Resumo Surtos frequentes do vírus da gripe aviária H9N2 no Paquistão revelaram que esse subtipo se tornou endêmico na avicultura e, além das perdas econômicas, representa uma ameaça à saúde pública. O presente estudo descreve a caracterização molecular e as alterações patológicas em frangos de corte naturalmente infectados com a atual cepa H9N2 e sua dinâmica filogenômica. Neste estudo, amostras de tecidos (traqueia, pulmões, rim e intestino) de 100 lotes comerciais de frangos foram coletadas de julho de 2018 a agosto de 2019. As amostras foram submetidas à detecção molecular, filogenia e posterior exame patológico. O comprimento completo do gene HA foi amplificado com sucesso em cinco amostras. O sequenciamento de nucleotídeos revelou amostras positivas colocadas em um clado pertencente à sublinhagem B2 do genótipo G1 e categorizado como LPAIV com base na sequência de aminoácidos do gene da hemaglutinina (HA) no local de clivagem (PAKSSR/G). A análise genética do gene da HA revelou: nt = 80,5%-99,5%; aa = 83,8%-98,9% de homologia com cepas de H9N2 relatadas anteriormente no Paquistão e em países vizinhos (A/Quail/Hong Kong/G1/97). As lesões macroscópicas incluíram aerossaculite leve, hemorragias leves, congestão difusa e exsudato purulento na mucosa traqueal, cilindro fibrinonecrótico no lúmen da traqueia e congestão pulmonar leve. As alterações histopatológicas incluíram descamação de células epiteliais, infiltração de células inflamatórias na traqueia, infiltração de células mononucleares (MNCs), congestão pulmonar e exsudato no lúmen dos parabrônquios, congestão peritubular nos rins com degeneração das células epiteliais tubulares, alterações degenerativas nas células epiteliais das vilosidades intestinais e hiperplasia de células caliciformes. A análise imunoistoquímica confirmou a presença do antígeno AIVH9N2 na traqueia, nos pulmões, no rim e no intestino. A microscopia eletrônica revelou alterações ultraestruturais na traqueia, incluindo cílios degenerados, inchaço mitocondrial e retículo endoplasmático aumentado. Com base em todas as análises, o presente estudo revelou a distribuição do vírus H9N2 do genótipo G1 em Punjab, Paquistão, com patogenicidade de leve a moderada.

Abstract Frequent outbreaks of avian influenza H9N2 virus in Pakistan revealed that this subtype has become endemic in the poultry industry and, besides economic losses, poses a threat to public health. The present study describes the molecular characterization and pathological alterations in naturally infected broiler chickens with the current H9N2 field strain and their phylogenomic dynamics. In this study, tissue samples (trachea, lung, kidney and intestine) from 100 commercial chicken flocks were collected from July 2018 to August 2019. Samples were subjected to molecular detection, phylogeny and subsequent pathological examination. The complete length of the HA gene was successfully amplified in five samples. Nucleotide sequencing revealed positive samples placed in a clade belonging to the B2 sub-lineage of the G1 genotype and categorized as LPAIV based on the amino acid sequence of the HA gene at the cleavage site (PAKSSR/G). Genetic analysis of the haemagglutinin (HA) gene revealed nt: 80.5%-99.5%; aa: 83.8%-98.9% homology to H9N2 strains reported previously from Pakistan, neighbouring countries, and (A/Quail/Hong Kong/G1/97). Gross lesions include a slight airsacculitis, mild hemorrhages, diffuse congestion and purulent exudate in tracheal mucosa, fibrinonecrotic cast in the trachea lumen and mild pulmonary congestion. Histopathological alterations include sloughing of epithelial cells and infiltration of inflammatory cells in the trachea, mononuclear cells (MNCs) infiltration, pulmonary congestion and exudate in the lumen of parabronchi, peritubular congestion in the kidneys with degeneration of tubular epithelial cells and degenerative changes in the intestinal villi epithelial cells and goblet cell hyperplasia. Immunohistochemistry analysis confirmed the presence of AIVH9N2 antigen in the trachea, lungs, kidney and intestine. Electron microscopy revealed ultrastructural changes in the trachea, including degenerated cilia, mitochondrial swelling and enlarged endoplasmic reticulum. Based on all essential analysis, the present study revealed the distribution of the H9N2 virus of G1 genotype in Punjab, Pakistan, with mild to moderate pathogenicity.

