Abstract The Saman tree (Samanea saman) is a native species with a significant and economic importance in Costa Rica due to its high-quality wood and versatile range of uses. It is ability to compete with other reforestation species and suits specific niche markets increses its value. This research aimed to develop a methodology of in vitro culture for cenízaro, as a key tool for breeding and germplasm conservation programs in Costa Rica. Experiments were focused on using greenhouse-reproduced material, both inside and outside of a microtunnel environment. Two disinfectant agents, sodium hypochlorite (NaClO) and mercury chloride (HgCl2), were assessed at varying concentrations and exposure durations. In vitro establishment success rates for material from the microtunnel greenhouse were less than 12.5 %. Conversely, material from outside the microtunnel showed remarkable in vitro establishment rates, surpassing 72.3 %. The most effective disinfection treatment for achieving contamination free shoots involved an incubation in 1 % v/v NaClO for 20 minutes, yielding the highest percentage of contamination-free shoots, corresponding to 85.47 %. As for apex disinfection, employing a 0.2 % (w/v) HgCl2 for 5 minutes proved optimal, resulting in 100 % establishment of explants devoid of contaminants.

Resumen El cenízaro (Samanea saman), es una especie nativa de Costa Rica, de reconocido valor económico por la calidad de la madera y la variedad de usos; estas características le permiten competir con otras especies usadas para reforestación, con el fin de generar productos dirigidos a mercados selectos. El objetivo de esta investigación fue desarrollar una metodología para el establecimiento in vitro de cenízaro como herramienta biotecnológica para un programa de mejoramiento genético y conservación de germoplasma en Costa Rica. El ensayo se estableció a partir de material reproducido en invernadero, tanto en microtúnel como fuera de este. Posteriormente, se evaluaron dos agentes desinfectantes, hipoclorito de sodio (NaClO) y cloruro de mercurio (HgCl2), en diferentes concentraciones y tiempos de exposición. Se obtuvieron porcentajes de establecimiento in vitro inferiores al 12,5 % al emplear material proveniente del invernadero microtúnel; mientras que, el material proveniente fuera del microtúnel, presentó porcentajes de establecimiento in vitro superiores a 72,3 %. La desinfección con hipoclorito de sodio (NaClO) al 1 % v/v durante 20 minutos presentó el mayor porcentaje de nudos libres de contaminación y correspondiente al 85,47 %. Por otro lado, la desinfección de ápices con cloruro de mercurio (HgCl2) al 0,2 % p/v durante 5 minutos, presentó el mayor porcentaje de ápices libres de contaminación (100 %).

Abstract Orchids of the Vanda genus have great value in the ornamental market due to the showiness of their flowers. Genetic improvement in this genus, is mostly carried out through conventional methods, but the high demand of the current market for new cultivars makes it necessary to include molecular and biotechnological techniques in genetic improvement. The aim of this review is to analyze the usefulness of different molecular and biotechnological tools for the development of a breeding program in Vanda, through the interrelation with reproductive biology and conventional breeding in the genus. A total of 95 articles published in scientific journals were consulted in this review. As a result, a compilation of information is provided that can serve as reference material for technicians, professionals and researchers related to this subject.

Resumen Las orquídeas del género Vanda tienen gran valor en el mercado ornamental por la vistosidad de sus flores. El mejoramiento genético en vandas es mayormente realizado a través de métodos convencionales, pero la alta demanda del mercado actual sobre nuevos cultivares hace necesaria la inclusión de técnicas moleculares y biotecnológicas en la mejora genética. El objetivo de esta revisión, es analizar la utilidad de diferentes herramientas moleculares y biotecnológicas para el desarrollo de un programa de mejoramiento genético en Vanda analizar la utilidad de diferentes herramientas moleculares y biotecnológicas para el desarrollo de un programa de mejora genética en Vanda, mediante la interrelación con biología reproductiva y mejoramiento convencional en el género. En esta revisión se consultaron un total de 95 artículos publicados en revistas científicas. Como resultado se brinda una compilación de información de utilidad como material de consulta para técnicos, profesionales e investigadores relacionados con esta temática.

