RESUMO Nos últimos tempos, as tecnologias verdes ganharam espaço e interesse em muitos setores industriais. Exemplo disso são as enzimas, que podem ser obtidas por fermentação em estado sólido usando microrganismos e resíduos agroindustriais como substratos. Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo verificar a produção de hidrolases, utilizando as cepas de Arthrobacter polychromogenes e Streptomyces violaceoruber como produtoras, e a influência, da umidade e resíduos de licuri [Syagrus coronata (Martius) Beccari] e trigo como substratos. A fermentação em estado sólido foi realizada a 28 ºC/12 dias, com diferentes proporções de farelo de trigo/ torta de amêndoa de licuri desengordurada: 0/70%, 10/60%, 35/35%, 60/10% e 70/0%; e casca de licuri, fixada em 30%. A umidade média variou de 29 a 67%. Casca de licuri foi adicionada para facilitar a aeração do meio; o farelo de trigo é comumente utilizado para produção de lipases e pectinases; e a torta de amêndoa de licuri desengordurada é o substrato de interesse deste trabalho, uma vez que ele foi inspirado pela produção extrativa de licuri na região do semiárido do Brasil. A relação farelo de trigo/torta de amêndoa de licuri desengordurada não afetou a produção de enzimas por A. polychromogenes; no entanto, com S. violaceoruber, o valor da razão foi significativo para a produção de lipase, mas não para pectinases. O meio preparado com umidade de 67% e razões iguais de farelo de trigo e torta de amêndoa de licuri desengordurada (35/35%) apresentou as maiores atividades enzimáticas para ambas as enzimas, 840,46 U/gds para lipases e 15,53 U/gds para pectinases, durante os ensaios de Delineamento Central Composto. Com os experimentos de validação, verificou-se que os resíduos de licuri podem ser utilizados como substrato para a produção de hidrolases por fermentação em estado sólido, e que as actinobactérias avaliadas são adequadas para esse fim.

ABSTRACT In recent times, green technologies have gained space and interest in many industrial sectors. Examples of this are enzymes, which can be obtained by solid-state fermentation using microorganisms and agro-industrial residues as substrates. In this context, this study aimed to verify the production of hydrolases leading to Arthrobacter polychromogenes and Streptomyces violaceoruber strains as producers and the influence of moisture and residues of licuri [Syagrus coronata (Martius) Beccari] and wheat as substrates. The solid-state fermentation was performed at 28 °C/12 days, with different ratios of wheat bran/degreased almond licuri cake: 0/70%, 10/60%, 35/35%, 60/10% and 70/0%; and licuri peel, set at 30%. The medium moisture ranged from 29 to 67%. Licuri peel was added to facilitate aeration of the medium; wheat bran is commonly used to produce lipases and pectinases; and degreased almond licuri cake is the substrate of interest in this work, since it was inspired by the extractive production of licuri in the semiarid region of Brazil. The wheat bran/degreased almond licuri cake ratio did not affect enzyme production by A. polychromogenes; however, with S. violaceoruber, the ratio value was significant for lipase production but not for pectinases. The medium prepared with 67% moisture and equal ratios of wheat bran and degreased almond licuri cake (35/35%) presented the highest enzymatic activities for both enzymes, 840.46 U/gds for lipases and 15.53 U/gds for pectinases, during Composite Central Design assays. With validation experiments, it was verified that licuri residues can be used as substrates for the production of hydrolases by solid-state fermentation and that actinobacteria evaluated are suitable microorganisms.

Resumo Scrippsiella acuminata é um complexo de espécies que pode causar condições anóxicas na coluna d’água durante florações. Este estudo teve como objetivo analisar a ocorrência e distribuição de Scrippsiella cf. acuminata ao longo do gradiente estuarino do rio Paraguaçu, a partir de coletas bimestrais (março de 2018 a março de 2019) realizadas em 12 pontos amostrais. Variáveis ambientais foram medidas in situ, e amostras de água foram coletadas para análise de nutrientes inorgânicos dissolvidos e densidade de células fitoplanctônicas. Em cada ponto, as amostras foram coletadas para análise da composição das espécies e preservadas com formaldeído com concentração final de 4%. S. cf. acuminata ocorreu em todo o gradiente estuarino (salinidade 0,1–38,9), exceto em julho, coincidindo com as menores concentrações de nutrientes inorgânicos dissolvidos. A densidade celular variou entre 20 células L-1 (janeiro de 2019) e 1,8 × 106 células L-1 (março de 2018); neste último, ocorreu uma floração em condições de baixa salinidade (5,7) e a maior concentração de nutrientes inorgânicos dissolvidos registrada para o estudo. A densidade celular (1,7 × 105 L-1) aumentou novamente em novembro de 2018. Nenhum dos eventos teve efeitos prejudiciais no sistema estuarino. Este estudo permitiu-nos compreender melhor os padrões de distribuição de S. cf. acuminata considerando as características ambientais que podem favorecer seu desenvolvimento.

