The aim of this work was to evaluate the effects of ethanol on the adsorption and tissue distribution of orally administered antigens in mice. Results showed that ethanol reduced the level of anti-ovalbumin IgA antibodies in intestinal fluid for the mice treated orally with a palmitoyl-ovalbumin conjugate. Ethanol was administered intragastrically to mice at 5 g/kg body weight for 14 days (chronic treatment), or 10 g/kg body weight every 7th day up to 14 days (acute treatment). Thereafter, 99m technetium-labeled antigens were administered and lymphoid tissues were collected. Ethanol interfered with the transport of ovalbumin to the liver. Moreover, the transport of palmitoyl-ovalbumin to mesenteric lymph nodes was reduced 6 h after the antigen administration. In conclusion, there was a relationship between the suppression of ethanol-mediated specific local IgA responses and the decreased transport of palmitoyl-ovalbumin to mesenteric lymph nodes.

A administração oral de antígenos protéicos pode levar a indução ou supressão da resposta imune. A indução da resposta imune é de grande importância para o desenvolvimento de vacinas orais. Já a supressão, denominada de tolerância oral, pode vir a representar uma solução terapêutica a numerosas enfermidades. O objetivo deste trabalho foi de compreender o comportamento in vivo de um antígeno modelo, a ovalbumina (OVA), marcado com um radioisótopo, o 99m tecnécio (99mTc), e administrado por via oral na sua forma livre e encapsulado em lipossomas de pequeno tamanho (SUV). As amostras foram administradas por gavagem à camundongos, sacrificados após 30, 60, 90, 120, 180 e 360 minutos. A radioatividade foi medida no estômago, intestinos, placas de Peyer, linfonodos mesentéricos, baço, fígado e sangue dos animais. Os resultados mostraram que a OVA livre ou encapsulada em lipossomas SUV apresenta biodistribuições distintas. As diferenças encontradas na biodistribuição da OVA livre ou encapsulada podem representar mecanismos diferentes para a indução ou não de tolerância oral.

The oral administration of proteic antigens, like ovalbumin, may result in the induction of oral tolerance or immunization. The aim of this work was to label a protein antigen with 99mTechnetium, encapsulate it in liposomes and investigate its absorption and tissue distribution after oral administration in mice. Ovalbumin was labeled with 99mTechnetium and encapsulated in small unilamellar vesicles. 99mTc-OVA encapsulated or not in liposomes was administrated to mice that were sacrificed after different times. The radioactivity was measured in various organs of the animals. Differences concerning the biodistribution of 99mTc-OVA were noticed. The technique may represent alternatives for the induction of immunization or oral tolerance.

O objetivo deste estudo foi marcar uma proteína utilizada como modelo, a soro albumina bovina (SAB), com 99mTecnécio (99mTc), encapsular a rroteína marcada (99mTc-SAB) em lipossomas e empregar este marcador para quantificar a 99m c-SAB capturada pelas placas de Peyer de camundongos Balb/c após administração oral. A 99mTc-SAB (taxa de marcação=94,9±2,4%; n=25) foi encapsulada em lipossomas multilamelar (MLV), unilamelar de pequeno tamanho (SUV) ou unilamelar de grande tamanho (LUV) compostos de fosfatidilcolina de soja (PC); PC e colesterol (CH) (razão molar 8/2); PC, CH e fosfatidilglicerol (PG) (razão molar 7/2/1) ou distearoilfosfatidilcolina (DSPC), CH e PG (razão molar 7/2/1). Utilizando eletroforese em gel de agarose e imunoeletroforese contra uma imunoglobulina anti-SAB específica, foi verificado que a SAB não sofreu degradação após ter sido marcada com 99mTc e encapsulada em lipossomas. 99mTc-SAB encapsulada em SUV compostos por PC/CH/PG ou DSPC/CH/ PG foi preferencialmente capturada pelas placas de Peyer. A captura de 99mTc-SAB encapsulada em LUV foi reduzida quando comparada com aquela observada para SUV com a mesma composição em lipídios. 99mTc-SAB encapsulada em MLV compostos por PC/CH/PG ou DSPC/CH/PG e em SUV compostos de PC ou PC/CH não foi capturada pelas placas de Peyer. Os resultados indicam que SUV pode ser um carreador para antígenos instáveis no trato gastrintestinal, tornando-os potencialmente capazes de induzir a resposta imunológica das mucosas.

The aim of this study was to employ a model protein, the bovine serum albumin (SAB), radiolabelled with 99mTechnetium (99mTc) (99mTc-SAB) and encapsulated into liposomes, in order to determine the amount de 99mTc-SAB taken up by Peyer´s patches following per os administration in mice Balb/c. The 99mTc-SAB, labelling yield of 94.9±2.4 % (n=25), was encapsulated within multilamellar large vesicles (MLV), small unilamellar vesicles (SUV) or large unilamellar vesicles (LUV) composed of soybean phosphatidylcholine (PC); PC and cholesterol (CH) (molar ratio 8/2); PC, CH and phosphatidylglicerol (PG) (molar ratio 7/2/1) or distearoylphosphatidylcholine (DSPC), CH and PG (molar ratio 7/2/1). A gel electrophoresis and a gel immunoelectrophoresis, using a specific anti-SAB serum immunoglobulin, were employed to evaluate the integrity of SAB after labelling with 99mTc and after encapsulation into liposomes. Labelling with 99mTc and liposome encapsulation did not result in degradation of SAB. SUVencapsulated-99mTc-SAB was preferentially taken up by Peyer´s patches. Uptake of LUV-encapsulated-99mTc-SAB by Peyer´s patches was reduced when compared with that observed for the SUV-encapsulated-99mTc-SAB. 99mTc-SAB encapsulated into SUV composed of PC or PC/CH was not uptaked by Peyer´s patches. The lipid composition (PC or DSPC/CH/PG) of SUV did not modify 99mTc-SAB uptake by Peyer´s patches. In conclusion, SUV might be an effective carrier for unstable antigens administered per os to induce mucosal immune response.