RESUMEN. El cáncer es una enfermedad cuya prevalencia aumenta en todos los países de forma inversa al descenso en su mortalidad debido a los avances diagnósticos y a los tratamientos actuales. En el caso concreto del cáncer laboral el objetivo es actuar en prevención y para ello hay que conocer sus causas y evitarlas: eliminar o reducir las sustancias que pueden producir cáncer, minimizar los tiempos de exposición e incrementar la protección colectiva e individual de la población trabajadora expuesta a cancerígenos. No obstante, esta enfermedad es multicausal, e incluye la exposición a factores medioambientales, individuales y laborales, lo que dificulta en muchas ocasiones poder establecer esta relación de causalidad imprescindible para su tipificación legal. No todos los factores de riesgo pueden ser evitados y cuando aparece el daño, en este caso la sospecha de cáncer, la actividad preventiva debe ser precoz, coordinada y protocolizada. Un diagnóstico temprano y certero del cáncer es importante para poder decidir cuáles serán las estrategias de tratamiento más apropiadas, aún si el paciente no muestra todavía síntomas claros de enfermedad. La detección y notificación de sospecha de cáncer laboral corresponde a los sanitarios de los Servicios de Prevención de Riesgos Laborales (SPRL), especialistas en Medicina del Trabajo y Enfermería del Trabajo y, fuera del ámbito laboral están involucrados todos los profesionales del Sistema Público de Salud. Del mismo modo y, ante la creciente tasa de curación en cáncer y mayor supervivencia, adquiere un notable protagonismo la reincorporación laboral del trabajador que ha superado un cáncer a su actividad laboral, todo ello en un marco de coordinación entre todos los agentes involucrados: técnicos de prevención y profesionales sanitarios del ámbito laboral y extralaboral. Proponemos una visión 360 grados en este tema que facilite una actuación conjunta, ajustándonos al proceso de mejora continua como modelo de utilidad que es recomendado en cualquier organización o empresa para optimizar sus objetivos y resultados.

ABSTRACT. Cancer is a disease that has seen substantial improvements and developments regarding its diagnosis and available treatments. This is causing its prevalence in all countries to experience an increase inversely proportional to the generalised decrease of its mortality rate. In the specific case of work-related cancer, the focus is on preventive actions based on determining its causes and avoiding them as much as possible: eliminating or reducing contact or intake of substances that can cause cancer, minimising exposure times, and increasing collective and individualised protection of workers who are exposed to carcinogens. However, this disease is multi-causal and includes exposure to environmental, personal and occupational factors. This often makes it difficult to establish the causal relationship between the illness and these factors, something essential for its categorisation. Not all risk factors can be avoided, and when damage appears, in this case the suspicion of cancer, preventive actions must be taken quickly and in a coordinated way following designated protocols. An early and accurate diagnosis of cancer is of high importance, even if the patient does not yet show clear symptoms of disease, in order to decide on the most appropriate treatment. The detection and disclosure of suspected work-related cancer is responsibility of the Occupational Health Services (SPRL), as well as Occupational Medicine and Occupational Nursing specialists, and, outside the workplace, all professionals involved within the Public Health System. Likewise, in view of the increasing cancer overcoming rate and even greater survival rate, the return to work of employees who have suffered from cancer keeps gaining weight. This return-to-work process requires coordination between all agents involved: prevention and health professionals, both in and outside workplace. We propose a 360-degree vision on this subject, looking to facilitate a joint protocol that can be adjusted as relevant improvements in this field are achieved, as it is recommended to any organisation or company that aims to optimise its objectives and results.

RESUMEN. El cáncer es una enfermedad cuya prevalencia aumenta en todos los países de forma inversa al descenso en su mortalidad debido a los avances diagnósticos y a los tratamientos actuales. En el caso concreto del cáncer laboral el objetivo es actuar en prevención y para ello hay que conocer sus causas y evitarlas: eliminar o reducir las sustancias que pueden producir cáncer, minimizar los tiempos de exposición e incrementar la protección colectiva e individual de la población trabajadora expuesta a cancerígenos. No obstante, esta enfermedad es multicausal, e incluye la exposición a factores medioambientales, individuales y laborales, lo que dificulta en muchas ocasiones poder establecer esta relación de causalidad imprescindible para su tipificación legal. No todos los factores de riesgo pueden ser evitados y cuando aparece el daño, en este caso la sospecha de cáncer, la actividad preventiva debe ser precoz, coordinada y protocolizada. Un diagnóstico temprano y certero del cáncer es importante para poder decidir cuáles serán las estrategias de tratamiento más apropiadas, aún si el paciente no muestra todavía síntomas claros de enfermedad. La detección y notificación de sospecha de cáncer laboral corresponde a los sanitarios de los Servicios de Prevención de Riesgos Laborales (SPRL), especialistas en Medicina del Trabajo y Enfermería del Trabajo y, fuera del ámbito laboral están involucrados todos los profesionales del Sistema Público de Salud. Del mismo modo y, ante la creciente tasa de curación en cáncer y mayor supervivencia, adquiere un notable protagonismo la reincorporación laboral del trabajador que ha superado un cáncer a su actividad laboral, todo ello en un marco de coordinación entre todos los agentes involucrados: técnicos de prevención y profesionales sanitarios del ámbito laboral y extralaboral. Proponemos una visión 360 grados en este tema que facilite una actuación conjunta, ajustándonos al proceso de mejora continua como modelo de utilidad que es recomendado en cualquier organización o empresa para optimizar sus objetivos y resultados.

