The flavonoid rutin presents several pharmacological effects, despite this, its application in the pharmaceutical industry can be significantly limited by its low bioavailability. The development of lipophilic derivatives by esterification of hydroxyl groups with fatty acid chains may be an effective strategy to change their physicochemical properties. This work aims to use high-speed countercurrent chromatography (HSCCC) to isolate rutin esters produced by esterification reactions catalyzed by the immobilized lipase from Candida antarctica (Novozyme 435®). The lipase-catalyzed synthesis of rutin esters (R3-R18:2) in 2-methyl-2-butanol exhibited conversions that ranged from 16 to 40% and highest conversion for short chain fatty acids (R4-R12). After initial partitioning tests of the reaction mixture in different solvent proportions followed by thin layer chromatography (TLC) analysis, the biphasic solvent systems consisting in HEMWat (hexane/ethyl acetate/methanol/water) in different proportions were chosen to separate rutin esters. These esters were separated for the first time to the reaction mixture via HSCCC. This technique proved to be more advantageous than the traditionally one since it allowed quick isolation and high purity (≥ 90%) of the products. It also permitted a substrate recovery for reuse in other enzymatic reactions. Furthermore, the results add valuable information, specially concerning the structures elucidation of different rutin esters not previously described.

Resumo Este trabalho descreve a avaliação preliminar das atividades citotóxica, antimicrobiana, moluscicida, antioxidante e anticolinesterásica de extratos alcoólicos das folhas (LECF) e das cascas do caule (BECF) da espécie Croton floribundus Spreng. (Euphorbiaceae), popularmente conhecida como capixingui ou tapixingui. No bioensaio com Artemia salina Leach, 1819 (Crustacea: Branchiopoda), BECF apresentou toxicidade significante (LC50 = 89,6 µg/ml), enquanto que LECF não apresentou atividade (LC50 > 1000 µg/ml). A partir do método de DPPH, os valores de IC50 para o LECF e BECF foram 61,2 µg/ml e 62,2 µg/ml, respectivamente, evidenciando que C. floribundus tem uma atividade antioxidante expressiva. A susceptibilidade antimicrobiana foi avaliada pela técnica de microdiluição e apenas BECF foi ativo contra Staphylococcus aureus (MIC = 39,6 mg/ml). Os extratos não apresentaram atividade moluscicida contra o caramujo Biomphalaria glabrata Say, 1818 (Gastropoda: Planorbidae). Ambos os extratos revelaram a presença de componentes com capacidade inibidora da enzima acetilcolinesterase no ensaio bioautográfico. C. floribundus mostrou ser uma espécie promissora considerando que exibiu boa atividade biológica na maioria dos ensaios testados.

Abstract This work describes the preliminary evaluation of cytotoxic, antimicrobial, molluscicidal, antioxidant and anticholinesterase activities from leaf (LECF) and stem bark alcoholic extracts (BECF) of the species Croton floribundus Spreng. (Euphorbiaceae), popularly known as capixingui or tapixingui. BECF presented significant toxicity (LC50 = 89.6 μg/ml) in the Artemia salina Leach, 1819 (Crustacea: Branchiopoda) bioassay, whereas LECF did not show activity (LC50 > 1000 μg/ml). From DPPH method, the values of IC50 for the LECF and BECF were 61.2 μg/ml and 62.2 μg/ml, respectively, showing that C. floribundus has an expressive antioxidant activity. Antimicrobial susceptibility was evaluated by microdilution technique and only BECF was active against Staphylococcus aureus (MIC = 39.6 μg/ml). The extracts did not present molluscicidal activity against snail Biomphalaria glabrata Say, 1818 (Gastropoda: Planorbidae). Both extracts revealed the presence of several components with an inhibiting capacity of acetylcholinesterase enzyme on the bioautographic assay. C. floribundus showed to be a promising species considering that it exhibited good biological activity in the most assays performed.

O presente trabalho analisou a composição físico-química e origem botânica de 31 amostras de mel indicadas como sendo de origem monofloral, comercializadas e produzidas na região Sudeste do Brasil, a fim de verificar parâmetros de qualidade. As análises físico-químicas compreenderam o teste de Fiehe, a reação de lugol, a determinação do teor de umidade, do pH, de açúcares redutores, de cinzas e do índice de diastase. Todas as amostras apresentaram-se dentro do limite previsto pela legislação brasileira para o teor de umidade. Dez amostras apresentaram teor de açúcares redutores inferior ao previsto na legislação, três tinham número de diastase (unidades Schade/Gothe) inferior a 8, uma apresentou pH abaixo do padrão e outra apresentou teor de cinzas superior ao previsto. A análise polínica mostrou que cerca de 57% das amostras poderiam ser classificadas como monoflorais, correspondendo nove amostras a mel de eucalipto (Eucalyptus, Myrtaceae), duas a mel de aroeira (Schinus, Anacardiaceae), duas a mel de assa-peixe (Vernonia, Asteraceae), duas a mel de laranjeira (Citrus, Rutaceae), uma a mel de cambará (Gochnatia, ) uma a mel de capixingui (Croton, Euphorbiaceae). As demais amostras eram bi- ou heteroflorais. A influência de uma determinada espécie botânica nas variáveis físico-químicas analisadas não foi significativa (p>0,05) segundo a análise de regressão.

