RESUMO O objetivo do presente estudo foi padronizar um protocolo de reação em cadeia da polimerase (PCR) para a autenticação de leite bovino e bubalino e a detecção da presença de Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. Para isso, o DNA-alvo foi extraído, misturado e submetido ao ensaio de PCR. Amostras de leite foram fraudadas e contaminadas experimentalmente com os micro-organismos, para se avaliar a detecção do DNA-alvo em diferentes tempos de cultivo, os títulos bacterianos e a concentração de material genético. Além disso, o protocolo foi testado com DNA extraído diretamente do alimento, sem a etapa de pré-enriquecimento. A PCR quadriplex proposta mostrou boa precisão na identificação de sequências de DNA-alvo. Foi possível identificar simultaneamente todas as sequências de DNA no momento da inoculação (0h), quando as amostras estavam contaminadas com 2 UFC/250mL, e com seis horas de cultura, quando o inóculo inicial foi de 1 UFC/250mL. Também foi possível detectar diretamente as sequências de DNA do alimento quando este foi inoculado com 3 UFC/mL de bactérias. Dessa forma, a metodologia proposta apresentou desempenho satisfatório, otimização do tempo de análise e potencial para detecção de micro-organismos em baixos títulos, podendo ser utilizada para detecção de fraude e contaminação.

ABSTRACT The objective of the present study was to Standardize a Polymerase Chain Reaction (PCR) protocol for the authentication of bovine and buffalo milk, and to detect the presence of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. For this, the target DNA was extracted, mixed, and subjected to a PCR assay. Milk samples were defrauded and experimentally contaminated with microorganisms to assess the detection of target DNA at different times of cultivation, bacterial titers, and concentration of genetic material. In addition, the protocol was tested with DNA extracted directly from food, without a pre-enrichment step. The proposed quadruplex PCR showed good accuracy in identifying target DNA sequences. It was possible to simultaneously identify all DNA sequences at the time of inoculation (0h), when the samples were contaminated with 2 CFU/250mL and with 6h of culture when the initial inoculum was 1 CFU/250mL. It was also possible to directly detect DNA sequences from the food when it was inoculated with 3 CFU/mL bacteria. Thus, the proposed methodology showed satisfactory performance, optimization of the analysis time, and a potential for the detection of microorganisms at low titers, which can be used for the detection of fraud and contamination.

RESUMO O objetivo do presente trabalho é descrever o primeiro relato no Brasil de tratamento cirúrgico de um cisto da membrana nictitante em um cão. Um Buldogue Francês, fêmea, seis meses, foi atendido no Hosvet-Unime, com queixa de aumento de volume avermelhado no canto medial de ambos os olhos, com histórico de recidiva de prolapso de glândula da terceira pálpebra, onde haviam sido realizadas duas cirurgias anteriormente em outro local. Ao exame físico, foi observado prolapso de glândula da terceira pálpebra no olho direito e a presença de um cisto na terceira pálpebra do olho esquerdo. O animal foi submetido ao procedimento cirúrgico de sepultamento de glândula da terceira pálpebra no olho direito e uma marsupialização na terceira pálpebra do olho esquerdo para o tratamento do cisto. Cento e oitenta dias após o procedimento cirúrgico, não foi observada recidiva. A técnica de marsupialização para tratamento de cisto lacrimal na terceira pálpebra em um cão possibilitou a manutenção da sua glândula e impediu a formação de nova cavidade cística.

ABSTRACT This study aims to describe the first Brazilian report of a nictitating membrane cyst’s surgical treatment in a dog. A 6-month-old female French Bulldog presented at HOSVET-UNIME with a reddish mass-like structure in the medial canthus of both eyes, with a history of recurrent third eyelid gland prolapse previously treated with two surgeries performed at another clinic. Physical examination revealed a third eyelid gland prolapse in the right eye and a cyst in the left eye’s third eyelid. The animal was submitted to surgical correction of the right eye’s third eyelid prolapse using pocket technique and of the left eye’s third eyelid using marsupialization technique for the cyst’s treatment. 180 days after th1e surgical procedure no recurrence was observed. The marsupialization technique for the treatment of a third eyelid’s lacrimal cyst in a dog allowed the maintenance of its gland and prevented the formation of a new cystic cavity.

RESUMO Objetivou-se estabelecer valores de referência para eletrorretinografia (ERG) de 23 cervídeos anestesiados, de oito espécies neotropicais (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus e Blastocerus dichotomus). Somente os olhos direitos foram estudados. A contenção química foi realizada com cetamina/xilazina, IM, nas seguintes espécies: M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus e O. virginianus. Para o B. dichotomus, foi utilizada a associação de tiletamina/zolazepam e xilazina. Após 20 minutos de adaptação ao escuro, os eletrorretinogramas foram obtidos com aparelho portátil de ERG, utilizando-se o protocolo “QuickRet Check”, em três intensidades de luz: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2 e 10cd.s/m2. Após adaptação à luz, realizou-se a fase fotóptica. Os valores para amplitude da onda A durante a resposta padrão mista de cones/bastonetes em M. americana foram significativamente menores quando comparados aos do B. dichotomus. Não foram observadas outras diferenças entre as espécies. A realização de ERG em cervídeos neotropicais é aplicável utilizando-se aparelho portátil e não demonstrou diferenças quanto à resposta retiniana a diferentes intensidades de luz. Dessa forma, o estilo de vida das espécies é ditado mais pela pressão de seleção do ambiente do que por fatores fisiológicos.