ABSTRACT. Cancer is a disease that has seen substantial improvements and developments regarding its diagnosis and available treatments. This is causing its prevalence in all countries to experience an increase inversely proportional to the generalised decrease of its mortality rate. In the specific case of work-related cancer, the focus is on preventive actions based on determining its causes and avoiding them as much as possible: eliminating or reducing contact or intake of substances that can cause cancer, minimising exposure times, and increasing collective and individualised protection of workers who are exposed to carcinogens. However, this disease is multi-causal and includes exposure to environmental, personal and occupational factors. This often makes it difficult to establish the causal relationship between the illness and these factors, something essential for its categorisation. Not all risk factors can be avoided, and when damage appears, in this case the suspicion of cancer, preventive actions must be taken quickly and in a coordinated way following designated protocols. An early and accurate diagnosis of cancer is of high importance, even if the patient does not yet show clear symptoms of disease, in order to decide on the most appropriate treatment. The detection and disclosure of suspected work-related cancer is responsibility of the Occupational Health Services (SPRL), as well as Occupational Medicine and Occupational Nursing specialists, and, outside the workplace, all professionals involved within the Public Health System. Likewise, in view of the increasing cancer overcoming rate and even greater survival rate, the return to work of employees who have suffered from cancer keeps gaining weight. This return-to-work process requires coordination between all agents involved: prevention and health professionals, both in and outside workplace. We propose a 360-degree vision on this subject, looking to facilitate a joint protocol that can be adjusted as relevant improvements in this field are achieved, as it is recommended to any organisation or company that aims to optimise its objectives and results.

ABSTRACT Simple liver cysts (SLC) are the most common liver tumors. They are usually asymptomatic but large cysts may produce symptoms. The aim of this article is to report a rare complication of SLC. We report the case of a 61-year-old woman with a history of multiple SLCs who sought medical care due to sudden abdominal pain not associated with trauma. A probable diagnosis of spontaneous rupture was made, and the patient underwent computed tomography (CT) scan of the abdomen which confirmed the suspicion. Conservative treatment was decided, with favorable outcome. After the acute episode the patient underwent surgery and the cysts were unroofed. Rupture of SLC is a rare complication that usually presents with abdominal pain. There is no standard of care due to the low incidence of this complication. The conservative approach is a good option in patients without signs of peritonitis, while emergency surgery is indicated in patients with acute abdomen.

RESUMEN Los quistes hepáticos simples (QHS) son las lesiones hepáticas más frecuentes. Cursan habitualmente asintomáticas, aunque cuando alcanzan gran tamaño pueden causar síntomas. El objetivo del presente artículo es presentar una complicación excepcional de los QHS. Presentamos a una mujer de 61 años con historia de QHS múltiples que acude a Urgencias por dolor abdominal brusco sin antecedente traumático. Ante la sospecha de rotura quística espontánea, se realiza tomografía computarizada (TC) abdominal que confirma el diagnóstico. Se decide tratamiento conservador con buena evolución. Tras el episodio agudo es intervenida quirúrgicamente realizándose destechamiento de los quistes. a rotura de los QHS es una complicación excepcional que habitualmente cursa con dolor abdominal. Debido a su baja frecuencia no existe un tratamiento estándar. Se acepta que el tratamiento conservador es una buena opción en pacientes sin signos de peritonitis, mientras que la cirugía urgente está indicada en pacientes con abdomen agudo.

Abstract: Introduction: Galactosemia is an inborn error of galactose metabolism, caused by the deficiency of some of the enzymes GALT, GALK1, GALE and GALM. In this study, six cases with galactosemia and their clinical, biochemical and molecular characterization are presented. Material and methods: The clinical data of six patients with galactosemia are presented, as well as the nutritional treatment and follow-up are described. The diagnosis was made with an expanded neonatal screen. In patients with a total galactose measurement > 10 mg / dL, the Beutler test was performed. Molecular analysis for the GALT, GALE and GALK genes was performed by Sanger sequencing. Results: Three patients presented clinical data at the time of diagnosis, two with acute neonatal symptoms, the third with chronic symptomatology, reaching diagnosis at school age. The other three were asymptomatic. All six patients were offered nutritional treatment based on the elimination of galactose. In four patients, biallelic pathogenic variants were identified in GALK1 and one in GALT. In the sixth patient, a homozygous intronic deletion was detected in GALK1, classified as SNP. Conclusions: Galactosemia has a variable clinical spectrum, therefore, its diagnosis requires both its detection by metabolic screening and the identification of a compatible clinical picture. As part of the approach, the genetic aspect is essential in order to offer individualized genetic counseling.

