O sequenciamento da região ITS2 (espaço interno transcrito) do rDNA foi utilizado para identificar duas espécies próximas de Trichogramma: T. rojasi e T. lasallei, esta última recentemente constatada no Brasil. O DNA das amostras foi extraído utilizando-se Chelex 100. O produto de PCR foi ligado ao vetor pGEM-T ® e ambos foram então acondicionados em placas de Petri para o crescimento de colônias brancas, o que constata a ligação correta entre o vetor e o DNA. A partir dessas colônias, uma pequena quantidade (10µl) foi purificada utilizando material específico e seqüenciada. As seqüências foram alinhadas pelo programa ESEE 3.0. Os primers específicos utilizados para a amplificação do rDNA da região ITS2 das espécies de Trichogramma estudadas foram eficientes. O sequenciamento das duas espécies diferiu em comprimento e posição dos nucleotídeos, mostrando que são distintas. Os resultados mostraram que esta é uma boa técnica para identificação de espécies crípticas de Trichogramma, difíceis de identificar quando são utilizados apenas caracteres morfológicos.

The sequence of the ITS2 (internally transcribed spacer 2) region of the rDNA was used to identify two closely related Trichogramma species: T. rojasi and T. lasallei, the second species recently reported in Brazil. The DNA of the samples was extracted using Chelex 100. The PCR product was linked to a pGEM-T® vector and both were then placed into Petri dishes to grow white colonies, which demonstrate the correct ligation between the vector and the DNA. From these colonies, 10µl were purified and sequenced using a special kit, and the sequences aligned using the ESEE 3.0 software. Specific primers were efficient to amplify the ITS2 rDNA region of the Brazilian Trichogramma. The sequence of each species differed in length and in nucleotide position, showing that they are distinct. Thus, the results show that this technique is a good tool to identify Trichogramma cryptic species, otherwise difficult to identify when using only morphological characters.

Identificou-se pela primeira vez no Brasil a presença de Wolbachia em Trichogramma através de um PCR com o primer específico wsp. A população de Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner foi coletada na Embrapa Milho e Sorgo, em ovos de Helicoverpa zea Boddie (Lepidoptera: Noctuidae). Os resultados mostraram através da amplificação de bandas de DNA, a confirmação da presença de Wolbachia na população em estudo. A presença dessa a-proteobactéria irá contribuir para a escolha da população correta a ser utilizada em programas de controle biológico aplicado contra lepidópteros pragas.

For the first time in Brazil, Wolbachia was detected in Trichogramma using PCR with the wsp specific primer. A Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner population was colected in Helicoverpa zea Boddie (Lepidoptera: Noctuidae) eggs at Embrapa/Sete Lagoas. The results showed that the amplification of DNA bands, confirms the presence of Wolbachia on the analysed population. The presence of this a-proteobacteria will contribute for the correct choice on which population will be used for applied biological control programs against lepidopterous pests.

Utilizando-se o sequenciamento da região ITS2 do DNA ribossomal juntamente com algumas enzimas de restrição, pôde-se construir uma chave molecular simples e precisa de algumas espécies brasileiras de Trichogramma. Esta chave é fácil de ser elaborada e resultados rápidos são obtidos na identificação desse pequeno parasitóide (0,25 mm). Usando-se essa metodologia, pode-se também verificar possíveis contaminações em criações de laboratório.

Using the ITS2 sequences of the ribosomal DNA together with some restriction enzymes, a simple and precise molecular key to some Brazilian species of Trichogramma was created. This key is very easy to make and quick results can be obtained on the identification of this minute parasitoid (0.25 mm). The methodology presented is easily implemented and can be used to detect possible contaminations under laboratory rearings.

Avaliou-se em laboratório (25ºC, 70% UR e fotofase de 12 horas) a resposta de diferentes densidades de Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner ao aumento da densidade de ovos do hospedeiro Helicoverpa zea (Boddie). Uma, três, cinco e 10 fêmeas do parasitóide, receberam, por um período de 24 h, 15, 30, 60, 90, 120 e 150 ovos do hospedeiro. Os resultados indicaram uma interferência mútua tanto do hospedeiro quanto do parasitóide, em tratamentos com três ou mais fêmeas confinadas nos tubos, e em baixas densidades de ovos do hospedeiro, resultando num menor número de ovos parasitados por fêmea. Numa densidade de 120 ovos do hospedeiro ou acima (no mínimo 12 ovos disponíveis/fêmea) não ocorreu interferência mútua. Respostas funcionais quadráticas foram verificadas para o número total de ovos parasitados com o aumento da densidade de ovos, para uma densidade de cinco ou mais parasitóides por recipiente.

Laboratory (25ºC, 70% UR and photoperiod of 12 hours) studies were conducted to evaluate the response of Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner female to the increase of its host [Helicoverpa zea (Boddie)] egg densities. One, three, five and 10 females received, 15, 30, 60, 90, 120 e 150 eggs, for a period of 24 h. Results indicated mutual interference of both parasitoid and host, when three or more females were confined inside the vials in low densities of host eggs resulting in a lower number of parasitized eggs/female. With at least 120 host eggs (minimum of 12 eggs available/female) no mutual interference was observed. Quadratic responses were verified to the total number of parasitized eggs with the increase of egg density, with five or more parasitoids/vial. Percent parasitism did not increase with the increment in egg density.

Avaliou-se o parasitismo de ovos de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) por Trichogramma spp., em três genótipos de milho (Zea mays L.): BR 205 (endosperma amarelo normal), BR 451 (endosperma branco, com alta qualidade protéica e BR 400 (endosperma amarelo e doce). Os genótipos foram semeados de duas maneiras: plantio dos três genótipos ao mesmo tempo (1º ensaio) e plantio escalonado com intervalo de uma semana, para coincidir o florescimento, a saber: BR 205, BR 451 e BR 400. Em ambos os plantios não houve efeito dos genótipos na infestação de ovos de H. zea e no parasitismo desses por Trichogramma spp. (média de 8,0 no 1º e de 1,8 ovos/estilo-estigma, no 2ºplantio). O parasitismo dos ovos variou significativamente de acordo com a cultivar, sendo de 62,4% para BR 451, 47,0% para BR 205 e 34,1% para BR 400.

This research was conducted to evaluate Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) egg parasitization by Trichogramma spp. on three different maize (Zea mays L.) genotypes: BR 205 (normal yellow endosperm), BR 451 (white endosperm, high quality protein maize) and BR 400 (sweet yellow endosperm). The genotypes were planted in two ways: all genotypes planted in the same day (1st trial), and with one week interval to equalize the flowering period: first the BR 205, followed by BR 451 and BR 400. On both trials there was no effect of maize genotypes on H. zea egg infestation or parasitism by Trichogramma spp. (average of 8.0 in the 1st and 1.8 eggs/ear in the 2nd trial). However, the parasitism varied significantly among cultivars, being 62.4% in BR 451, 47.0% in BR 205 and 34.1 in BR 400.