RESUMO Este estudo teve como objetivo avaliar o comportamento sexual e as características de condicionamento de reprodutores bubalinos submetidos à coleta de sêmen com vagina artificial. Trinta touros foram avaliados durante as estações reprodutivas favorável (março a maio) e desfavorável (novembro e dezembro), em propriedade localizada no estado de Minas Gerias, Brasil (latitude 20°41'45'' Sul e longitude 44º49'37'' Oeste ). Os dados foram analisados descritivamente de acordo com o sucesso ou não da ejaculação, usando-se uma série de parâmetros comportamentais. Uma análise de regressão logística multinível foi realizada utilizando-se as respostas e as variáveis explicativas mencionadas acima. Os resultados mostraram que, quando mais de três parâmetros se manifestam, a chance de se obter ejaculação aumenta em 9,0%, valor que sobe para 28,2% quando se observam sete a nove parâmetros manifestados pelos reprodutores. Essas observações permitem concluir que é possível condicionar touros sexualmente maduros para coleta de sêmen por meio da vagina artificial para uso em programas de inseminação artificial e inseminação artificial em tempo fixo. março maio novembro dezembro, dezembro , dezembro) Gerias latitude 20°4145 204145 20°41 45 20 41 20°41'45' 44º4937 º 44º49 37 44º49'37' . ) usandose usando comportamentais utilizandose utilizando acima manifestam 90 9 0 9,0% 282 28 2 28,2 fixo 4145 20°414 20414 2041 20°4 4 20°41'45 44º493 44º4 3 44º49'37 9,0 28, 414 204 20° 20°41'4 44º 44º49'3 9, 20°41' 44º49'

ABSTRACT This study aimed to evaluate the sexual behavior and accommodation characteristics of buffalo recipients patented for semen collection with an artificial vagina. Thirty bulls were sampled during favorable (March to May) and unfavorable (November to December) breeding seasons in a property located in the state of Minas Gerais, Brazil (Latitude 20°41'45'' South and Longitude 44°49'37'' West). Data were analyzed descriptively according to whether ejaculation was successful, using a range of behavioral parameters. A multilevel logistic regression analysis was performed using the responses and explanatory variables mentioned above. The results show that when more than three parameters are manifested, the chance of obtaining ejaculation increases by 9.0%, a value that rises to 28.2% when seven to nine parameters manifested by the breeders are observed. These observations allow us to conclude that it is possible to condition sexually mature bulls for semen collection through the artificial vagina for use in artificial insemination and fixed-time artificial insemination programs. March May November December Gerais Latitude 20°4145 204145 20°41 45 20 41 20°41'45' 44°4937 444937 44°49 37 44 49 44°49'37' West. West . West) successful above 90 9 0 9.0% 282 28 2 28.2 observed fixedtime fixed time programs 4145 20°414 20414 2041 20°4 4 20°41'45 4937 44°493 44493 4449 44°4 3 44°49'37 9.0 28. 414 204 20° 20°41'4 493 444 44° 44°49'3 9. 20°41' 44°49'

RESUMO O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência reprodutiva de búfalas leiteiras submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) à base de progesterona/estrogênio (P4/E2) e eCG, durante a estação reprodutiva desfavorável, usando-se sêmen resfriado (SR) e congelado (SC) Um total de 446 búfalas (> 40 dias após o parto) foi distribuído aleatoriamente em quatro blocos (anos): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90) e B4-2017 (n = 179). Cada bloco foi subdividido em dois (IA com SR e SC utilizando-se a mesma ejaculação de cada touro). Assim, a subdivisão do bloco foi a seguinte: B1 (SR = 71 e SC = 72); B2 (SR = 18 e SC = 16); B3 (SR = 47 e SC = 43); e B4 (SR = 90 e SC = 89). Os ejaculados de oito touros Murrah coletados com vagina artificial foram divididos em duas alíquotas: uma alíquota diluída em diluente comercial Botu-Bov® e resfriada (BB-SR), e a outra diluída no mesmo diluente e congelada (BB-SC). As alíquotas de BB-SR foram resfriados a 5°C/24h usando-se um refrigerador. As alíquotas do grupo BB-SC também foram resfriadas e, após equilíbrio a 5°C por 4h, foram colocadas em uma caixa de isopor de 21L, 5 cm acima da superfície do nitrogênio líquido. À tarde (A), no D0 (14h), os animais receberam BE 2,0 mg IM (Estrogin®) e um implante auricular (Crestar® 3,0 mg P4). No D9 (A), o implante foi retirado e os animais receberam eCG 400 UI IM (Folligon® 5000) + cloprostenol PGF2α 0,530 mg IM (Sincrocio®). No D10 (A), os animais receberam BE 1,0mg IM (Estrogin®), e, no D12 (8h da manhã), foram realizadas as IAs. No D42, a gestação foi diagnosticada por ultrassonografia. As taxas de concepção (TC) totais foram 48,2% SR e 34,6% SC para os anos de 2014 a 2017, com uma diferença significativa de 13,7% (P<0,05). Em conclusão, o sêmen resfriado resultou em maior TC do que o sêmen congelado em bubalinos leiteiros sob P4/E2 e eCG FTAI durante a estação reprodutiva desfavorável.

