Resumo Este artigo descreve os impactos ambientais da produção de uma única muda em viveiros florestais de distritos selecionados (Haripur, Abbottabad e Manshera) da divisão Hazara, de Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão, usando a abordagem de avaliação do ciclo de vida (ACV). Este estudo baseou-se na abordagem “do berço ao portão”, que se inicia na fase pré-viveiro e progride em direção ao viveiro principal antes do transplante das mudas para o local de plantio. Os dados ou inventário de ciclo de vida (ICV) da produção de mudas foram coletados por meio de questionários e reuniões pessoais com o gerente e os trabalhadores dos viveiros florestais sobre o consumo de diferentes insumos, como energia elétrica, diesel, fertilizantes, herbicidas, sacos de polietileno, adubo orgânico e consumo de água. O software SimaPro, versão 8.5, e o modelo ambiental CML2000, v2.05, foram aplicados para realizar a avaliação de impacto do ciclo de vida (AICV) de uma única produção de mudas em viveiros florestais na área de estudo. Em consonância com os objetivos do estudo, os dados primários relativos às entradas e saídas dos viveiros foram coletados de 35 viveiros na área de estudo por meio de um método de questionário aleatório. Além disso, dados secundários foram obtidos de bancos de dados online, como Eco-invent v.3.2 CORRIM e literatura publicada revisada por pares. Para este estudo, foi considerada uma unidade funcional de uma única plântula. Os dados médios ponderados de produção foram modelados no software de modelagem ambiental mais recente, ou seja, SimaPro, v.8.5, para 10 impactos ambientais mais desejados pela US-EPA, como potencial de aquecimento global (PAG), depleção abiótica (DA), potencial de eutrofização (PE), potencial de acidificação (PA), ecotoxicidade de água doce (EAD), ecotoxicidade da água marinha (EAM), ecotoxicidade terrestre (ET), destruição da camada de ozônio (DCO), oxidação fotoquímica (OF) e toxicidade humana (TH). Os resultados mostraram que o maior impacto ambiental causado por uma única muda foi a ecotoxicidade da água marinha (11,31360 kg 1,4-DB eq), seguido pelo potencial de aquecimento global (0,02945 kg CO2 eq) e toxicidade humana (0,01227 kg 1,4-DB eq) eq). A principal razão para esses ônus ambientais foi o uso de fertilizantes sintéticos em viveiros florestais e o consumo de combustíveis fósseis nas atividades de mecanização e transporte de viveiros. A demanda total acumulada de energia para uma única muda foi de 0,800 MJ, com mais de 90% de contribuição de recursos energéticos de combustíveis fósseis, como gasolina e diesel. Portanto, é altamente recomendável usar recursos de energia renovável e fertilizantes orgânicos em vez de fertilizantes químicos em viveiros florestais para evitar e minimizar as emissões de gases de efeito estufa (GEE) e outras emissões tóxicas na área de estudo.

Abstract This article describes the environmental impacts of producing a single seedling in forest nurseries of selected districts (i.e., Haripur, Abbottabad, and Mansehra) of Hazara Division of Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan using the life cycle assessment (LCA) approach. This study was based on the cradle-to-gate approach which begins with the pre-nursery stage and progresses toward the main nursery before transplanting seedlings into the plantation site. Data or life cycle inventory (LCI) of seedling production were collected through questionnaire surveys and personal meetings with forest nurseries managers and workers regarding consumption of different inputs such as electricity, diesel, fertilizers, herbicides, and polyethylene bags, organic manure, and water consumption. The SimaPro software version 8.5 and the CML2000 v2.05 environmental model was applied to perform life cycle impact assessment (LCIA) for a single seedling production in forest nurseries in the study area. In line with the objectives of the study, primary data regarding inputs and outputs of the nurseries were collected from 35 nurseries in the study area by using a random questionnaire method. In addition, secondary data were taken from online databases such as Eco-invent v.3.2 CORRIM and peer-reviewed published literature. For this study, a functional unit of a single seedling was considered. Production weighted average data were modeled in the latest environmental modeling software i.e., SimaPro v.8.5 for ten US-EPA most wanted environmental impacts, such as global warming potential (GWP), abiotic depletion (AD), eutrophication potential (EP), acidification potential (AP), freshwater aquatic eco-toxicity (FAE), marine water eco-toxicity (MWE), terrestrial eco-toxicity (TE), ozone layer depletion (OLD), photochemical oxidation (PO), and human toxicity (HT). The results showed that the highest environmental impact posed by a single seedling was marine aquatic eco-toxicity (11.31360 kg 1,4-DB eq), followed by global warming potential (0.02945 kg CO2 eq) and (0.01227 kg 1,4-DB eq) human toxicity. The primary reason for these environmental burdens was the use of synthetic fertilizers in forest nurseries and the consumption of fossil fuels in nursery mechanization and transportation activities. The total cumulative energy demand for a single seedling was (0.800 MJ) with more than 90% contribution from fossil fuel energy resources such as petrol and diesel. It is therefore highly recommended to use renewable energy resources and organic fertilizers instead of chemical fertilizers in forest nurseries to avoid and minimize greenhouse gas emissions (GHS) and other toxic emissions in the study area.