Resumen: Introducción: La galactosemia es un error innato del metabolismo de la galactosa, causado por la deficiencia de alguna de las enzimas GALT, GALK1, GALE y GALM. En este estudio se presentan seis casos con galactosemia y su caracterización clínica, bioquímica y molecular. Material y métodos: Se presentan los datos clínicos de seis pacientes con galactosemia y se describe el tratamiento nutricional y seguimiento. El diagnóstico se realizó con tamiz neonatal ampliado. A los pacientes con una medición de galactosa total > 10 mg/dL, se les realizó la prueba de Beutler. El análisis molecular para los genes GALT, GALE y GALK por secuenciación Sanger. Resultados: Tres pacientes presentaron datos clínicos al momento de su diagnóstico, dos con cuadro agudo neonatal, el tercero, con datos crónicos, pero el diagnóstico fue en edad escolar. Los otros tres pacientes estaban asintomáticos. A todos se ofreció tratamiento nutricional a base de eliminación de galactosa. En cuatro pacientes se identificaron variantes patogénicas bialélicas en GALK1 y uno en GALT. En el sexto paciente se detectó una deleción intrónica en homocigosis en GALK1, clasificada como SNP. Conclusiones: La galactosemia tiene un espectro clínico variable, por lo cual para su diagnóstico se requiere tanto de su detección por tamiz metabólico como por la identificación de un cuadro clínico compatible. Como parte del abordaje, el aspecto genético es básico a fin de ofrecer asesoramiento genético individualizado.

ABSTRACT Teak (Tectona grandis L. f.), is a native tree from Southeast Asia considered of great economic value, mainly for its wood. As part of the efforts for the genetic improvement of this specie, protocols for pollen cryopreservation have been developed; however, it is essential to ensure its viability and efficient germination for future crosses of selected material. The objective of the present work was to evaluate the effect of spirostanic analogue of brassinosteroids (Biobras-16®) and a mixture of oligogalacturonides (Pectimorf®) on the in vitro germination, size of pollen and pollen tube length of cryopreserved teak pollen. The experiments consisted of evaluating the germination of pollen with 0, 4 and 8 months of cryopreservation in culture medium without supplements, supplemented with 0.001 and 0.050 Biobras-16® mg L-1 and, Pectimorf® 5 and 10 mg L-1. Germination data were analyzed using a General Linear Model, while pollen tube length and pollen area using analysis of variance (ANOVA) and correlation analysis. It was demonstrated that both bioactive products promote in vitro germination of cryopreserved pollen grains for 4 and 8 months, where Biobras-16® at 0.001 mg L-1 showed results that are more consistent. Pectimorf® stimulated the elongation of the pollen tube, which could favor the fecundation processes.

RESUMEN La teca (Tectona grandis L. f.), es un árbol originario del sureste asiático, considerado de gran valor económico principalmente por su madera. Como parte de los esfuerzos por el mejoramiento genético de esta especie, se han desarrollado protocolos para la crioconservación de polen, sin embargo, es indispensable asegurar la viabilidad y germinación eficiente del mismo para futuros cruzamientos de material seleccionado. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de un análogo espirostánico de brasinoesteriode (Biobras-16®) y una mezcla de oligogalacturónidos (Pectimorf®) sobre la germinación in vitro, tamaño del polen y longitud del tubo polínico de polen de teca crioconservado. Los experimentos consistieron en evaluar la germinación de polen a 0, 4 y 8 meses de crioconservación, en medio de cultivo sin suplementos (M1), suplementado con 0,001 y 0,050 mg L-1de Biobras-16® y 5 y 10 mg L-1 de Pectimorf®. Los datos de germinación fueron analizados mediante un Modelo Lineal General, mientras que la longitud del tubo polínico y el área del polen mediante análisis de varianza (ANOVA) y análisis de correlación. Se demostró que ambos productos bioactivos favorecieron la germinación in vitro de los granos de polen crioconservados durante 4 y 8 meses, donde Biobras-16® a 0,001 mg L-1 mostró resultados más consistentes. Pectimorf® estimuló la elongación del tubo polínico, lo cual podría favorecer los procesos de fecundación.