ABSTRACT The objective of this study was to compare the reproductive efficiency of dairy buffaloes undergoing fixed-time artificial insemination (FTAI) protocols based on progesterone/estrogen (P4/E2) and eCG during unfavorable breeding season using cooled (CS) and frozen semen (FS). A total of 446 buffaloes (> 40 days postpartum) were randomly distributed into four blocks (years): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90), and B4-2017 (n = 179). Each block was subdivided into two (AI with CS and FS using the same ejaculate of each bull). Thus, the block subdivision was as follows: B1 (CS = 71 and FS = 72); B2 (CS = 18 and FS = 16); B3 (CS = 47 and FS = 43); and B4 (CS = 90 and FS = 89). The ejaculates of eight Murrah bulls collected using an artificial vagina were divided into two aliquots: one aliquot was diluted in Botu-Bov® commercial extender and cooled (BB-CS), and the other was diluted in the same extender and frozen (BB-FS). BB-CS aliquots were cooled at 5 °C/24 h using a refrigerator. BB-FS group aliquots were also cooled, and after equilibrating at 5 °C for 4 h, were placed in a 21-L Styrofoam box, 5 cm above the surface of liquid nitrogen. In the afternoon (A) on D0 (2:00 p.m.) the animals received EB 2.0 mg IM (Estrogin®) and an ear implant (CRESTAR® 3.0 mg P4). At D9 (A), the implant was removed, and the animals received eCG 400 IU IM (Folligon® 5000) + Cloprostenol PGF2α 0.530 mg IM (Sincrocio®). At D10 (A), the animals received EB 1.0 mg IM (Estrogin®), and at D12 (8:00 a.m.), AI was performed. At D42, pregnancy was diagnosed via ultrasonography. Total CRs were 48.2% CS and 34.6% FS for years 2014 to 2017, with a significant difference of 13.7% (P<0.05). In conclusion, cooled semen resulted in higher CR than frozen semen in dairy buffaloes under the P4/E2 and eCG FTAI during the unfavorable reproductive season.

RESUMO Este estudo investigou in vitro a eficácia de quatro diferentes extensores (TES-TRIS e TRIS com lipoproteína de baixa densidade - LDL, nas concentrações de 10 ou 5%) sobre a longevidade espermática de búfalos no processo de refrigeração a 5ºC. A motilidade espermática foi avaliada a cada 24 horas até 72 horas de incubação, por sistema computadorizado “CASA”, e a integridade de membrana espermática foi examinada pelo teste hiposmótico (HOST) em T1, T24, T48 e T72 horas. Foram utilizados 11 búfalos (um ejaculado por búfalo) da raça Murrah, com idade variando de quatro a cinco anos. Imediatamente após a coleta, cada ejaculado foi fracionado em quatro alíquotas, e cada alíquota foi diluída em um dos quatro diluidores para a obtenção de 50x106 SPTZ/mL. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL, refrigeradas (-0,25oC/minuto) até 5oC e mantidas nessa temperatura até a avaliação. Previamente à avaliação, as amostras foram aquecidas a 37oC por 30 segundos. O pacote estatístico utilizado para as análises foi o STATA 12.0 “Statistical Analysis Software”, e as médias foram comparadas pelo teste de Friedman (P<0,05). Os resultados de cinética e HOST até o tempo de 48 horas indicam que o diluidor TRIS com 10% LDL seria uma alternativa promissora para a refrigeração do sêmen a 5ºC, a ser utilizado na inseminação artificial e na inseminação artificial em tempo fixo.

ABSTRACT This study investigated in vitro the efficacy of four different extenders (TES-TRIS and TRIS with LDL low-density lipoprotein at concentrations of 10 or 5%) on the longevity of buffalo sperm in the refrigeration process at 5ºC. Sperm motility was assessed every 24 hours up to 72 hours of incubation using computer assisted sperm analysis and sperm membrane integrity was examined by the hypoosmotic test (HOST) at T1, T24, T48 and T72 hours. Eleven buffaloes (1 ejaculate per buffalo) of the Murrah breed were used, ranging in age from 4 to 5 years. Immediately after collection, each ejaculate was fractionated into 4 aliquots, and each aliquot was diluted in one of four diluents to obtain 50x106SPTZ/mL. The samples were packed in 0.5mL straws and refrigerated (-0.25°C/min) to 5°C and maintained at this temperature until evaluation. Prior to evaluation the samples were heated at 37°C for 30 seconds. The statistical package used for analysis was STATA 12.0 "Statistical Analysis Software" and means were compared by the Friedman test (P<0.05). The results of sperm kinetics and HOST indicate that the TRIS diluent with 10% LDL could be a promising alternative for semen refrigeration at 5ºC, to be used in conventional and fixed time artificial insemination.