Resumo Nos países desenvolvidos, o uso de OCPs (pesticidas organoclorados) foi proibido. No entanto, no sul da Ásia, vários deles ainda estão em uso. No Paquistão e na Índia, uma adição constante de OCPs na atmosfera foi indicada por vários pesquisadores. Neste estudo, os níveis de resíduos de pesticidas organoclorados selecionados foram avaliados em sedimentos e biota coletados de 4 reservatórios de água (3 barragens e 1 sifão) no rio Satluj, Paquistão, ao longo de 231 milhas (372 km) do trecho do rio, que foi posteriormente dividido em 12 locais de amostragem. O objetivo foi descobrir os níveis de resíduos de pesticidas organoclorados (OCPs) em sedimentos e de espécies de peixes selecionadas (Labeo rohita, Wallagu attu, Cyprinus carpio) do rio Satluj, Paquistão. Os resíduos de organoclorados (7 pesticidas) presentes em amostras de sedimentos e biota foram investigados através do método multirresíduos, utilizando cromatógrafo a gás (GC-ECD). No presente estudo, a concentração de DDT foi investigada em Wallago attu (0,786-3,987 ppb ), Labeo rohita (0,779-4,355 ppb) e Cyprinus carpio (1,234-5,654 ppb). DDE também foi encontrado em Cyprinus carpio (1.244-6.322 ppb), Wallag attu (0.877-4.221 ppb) e Labeo rohita (2.112-5.897 ppb). Aldrin não foi observada em Labeo rohita e Wallago attu. Atualmente, lindano e DDE foram encontrados predominantemente altos nos sedimentos da área de estudo em SZ-4 (Panjnad Barrage) variando (2.238-8.226 ppb) e (4.234-6.876 ppb), respectivamente. Heaptacloro foi encontrado apenas em SZ-4 (Panjnad Barrage) dos sedimentos com concentração variando (0,032-234 ppb). Em suma, todos os outros resíduos investigados foram encontrados abaixo do MCL (nível de concentração máxima) em todos os compartimentos da área de estudo definidos por várias agências como a OMS / FAO-Codex Alimenterious.

Abstract In the developed countries, the use of OCPs (organochlorine pesticides) has been banned. However, in South Asia several of them are still in use. In Pakistan and India a constant addition of OCPs into the atmosphere has been indicated by various researchers. In this study levels of selected organochlorine pesticide residues were assessed in sediment and biota collected from four (4) water reservoirs (3 Barrages & 1 Siphon) on the River Satluj Pakistan, along 231 miles (372 km) of River stretch which was further divided into 12 sampling sites. It was aimed to find out the levels of organochlorine pesticide (OCPs) residues in sediments and from selected fish species (Labeo rohita, Wallagu attu, Cyprinus carpio) of the River Satluj Pakistan. The Organochlorine residues (seven pesticides) present in samples of sediments and biota were investigated through multi residue method, using Gas Chromatograph (GC-ECD).In the current study, the concentration of DDT, was investigated in Wallago attu (0.786-3.987 ppb), Labeo rohita (0.779-4.355 ppb) and Cyprinus carpio (1.234-5.654 ppb). DDE was also found in Cyprinus carpio (1.244-6.322 ppb), Wallag attu (0.877-4.221 ppb) and Labeo rohita (2.112-5.897 ppb). Aldrin was not observed in Labeo rohita and Wallago attu. Currently, lindane and DDE was found predominately high in the sediments of study area at SZ-4 (Panjnad Barrage) ranging (2.238-8.226 ppb) and (4.234-6.876 ppb), respectively. Heaptachlor was found only at SZ-4 (Panjnad Barrage) from the sediments with concentration ranging (0.032-234 ppb). In short all other residues investigated were found below the MCL (maximum concentration level) in all the compartments of the study area set by various agencies like WHO/FAO- Codex Alimenterious.

Abstract The study was aimed to identify different environmental factors (selected organochlorine pesticides) affecting the river water of Satluj. River Sutlej is about 1400 kilometers long and its water is extensively used for irrigation in Punjab, located both in India and Pakistan, which was also a reason of dispute between both countries for its water share. The study area was divided into four zones, Sulemanki Zone, Islam Zone, Mailsi Syphone Zone and Panjnad Zone. Liquid Liquid Extraction (LLE) technique was used for the collected water samples followed by high performance liquid chromatography (HPLC) UV-Visible detector The current finding revealed that aldrin was not detected during summer period in water samples of SZ-1 (Sulemanki Barrage), SZ-2 and SZ-3 (Maisli Siphon) of the study area. Lindane and DDE were found more in the samples of sediments from the study area at SZ-4 ranging from 2.238-8.226 ppb and 4.234-6.876 ppb, respectively. Heaptachlor (in sediments) was found to be0.032-234 ppb only at SZ-4.Endosulfan concentrations in water (winter) at SZ-3 was 0.06 ppb and at SZ-4,it was 0.05 ppb; dieldrin in water (winter) at SZ-4 was 0.0314 ppb and heptachlor was detected at SZ-1 (0.0315 ppb) and SZ-2 (0.0310 ppb) in water during winter season, were reaching to the Maximum Concentrations Limits (MCL), while all other residues investigated were found below the MCLin all the compartments of the study area set by various agencies like WHO/FAO- Codex Alimenterious. Present findings revealed that although the organochlorine pesticides are banned for agricultural use in many countries, including Pakistan, their presence in various samples might be due to illegal use of these pesticides in the study area and its neighboring regions. The overall study area comprises of mainly urban, suburban and agricultural land being the largest cotton growing area of the country. There is a need to take serious steps to minimize water pollution caused by pesticides to achieve a healthy lifestyle.

