Quarenta e nove isolados brasileiros de Dicyma pulvinata foram analisados quanto a características morfológicas, análises de RFLP, RAPD e AFLP. Este fungo é um micoparasita do Microcyclus ulei, o agente causal da mais importante doença da seringueira (Hevea brasiliensis), o mal-das-folhas. Estes isolados foram comparados com isolados indianos obtidos a partir de lesões de Cercosporidium sp., com um isolado proveniente da França obtido a partir de lesões de Cladosporium fulvum e com um isolado de D. ampullifera proveniente de Papua-Nova Guiné. A análise de parâmetros morfológicos confirmou a identificação dos isolados brasileiros. As representações gráficas das matrizes de distância de cada marcador molecular mostraram resultados semelhantes. Os isolados de D. pulvinata obtidos de M. ulei mostraram-se intimamente relacionados. Por outro lado, os isolados - referência, incluídos nestes estudos, mostraram-se bastante dispersos. De acordo com a análise de variância molecular, considerando todos os marcadores, os isolados de D. pulvinata obtidos de M. ulei, apresentaram diferença significativa entre isolados procedentes de áreas de cultivo de seringueira favoráveis à ocorrência do mal-das-folhas (regiões norte e nordeste do Brasil) e aqueles de áreas de escape da doença (Mato Grosso).

Forty-nine Brazilian Dicyma pulvinata isolates were examined by morphological traits and RFLP, RAPD and AFLP analyses. This fungus is a mycoparasite of Microcyclus ulei, the causal agent of the most devastating rubber (Hevea brasiliensis) disease, known as "South American Leaf Blight" (SALB). These isolates were compared with an Indian isolate from Cercosporidium sp., and a French isolate from Cladosporium fulvum. They were also compared with Dicyma ampullifera from Papua New Guinea. The morphological parameters analyzed confirmed the identification of the Brazilian isolates. The graphic representations of the distance matrices of each molecular marker showed similar results. Dicyma pulvinata isolates from M. ulei were closely related, whereas the reference isolates examined were dispersed. Among the D. pulvinata isolates obtained from M. ulei, a significant pairwise distance was obtained, for all the molecular markers, between the isolates from the areas favorable to the occurrence of SALB (North and Northeast of Brazil) and the region of escape for the disease (Mato Grosso State).

O fungo Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., isolado CG 306, foi testado contra o Triatoma infestans (Klug) através de aplicação indireta por contato do inseto com papel filtro tratado com conídios. O patógeno foi aplicado sobre papel filtro através de filtragem a vácuo de uma suspensão de conídios. Foram feitas estimativas do tempo médio de sobrevivência entre 15 e 21 dias nas densidades de 3x10(6) e 10(7) conídios/cm², respectivamente, sem diferenças significativas entre as concentrações. A concentração de 2,4x10(6) conídios/cm² de CG 306 foi necessária para matar 50% de ninfas de terceiro ínstar de T. infestans 25 dias após inoculação e incubação a 25°C e 50% de umidade relativa. A CL50 foi estatisticamente maior (2,0x10(7) conídios/cm²) quando os insetos foram expostos por uma hora aos conídios distribuídos sobre papel filtro. Um emulsificante à base de óleo mineral (2%) não afetou a germinação de conídios in vitro. Um número menor de conídios foi necessário para matar 50% dos insetos após exposição constante ao papel filtro tratado, em comparação com os conídios não formulados com o emulsificante. Quando a exposição foi limitada a 1 h, os conídios não formulados foram mais efetivos do que conídios formulados. Após aplicação de B. bassiana (10(7) conídios/cm²) em pequenas casas experimentais de madeira, seguida de liberação de ninfas de terceiro ínstar de T. infestans, o nível de infecção de insetos recuperados 25 dias após aplicação com o fungo foi significativamente inferior as encontrado na casa-testemunha. A mortalidade atribuída a infecção fúngica de insetos recuperados e mantidos em laboratório foi de 38,1 a 93,8%. A mortalidade de insetos expostos ao papel filtro tratado e mantido em copos cobertos com gaze dentro das casas, foi de 35 a 78,8% 25 dias após aplicação. A persistência dos conídios foi superior a 98% durante os experimentos de campo. Não houve desenvolvimento de B. bassiana sobre cadáveres originados de infecção provocada em laboratório e posteriormente expostos às condições de campo no interior das casas.

Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., isolate CG 306, was assayed against Triatoma infestans (Klug) using indirect application by contact with a treated filter paper. The fungus was deposited on filter paper by vacuum-filtration of a conidial suspension. Estimates of 50% survival time of insects were between 15 and 21 days at 3x10(6) and 10(7) conidia/cm² of treated support, respectively, without significant difference between concentrations. A concentration of 2.4x10(6) conidia/cm² of CG 306 was necessary to kill 50% of T. infestans third instar nymphs 25 days after inoculation at 25°C and 50% relative humidity, when insects were continuously exposed to conidia. The LC50 was significantly higher (2.0x10(7) conidia/cm²) when insects were exposed for 1 h to the treated filter paper, than with continuous exposure. A mineral oil based emulsifier (2%) had no effect on germination of conidia in vitro. Fewer formulated conidia were necessary to kill 50% of insects after constant exposure to the treated surface, compared with unformulated conidia. After a 1 h exposure, unformulated conidia were more effective than formulated. After spraying B. bassiana (10(7) conidia/cm²) and releasing third instar nymphs of T. infestans in small wooden test houses, the rate of insect recovery after 25 days was significantly lower in the fungus treated houses compared to the control house. Mortality due to fungal infection of recovered insects transferred to the laboratory was between 38.1 and 93.8%, compared with no mortality in the control group. The rate of mortality of insects exposed to treated filter paper in gauze covered cups in the houses was between 35 and 78.8% after 25 days. Persistence of conidia on filter paper exposed inside the houses was > 98% during the field tests. There was no development of CG 306 on cadavers originating from laboratory infection and exposed to field conditions in the houses.