Resumen Introducción: La melina (Gmelina arborea), es una especie de gran interés por su madera y propiedades medicinales. En Costa Rica, existen clones genéticamente superiores que se propagan sin el conocimiento de la edad ontogénica y fisiológica de los materiales. Objetivo: Evaluar la relación del contenido de fenoles y ligninas en hojas, peciolos, tallos y raíces de plantas con diferentes edades. Métodos: Los contenidos de fenoles y ligninas totales se determinaron mediante el método colorimétrico de Folin-Ciocalteu y el método de extracción alcalina, respectivamente. Para la investigación se eligieron plantas in vitro “año cero” y árboles de año y medio, cuatro, siete y 20 años. El muestreo se realizó en marzo y abril del 2021. Resultados: Se demostró que todas las partes de la planta analizadas contienen compuestos fenólicos y ligninas, independientemente de su edad. No hubo una correlación positiva entre la edad con el contenido de fenoles y ligninas para ninguna condición de desarrollo, pues los valores más altos no se obtuvieron en los árboles más longevos. Los extractos de hojas de las plantas in vitro y los árboles de siete años mostraron, respectivamente, los contenidos más altos de fenoles y ligninas para todas las condiciones (P < 0.05). Los valores promedio más bajos de compuestos fenólicos para todas las condiciones se obtuvieron en los árboles de cuatro años. Respecto a las ligninas, el contenido más bajo se presentó en las raíces más longevas, aunque la tendencia no se mantuvo para el resto de las partes de la planta. Conclusiones: La investigación muestra los primeros resultados del contenido de compuestos fenólicos y ligninas presentes en diferentes tejidos de una especie forestal de edades diferentes. Por lo tanto, son los primeros valores de referencia acerca del compromiso bioquímico para la síntesis fenólica según la edad y el estado de desarrollo específico de una planta leñosa.

Abstract Introduction: Melina (Gmelina arborea) is a tree species of great interest for its wood and medicinal properties. In Costa Rica, there are genetically superior clones that are propagated without knowledge of the ontogenic and physiological age of the materials. Objective: To evaluate how age influences the content of phenols and lignins in leaves, petioles, stems, and roots of melina plants. Methods: The total phenolic and lignins contents were determined using Folin-Ciocalteu colorimetric method and alkaline extraction method, respectively. Plants of five different ages were chosen for the investigation (in vitro plants “year 0” and trees of a year and a half, four, seven and 20 years). Sampling was done in March and April 2021. Results: All parts of the plant analyzed contain phenolic compounds and lignins, regardless of their age. There was no positive correlation between age and phenol and lignin content for any development condition, since the highest values were not obtained in the oldest trees. Leaf extracts from in vitro plants and seven-year-old trees showed, respectively, the highest phenol and lignin contents for all conditions (P < 0.05). The lowest average values of phenolic compounds for all conditions were obtained in four-year-old trees. Regarding lignins, the lowest content occurred in the oldest roots, although the trend was not maintained for the rest of the plant parts. Conclusions: This study provides the first results of the content of phenolic compounds and lignins present in different tissues of a forest species of different ages. Therefore, they are the first reference values about the biochemical commitment for phenolic synthesis according to the age and the specific developmental stage of a woody plant.

Abstract The Saman tree (Samanea saman) is a native species with a significant and economic importance in Costa Rica due to its high-quality wood and versatile range of uses. It is ability to compete with other reforestation species and suits specific niche markets increses its value. This research aimed to develop a methodology of in vitro culture for cenízaro, as a key tool for breeding and germplasm conservation programs in Costa Rica. Experiments were focused on using greenhouse-reproduced material, both inside and outside of a microtunnel environment. Two disinfectant agents, sodium hypochlorite (NaClO) and mercury chloride (HgCl2), were assessed at varying concentrations and exposure durations. In vitro establishment success rates for material from the microtunnel greenhouse were less than 12.5 %. Conversely, material from outside the microtunnel showed remarkable in vitro establishment rates, surpassing 72.3 %. The most effective disinfection treatment for achieving contamination free shoots involved an incubation in 1 % v/v NaClO for 20 minutes, yielding the highest percentage of contamination-free shoots, corresponding to 85.47 %. As for apex disinfection, employing a 0.2 % (w/v) HgCl2 for 5 minutes proved optimal, resulting in 100 % establishment of explants devoid of contaminants.