Resumo O estudo teve como objetivo identificar diferentes fatores ambientais (pesticidas organoclorados selecionados) que afetam a água do rio Satluj. O rio Sutlej tem cerca de 1.400 quilômetros de extensão e sua água é amplamente utilizada para irrigação no Punjab, localizado tanto na Índia quanto no Paquistão, o que também foi motivo de disputa entre os dois países por sua cota de água. A área de estudo foi dividida em quatro zonas, Zona Sulemanki, Zona Islam, Zona Mailsi Syphone e Zona Panjnad. A técnica de extração líquida líquida (LLE) foi usada para as amostras de água coletadas seguida de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) Detector UV-Visível, SZ-2 e SZ-3 (Sifão Maisli) da área de estudo. Lindano e DDE foram mais encontrados nas amostras de sedimentos da área de estudo na SZ-4 variando de 2.238-8.226 ppb e 4.234-6.876 ppb, respectivamente. O heptacloro (em sedimentos) foi encontrado em 0,032-234 ppb apenas em SZ-4. As concentrações de endosulfan na água (inverno) em SZ-3 foram de 0,06 ppb, e em SZ-4, de 0,05 ppb; dieldrin em água (inverno) em SZ-4 foi de 0,0314 ppb e heptacloro foi detectado em SZ-1 (0,0315 ppb) e SZ-2 (0,0310 ppb) em água durante o inverno, atingindo os Limites Máximos de Concentrações (LCM), enquanto todos os demais resíduos investigados foram encontrados abaixo do MCL em todos os compartimentos da área de estudo definidos por diversos órgãos, como OMS/FAO - Codex Alimenterious. Os resultados atuais revelaram que, embora os pesticidas organoclorados sejam proibidos para uso agrícola em muitos países, incluindo o Paquistão, sua presença em várias amostras pode ser devido ao uso ilegal desses pesticidas na área de estudo e regiões vizinhas. A área total de estudo compreende principalmente áreas urbanas, suburbanas e agrícolas, sendo a maior área de cultivo de algodão do país. Há uma necessidade de tomar medidas sérias para minimizar a poluição da água causada por pesticidas para alcançar um estilo de vida saudável.

Resumo A utilização de técnicas modernas de melhoramento para o desenvolvimento de tipos de plantas uniformes e de alto rendimento, em última análise, estreitando a composição genética da maioria das culturas. A composição genética restrita dessas plantações tornou-as vulneráveis a doenças e epidemias de insetos. Para uma produção agrícola sustentável, a variabilidade genética dessas culturas deve ser ampliada contra vários estresses bióticos e abióticos. Uma das maneiras de ampliar a configuração genética dessas culturas é identificar novas fontes adicionais de resistência durável. A esse respeito, os parentes selvagens das culturas estão fornecendo fontes valiosas de diversidade alélica para vários componentes de qualidade e tolerância ao estresse abiótico e biótico. Para incorporar a nova variabilidade da ampla técnica de hibridização de parente selvagem tornou-se um método de reprodução promissor. Para esse efeito, trigo-Th. As linhas anfiploides, de adição e translocação de bessarabicum foram selecionadas em condições de campo e de casa de tela para obter novas fontes de ferrugem amarela e resistência ao bunt de Karnal. A triagem de ferrugem em faixas em condições de campo revelou as linhas de adição 4JJ e 6JJ como resistentes a moderadamente resistentes, enquanto as linhas de adição 3JJ, 5JJ, 7JJ e as linhas de translocação Tr-3, Tr-6 como estoque genético de trigo-Thinopyrum bessarabicum moderadamente resistente. A triagem Karnal bunt descreveu as linhas de adição 5JJ e 4JJ como estoque genético altamente resistente. Esses estoques genéticos podem ser usados para introgressão da nova ferrugem e resistência ao bunt de Karnal do pool genético terciário em origens de trigo suscetíveis.

Abstract Utilization of modern breeding techniques for developing high yielding and uniform plant types ultimately narrowing the genetic makeup of most crops. Narrowed genetic makeup of these crops has made them vulnerable towards disease and insect epidemics. For sustainable crop production, genetic variability of these crops must be broadened against various biotic and abiotic stresses. One of the ways to widen genetic configuration of these crops is to identify novel additional sources of durable resistance. In this regard crops wild relatives are providing valuable sources of allelic diversity towards various biotic, abiotic stress tolerance and quality components. For incorporating novel variability from wild relative’s wide hybridization technique has become a promising breeding method. For this purpose, wheat-Th. bessarabicum amphiploid, addition and translocation lines have been screened in field and screen house conditions to get novel sources of yellow rust and Karnal bunt resistant. Stripe rust screening under field conditions has revealed addition lines 4JJ and 6JJ as resistant to moderately resistant while addition lines 3JJ, 5JJ, 7JJ and translocation lines Tr-3, Tr-6 as moderately resistant wheat-Thinopyrum-bessarabicum genetic stock. Karnal bunt screening depicted addition lines 5JJ and 4JJ as highly resistant genetic stock. These genetic stocks may be used to introgression novel stripe rust and Karnal bunt resistance from the tertiary gene pool into susceptible wheat backgrounds.