ABSTRACT The aim of this study was to establish normal baseline ERG values of 23 anesthetized deer belonging to 8 neotropical species (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus and Blastocerus dichotomus). Only right eyes were studied. Chemical restraint was performed using xylazine associated with ketamine, IM, for M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus and O. virginianus. A combination of tiletamine/zolazepam diluted in xylazine 2% was used for B. dichotomus individuals. After 20min of dark adaptation, electroretinograms were obtained using a handheld electroretinography (ERG) machine using the QuickRetCheck Protocol at three different light intensities: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2, and 10cd.s/m2. After light adaptation, photopic phase was recorded. A-wave amplitude recorded during pattern mixed rod/cone response in M. americana was significantly lower when compared to B. dichotomus. No other differences were observed between the species studied. ERG in Neotropical deer is applicable using a portable ERG system and did not show differences among species in relation to the retinal response at different light intensities. Therefore, the lifestyle of the species is more dictated by the selection pressure of the environment than by physiological factors.

RESUMO: Cachorros-do-mato (Cerdocyon thous) são canídeos selvagens encontrados em praticamente todos os estados brasileiros. Geralmente vivem e caçam em pares, mas podem ser encontrados em pequenos grupos, o que favorece a transmissão de doenças, como a sarna sarcóptica. O presente trabalho tem como objetivo descrever os achados epidemiológicos, parasitológicos e patológicos de dois casos fatais de sarna sarcóptica em cachorros-do-mato. Foram realizados necropsia de dois cachorros do mato, exame citológico de amostras de pele e crostas e exame histológico de amostras dos órgãos e tecidos. Na necropsia foram observados mau estado corporal, extensas áreas de alopecia, crostas cutâneas espessas que se desprendiam e eram intercaladas por áreas alopécicas intensamente eritematosas. No exame citológico foi observada grande quantidade de ácaros com gnatossoma curto e largo, idiossoma globoso, transversalmente estriado e com espinhos triangulares na superfície dorsal, ânus terminal e pernas curtas e grossas, característicos de Sarcoptes scabiei. Ao exame histológico da pele havia muitos túneis no estrato córneo da epiderme e abaixo dele, contendo grande quantidade de S. scabiei. Essas estruturas parasitárias estavam associadas a acantose e hiperqueratose acentuadas e dermatite superficial discreta. Os achados revelam a sarna sarcóptica como uma doença importante em cachorros do mato.

ABSTRACT: Crab-eating foxes (Cerdocyon thous) are wild canids found in practically all Brazilian states. They usually live and hunt in pairs, but can be found in small groups, which favors the transmission of diseases such as sarcoptic mange. This study aims to describe the epidemiological, parasitological and pathological findings of two fatal cases of sarcoptic mange in C. thous. Two wild canids were necropsied and cytological examination of skin and crust samples and histologic evaluation of various tissue samples were performed. Gross findings included poor body condition and extensive alopecia with thick skin crusts interspersed by intensely reddened alopecic areas. The cytological examination revealed numerous mites with short gnathosoma and rounded idiosoma that were transversally striated and presented triangular spines on the dorsal surface, terminal anus, and short and thick legs, characteristic of Sarcoptes scabiei. Histologic examination of the skin revealed numerous tunnels into and under the stratum corneum of the epidermis containing high amounts of S. scabiei. The mites were associated with marked acanthosis and hyperkeratosis, and mild superficial dermatitis. The findings reveal that sarcoptic mange is an important disease in wild canids.

Bacterial infections occur worldwide and are a major public health problem. Among pathogens, Staphylococcus aureus is the main causative agent of bacterial diseases in the world. This study aimed to evaluate which components of the immune system could act protectively against a S. aureus infection in intradermally immunized mice. C57BL/6 and A/j mice were immunized intradermally with S. aureus inactivated by heat and then challenged with viable strains in an air pouch model. At 6, 12, and 24 h after the challenge, euthanasia was performed, and the cellular profile of the inflammatory infiltrate, cytokines, and the bacterial load were evaluated in the air pouch lavages. Immunized mice demonstrated that the intradermal immunization with S. aureus promoted protection in C57BL/6 mice by reducing the bacterial, which was correlated with increased serum concentration of IgG antibodies (IgG1 and IgG2a) against S. aureus. The increase in IgG2a antibody levels was correlated with a decrease of bacterial load in intradermally immunized C57BL/6 mice, along with production of IL-17A at the inflammation site, as well as IgG1consumption. Similar results were not found in the A/j lineage. In conclusion, a vaccine against S. aureus should focus more on the individual characteristics of the host because it is a determinant factor for the success of the immunization.

