0 μM pode ser recomendada para conservação in vitro de P. pyramidalis por um período de 240 dias sem a necessidade de subcultivos.

ABSTRACT Poincianella pyramidalis (Tul.) L.P. Queiroz, is an arboreal species endemic to Brazil’s Caatinga biome and an important source of lumber and also of medicinal substances. This study aimed to evaluate the effect of the osmotic agents sucrose, sorbitol and mannitol and the growth retardant paclobutrazol (PBZ) on the induction of slow growth in vitro of P. pyramidalis, seeking to establish alternative techniques for ex situ conservation of the species. In the first experiment, plantlets with seven days of age were inoculated on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with four concentrations of sucrose (87.64, 131.46, 175.28 or 219.10 mM) combined with 0.0 or 87.64 mM sorbitol or mannitol. In the second experiment, these plantlets were inoculated on WPM medium with 0.0, 1.5, 3.0, 4.5 or 6.0 µM PBZ and supplemented with 87.64 mM sucrose. For both experiments, the survival percentage of the plants was evaluated every 60 days, and at the end of 240 days, the following parameters were recorded: number of green leaves and senescent leaves; length of the aerial part and longest root; and dry mass of the aerial part and roots. The best results to maintain the quality of the P. pyramidalis plants conserved in vitro were obtained on medium supplemented with 219.10 mM sucrose for up to 240 days without subculture. With respect to PBZ, the concentration of 6.0 μM can be recommended for in vitro conservation of P. pyramidalis for 240 days without the need of subculturing.

RESUMO Physalis peruviana L. (Solanaceae) é uma frutífera herbácea, que vem se consolidando no mercado em virtude de suas potencialidades nutricionais e medicinais. As limitações à sua produção são o ciclo reprodutivo curto, o acometimento dos frutos por pragas e a carência de estudos, o que justifica a busca de estratégias para a sua propagação. Objetivou-se avaliar os efeitos de 6-benzilaminopurina (BAP) e explantes no potencial morfogênico de P. peruviana, bem como estabelecer um protocolo para a micropropagação da espécie via organogênese direta. Para avaliar a morfogênese, explantes (nó cotiledonar, cotilédone, folha, epicótilo, hipocótilo e raiz) foram inoculados em meio de cultura Murashige & Skoog com metade das concentrações salinas e suplementado com a citocinina BAP (0,00 µM; 2,22 µM; 4,44 µM; 6,66 µM; ou 8,88 µM), acrescido de 30 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar. Visando à produção de brotos via direta, o explante nó cotiledonar foi submetido a 0,00 µM; 2,22 µM; 4,44 µM; 6,66 µM; 8,88 µM; 13,32 µM; 17,76 µM; ou 22,20 µM de BAP. Os brotos obtidos foram submetidos ao enraizamento em meios com e sem adição de carvão ativado e, posteriormente, transferidos para aclimatização. Verificou-se que o nó cotiledonar e a folha foram as fontes de explantes mais eficientes para a regeneração dos brotos via organogênese direta e indireta, respectivamente. Os resultados mais significativos para a produção de brotos via direta foram obtidos com 12,50 µM de BAP. Estes brotos foram enraizados in vitro em meio isento de carvão, e as microplantas aclimatizadas em terra vegetal alcançaram 100 % de sobrevivência aos 90 dias da aclimatização.

ABSTRACT Physalis peruviana L. (Solanaceae) is an herbaceous fruit-bearing species that has been gaining market acceptance due to its nutritional and medicinal potential. The main limitations to its cultivation are the short reproductive cycle, the susceptibility of the fruits to pests and the lack of information about the crop management. Hence, studies are necessary to develop strategies for its propagation. This study aimed to evaluate the effects of 6-benzylaminopurine (BAP) and explants on the morphogenetic potential of P. peruviana, as well as to establish a protocol for the micropropagation of the species via direct organogenesis. To evaluate the morphogenesis, cotyledonary node, cotyledon, leaf, epicotyl, hypocotyl and root explants were inoculated in Murashige & Skoog culture medium with half the normal concentration of salts and supplemented with cytokinin BAP (0.00 µM, 2.22 µM, 4.44 µM, 6.66 µM or 8.88 µM), plus 30 g L-1 of sucrose and 7 g L-1 of agar. Aiming at a direct production of shoots, the cotyledonary node explant was submitted to 0.00 µM, 2.22 µM, 4.44 µM, 6.66 µM, 8.88 µM, 13.32 µM, 17.76 µM or 22.20 µM of BAP. The obtained shoots were tested regarding their rooting potential in media with and without the addition of activated charcoal and then were transferred for acclimatation. The cotyledonary node and leaf explants were the most efficient sources for the regeneration of shoots via direct and indirect organogenesis, respectively. The most significant results for direct shoot production were obtained with 12.50 µM of BAP. These shoots were successfully rooted in vitro in medium without activated charcoal, and the microplants acclimated in vegetable earth attained 100 % of survival after 90 days of acclimatation.

RESUMO: Este trabalho teve como objetivo avaliar a germinação, o crescimento inicial e o co-cultivo in vitro de Comanthera curralensis Moldenke, uma "sempre viva" nativa da Chapada Diamantina-BA. Para germinação e crescimento inicial, foram testados os meios de cultura MS completo e MS1/2 suplementados com duas concentrações de sacarose (15 e 30gL-1); no cultivo in vitro, foram testadas três quantidades de plantas por recipiente (8,10 e 12). A utilização do meio MS1/2 com 15gL-1 de sacarose proporcionou maiores porcentagem de germinação crescimento das plantas no estabelecimento in vitro de C. curralensis , e o uso de 12 plantas por recipiente é indicado para a redução de custos na produção in vitro da espécie.

ABSTRACT: The goal of the present study was to evaluate the germination, initial growth, and in vitro co-cultivation of Comanthera curralensis Moldenke, a "sempre viva" native of the Chapada Diamantina state of Bahia. Full strength (MS) and half-strength MS (MS1/2) growth media supplemented with two different sucrose concentrations (15 and 30g L-1) were tested for germination and initial plant growth. Three different plant densities were tested by in vitro culture (8, 10 and 12 plants per container). MS1/2 medium with 15g L-1 sucrose resulted in a higher percentage of germination and plant growth for the in vitro establishment of C. curralensis. The use of 12 plants per container is indicated for cost reduction in C. curralensis in vitro production.