Resumo A quitina e seus produtos derivados têm imenso valor econômico devido ao seu papel vital em várias atividades biológicas, bem como em aplicações biomédicas e industriais. Insetos, microrganismos e crustáceos são o principal suprimento de quitina, mas a casca dos crustáceos como camarão, krill, lagosta e caranguejo são as principais fontes comerciais. O conteúdo de quitina de um indivíduo varia dependendo das estruturas que possuem o polímero e da espécie. Neste estudo, as cascas de caranguejos comestíveis (Callinectes sapidus) foram desmineralizadas e desproteinizadas, resultando em 13,8% (peso seco) de recuperação de quitina a partir de resíduos de quitina. As análises de FTIR e XRD do bruto experimental, bem como das quitinas purificadas, revelaram que ambas eram muito comparáveis aos controles adquiridos comercialmente. O pré-tratamento com ácido cedeu 54 g de quitina coloidal que resultou em 1.080% da quitina bruta. A quitina coloidal foi analisada para isolamento de 85 isolados bacterianos quitinolíticos de diferentes fontes. A zona de eliminação foi exibida pelos 35 isolados (41,17%) que sucederam seu crescimento a pH 7 em meio de ágar de quitina coloidal. A atividade quitinolítica máxima, ou seja, 301,55 U / ml, foi exibida pelo isolado JF70 quando cultivado em quitina extraída contendo carbono e nitrogênio. O estudo mostrou que resíduos de caranguejos azuis podem ser utilizados para extração de quitina e isolamento de bactérias quitinolíticas que podem ser usadas para degradar resíduos de quitina, resolver a poluição ambiental e também para fins industriais.

Abstract Chitin and its derived products have immense economic value due to their vital role in various biological activities as well as biomedical and industrial application. Insects, microorganism and crustaceans are the main supply of chitin but the crustaceans shell like shrimp, krill, lobsters and crabs are the main commercial sources. Chitin content of an individual varies depending on the structures possessing the polymer and the species. In this study edible crabs’ shells (Callinectes sapidus) were demineralized and deproteinized resulting in 13.8% (dry weight) chitin recovery from chitin wastes. FTIR and XRD analyses of the experimental crude as well as purified chitins revealed that both were much comparable to the commercially purchased controls. The acid pretreatment ceded 54g of colloidal chitin that resulted in 1080% of the crude chitin. The colloidal chitin was exploited for isolation of eighty five chitinolytic bacterial isolates from different sources. Zone of clearance was displayed by the thirty five isolates (41.17%) succeeding their growth at pH 7 on colloidal chitin agar medium. Maximum chitinolytic activity i.e. 301.55 U/ml was exhibited by isolate JF70 when cultivated in extracted chitin containing both carbon and nitrogen. The study showed wastes of blue crabs can be utilized for extraction of chitin and isolation of chitinolytic bacteria that can be used to degrade chitin waste, resolve environmental pollution as well as industrial purpose.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O Plasmodium vivax é o parasita da malária humana mais comum nos países asiáticos, incluindo o Paquistão. O presente estudo foi desenhado para explorar a diversidade genética de genótipos de Plasmodium vivax baseados nos genes Pvmsp-3α e Pvmsp-3β, usando marcadores de ensaios alélicos nested PCR e RFLP de isolados de campo no distrito de Mardan, Paquistão. Amostras de sangue de 200 pacientes com malária por P. vivax foram coletadas após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido. A diversidade genética em produtos de PCR nested foi determinada por polimorfismo de fragmento de restrição (RFLP) utilizando as enzimas de restrição Alu1 e PstI para a digestão dos produtos dos genes alfa e beta, respectivamente. Para análise da diversidade genética das variantes subalélicas dos genes Pvmsp3α e Pvmsp3β, o teste Qui-quadrado foi realizado utilizando o software de programação Minitab 18. O valor P = 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Para os genes Pvmsp-3α, após eletroforese em gel de produtos digeridos, quatro genótipos distintos foram obtidos de um total de 50 amostras; tipo A: 35 (70%) (1,5-2,0 kb), 12 do tipo B (24%) (1,5-1,7 kb), 2 do tipo C (4%) (0,5-1,5) e um para o tipo D (2%) (0,5-0,65 kb), que podem ser caracterizados em nove padrões alélicos (A1-A4, B1-B3, C1, D), em que A3 permaneceu como o mais predominante. Para Pvmsp-3βgenes, três genótipos distintos foram obtidos a partir de 50 amostras; 40 (80%) do tipo A (1,5-2,5 kb), 9 (18%) do tipo B (1,0-1,5 kb) e 1 (2%) do tipo C (0,65 kb), que podem ser caracterizados em seis padrões alélicos (A1-A3, B1-B2 e C1). Os mais dominantes no tipo A foram o alelo A1, observados em 46%, enquanto, no tipo B, os mais dominantes foram B1 (10%). Este estudo é o primeiro relato de epidemiologia molecular e variação genética em Pvmsp-3α. Os genes Pvmsp-3β de isolados de P. vivax utilizando PCR/RFLP do Distrito Mardan mostraram um nível notável de diversidade genética nos genes estudados de parasitas circulantes na área de estudo. Os resultados desse estudo contribuirão em estudos futuros sobre a estrutura genética do parasita e o desenvolvimento de vacinas contra a malária.

