RESUMO A emergência de cepas de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina associadas à pecuária (LA-MRSA) e o papel potencial dos suínos na evolução dessas cepas têm levado ao aumento do interesse na pesquisa desses microrganismos. No entanto, isso tem contribuído para a falta de estudos sobre o isolamento e a caracterização de cepas de S. aureus sensíveis à meticilina (MSSA). Neste estudo, foi analisada a prevalência de S. aureus em suínos nas fases de creche e terminação. Os perfis de suscetibilidade aos antibióticos, a tolerância a metais pesados e a produção de biofilme dos isolados foram avaliados por meio de técnicas fenotípicas e genotípicas. Um total de 1.250 colônias sugestivas de Staphylococcus spp. foi isolado de 128 suínos, das quais 63,6% (n = 795) pertenciam a esse gênero microbiano. Sessenta e sete colônias isoladas de 34 animais (26,5%) foram confirmadas como S. aureus (8,4%). Nenhuma cepa resistente ao cobre, ao zinco ou à meticilina foi detectada; entretanto, todas as cepas apresentaram perfil de resistência a pelo menos três classes diferentes de antimicrobianos e 21 produziam biofilme. Esses dados são preocupantes, pois indicam a necessidade de maior vigilância no uso de antimicrobianos, bem como reforçam a importância de estudos com cepas de MSSA.

ABSTRACT The emergence of livestock-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains (LA-MRSA) and the potential role of pigs in the evolution of these strains has led to increased interest in research of these microorganisms. However, this has contributed to a lack of research in the isolation and characterization of methicillin-susceptible S. aureus strains (MSSA). In this study, the prevalence of S. aureus in pigs in the nursery and finishing stages were analyzed. The susceptibility profiles to antibiotics, tolerance to heavy metals, and biofilm production of the isolates were evaluated using phenotypic and genotypic techniques. A total of 1,250 colonies suggestive of Staphylococcus spp. were isolated from 128 pigs, of which 63.6% (n = 795) belonged to this microbial genus. Sixty-seven colonies isolated from 34 animals (26.5%) were confirmed as S. aureus (8.4%). No strains resistant to copper, zinc, or methicillin were detected; however, all strains presented a resistance profile to at least three different classes of antimicrobials and 21 produced biofilms. These data are of concern, as they indicate the need for increased surveillance in the use of antimicrobials as well as reinforce the importance of studies on MSSA strains.

RESUMO: O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.

ABSTRACT: Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.

Ureaplasma diversum é um patógeno oportunista asso ciado com inflamação uterina, implantação do embrião prejudicada, infertilidade, abortos, nascimento prema turo de bezerros e pneumonia neonatal em gado. Tem sido sugerido que infecções causadas por Ureaplasma diversum podem causar alterações vasculares que impedem o sucesso da gravidez. Portanto, o objetivo desse estudo foi avaliar as alterações intrauterinas em camundongos A/J na fase de estro ou proestro inoculados com Ureaplasma diversum. A infecção foi avaliada após 24, 48 e 72 horas pela metodologia de PCR para detectar Ureaplasma no sítio de inoculação e o perfil de células sanguíneas circulantes. Alterações morfológicas, intensidade da inflamação e a produção de citocinas foram comparadas. Os camundongos infectados mostraram inflamação local pela produção de IFN-γ e TNF-α. Infecções por Ureaplasma diversum no trato reprodutivo dos camundongos estudados mostraram estar associadas com a produção de citocinas pró-inflamatórias no parênquima uterino. As concentrações de TNF-α nos camundongos infectados foram dependentes da carga bacteriana de Ureaplasma inoculado. Infecções uterinas experimentais por Ureaplasma diversum ainda não foram descritas e aqui nós apresentamos o primeiro relato de um modelo de infecção intrauterina em camundongos.

Ureaplasma diversum is an opportunistic pathogen associated with uterine inflammation, impaired embryo implantation, infertility, abortions, premature birth of calves and neonatal pneumonia in cattle. It has been suggested that the intra-uterine infection by Ureaplasma diversum can cause vascular changes that hinder the success of pregnancy. Thus, the aim of this study was to evaluate the changes of intrauterine site of A/J mice in estrus or proestrus phase inoculated with Ureaplasma diversum. The infection was monitored at 24, 48 and 72 hours by the PCR methodology to detect the Ureaplasma in the inoculation site and the profile of circulating blood cells. Morphological changes, intensity of inflammation and the production of cytokines were compared. The infected mice showed local inflammation through the production of IFN-γ and TNF-α. Ureaplasma diversum infections in the reproductive tract of studied mice seemed to be associated with the production of pro-inflammatory cytokines in uterine parenchyma. The levels of TNF-α of infected mice were dependent on the bacterial load of inoculated Ureaplasma. Uterine experimental infections by Ureaplasma diversum have not been mentioned yet and herein we presented the first report of an intrauterine infection model in mice.

We evaluated the effects of vincristine on the gastrointestinal (GI) motility of awake rats and correlated them with the course of vincristine-induced peripheral neuropathy. Vincristine or saline was injected into the tail vein of male Wistar rats (180-250 g) on alternate days: 50 µg/kg (5 doses, N = 10), 100 µg/kg (2, 3, 4 and 5 doses, N = 49) or 150 µg/kg (1, 2, or 5 doses, N = 37). Weight and stool output were measured daily for each animal. One day after completing the vincristine treatment, the animals were fasted for 24 h, gavage-fed with a test meal and sacrificed 10 min later to measure gastric emptying (GE), GI transit and colon weight. Sensory peripheral neuropathy was evaluated by hot plate testing. Chronic vincristine treatments with total cumulative doses of at least 250 µg/kg significantly decreased GE by 31-59% and GI transit by 55-93%. The effect of 5 doses of vincristine (150 µg/kg) on GE did not persist for more than 1 week. Colon weight increased after 2 and 5 doses of vincristine (150 µg/kg). Fecal output decreased up to 48 h after the fifth dose of vincristine (150 µg/kg). Vincristine decreased the heat pain threshold 1 day after 5 doses of 50-100 µg/kg or after 3-5 doses of 150 µg/kg. This effect lasted for at least 2 weeks after the fifth dose. Chronic intravenous vincristine treatment delayed GE and GI transit of liquid. This effect correlated with the peak increase in colon weight but not with the pain threshold changes.