Abstract Scrippsiella acuminata is a species complex that can cause anoxic conditions in the water column during blooms. This study aimed to analyze the occurrence and distribution of Scrippsiella cf. acuminata along the estuarine gradient of Paraguaçu River, from bimonthly sampling (March 2018 to March 2019) performed at 12 sampling points. Environmental variables were measured in situ, and water samples were collected for analysis of dissolved inorganic nutrients and phytoplankton cell density. At each point, samples were collected for analysis of species composition and preserved with formaldehyde at a final concentration of 4%. S. cf. acuminata occurred throughout the estuarine gradient (salinity 0.1–38.9), except in July, coinciding with the lowest concentrations of dissolved inorganic nutrients. Cell density varied between 20 cel L-1 (January 2019) and 1.8 × 106 cell L-1 (March 2018); in the latter, the species bloomed under conditions of low salinity (5.7) and the highest dissolved inorganic nutrient concentration recorded in the study. Cell density (1.7 × 105 L-1) increased in November 2018. Neither event had any detrimental effects on the estuarine system. This study allowed us to better understand the distribution patterns of S. cf. acuminata considering the environmental characteristics that can favor its development.

ABSTRACT BKV and JCV belong to the Polyomaviridae family and are opportunistic agents associated with complications in immunocompromised individuals. Although a single screening assay for both viruses would be convenient, the diversity of BKV and JCV serotypes and genotypes is a methodological challenge. In this paper, we developed a PCR method able to detect and segregate BKV and JCV, despite these genetic discrepancies. A duplex semi-nested PCR (duplex snPCR) was designed to target a conserved region (639nt-1516nt) within the VP2 gene. In the first PCR, a primer set common to all BKV and JCV serotypes/ genotypes was used, followed by a semi-nested PCR with internal primers for BKV and JCV segregation. The limit of detection of the duplex snPCR was as low as 10 copies of BKV or JCV plasmids/μL. Specific products were observed when JCV and BKV plasmids were mixed in the same reaction. In field sample testing, the duplex snPCR detected and distinguished both viruses in different biological samples. Results were confirmed by Sanger's sequencing. The geographical complexity of BKV and JCV serotypes and genotypes imposes limits to a simple and universal method that could detect each virus. However, we describe here a sensitive and reliable PCR technique for BKV and JCV diagnosis that overcomes these limitations and could be universally applied.

The main objective of this paper was to evaluate the level of occurrence of the organochlorine compounds in samples of sediments, bivalves and two fish species collected in the Piracicaba River basin (São Paulo, Brazil). The isomers alpha and gamma of HCH and Heptachlor were most frequently detected in samples of sediments and specimens of bivalve and fish. Therefore, although the levels of these compounds found were not critically high, they are still found in the environment. This fact suggests that they are still being used, despite the fact that the use of these compounds was outlawed more than twenty years ago.

A mancha-aquosa, causada por Acidovorax avenae subsp. citrulli, é a mais importante doença bacteriana do meloeiro (Cucumis melo) no Nordeste. Objetivando buscar alternativas para seu controle, diferentes doses de kasugamicina (100, 200, 300, 500 e 700 ppm), oxicloreto de cobre (500 ppm) e mistura dos dois produtos (200+500 ppm) foram avaliadas quanto à inibição do patógeno, in vitro. Em seguida, dois ensaios de campo foram realizados no Rio Grande do Norte (RN) e Ceará (CE), registrando-se inicialmente as incidências médias da doença em plantas. Os tratamentos: 1 a 4 - kasugamicina 40, 50, 60 e 70 ppm; 5 - kasugamicina + oxicloreto de cobre 40 + 1250 ppm; 6 - oxicloreto de cobre 1250 ppm; 7 - sal de oxitetraciclina 82 ppm e 8 - testemunha, foram aplicados quatro vezes, sendo avaliada a incidência da doença em frutos, 67 dias após plantio. In vitro, 300, 500 e 700 ppm de kasugamicina inibiram significativamente o crescimento do patógeno, diferindo dos demais tratamentos, mas não diferindo entre si (teste não paramétrico de Friedman, P=0,01). Nos campos do RN e CE, incidências médias da doença de 67,8 e 46,3%, respectivamente, foram registradas inicialmente. Aos 67 dias após plantio, os tratamentos 4 e 6 no RN, bem como 5 e 7 no CE, reduziram significativamente a incidência da doença em frutos, com relação aos demais (teste z de duas proporções, P= 0,05).