Abstract Plasmodium vivax is the most common human malaria parasite in Asian countries including Pakistan. Present study was designed to explore the genetic diversity of plasmodium vivax genotypes based on Pvmsp-3α and Pvmsp-3βgenes using allelic specific nested PCR and RFLP assays markers from field isolates in district Mardan, Pakistan. Blood samples of 200 P. vivax malarial patients were collected after taking their written informed consent. Genetic diversity in nested PCR products was determined by Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) utilizing Alu1 and PstI restriction enzymes for alpha and beta gene products digestion, respectively. For analysis the genetic diversity of the sub allelic variants of Pvmsp3α and Pvmsp3β genes, Chi-Square test was performed by utilizing Minitab programming software 18. The P value 0.05 was considered as statistically significant. For Pvmsp-3α genes after gel electrophoresis of digested products, four distinct genotypes were obtained from total of 50 samples; type A: 35 (70%) (1.5-2.0 kb), 12 of type B (24%) (1.5-1.7 kb), 2 of type C (4%) (0.5-1.5) and one for type D (2%) (0.5-0.65 kb) which could be characterized into 9 allelic pattern (A1-A4, B1-B3, C1, D), in which A3 remained the most predominant. For Pvmsp-3βgenes, three distinct genotypes were obtained from 50 samples; 40(80%) of type A (1.5-2.5 kb), 9 (18%) of type B (1.0-1.5kb) and 1(2%) of type C (0.65 kb) which could be characterized into 6 allelic patterns (A1-A3, B1-B2, and C1). Most dominant one in Type A was A1 alleles which were noted (46%), while in Type B, the most dominant were B1 (10%).This study is the first ever report of molecular epidemiology and genetic variation in Pvmsp-3α and Pvmsp-3β genes of P. vivax isolates by using PCR/RFLP from District Mardan and showed a remarkable level of genetic diversity in the studied genes of circulating parasites in the study area. The results of this study will contribute in future studies about the genetic structure of parasite and vaccine development against the malaria.

RESUMO Agentes infecciosos causam doenças graves em humanos em todo o mundo, e são responsáveis pelo alto índice de morbimortalidade. A prevalência e a epidemiologia das doenças infecciosas no hospital que atendeu pacientes encaminhados pelos médicos por meio dos achados iniciais e seus fatores de risco associados foram estudadas em Peshawar. Os dados de 174 pacientes infectados foram coletados durante o período de 2015 a 2017 oriundos de dois laboratórios clínicos de Tehsil Matta Swat. O formulário de consentimento informado foi obtido antes da coleta de sangue. Após a obtenção do consentimento informado, foram coletadas amostras de sangue e foi realizado o teste ICT e, em seguida, os casos ICT positivos foram confirmados por PCR. Um total de 174 amostras ICT positivas [106 homens e 68 mulheres] foi incluído neste estudo. A idade considerada foi de 10 a 72 anos. Das 174 tiras de ICT positivas, 99 casos [63 homens, 36 mulheres] foram confirmados por PCR. A taxa de prevalência foi de 56,89%. A injeção IV / IM foi registrada em 100% dos indivíduos. A visita à barbearia foi relatada em (58%) dos indivíduos, os números de casados foram (81,0%), e a operação cirúrgica foi relatada em (44,8%), o compartilhamento de escova de dente foi observado em (29,9%), o piercing foi relatado em (39,7%), antecedentes familiares foram relatados em (26,4%), tratamento odontológico em (21,8%), icterícia (13,2%) e tatuagem em (1,7%). Transfusão de sangue, operações cirúrgicas, icterícia, histórico familiar e tratamento odontológico foram fatores de risco significativos para adquirir infecção por Vírus da Hepatite C (VHC). Concluiu-se que a implementação adequada de medidas de precaução deve ser necessária para controlar a propagação do VHC em um futuro próximo.

ABSTRACT Infectious agents cause serious diseases in humans worldwide and are responsible for the high rate of morbidity and mortality. The prevalence and epidemiology of infectious disease (HCV) in the hospital visited patients referred by the physicians through the initial findings and their associated risk factors were studied in Swat. The data of 174 infected patients were collected during the period of 2015 to 2017 from two clinical laboratories of Tehsil Matta Swat. Inform consent form was taken before blood collection. After taking informed consent blood samples were collected and ICT test was performed and then ICT positive cases were conform through PCR. A total of 174 ICT positive samples [106 male and 68 females] were included in this study. Age was considered from 10 to 72 years. Of the 174 ICT strip positive, 99 [63 males, 36 females] were confirmed through PCR. The prevalence rate was recorded 56.89%. I.V/I.M injection was recorded in 100% of the individuals. Visits to the barber shop was reported in (58%) of the individuals, married individuals were (81.0), surgical operation was reported in (44.8%), sharing toothbrush was observed in (29.9%), piercing was reported in (39.7%), family history was reported in (26.4%), dental treatment was observed in (21.8%), jaundice were (13.2%) and tattooing was (1.7%). Blood transfusion, surgical operations, Jaundice, family history and dental treatment were found significant risk factors for acquiring HCV infection. It was concluded that proper implementation of precautionary measures should be needed to control the spread of HCV in far near future.

Resumo A presente pesquisa foi realizada para explorar a fauna de aranhas do vale Buner, em um estudo taxonômico realizado de fevereiro de 2018 a janeiro de 2019. Para esse fim, foram coletadas amostras, quatro vezes por mês, a partir de 4 subdistritos: Daggar, Gagra, Mandan e Totalai. Foram utilizados dois métodos, coleta manual e rede de varredura, para a obtenção das amostras. Durante o dia e a noite, foram pesquisados três habitats: área árida, área agrícola e área de construção. Foram coletadas 534 amostras de aranha em quatro locais de amostragem, sendo que 379 pertenciam à família Araneidae. Após a confirmação, as espécies identificadas pertenciam a 8 gêneros (Neoscona, Argiope, Cyclosa, Araneus, Cyrtophora, Larinia, Erivoxia e Poltys) e a 19 espécies (18 delas foram identificados em seu nível de espécie, enquanto uma única foi identificada em seu nível genérico). O gênero Neoscona foi dominante (26,31%), com 5 espécies, seguido pelos gêneros Argiope (21,05%), com 4 espécies, Cyclosa (15,78%), com 3 espécies, e Cyrtophora e Araneus (10,52%), com 2 espécies. Poltys e Larinia (5,26%) são os gêneros mais raros, representando a mesma espécie. A análise estatística mostrou que a riqueza de espécies (D) foi de 5,77, o índice de Simpson (1-D) foi de 0,87 e o índice de Shannon (H) foi de 2,33. A diversidade de aranhas foi distribuída uniformemente, e o valor calculado da uniformidade foi H / InS = 0,5408. Também existem poucas espécies atípicas, e o alfa de Fisher (Fisher α) estimou o valor de 4,42. Já Chao-1 estimou 22 espécies.

