RESUMO: Técnicas colorimétricas, como sais de tetrazólio e resazurina, são indicadores de viabilidade (atividade respiratória) de fungos, bactérias e sementes, amplamente utilizados em diferentes áreas de pesquisa. O objetivo deste estudo foi desenvolver um protocolo com dois métodos, qualitativo e quantitativo, de triagem para detecção da viabilidade de Fusarium semitectum em sementes de soja, utilizando 2,3,5-trifenil cloreto de tetrazólio (TZ). O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado (DIC) em arranjo fatorial triplo (tempos de incubação, concentrações de TZ e diluições seriadas de inóculo) com níveis de 3, 5 e 5 de cada fator, respectivamente, com 3 repetições em ambos os métodos. Para o método qualitativo, a sensibilidade foi mais satisfatória no tempo de 72h, na concentração mínima de TZ de 0,1 mg mL-1 e com a concentração de inóculo 10⁻¹. No método quantitativo (espectrofotometria) não foi possível quantificar as Unidades Formadoras de Colônias (UFC) em placas, sendo a Densidade Óptica (DO) interferida pela estrutura do micélio no microtubo, embora seja uma metodologia reprodutível está condicionada pela morfologia do fungo. O presente estudo permitiu fácil visualização das estruturas de F. semitectum em sementes de soja, a partir do TZ, porém não foi possível quantificar a densidade de inóculo devido a baixa produção de esporos precisando de maiores ajustes na metodologia. RESUMO colorimétricas resazurina atividade respiratória fungos pesquisa métodos soja 2,3,5trifenil 235trifenil trifenil 2,3,5 2 TZ. . (TZ) DIC (DIC tempos incubação fator respectivamente 72h h 01 0 1 0, mL1 mL mL- 10¹ 10 ¹ 10⁻¹ espectrofotometria (espectrofotometria UFC (UFC placas DO (DO microtubo fungo F 5trifenil 235 2,3, (TZ 10⁻ 23 2,3 2,
ABSTRACT: Colorimetric techniques, such as tetrazolium salts and resazurin, are indicators of viability (respiratory activity) of fungi, bacteria, and seeds widely used in different areas of research. The objective of this study was to develop a protocol with two screening methods, qualitative and quantitative, to detect the viability of Fusarium semitectum in soybean seeds using 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride (TZ). The experimental design was completely randomized in a triple factorial arrangement (incubation times, TZ concentrations, and inoculum serial dilutions) with levels of 3, 5, and 5 of each factor, respectively, and 3 replications in both methods. For the qualitative method, sensitivity was more satisfactory at 72 hours, at the minimum TZ concentration of 0.1 mg mL-1, and with the inoculum concentration of 10-¹. In the quantitative method (spectrophotometry), it was not possible to quantify the colony forming units (CFU) on plates, with the Optical Density (OD) being interfered with by structure of the mecelium in the microtube. Although it is a reproducible methodology, it is conditioned by fungal morphology. The present study allowed easy visualization of the structures of F. semitectum in soybean seeds, based on the TZ. However, it was not possible to quantify the inoculum density, due to low spore production, requiring greater adjustments in the methodology. ABSTRACT techniques resazurin respiratory activity fungi bacteria research methods 2,3,5triphenyl 235triphenyl triphenyl 2,3,5 2 . (TZ) incubation times concentrations dilutions factor respectively 7 hours 01 0 1 0. mL1, mL1 mL 1, mL-1 10¹. 10¹ 10 ¹. ¹ 10-¹ spectrophotometry, spectrophotometry , (spectrophotometry) CFU (CFU plates OD (OD microtube methodology morphology F However density production 5triphenyl 235 2,3, (TZ mL- 10- (spectrophotometry 23 2,3 2,