Foram avaliados os efeitos de diferentes níveis de suplementação do meio de cultivo com soro fetal bovino (FBS), extrato de larvas de peixe (FE), combinações de FBS e FE e adição de fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) e fator de crescimento fibroblástico (FGF), na proliferação da linhagem de células somáticas do bagre "brown bullhead" (BB). Os tratamentos (n = 4) utilizados foram: suplementação do meio de cultivo com 2,5, 5, 10% e 15% FBS ou FE, ou 5/2,5, 5/5, 10/2,5 e 10/5 da combinação FBS/FE ou, ainda, a adição de 0,1, 1, 2,5, 10, 25 e 75 ng/ml de IGF-I ou FGF ao meio de cultivo. Foi utilizada uma densidade inicial de 1,1 x 10(6) células/câmara, em placas não recobertas de 24 câmaras. A temperatura de incubação foi de 29,5 ± 0,7ºC. Seis horas após plaqueamento, o meio de cultura inicial foi removido das placas; estas foram enxaguadas com solução salina fosfatada tamponizada de Dulbecco, o meio experimental foi adicionado e as células ficaram em proliferação por 24 horas. Um bioensaio paralelo foi conduzido utilizando-se a linhagem celular mioblástica Omega de ratos (RMo), utilizando-se os mesmos níveis de suplementação do meio com FBS, FE e FBS/FE, tendo por meio básico de cultivo o meio Dulbecco’s MEM. A densidade inicial de células/câmara era de 7,2 x 10(6) células e o bioensaio foi conduzido a 36 ± 0,5ºC em uma incubadora com atmosfera de 95% de ar e 5% de CO2. O aumento nos níveis de suplementação com FBS tiveram um efeito positivo (P < 0,05) na proliferação das linhagens BB e RMo. Níveis crescentes de FE tiveram um efeito negativo (P < 0,05) na proliferação de BB e inibiram totalmente a proliferação de RMo em qualquer nível de suplementação. O aumento nos níveis de FE nas combinações FBS/FE tiveram um efeito negativo na proliferação tanto de BB como RMo (P < 0,05). O IGF-I teve um efeito positivo quadrático (P < 0,05) na proliferação das células BB. Aparentemente, fatores de crescimento de mamíferos estimulam discretamente a atividade mitogênica de células de peixes, enquanto os fatores de crescimento contidos no FE inibem a atividade mitogênica tanto da linhagem BB quanto da linhagem RMo.
Biossays were performed to assess the effects of different levels of growth medium supplementation with fetal bovine serum (FBS), fish fry extract (FE), combinations of FBS and FE, and addition of insulin-like growth factor I (IGF-I) and fibroblast growth factor (FGF) on the proliferation of brown bullhead catfish cells (BB line). Treatments (n = 4) were: 2.5, 5, 10, and 15.0% FBS or FE and 5/2.5, 5/5, 10/2.5, and 10/5 of a FBS/FE combination as supplement to the growth medium, or the addition of 0.1, 1, 2.5, 10, 25, and 75 ng/ml of either IGF-I or FGF to the growth media. Initial cell density was 1.1 x 10(6) cells per well on uncoated 24-well plates. Incubation temperature was 29.5 ± 0.7ºC. Six hours after plating, initial culture medium was removed, plates rinsed with Dulbecco’s phosphate buffered saline, treatment media added, and cells allowed to proliferate for 24 hours. Another bioassay was performed with rat myoblast omega cells (RMo) using the same levels of growth medium supplemented with FBS, FE and FBS/FE. Base growth medium was Dulbecco’s MEM. The initial cell density was 7.2 x 10(6) cells per well, and the bioassay was carried out at 36.0 ± 0.5ºC, on a 95% air, 5% CO2 incubator. Increasing levels of FBS had a positive effect (P < 0.05) on the proliferation of both BB and RMo cells. Increasing levels of FE had a negative effect (P < 0.05) on the proliferation of BB cells and totally inhibited the proliferation of RMo cells at any level of supplementation. Higher levels of FE on the FBS/FE combinations presented a negative effect on the proliferation of both BB and RMo cells (P < 0.05). Insulin-like growth factor I had a positive quadratic effect (P < 0.05) on the proliferation of BB cells. Apparently, mammalian growth factors slightly stimulated mitogenic activity in fish cells, while FE contained factors which inhibited the mitogenic activity of RMo and BB cell lines.