Abstract The present research was carried out to explore the spider fauna of Buner valley with taxonomic study from February 2018 to January 2019. For this purpose samples were collected, four times at each month from 4 tehsils: Daggar, Gagra, Mandan and Totalai. Two methods were used, hand picking and sweep net for collection of samples. During day and night, three habitats, arid area, agriculture land and building area were search for collection. A total of 534 samples of spider were collected from four sampling sites, in which 379 were belonging to family Araniedae. After confirmation, the identified species were belonging to 8 genera (Neoscona, Argiope, Cyclosa, Araneus, Cyrtophora, Larinia, Erivoxia and Poltys) and 19 species. 18 of them were identified to specie level while a single specie to its generic level. The genus Neoscona was the dominant genus 26.31% having 5 species while the genus Argiope 21.05% is the second dominant having 4 species followed by Cyclosa 15.78% having 3 species followed by Cyrtophora and Araneus 10.52% having two species both. The Poltys and Larinia 5.26% are the rarest genera represent single-single specie both. Statistical analysis show that specie richness (D) = 5.77, Simpson index (1-D) = 0.87, Shannon index (H) = 2.33. Diversity of spiders was evenly distributed and calculated Evenness value was H/InS = 0.5408. There is also few atypical species and Fisher alpha estimate high value (Fisher α) = 4.42. Chao-1 estimated we have reported 22 species.

Resumo Para o bom crescimento dos peixes, é necessário alimentá-los com uma alimentação adequada e balanceada. Um estudo foi realizado para descobrir o efeito de diferentes dietas à base de proteínas em alevinos de Tor putitora (mahseer). Foi preparado um alimento com níveis de proteína dietética de 35%, 40%, 45% e 50%. O efeito de diferentes alimentos à base de proteína no ganho de peso, taxa de crescimento padrão (SGR), taxa de conversão alimentar (FCR), ganho de peso percentual, eficiência de conversão alimentar (FCE) e taxa de eficiência proteica (PER) foi estudado. Foi observado um aumento na taxa de crescimento com um aumento na concentração de proteína de até 45%. Os alevinos alimentados com dieta de 45% de proteína apresentaram o maior crescimento, seguidos de 50%, 40% e 35%. O valor de SGR foi maior para dieta com 45% de proteína (8,56), seguido de 50% e 40%, enquanto os menores valores foram observados para ração com 35% de proteína (1,57). A mesma tendência foi observada para FCE. Os maiores valores de PER foram observados em peixes alimentados com 45% de ração à base de proteína (0,65), seguido por 50% (0,56), 40% (0,38) e 35% (0,17). A taxa de conversão alimentar foi menor para a dieta com 45% de proteína (3,41), enquanto a maior para a dieta com 35% de proteína (16,85). Concluiu-se que a dieta à base de proteína de 45% foi a melhor formulação alimentar para maior produção de Tor putitora. No entanto, a pesquisa sobre a mesma porcentagem de dieta proteica é recomendada para animais de um ano.

Abstract For the proper growth of fish, it is necessary to feed the fish with a proper and balanced diet. A study was conducted to find out the effect of different protein-based diets on fingerlings of Tor putitora (mahseer). A feed with dietary protein levels of 35%, 40%, 45%, and 50% were prepared. The effect of different protein-based feed on weight gain, standard growth rate (SGR), food conversion ratio (FCR), percent weight gain, food conversion efficiency (FCE), and protein efficiency ratio (PER) was studied. An increase was observed in the growth rate with an increase in protein concentration up to 45%. The fingerlings fed a 45% protein diet shown the highest growth, followed by 50%, 40%, and 35%. The SGR value was greatest for 45% protein diet (8.56) followed by 50% and 40%, while the least values were observed for 35% protein feed (1.57). The same trend was observed for FCE. The highest PER values was observed in fishes fed 45% protein-based feed (0.65) followed by 50% (0.56), 40% (0.38) and35% (0.17). The food conversion ratio was lowest for 45% protein diet (3.41), while the greatest for 35% protein feed (16.85). It was concluded that a 45% protein-based diet was the best feed formulation for higher production of Tor putitora. However, research on the same percentage of protein diet is recommended for yearlings.

Resumo O presente estudo teve como objetivo comparar o tamanho do cérebro de mahseer (Tor putitora) em relação ao seu peso corporal e comprimento padrão, para investigar o impacto potencial do ambiente de criação no desenvolvimento do cérebro em peixes. O peso do cérebro e três de suas subdivisões — cerebelo (CB), tectum óptico (OT) e telencéfalo (TC) — foram medidos para peixes selvagens e criados em incubadoras. Os dados foram analisados usando análise múltipla de covariância (MANCOVA), análise de covariância (ANCOVA) e análise de função discriminante (DFA). Descobrimos que os peixes criados em condições de incubação apresentam menor tamanho do cérebro em relação ao peso corporal quando comparados aos selvagens. Uma diferença significativa (p <0,5) foi observada no comprimento do CB e OT em relação ao comprimento corporal padrão, enquanto nenhuma diferença significativa foi encontrada no CT dos peixes de ambas as origens. Os resultados do estudo atual destacam uma suposição lógica de que a deficiência neural afeta o comportamento dos peixes. É por isso que os peixes criados em cativeiro mostram uma resposta mal adaptativa e enfrentam declínio de aptidão quando liberados no ambiente natural para o aprimoramento do estoque selvagem. O estudo atual concluiu que os peixes criados em incubadoras exibem variações na morfologia cerebral bruta em comparação com suas contrapartes selvagens.