ABSTRACT Pleural mesotheliomas are primary mesothelial cell tumors. Lining the pleural cavity, they are closely related to asbestos exposure. They have a low incidence and poor prognosis. A 46-years-old patient, white-skinned, who attended the Dr. Gustavo Aldereguía Lima University General Hospital in Cienfuegos due to pain in the back and shoulders, fever, and weight loss is presented. The physical examination revealed an abolished vesicular murmur in the lower 1/3 of the right lung. The chest X-ray and CT scan showed a medium to large right pleural effusion and pleural thickening. Histological studies indicated that the lesion was compatible with epithelioid variant pleural mesothelioma. The patient is maintained with cytostatic treatment and follow-up in consultation. The objective of this study is to describe the case of a patient with malignant pleural mesothelioma, admitted to the Internal Medicine Service of the Dr. Gustavo Aldereguía Lima General University Hospital of Cienfuegos.

RESUMEN Los mesoteliomas pleurales son tumores primarios de células mesoteliales. Recubren la cavidad pleural, se encuentran estrechamente relacionados con la exposición al asbesto. Tienen una baja incidencia y mal pronóstico. Se presenta el caso de un paciente de 46 años, de color de piel blanca, que acudió al Hospital General Universitario Dr. Gustavo Aldereguía Lima de Cienfuegos por presentar dolor en la espalda y hombros, fiebre y pérdida de peso. En el examen físico se constató murmullo vesicular abolido en 1/3 inferior del pulmón derecho. La radiografía de tórax y la tomografía evidenciaron derrame pleural derecho de mediana a gran cuantía y engrosamiento pleural. Los estudios histológicos indicaron que la lesión era compatible con un mesotelioma pleural de variante epitelioide. El paciente se mantiene con tratamiento citostático y seguimiento en consulta. El objetivo del presente trabajo es describir el caso de un paciente con mesotelioma pleural maligno, una enfermedad tumoral rara, ingresado en el Servicio de Medicina Interna del Hospital General Universitario Dr. Gustavo Aldereguía Lima de Cienfuegos.

Resumen: Como consecuencia de la declaración de pandemia a nivel mundial y el Decreto Ejecutivo de emergencia sanitaria en todo el territorio de Costa Rica, las actividades académicas presenciales fueron suspendidas y las autoridades implementaron la modalidad de teletrabajo en la mayoría de las instituciones, con el fin de evitar un contagio masivo y temprano. En este contexto, la Universidad Estatal a Distancia (UNED) de Costa Rica maximizó el uso de los recursos virtuales para potencializar el modelo de educación a distancia y permitir que la carrera de Ingeniería Agronómica continuara con su gestión académica administrativa sin afectar la calidad en el proceso de enseñanza aprendizaje, así como de investigación y extensión. Para ello, se implementaron estrategias metodológicas mediadas para ofrecer al estudiantado la experiencia educativa a través de las actividades virtuales, simuladas y contextualizadas. Por tanto, el siguiente documento presenta la sistematización de las principales acciones implementadas por la carrera Ingeniería Agronómica de la UNED como respuesta a la pandemia, los resultados obtenidos y su correspondiente análisis reflexivo.

Resumo: Como consequência da declaração de pandemia mundial e o Decreto Executivo de emergência sanitária em todo o território da Costa Rica, as atividades acadêmicas presenciais foram suspensas e as autoridades implementaram a modalidade de teletrabalho na maioria das instituições, a fim de evitar uma infecção massiva e precoce. Neste contexto, a Universidade Estatal a Distância (UNED) da Costa Rica maximizou o uso dos recursos virtuais para potencializar o modelo de educação à distância e permitir que a carreira de Engenharia Agrícola continue com sua gestão acadêmica administrativa sem afetar a qualidade no processo de ensino e aprendizagem, assim como de pesquisa e extensão. Para este fim, foram implementadas estratégias metodológicas mediadas para oferecer aos estudantes a experiência educacional através das atividades virtuais, simuladas e contextualizadas. Portanto, o documento a seguir apresenta a sistematização das principais ações implementadas pela carreira de Engenharia Agrícola da UNED como resposta à pandemia, os resultados obtidos e sua correspondente análise reflexiva.

Abstract: As a consequence of the declaration of a global pandemic and the Executive Decree of health emergency throughout the territory of Costa Rica, face-to-face academic activities were suspended and the authorities implemented a remote work modality in most of the institutions, in order to avoid a massive and early contagion. In this context, Costa Rica’s State Distance Learning University (Universdidad Estatal a Distancia, UNED) maximized the use of virtual resources to enhance the distance education model and allow the Agronomic Engineering major to continue with its administrative academic management without affecting the quality of the teaching-learning processes, as well as both of the research and extension programs. To do this, mediated methodological strategies were implemented to offer students the educational experience through virtual, simulated and contextualized activities. Therefore, the following document presents the systematization of the main actions implemented by UNED’s Agronomic Engineering undergraduate program as a response to the pandemic, as well as the results obtained and their corresponding reflective analysis.