Resumen El cenízaro (Samanea saman), es una especie nativa de Costa Rica, de reconocido valor económico por la calidad de la madera y la variedad de usos; estas características le permiten competir con otras especies usadas para reforestación, con el fin de generar productos dirigidos a mercados selectos. El objetivo de esta investigación fue desarrollar una metodología para el establecimiento in vitro de cenízaro como herramienta biotecnológica para un programa de mejoramiento genético y conservación de germoplasma en Costa Rica. El ensayo se estableció a partir de material reproducido en invernadero, tanto en microtúnel como fuera de este. Posteriormente, se evaluaron dos agentes desinfectantes, hipoclorito de sodio (NaClO) y cloruro de mercurio (HgCl2), en diferentes concentraciones y tiempos de exposición. Se obtuvieron porcentajes de establecimiento in vitro inferiores al 12,5 % al emplear material proveniente del invernadero microtúnel; mientras que, el material proveniente fuera del microtúnel, presentó porcentajes de establecimiento in vitro superiores a 72,3 %. La desinfección con hipoclorito de sodio (NaClO) al 1 % v/v durante 20 minutos presentó el mayor porcentaje de nudos libres de contaminación y correspondiente al 85,47 %. Por otro lado, la desinfección de ápices con cloruro de mercurio (HgCl2) al 0,2 % p/v durante 5 minutos, presentó el mayor porcentaje de ápices libres de contaminación (100 %).

ABSTRACT Teak (Tectona grandis L. f.), is a native tree from Southeast Asia considered of great economic value, mainly for its wood. As part of the efforts for the genetic improvement of this specie, protocols for pollen cryopreservation have been developed; however, it is essential to ensure its viability and efficient germination for future crosses of selected material. The objective of the present work was to evaluate the effect of spirostanic analogue of brassinosteroids (Biobras-16®) and a mixture of oligogalacturonides (Pectimorf®) on the in vitro germination, size of pollen and pollen tube length of cryopreserved teak pollen. The experiments consisted of evaluating the germination of pollen with 0, 4 and 8 months of cryopreservation in culture medium without supplements, supplemented with 0.001 and 0.050 Biobras-16® mg L-1 and, Pectimorf® 5 and 10 mg L-1. Germination data were analyzed using a General Linear Model, while pollen tube length and pollen area using analysis of variance (ANOVA) and correlation analysis. It was demonstrated that both bioactive products promote in vitro germination of cryopreserved pollen grains for 4 and 8 months, where Biobras-16® at 0.001 mg L-1 showed results that are more consistent. Pectimorf® stimulated the elongation of the pollen tube, which could favor the fecundation processes.

RESUMEN La teca (Tectona grandis L. f.), es un árbol originario del sureste asiático, considerado de gran valor económico principalmente por su madera. Como parte de los esfuerzos por el mejoramiento genético de esta especie, se han desarrollado protocolos para la crioconservación de polen, sin embargo, es indispensable asegurar la viabilidad y germinación eficiente del mismo para futuros cruzamientos de material seleccionado. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de un análogo espirostánico de brasinoesteriode (Biobras-16®) y una mezcla de oligogalacturónidos (Pectimorf®) sobre la germinación in vitro, tamaño del polen y longitud del tubo polínico de polen de teca crioconservado. Los experimentos consistieron en evaluar la germinación de polen a 0, 4 y 8 meses de crioconservación, en medio de cultivo sin suplementos (M1), suplementado con 0,001 y 0,050 mg L-1de Biobras-16® y 5 y 10 mg L-1 de Pectimorf®. Los datos de germinación fueron analizados mediante un Modelo Lineal General, mientras que la longitud del tubo polínico y el área del polen mediante análisis de varianza (ANOVA) y análisis de correlación. Se demostró que ambos productos bioactivos favorecieron la germinación in vitro de los granos de polen crioconservados durante 4 y 8 meses, donde Biobras-16® a 0,001 mg L-1 mostró resultados más consistentes. Pectimorf® estimuló la elongación del tubo polínico, lo cual podría favorecer los procesos de fecundación.