Bacterial blotch caused by Acidovorax avenae subsp. citrulli is the most important bacterial disease of melon (Cucumis melo) in Northeastern Brazil. In an attempt to find alternatives for controlling this disease, several dosages of kasugamycin (100, 200, 300, 500 and 700 ppm), copper oxichloride (500 ppm) and a mixture of the two products (200 + 500 ppm) were evaluated for pathogen inhibition in vitro. Two field experiments were performed in Rio Grande do Norte (RN) and Ceará (CE) where disease incidence was initially determined. The treatments: 1 to 4 - kasugamycin 40, 50, 60 and 70 ppm; 5 - kasugamycin + copper oxichloride 40 + 1250 ppm; 6 - copper oxichloride 1250 ppm; 7 - oxitetracyclin salt 82 ppm and 8 - control were applied four times and evaluation was carried out 67 days after planting by recording disease incidence on fruits. In vitro 300, 500 and 700 ppm of kasugamycin significantly inhibited pathogen growth, differing from the other treatments but not among them (Friedman non parametric test, P=0.01). In field experiments in RN and CE, disease incidence was recorded initially at 67.8 and 46.3%, respectively. Sixty-seven days after planting, treatments 4 and 6 in RN, as well as 5 and 7 in CE, significantly reduced disease incidence on fruits (two-tailed z test, P=0.05).

O presente trabalho teve por finalidade estudar os efeitos do cádmio sobre a levedura Saccharomyces cerevisiae, bem como avaliar a possibilidade de se utilizar a vinhaça como fornecedora de agentes ligantes, visando minimizar os efeitos deletérios do mesmo. Primeiramente montou-se um ensaio visando observar a ação tóxica de diferentes concentrações de cádmio (0; 0,05; 0,1 e 0,5mM), avaliada pelo crescimento de duas cepas da levedura S. cerevisiae (PE-2 e IZ-1904) em meio YED. O meio foi inoculado com 1mL de uma suspensão a 1% (m/v) das respectivas cepas e incubado por 18 horas. Em tempos determinados durante o crescimento anaeróbio, alíquotas da suspensão de células foram retiradas e a concentração celular foi determinada. No final do ensaio, foram determinadas a viabilidade celular, a taxa de brotamento e a contaminação bacteriana. Os teores de trealose para cada tratamento, de ambas as cepas, foram dosados no início e no final do ensaio. Em uma segunda etapa, montou-se um ensaio visando avaliar a capacidade da vinhaça (0,15 e 30% do volume do meio) em atenuar os efeitos tóxicos de duas doses de cádmio (0,1 e 0,5mM), empregando-se a levedura S. cerevisiae PE-2 em meio YED. O meio foi inoculado com 2mL de uma suspensão a 1% (m/v) da levedura e incubado por 18 horas. Em tempos determinados durante o crescimento anaeróbio, alíquotas da suspensão de células foram retiradas e a concentração celular foi determinada. No final do ensaio, foram determinadas a viabilidade celular, a taxa de brotamento, a contaminação bacteriana e a produção de etanol. Os teores de trealose, para cada tratamento, foram dosados nas leveduras no início e no final do ensaio. O cádmio prejudicou o crescimento e a viabilidade celular das duas cepas da levedura S. cerevisiae. A vinhaça apresentou um discreto efeito tóxico, traduzido pela redução do crescimento. Porém, nos tratamentos contaminados com cádmio, apresentou um efeito protetor, minimizando os efeitos deletérios do metal.

The present study was carried out in order to evaluate the capability of different cadmium concentration (0; 0,05, 0,10 and 0,50mM) to affect the growth of two S. cerevisiae strains (PE-2 and IZ-1904) in YED (yeast extract 1% and dextrose 2%) medium, and to evaluate the three vinasse concentration capability (0,15 and 30%) to attenuate the two cadmium concentration toxicity (0,1 and 0,5mM), using S. cerevisiae PE-2 strain in YED medium. In the first assay, the medium was inoculated in aseptic conditions with 1mL of 1% yeast suspension (PE-2 or IZ-1904) and incubated at 30ºC, 70 RPM for 18 hours. During anaerobic growth (0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16 and 18 hours), portions of cell suspension were taken out and biomass concentration was determined. At the end of fermentation, yeast viability, budding rate and bacterial contamination were determined. Both, initial and final trehalose, was measured. In the second assay, the medium was inoculated in aseptic conditions with 2mL of 1% PE-2 suspension and incubated at 30ºC, 120 rpm for 18 hours. During the anaerobic growth (0, 2, 4, 6, 8, 10, 12,14, 16 and 18 hours) portions of cell suspension were taken out and biomass concentration was determined. At the end of fermentation, alcohol production, yeast viability, budding rate and bacterial contamination were determined. Both, initial and final trehalose, was measured. The increase of cadmium levels showed a reduction on yeast growth and cell viability. Vinasse showed low toxicity, but protected yeast cells very effectively against the toxic effects of cadmium.