Abstract The present study was aimed at comparing the brain size of mahseer (Tor putitora) in relation to their body weight and standard length, to investigate the potential impact of rearing environment on brain development in fish. The weight of the brain and three of its subdivisions cerebellum (CB), optic tectum (OT), and telencephalon (TC) were measured for both wild and hatchery-reared fish. The data was analysed using multiple analysis of covariance (MANCOVA), analysis of covariance (ANCOVA), and discriminate function analysis (DFA). We found the fish reared under hatchery conditions exhibit smaller brain size related to body weight, when compared to the wild ones. A significant (p<0.5) difference was observed in the length of CB and OT concerning the standard body length while no significant difference was found in TC of the fish from both the origins. The results of the current study highlight a logical assumption that neural deficiency affects the behaviour of fish, that’s why the captive-reared fish show maladaptive response and face fitness decline when released to the natural environment for wild stock enhancement. The current study concluded that hatchery-reared fish exhibit variations in gross brain morphology as compared to their wild counterpart.

Resumo A truta das neves (Schizothorax plagiostomus) é um peixe de água doce economicamente importante, encontrado principalmente nas áreas ao norte de reservatórios de água do Paquistão. O presente estudo foi realizado em River Swat para analisar a bioacumulação de metais pesados (Pb, Cr, Ni e Zn) em tecidos de Schizothorax plagiostomus. Os tecidos foram extraídos e dissolvidos em ácido perclórico (HClO4) e ácido nítrico (HNO3) com placa de aquecimento. Os metais pesados zinco (Zn), chumbo (Pb), cromo (Cr) e níquel (Ni) foram determinados usando espectrofotômetro de absorção atômica Perkin Elmer 2380. Os resultados mostram grande variação no conteúdo do metal relacionado ao tipo de tecido e locais de amostragem. Uma alta concentração de bioacumulação foi relatada em Charbagh, enquanto a mais baixa, em Odigram: Charbagh > Landakai > Odigram. Da mesma forma, Cr foi o metal pesado mais acumulado, seguido por Pb, Ni e Zn.

Abstract Snow trout (Schizothorax plagiostomus) is an economically important freshwater fish, mostly found in northern areas of water reservoirs of Pakistan. The current study was conducted in River Swat to analyze the bioaccumulation of heavy metals (Pb, Cr, Ni, and Zn) in tissues of Schizothorax plagiostomus. Tissues were extracted and dissolved in perchloric acid (HClO4) and nitric acid (HNO3) along with hotplate. The heavy metals, zinc (Zn), lead (Pb), chromium (Cr), and Nickel (Ni) were determined using Perkin Elmer 2380 atomic absorption spectrophotometer. Results shows great variation in the content of the metal related to tissue type and sampling sites. A high concentration of bioaccumulation was reported at Charbagh, whereas lowest at Odigram: Charbagh>Landakai>Odigram. In the same way, Cr was the most accumulated heavy metal followed by lead, nickel, and Zinc:

Resumo Extensas pesquisas de campo foram realizadas para explorar a distribuição do morcego de Leisler Nyctalus leisleri (Kuhl, 1819), em uma área selecionada das regiões das FATA, Paquistão. Espécimes do morcego de Leisler Nyctalus leisleri (Kuhl, 1819) (n = 5) foram coletados na Agência Kurram (Shublan) (N33.8229788 E70.1634414), na elevação 1.427 m, e na Agência Khyber (Landi Kotel) (N34.0909899 E71.1457517), na elevação 1.091 m, por dois anos de pesquisa, estendendo-se de maio de 2013 a agosto de 2015. Os comprimentos médios da cabeça, do corpo, do pé traseiro, da orelha e da cauda dos espécimes de Nyctalus leisleri capturados na área de estudo foram de 65,08 ± 1,58 mm, 44,06 ± 0,52 mm, 8,38 ± 0,60 mm, 13,20 ± 0,99 mm e 39,46 ± 1,46 mm, respectivamente. Para análise molecular, foram obtidas e analisadas as sequências do gene COI. A média das divergências intraespecíficas de Nyctalus leisleri foi de 0,04%. As divergências interespecíficas médias de Nyctalus noctula e Nyctalus leisleri foram de 0,2%. A concentração média de cada nucleotídeos foi A = 26,3%, T = 32,8%, G = 15,9% e C = 25%. Os conteúdos médios de A + T foram de 59,2% e de C + G foram de 40,9%. Na árvore filogenética, Nyctalus leisleri e Nyctalus noctula agruparam-se com um valor significativo de suporte de bootstrap.

Abstract Extensive field surveys were carried out to explore the distribution of Leisler’s Bat Nyctalus leisleri (Kuhl, 1819) in selected area of FATA regions, Pakistan. Specimens of Leisler’s Bat Nyctalus leisleri (Kuhl, 1819) (n5) were collected from Kurram Agency (Shublan) (N33.8229788 E70.1634414) at elevation 1427m and Khyber Agency (Landi Kotel) (N34.0909899 E71.1457517) at elevation 1091m for two years survey extending from May 2013 through August 2015. The mean head and body length, hind foot length, ear length and tail length the Nyctalus leisleri specimens captured from the study area was 65.08 ± 1.58 mm, 44.06 ± 0.52 mm, 8.38 ± 0.60 mm, 13.20 ± 0.99 mm and 39.46 ± 1.46 mm, respectively. For molecular analysis the sequences of COI gene were obtained and analyzed. The mean intraspecific divergences of Nyctalus leisleri was 0.04%. The mean interspecific divergences of Nyctalus noctula and Nyctalus leisleri was 0.2%. The mean concentration of each nucleotides was A = (26.3%), T = (32.8%), G = (15.9%) and C = (25.0%). The mean A+T contents were 59.2%and C+G were 40.9%. In the phylogenetic tree Nyctalus leisleri and Nyctalus noctula clustered with significant bootstrap support value.