ABSTRACT Breast plasmocytoma is an extremely rare plasma cell neoplasm, with less than 50 cases reported in the last century. This is the reason why we barely have data about optimal management, treatment and follow-up. We hereby report the case of a 70 year old woman diagnosed with breast plasmocytoma that developed lobular breast cancer a year later. The link between plasmocytoma and breast cancer has not been previously established. However, breast plasmocytoma treatment could compromise latter breast cancer approach, so probably the most suitable strategy in these cases should be breast surgery.Conclusions: There are clinical characteristics associated with complications in women with surgical management abortion in our center, such as admission diagnosis, unplanned pregnancy, previous abortion and type of evacuation. There are limitations regarding the quantity and quality of information, however, our results allow us to know the profile of patients treated for abortion in our center.

RESUMEN El plasmocitoma mamario es una neoplasia de células plasmáticas extremadamente infrecuente, con menos de cincuenta casos descritos en el último siglo. Por este motivo, apenas se dispone de datos acerca del abordaje, tratamiento y seguimiento más convenientes. Presentamos el caso de una paciente de 70 años que debutó con un plasmocitoma mamario y que un año después fue diagnosticada de un carcinoma mamario lobulillar ipsilateral. La asociación entre plasmocitoma y cáncer de mama no está descrita en la literatura, por lo que es muy complicado establecer un vínculo entre ambas entidades. Sin embargo, el abordaje terapéutico del plasmocitoma podría comprometer el tratamiento ulterior de un cáncer de mama, por lo que el tratamiento idóneo en estos casos sea probablemente la cirugía.

Resumen El aislamiento y selección de linfocitos T puros de cultivo primario de bazo de ratón puede obtenerse de manera rápida y fácil utilizando kits comerciales con microesferas magnéticas para capturar y purificar las células. A pesar de estas ventajas, la carga financiera que puede representar para el presupuesto de un laboratorio, la adquisición constante de estos kits justifica la evaluación de otras opciones de menor costo. Por ello, se comparó el porcentaje de recuperación celular, viabilidad y pureza de tres métodos de aislamiento y purificación de linfocitos T; dos de bajo costo y fácil implementación (aislamiento con amortiguador de amonio-cloruro-potasio (ACK)-adhesión celular y aislamiento con Ficoll), y un kit comercial de selección negativa con microesferas magnéticas. Con el método de amortiguador ACK-adhesión celular se obtuvo un porcentaje de recuperación y purificación de linfocitos T viables comparable al obtenido con el kit. Aunque este método requiere más tiempo, dado que las células deben ser incubadas durante toda la noche, es de fácil implementación y tiene una eficiencia comparable al kit, así como un menor costo. Este método puede ser tomado en cuenta para utilizar en experimentos que puedan trabajar con linfocitos activados.

Abstract The isolation and selection of pure T lymphocytes from spleen primary culture can be obtained easily and quickly using commercial kits that use magnetics microbeads to capture and purify the cells. Despite these advantages, the financial burden that the constant acquisition of these kits can impose to a laboratory budget makes it important to evaluate other options. We compared the cell recovery, viability and purity percentage of three isolation and purification methods; two of them of low cost and easy implementation (cell adhesion of cultures treated with Ammonium-Chloride-Potassium (ACK) buffer, and Ficoll), and a commercial with kit of negative selection with magnetics microbeads. With the ACK-cell adhesion method, we found a recovery and purity percentage of lymphocytes T comparable to the one obtained with the kit. Although this method requires more time, as cells must be incubated overnight, it is easily implemented and has a comparable efficiency to the kit, as well as a lower cost. This method can be taken into account for experiments that can use activated cells.

The splenic rupture is most commonly related to trauma, but spontaneus ruptures have also been described with increasing frequency. We present a case of a male patient with spontaneous splenic rupture due to oral anticoagulant overdose that required urgent splenectomy. The spontaneous splenic rupture is a life-threatening condition that must be considered in patients with acute abdomen. Although most ruptures are associated with to neoplastic and infectious complications , recent reports have related rupture with anticoagulant and antiaggregant therapies. Moreover, since the number of patients undergoing oral anticoagulant therapies is growing, overdose of anticoagulant drugs must be considered as a possible ethiology of spontaneous splenic rupture and suspect this association in patient with acute abdomen undergoing anticoagulant therapy.