Resumen La caoba es la especie forestal nativa económicamente más importante en Latinoamérica, se encuentra en el Apéndice II de CITES, debido a que registra un elevado índice de explotación, producto de la alta extracción sufrida a lo largo de décadas. El objetivo de esta investigación fue desarrollar un protocolo para el establecimiento in vitro de 2 clones (33 y 80), pertenecientes a un programa de mejoramiento genético forestal. Se lograron establecer segmentos nodales de los clones 83 y 33 en condiciones in vitro, al emplear hipoclorito de calcio al 15 % con un tiempo de exposición de 20 minutos. El mejor medio de cultivo para el establecimiento in vitro de los nudos fue el MS complementado con 3 % de sacarosa, 0.016 g/l de agrimicin y benlate, obteniéndose un 55 % de nudos establecidos a los 16 días de cultivo. En ambos clones se evaluó el efecto de 5 concentraciones de 6-Bencilaminopurina (6-BAP) (0.0, 0.44, 0.88, 1.33, 1.77 y 2.21 μM L-1) sobre la brotación. Se obtuvo en promedio un brote por explante en los 5 tratamientos evaluados. No se observaron diferencias estadísticas significativas.

Abstract Mahogany is the most economically important native forest species in Latin America, it is found in Appendix II of CITES, because it has a high exploitation rate, due to high extraction rates suffered over decades. The objective of this research was to develop a protocol for the in vitro establishment of two clones (33 and 80), belonging to a forest genetic improvement program. Nodal segments of clones 83 and 33 were established under in vitro conditions using 15 % calcium hypochlorite with an exposure time of 20 minutes. The best culture medium for in vitro establishment of the nodes was MS supplemented with 3 % sucrose, 0.016 g / l of agrimicin and benlate, obtaining 55 % of established nodes at 16 days of culture. In both clones, the effect of five concentrations of 6-Benzylaminopurine (6-BAP) (0.0, 0.44, 0.88, 1.33, 1.77, and 2.21 μM L-1) was evaluated sprouting. On average, one outbreak per explant was obtained in the five 1treatments evaluated. No significant statistical differences were observed.

El objetivo de esta investigación fue lograr el establecimiento in vitro de la especie Terminalia amazonia y Vochysia allenii debido a la dificultad de propagarlas sexual y asexualmente con técnicas convencionales. Se logró establecer segmentos nodales de ambas especies en condiciones in vitro empleando el HgCl2 0,1 % con un tiempo de exposición de 5 minutos. El mejor medio de cultivo para nudos fue el WPM 100 % de sales para T.amazonia y para V. allenii fue el WPM 50 % de sales. Después de 28 días de cultivo se obtuvo un 42 % de nudos establecidos para T. amazonia y 10% para V. allenii. En ambas especies se evaluó el efecto sobre la brotación de cinco concentraciones de 6-bencilaminopurina (6-BAP) (0,0; 2.22, 4.44, 6.66, 8.88 μM L-1) y cinco de tidiazuron (TDZ) (0,0; 0.22, 0.45, 0.68, 0.90 μM L-1). Se obtuvó en promedio un brote por explante en los cinco tratamientos de BAP y TDZ utilizados.

The objective of this research was to achieve the in vitro establishment of the species Terminalia amazonia and Vochysia allenii due to the difficulty propagate sexually and asexually with conventional techniques. It was possible to establish the nodal segments of both species in in vitro conditions using 0.1 % HgCl2 with an exposure time of 5 minutes. The best nodal culture medium was 100 % WPM salts in T. amazonia and V. allenii was WPM 50% salts. After 28 days of culture 42 % of nodal segments to T. amazonia and V. allenii 10% was obtained. In both species, the effect on sprouting of five concentrations of 6-benzylaminopurine (6-BAP) (0.0, 2.22, 4.44, 6.66, 8.88 μM L-1) and five thidiazuron (TDZ) (0.0, 0.22, 0.45, 0.68, 0.90 μM L-1) was evaluated. Outbreak was scored on average per explant in the five treatments of BAP and TDZ used.

In this work, it was achieved to stablish in vitro shoots of Cryptomeria japonica from 20 year old trees. The shoots were disinfected and treated with six different concentrations of kinetin and belciladenine in order to induce their development and budding. It was evaluated the effect of quality and lighting intensity on these using for this orange light at 20 µEs-1 m -2 and white light at 30 µEs-1 m-2 . For shoots rooting it was used different concentrations of NAA (naftalen acetic acid) and IBA (indolbutiric acid) alone or combined. BA and KIN induced the bud formation in Cryptomeria but it was observed the best budding with BA at 9.1µM. White light and orange light promoved the growth of explants as well as the growth of new buds but it was higher with orange light. The bud rooting was observed but it was not posible to find the best auxin concentration for rooting because of the plentiful callus formation on the base of explants and the root formation was very sporadic. The rooted shoots were placed on a substrate for their acclimatation in greenhouse conditions