Resumo A ocorrência contínua de metais pesados é uma das principais causas de poluição ambiental devido aos seus efeitos tóxicos. A contaminação por metais pesados representa um grande risco para todas as formas de vida encontradas no meio ambiente. Em concentrações mínimas, esses metais são altamente reativos e podem se acumular nas cadeias alimentares e na cadeia alimentar, causando grandes perigos às preocupações com a saúde pública. Amostras de solo foram coletadas no esgoto de Paharang, Faisalabad. Bactérias tolerantes ao cádmio foram isoladas da amostra coletada pelo método da placa de ágar. As colônias separadas individuais selecionadas foram avaliadas quanto às suas concentrações inibitórias mínimas contra Cd. A cepa bacteriana isolada GCFSD01 apresentou valores de CIM de 30 mM/L. A colônia bacteriana que apresentou maior resistência contra o Cd foi selecionada para identificação. Após seleção da maior colônia bacteriana resistente ao Cd, coloração de Gram e diferentes testes bioquímicos foram realizados para a caracterização da bactéria isolada. A caracterização molecular do isolado bacteriano GCFSD01 foi realizada por PCR 16S rRNA confirmando a presença de Bacillus cereus. Após a identificação molecular, as condições ótimas de crescimento da cepa bacteriana também foram verificadas. A cepa GCFSD01 apresentou crescimento ótimo em pH 7 e temperatura de 37 °C. Nosso resultado revelou que a cepa de B. cereus GCFSD01 reduziu 61,3% de Cd após 48 horas. A tolerância a múltiplos metais e a redução de Cd por B. cereus indicam seu potencial para uso posterior na descontaminação do solo poluído.

Abstract Continuous occurrence of heavy metals is a major cause of environmental pollution due to its toxic effects. At minimum concentrations, these metals are highly reactive and can gather in the food chains and food web, causing major dangers to public health concerns. Soil samples were collected from Paharang drain, Faisalabad. Cadmium tolerant bacteria were isolated and evaluated for their MIC against Cd. The isolated bacterial strain GCFSD01 showed MIC value upto 30 mM/L. The bacterial strain with the highest resistance against Cd was selected for further study. Molecular characterization of bacterial isolate GCFSD01 was performed by 16S rRNA which confirmed it as Bacillus cereus. Optimum growth conditions of bacterial strain were also evaluated. Strain GCFSD01 showed optimum growth at pH 7 and 37 °C temperature. Our result revealed that B. cereus strain GCFSD01 reduced 61.3% Cd after 48 hrs. Multiple metal tolerance and Cd reduction by B. cereus indicate its potential for further use for decontamination of polluted soil.

Resumo Este estudo foi conduzido para avaliar a poluição da água examinando a fragmentação do DNA em órgãos de peixes selecionados (rim, fígado, brânquias e tecido muscular) de Wallago attu, Sperata sarwari, Vulgaris vulgaris e Labeo rohita coletados de uma conhecida área poluída do rio Chenab, Paquistão e de um local de controle. Os peixes foram capturados usando uma rede branquial e foram divididos em três grupos de pesos diferentes (W1, W2 e W3) para estudar o grau de variação na fragmentação do DNA em relação ao peso corporal. Nos peixes do local poluído, a fragmentação do DNA foi maior nos rins, fígado, brânquias e músculos, em comparação ao controle. Não foi observada fragmentação significativa do DNA em peixes coletados no local de controle. Relação altamente significativa (P <0,01) entre o peso corporal e a fragmentação do DNA foi encontrada nos órgãos dos peixes adquiridos no local contaminado. Verificou-se que a fragmentação do DNA nos órgãos do corpo é afetada pelas concentrações de chumbo, cobre, níquel e cádmio em W. attu, S. sarwari, L. rohita e V. vulgarus colhidos no rio Chenab. A fragmentação do DNA em diferentes espécies de peixes de água doce é, portanto, um biomarcador confiável da poluição da água.

Abstract This study was conducted to assess water pollution by examining DNA fragmentation in selected fish organs (kidney, liver, gills, and muscle tissue) from Wallago attu, Sperata sarwari, Vulgaris vulgaris, and Labeo rohita collected from a known polluted section of the Chenab River, Pakistan, and from a control site. The fish were caught using a gill net and were assigned to three different weight groups (W1, W2, and W3) to study the degree of variation in DNA fragmentation in relation to body weight. In fish from the polluted site, DNA fragmentation was higher in kidney, liver, gills, and muscles, compared to the control. No significant DNA fragmentation was observed in fish collected from the control site. Highly significant (P < 0.01) relationship between body weight and DNA fragmentation was found in the organs of fish procured at the contaminated site. DNA fragmentation in body organs was found to be affected by the concentrations of lead, copper, nickel, and cadmium in W. attu, S. sarwari, L. rohita, and V. vulgarus harvested from Chenab River. DNA fragmentation in different freshwater fish species is therefore a reliable biomarker of water pollution.