Os parâmetros: volume de esgoto gerado, volume de esgoto tratado, cargas poluidoras domiciliar potencial e remanescente, cargas equivalentes de carbono e nitrogênio foram estimados neste estudo a partir dos dados populacionais do censo 2000 do IBGE para todos os municípios do Estado de São Paulo bem como as bacias hidrográficas dos rios Piracicaba, Mogi-Guaçu, Turvo, Peixe, Aguapeí, São José dos Dourados, Itapetininga, Apiaí, Taquari e Paranapanema,. Para essas estimativas foram levados em consideração o nível de atendimento das populações pela existência de redes coletoras de esgoto e a existência ou não de algum tipo de tratamento de esgoto em cada município do Estado. Todas essas estimativas encontram-se disponíveis em www.cena.usp.br/biota. Apesar da preocupação histórica do Governo Paulista com saneamento básico, somente 17% do esgoto gerado no Estado sofre algum tipo de tratamento prévio. Portanto, a carga domiciliar remanescente é extremamente elevada. Esse aporte extra de matéria orgânica causa mudanças profundas nos corpos hídricos receptores. Dentre as bacias hidrográficas acima citadas, a bacia do rio Piracicaba é a mais severamente afetada por despejos de esgoto doméstico, seguida pelas bacias dos rios Mogi e Turvo. Por outro lado, as bacias do Alto Paranapanema (Itapeteninga, Apiaí, Taquari e Paranapanema) são as menos afetadas.

Based on population data provided by the 2000 IBGE census, the volume of domestic sewage, the volume of treated sewage, the potential and remnant domestic sewage loads and the equivalent carbon and nitrogen loads were estimated for each one of the 645 counties of the São Paulo State and for the catchments of the rivers Piracicaba, Mogi-Guaçu, Turvo, Peixe, Aguapeí, São José dos Dourados, Itapetininga, Apiaí, Taquari, and Paranapanema. In order to estimate these parameters the existence of sewage collecting system, and the existence of any kind of sewage treatment in each county of the State were taken into account. The database generated in this study may be found at www.cena.usp.br/biota. Despite of the historical attempts of the São Paulo State government in treating sewage, only 17% of the sewage volume produced in the State has some type of treatment before it is launched to rivers. Consequently, the load of untreated sewage is indeed very large. This input of extra organic matter causes severe alterations in water bodies. Among the catchments we have analyzed the Piracicaba River basin is the most affected by domestic sewage, followed by Mogi-Guaçu and Turvo basins. On the other hand, the basins of the rivers Itapeteninga, Apiaí, Taquari and Paranapanema are the least affected.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o parasitismo do nematóide Deladenus siricidicola,Bedding (Neotylenchidae)em adultos de Sirex noctilio, Fabricius, 1793 (Hymenoptera: Siricidae). Foram utilizados toretes de 0,80 cm de comprimento, retirados do terço médio de árvores de Pinus taeda atacadas por Sirex noctilio e inoculadas com Deladenus siricidicola. Os toretes possuíam diâmetro entre 15-20 cm, de acordo com a idade das árvores. As amostras foram acondicionadas em gaiolas ou tonéis vedados com tela de nylon e seguros por cintas de borracha, permanecendo em observação diária até a emergência dos insetos adultos. Os insetos foram trasportados em recipientes plásticos para o laboratório, onde foram seccionados e dissecados sob microscópio estereoscópico, para a verificação da ocorrência ou não do nematóide. Foram avaliadas nove das dez unidades inicialmente propostas. Nestas, foram analisados 1.810 insetos adultos, sendo 1.441 machos e 369 fêmeas. O parasitismo pelo nematóide foi verificado em 267 machos e 74 fêmeas, em um total de 341 insetos parasitados, com uma porcentagem de parasitismo de 18,84%.

This work aimed to evaluate the Deladenus siricidicola, Bedding (Neotylenchidae)parasitism in adults Sirex noctilio, Fabricius, 1793 (Hymenoptera: Siricidae). Timber was sampled by cutting out pieces of 0.80 m in length in Sirex noctilio attacked and Deladenus siricidicola inoculated Pinus taeda. Longs were 15-20 cm in diameter, according to the tree age. Samples were packed in gauze-cages, for daily observations, till S. noctilio adults emergence. The emerged insects were transported, in plastic containers to the laboratory, where they were sectioned and dissected under stereoscopic microscopy to observ the nematode occurrence. From the initially proposed ten units, nine of them were evaluated in a total of 1,810 emerged adult insects, being 1,441 males and 369 females. Nematode parasitism was shown in 267 males and 74 females, in a total of 341 infected insects (18.84%).