Aunque la causa más frecuente de rotura esplénica es la traumática, podemos encontrar roturas sin relación a un traumatismo previo. Se está objetivando un aumento de roturas espontáneas en relación con tratamiento anticoagulante. Presentamos el caso de un hombre en tratamiento con acenocumarol que presentó una rotura espontánea esplénica que requirió esplenectomía urgente. La rotura de bazo es una entidad grave que debe considerarse ante todo paciente con un abdomen agudo. Aunque las causas más frecuentes de rotura esplénica atraumática son las complicaciones neoplásicas e infecciosas, se han objetivado varios casos asociados a terapias antiagregantes y anticoagulantes. Dado el aumento de población que precisa anticoagulación oral, la sobredosificación con acenocumarol debe considerarse como una posible causa de rotura esplénica. Debemos sospechar esta entidad ante todo paciente en tratamiento con anticoagulación oral con un abdomen agudo.

ResumenUncaria tomentosa,conocida como uña de gato, es una planta medicinal originaria de Perú que se emplea en medicina natural, principalmente como antiinflamatoria, inmunoestimulante, antioxidante y citotóxica en varias líneas celulares cancerígenas (HL-60, A549 y HEp-3).Es necesario crear estrategias biotecnológicas para el estudio y extracción de los compuestos activos de esta planta, tales como el cultivo de células en biorreactores, lo que permitiría la producción de los metabolitos secundarios a gran escala, bajo condiciones controladas.Previamente al escalamiento del cultivo, es necesario estandarizar los protocolos de callogénesis y de establecimiento de suspensiones celulares.En el presente trabajo se probaron dos protocolos de inducción de callo a partir de segmentos foliares de plantas in vitro de Uncaria tomentosa.Posteriormente se estableció el cultivo de células en suspensión. Se elaboraron las cinéticas de crecimiento del proceso de callogénesis y del cultivo en suspensión.Se determinó que la composición del medio de cultivo más efectivo para la inducción de callo es el Murashige y Skoog (MS) (1962) complementado con 2 mg/L de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 1 mg/L de ácido 3-indolbutírico (AIB). Además de que produjo la mayor biomasa, el callo fue friable, adecuado para el establecimiento de suspensiones celulares.En el cultivo de células en suspensión se utilizó el medio de cultivo más efectivo en el proceso de callogénesis, anteriormente citado. Además, se evidenció la predominancia de dos morfotipos de células, tanto en callo como en suspensiones celulares, con características propias, según la etapa de cultivo.

AbstractUncaria tomentosa,known as cat's claw, is a medicinal plant native to Peru, used in herbal medicine, mainly as anti-inflammatory, immune stimulant, antioxidant and cyto toxic in several cancer cell lines (HL-60, A549 and HEp-3).It's necessary to generate biotechnological strategies for studying and extraction of active compounds from the plant, such as cell cultures in bioreactors. Allowing the production of secondary metabolites scale under controlled conditions.Prior to the escalation of the crop, it is necessary to standardize protocols callus induction and cell suspension setting.In the present work we tested two protocols callus induction from leaf segments vitroplants Uncaria tomentosa.Subsequently established in cell culture suspension. Were prepared growth kinetics of the process of callus formation and suspension culture.It was determined that the composition of the most effective medium for callus induction was Murashige and Skoog (MS) (1962) supplemented with 2 mg/L 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 1 mg/L 3-Indole butyric acid (IBA). Besides that produced the highest biomass, the callus was friable, suitable for establishment of cell suspensions. The cell culture suspension was used in the culture medium more effective in the process of callus formation, cited above. Furthermore, it showed the predominance of two morphological types of cells, in both, callus and cell suspensions with characteristics depending on the cultivation stage.