The physico-chemical properties and the botanical origin of 31 commercial honey samples from Southeast Brazil, indicated as monofloral honeys, were analyzed in order to verify quality parameters. The physico-chemical analyses comprised the test of Fiehe, the lugol reaction, the determination of humidity, pH, reduced sugars, ashes and diastase. In accordance with Brazilian legislation all samples showed adequate water content. The level of reducing sugars from 10 samples was below the Brazilian quality parameters for honey, three presented a Schade/Gothe number of diastase activity below 8 and in one sample only a higher ash content. Pollen analysis showed that nearly 57% of the samples analyzed could be classified as monofloral honeys, corresponding to nine samples of Eucalyptus (Myrtaceae), two of Citrus (Rutaceae), two of Schinus (Anacardiaceae), two of Vernonia (Asteraceae), one of Croton (Euphorbiaceae) and one of Gochnatia (Asteraceae). The other samples were of bifloral or heterofloral origin. No relation between the floral origin and the physico-chemical properties of the samples examined could be detected using regression analysis (p>0.05).

A presença de antígeno viral em cortes de tecidos humanos fixados em formol e emblocados em parafina foi demonstrada pela digestão com tripsina foi demonstrada pela ingestão com tripsina seguida de imunofluorescência direta ou indireta. Os espécimens podem ser utilizados para diagnoses retrospectivas. A técnica da imunofluorescência deve ser adaptada à infecção viral suspeita segundo diagnosie histopatológica prévia. Os parâmetros para a digestão do tecido pela tripsina, relacionados à concentração, duração de atuação e temperatura, expõem diferentes antígenos virais e devem ser previamente testados para cada sistema a ser estabelecido. Uma digestão mais intensa deve ser aplicada para a detecção do vírus do sarampo em tecido pulmonar do que para adenovírus ou vírus respiratório sincicial no mesmo tecido. Por outro lado, o vírus da febre amarela em tecido de fígado necessita de uma digestão mais fraca.

The presence of viral antigen in sections from formalin-fixed and paraffin-embedded human tissues was demonstrated by trypsin digestion followed by direct or indirect immunofluorescence. The specimens may be used for retrospective diagnosis. The immunofluorescence technique has to be adapted to the suspected virus infection on the basis of previous histopathology study. Variations of trypsin concentration time and temperature of incubation, expose different viral antigens and have to be previously tested for each unknown system. For measles virus detection in lung a stronger digestion has to be applied as compared to adenovirus or respiratory disease viruses in the same tisue. Flavivirus in liver tissue needs a weaker digestion. The reproducibility of the method makes it useful as a routine technique in diagnosis of virus infection.

Um retrovírus foi isolado de um paciente brasileiro com "Síndrome de Imunodeficiência Adquirida" (SIDA/AIDS) e caracterizado em termos de sua reatividade com soros de indivíduos infectados com vírus da imunodeficiência humana dos tipos 1 e 2 (HIV-1 e HIV-2). A análise antigênica por "Western blot" revelou que o isolado brasileiro é bastante similar a uma cepa de HIV-1 bem caracterizada. A identificação do retrovírus como HIV-1 e não HIV-2 é reforçada pelo fato dos anticorpos do paciente do qual foi isolado o vírus não terem reagido com a glicoproteínas de envelope de 140 kDa, específica para HIV-2.

A retrovirus infecting a Brazilian AIDS patient was isolated and characterized in terms of its reactivity with sera from individuals infected with human immunodeficiency viruses 1 and 2 (HIV-1 and HIV-2). The Western blot analysis revealed that the Brazilian isolate is very similar to the well characterized HIV-1 strain. The serum of the patient from whom the virus was isolated did not react with the 140 kDa envelope glycoprotein specific for HIV-2.

A evidenciação da presença de ácido ribonucleico (ARN) viral por eletroforese em gel de policrilamida (EGPA) foi comprovada como um método altamente sensível e rápido para o diagnóstico de infecções por rotavirus. Uma comparação desta prova com a imunomicroscopia eletrônica (IEM) e com o ensaio imunoenzimático (EIE) no exame de 245 fezes de crianças com gastroenterite revelou completa concordancia entre os três ensaios em 238 (97.14%) amostras. Entre 75 amostras positivas pelo menos em um dos três ensaios, resultados negativos foram observados em 5 (6.48%) por EGPA, em 6 (6.76%) por EIE e em nenhum por IEM. Coloração pela prata aumentou consideravelmente a sensibilidade do ensaio por EGPA. Concluímos que embora a IEM ainda seja a prova mais sensível e rápida para o diagnóstico de infecções por rotavirus, o ensaio por EGPA tem muitas vantagens em seu favor, sendo as principais as de não necessitar equipamentos caros, de empregar exclusivamente reagentes quimicamente definidos, de identificar grupos e variantes virais e de detectar amostras que não possuindo antígenos comuns a maioria dos rotavirus, não são reveláveis por ensaios sorológicos.

Detection of rotavirus RNA by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) proved to be a highly sensitive and rapid diagnostic test. A comparison of this assay with immuno-electron microscopy (IEM) and enzyme immunoassay (EIA) in 245 faeces from children with gastroenteritis revealed complete agreement between the three assays in 238 (97.14%) samples. Among 75 samples positive in at least one of the three assays, negative results were observed in 5 (6.48%) by PAGE, in 6 (6.76%) by EIA and in none by IEM. Silver staining greatly increased the sensitivity of the PAGE assay. We conclude that although IEM remains the most sensitive and rapid rotavirus diagnostic assay, the PAGE technique has many advantages in its favour, including the non-requirement of expensive equipment, the use of only chemically defined reagents and the capacity to distinguish virus subgroup and variants and to detect non-crossreactive rotaviruses which are missed in serological assays.