RESUMO: O artigo relata um caso de testículo ectópico em quati de cativeiro (Nasua nasua) no Zoológico do Parque Estadual Dois Irmãos, Recife/PE. O testículo encontrava-se localizado no tecido subcutâneo da região inguinal, sem estar aderido aos tecidos circunvizinhos. Após orquiectomia bilateral, ambos os testículos foram mensurados, fixados em formol a 10% e embebidos em parafina para avaliação histopatológica. O testículo esquerdo mediu 1,2cm de largura por 1,7cm de movimento; e o testículo direito mediu 1,5cm de largura por 2,0cm de comprimento. O testículo ectópico apresentou epitélio sem linhagem de células germinativas pós-meióticas. O testículo não ectópico apresentou alterações no epitélio seminífero caracterizando degeneração. Em ambos os epidídimos, o lúmen não continha espermatozoides e as principais alterações estruturais do epitélio foram mais distintas no epidídimo associado ao testículo ectópico. Conclui-se que o testículo ectópico e epidídimo apresentaram lesões características de aumento de temperatura. O testículo e epidídimo não ectópico apesentaram lesões menores mas que puderam ser associadas à infertilidade do quati.

ABSTRACT: This paper reports a case of unilateral extracorporeal ectopic testes in a captive coati (Nasua nasua) in the State Park of Dois Irmãos Zoo, Recife/PE, Brazil. The testicle was located in the subcutaneous tissue of the inguinal region not adhered to the surrounding tissues. After bilateral orchiectomy, both testes were measured, fixed with 10% formalin buffered and embedded in paraffin for histopathological evaluation. The left testis measured 1.2 cm width by 1.7cm length, and the right one measured 1.5 cm width by 2.0 cm length. The ectopic testes had seminiferous epithelium without post-meiotic germ cell lines. The non-ectopic testis had several changes in the seminiferous epithelium that indicated degeneration. In both epididymis, the lumen did not contain sperm and the major epithelial structural alterations were more distinct in the epididymis associated to the ectopic testicle. In conclusion, the ectopic testis and epididymis had lesions compatible with testicular exposition to body temperature. Non-ectopic epididymis and testis had minor lesions but could be related to the infertility of the coati.

Usando as triangulações propostas pelo antigo astrônomo Aristarco, obtivemos neste trabalho o tempo total e a duração do máximo dos eclipses solares e calculamos o tempo total dos eclipses lunares. Para isso, usamos os valores do período orbital da Lua e os valores das razões entre as distâncias Terra-Lua e o diâmetro da Terra. Combinamos esses valores com outros dois parâmetros geométricos, conseguidos a partir do tratamento das imagens dos eclipses do Sol e da Lua. Os resultados foram comparados com valores atuais.

Using triangulations proposed by the ancient astronomer Aristarchus, we obtained in this work the total time to lunar and solar eclipses and the maximum duration of solar eclipses. For this purpose, we used the values of the orbital period of the Moon and the values of the ratio between the Earth-Moon distance and the Earth's diameter. We combined them with two other geometric parameters obtained from the processing of images of the Sun and Moon eclipses. The results were compared with current values.

Apolipoprotein E (APOE=gene, apoE=protein) is a known factor regulating the inflammatory response that may have regenerative effects during tissue recovery from injury. We investigated whether apoE deficiency reduces the healing effect of alanyl-glutamine (Ala-Gln) treatment, a recognized gut-trophic nutrient, during tissue recovery after 5-FU-induced intestinal mucositis. APOE-knockout (APOE-/-) and wild-type (APOE+/+) C57BL6J male and female mice (N=86) were given either Ala-Gln (100 mM) or phosphate buffered saline (PBS) by gavage 3 days before and 5 days after a 5-fluorouracil (5-FU) challenge (450 mg/kg, via intraperitoneal injection). Mouse body weight was monitored daily. The 5-FU cytotoxic effect was evaluated by leukometry. Intestinal villus height, villus/crypt ratio, and villin expression were monitored to assess recovery of the intestinal absorptive surface area. Crypt length, mitotic, apoptotic, and necrotic crypt indexes, and quantitative real-time PCR for insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) intestinal mRNA transcripts were used to evaluate intestinal epithelial cell turnover. 5-FU challenge caused significant weight loss and leukopenia (P<0.001) in both mouse strains, which was not improved by Ala-Gln. Villus blunting, crypt hyperplasia, and reduced villus/crypt ratio (P<0.05) were found in all 5-FU-challenged mice but not in PBS controls. Ala-Gln improved villus/crypt ratio, crypt length and mitotic index in all challenged mice, compared with PBS controls. Ala-Gln improved villus height only in APOE-/- mice. Crypt cell apoptosis and necrotic scores were increased in all mice challenged by 5-FU, compared with untreated controls. Those scores were significantly lower in Ala-Gln-treated APOE+/+ mice than in controls. Bcl-2 and IGF-1 mRNA transcripts were reduced only in the APOE-/--challenged mice. Altogether our findings suggest APOE-independent Ala-Gln regenerative effects after 5-FU challenge.