Background: Haemodialysis systems are potentially thrombogenic, so anticoagulation is routinely used. Its prescription involves certain risks, despite which the recommendations regarding dosage are still based on very disparate criteria. Methods: We performed a randomised, crossed pilot study. Six patients underwent six sessions of post-dilution haemodiafiltration with a polysulfone HF80® dialyser and standard anticoagulation with nadroparin, and six sessions with heparincoated poliacrylonitrile AN69ST® membrane without the administration of systemic anticoagulation therapy. The coagulation level of the dialyser and extracorporeal circuit was evaluated every hour using a visual scale along with variation in clotting parameters such as anti-Xa factor. Our primary objective was to assess anti-Xa activity in the absence of differences in the rate of massive coagulation between the two groups. Results: No complete or grade 4 dialyser clotting occurred in any of the 36 sessions with either dialyser. Partial clotting of the dialyser occurred below 25% (grade 1-2) in 32 (88.9%) AN69ST® sessions and 35 (97.2%) sessions using the standard dialyser, and partial clotting surpassed 25% (grade 3-4) in 4 (11.1%) AN69ST® sessions and 1 (2.8%) dialysis session with heparin. Arterial chamber blood clotting did not surpass 25% (grade 3 and 4) in any of the studied sessions, and venous chamber coagulation occurred in only 1 (2.8%) session with the usual dialyser and in 3 (8.4%) sessions with the AN69ST®, with no significant differences between the two dialysers. The activated partial thromboplastin time at two hours showed differences between the two techniques in correlation with the administration of low molecular weight heparin (33.3±2.7s with polysulfone and 27.5±2.3s in AN69ST®; P<0.05), which remained significant at the end of the session (29.8±2.1s with polysulfone and 27.2±1.8s with AN69ST®; P<0.05). Anti-Xa factor activity reached a maximum at two hours after the administration of nadroparin, with differences between the two dialysers (0.46±0.13IU/ml in dialysis with polysulfone and 0.04±0.04IU/ml with AN69ST®; P<0.05), and levels decreased after 4 hours (0.17±0.12IU/ml in dialysis with polysulfone and 0.02±0.03IU/ml in AN69ST®; P<0.05). One patient on dialysis with AN69ST® had an adverse reaction in the form of generalised pruritus and was excluded from the study, by withdrawing consent for participation in the first session. Conclusion: We demonstrate the low thrombogenicity of the AN69ST® dialyser, allowing for postdilution haemodiafiltration sessions without systemic anticoagulation therapy and without increasing the frequency of severe coagulation events as compared to the HF80® dialyser with nadroparin, with a lower associated risk of bleeding by not modifying anti-Xa factor activity.

Introducción: Los sistemas de hemodiálisis tienen capacidad trombogénica, por lo que se utiliza de forma rutinaria la anticoagulación. Su prescripción no se encuentra exenta de riesgos, a pesar de lo cual las recomendaciones respecto a la dosis pautada siguen basándose en criterios muy diversos. Métodos: Se realizó un estudio experimental aleatorizado y cruzado. Seis pacientes realizaron seis sesiones de hemodiafiltración posdilución con el dializador de polisulfona HF80® y anticoagulación habitual con nadroparina, y seis sesiones con el dializador AN69ST® de poliacrilonitrilo con una cubierta de heparina sin el uso de anticoagulación sistémica. Evaluamos cada hora el grado de coagulación del dializador y del circuito extracorpóreo mediante una escala visual y las variaciones en los parámetros de coagulación, entre los que se incluyó el factor anti-Xa. Nuestro objetivo primario fue valorar las variaciones en la actividad del factor anti-Xa en ausencia de diferencias en la tasa de coagulación masiva entre los dos grupos. Resultados: No se coaguló el dializador de forma completa o grado 4 en ninguna de las 36 sesiones realizadas con cada dializador. Se produjo una coagulación parcial del dializador inferior del 25% (grado 1-2) en 32 (88,9%) sesiones con AN69ST® y 35 (97,2%) con el dializador habitual, y superior del 25% (grado 3-4) en 4 (11,1%) sesiones con AN69ST® y en 1 (2,8%) sesión con el dializador con heparina. La coagulación del atrapaburbujas arterial no fue superior al 25% (grados 3 y 4) en ninguna de las sesiones estudiadas, y la cámara venosa en sólo 1 (2,8%) sesión con el dializador habitual y 3 (8,4%) con AN69ST® sin diferencias entre los dos dializadores. El valor del tiempo de tromboplastina parcial activada presentó diferencias a las dos horas entre ambas técnicas, relacionadas con la administración de la heparina de bajo peso molecular (33,3 ± 2,7 s con polisulfona y 27,5 ± 2,3 s en AN69ST®, p < 0,05), que continuaron siendo significativas al finalizar la sesión (29,8 ± 2,1 s con polisulfona y 27,2 ± 1,8 s con AN69ST® , p < 0,05). La actividad del factor anti-Xa fue máxima dos horas después de la administración de nadroparina, con diferencias entre ambos dializadores (0,46 ± 0,13 UI/ml en diálisis con polisulfona y 0,04 ± 0,04 UI/ml con AN69ST®, p < 0,005), para ir descendiendo en la determinación de las 4 horas (0,17 ± 0,12 UI/ml en diálisis con polisulfona y 0,02 ± 0,03 UI/ml en AN69ST®, p < 0,05). Un paciente fue excluido del estudio al presentar una reacción adversa caracterizada por prurito generalizado con el dializador AN69ST®, motivo por el que retiró en la primera sesión el consentimiento. Conclusión: Demostramos la baja trombogenicidad del dializador AN69ST® de forma que permite realizar sesiones de hemodiafiltración posdilución sin necesidad de anticoagulación sistémica, y sin aumentar la frecuencia de eventos de coagulación grave en comparación con el dializador HF80® junto a nadroparina y con menor riesgo de sangrado al no modificar la actividad del factor anti-Xa.