Resumo Os faisões estão diminuindo em todo o mundo, por isso informações atualizadas sobre sua população e seus habitats são importantes para conservação e manejo. O presente estudo foi realizado no vale Palas, distrito de Kohistan, Paquistão, no final da primavera (maio e junho) de 2020 e início da primavera (março e abril) de 2021 para avaliar a população e o estresse antropogênico. O foco principal foram três espécies simpátricas de faisão, incluindo Tragopan de Chifres Ocidental (Tragopan melanocephalus), Monal-do-Himalaia (Lophophorus impejanus) e Faisão Koklass (Pucrasia macrolopha). Foi utilizado o “Método de Contagem de Chamadas” para avaliar a população em campo, e foi realizada uma pesquisa por questionário para documentar a avaliação de risco dos moradores locais do vale. As avaliações populacionais revelaram que o Faisão Koklass está mais adaptado às crescentes atividades antrópicas e que sua população se mantém mais ou menos semelhante à população de 22 anos atrás. Nos últimos 22 anos, Tragopan de Chifres Ocidental e Monal-do-Himalaia perderam cerca de 40 a 50% de suas populações. A interferência humana, sob a forma de caça ilegal, desmatamento e sobrepastoreio, era comum no vale. O estudo conclui que o habitat do vale Palas é ideal para espécies de faisão; no entanto, a interferência humana, por meio de urbanização, fragmentação de habitat, caça ilegal e desmatamento, está ocorrendo em ritmo acelerado, causando estragos na população de faisões.

Abstract Pheasants are declining everywhere in the world and therefore updated information about their population and habitats are important for conservation and management. The present study was conducted in the Palas Valley, District Kohistan, Pakistan in late spring (May and June) 2020 and early spring (March and April) 2021 to assess the population and anthropogenic stress. The major focus was on three sympatric pheasant species, including Western Horned Tragopan (Tragopan melanocephalus), Himalayan Monal (Lophophorus impejanus), and Koklass Pheasant (Pucrasia macrolopha). We used the “Call Count Method” for the population assessment in the field, and a questionnaire survey was conducted to document the risk assessment of local residents of the valley. The population assessments revealed that the Koklass Pheasant is more adapted to increasing anthropogenic activities and its population appeared more or less similar as 22 years ago. In the past 22 years, Western Tragopan and Himalayan Monal have lost about 40–50% of their populations. Human interference in the form of illegal hunting, deforestation, and overgrazing was found to be common in the valley. The study concludes that the Palas Valley habitat is ideal for pheasant species; however, human interference in the form of urbanization, habitat fragmentation, illegal hunting, and deforestation is occurring at a rapid pace, causing havoc in the pheasant population.

Resumo A tecnologia Biofloc é muito destacada hoje em dia por causa de seus tremendos efeitos na aquicultura. Os micróbios foram enriquecidos com a fonte de carbono orgânico mais barata, i. e., cascas de banana em pó, e foram incorporadas em diferentes aquários de criação de alevinos de carpa-capim sob diferentes tratamentos C/N (10: 1, 15: 1 e 20: 1) e 10% de troca diária de água. O crescimento inicial dos alevinos foi registrado. O experimento foi resolvido em triplicatas por 60 dias e executado paralelamente ao grupo controle fornecido com ração comercial e troca diária de água. Seu efeito foi avaliado medindo o crescimento dos alevinos e os parâmetros da água de cada aquário. O% de ganho médio em peso e comprimento dos alevinos foi obtido significativamente mais alto (28,12 ± 0,30g e 17,29 ± 0,46 cm respectivamente) em aquários contendo cascas de banana em pó puro com 10% de troca de água e a relação C/N foi ajustada em 20: 1 (T3) do que outros tratamentos e controle. A amônia e outros parâmetros da água também estavam sob controle no T3 mais do que nos outros grupos experimentais e de controle. Por todas as contagens, concluiu-se que a maior razão C/N no sistema de bioflocos tem o potencial de incrementar a taxa de crescimento de C. idella reduzindo a toxicidade e pode ser usada como substituto da farinha de peixe.

Abstract Biofloc technology is much highlighted these days because of its tremendous effects on aquaculture. Microbes were enriched on cheapest organic carbon source i. e., powdered banana peels and were incorporated in different aquaria rearing grass carp fingerlings under different C/N treatments (10:1, 15:1 and 20:1) and 10% water daily water exchange. The initial growth of fingerlings was recorded. The experiment was settled in triplicates for 60 days and run parallel to control group provided with commercial feed and daily water exchange. Its effect was evaluated by measuring the growth of fingerlings and water parameters of each aquarium. The average % gain in weight and length of fingerlings was obtained significantly highest (28.12 ± 0.30g and 17.29 ± 0.46cm respectively) in aquaria containing pure powdered banana peels with 10% water exchange and C/N ratio was adjusted at 20: 1 (T3) than other treatments and control. Ammonia and other water parameters were also under control in T3 than other experimental and control groups. By all counts, it was concluded that the highest C/N ratio in biofloc system had the potential to increment C. idella growth rate by reducing toxicity and could be used as fish meal substitute.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo O presente estudo descreve o perfil hematológico, a preferência alimentar e a comparação de caracteres morfométricos de casais reprodutores de pombo-rocha (Columba livia). Para tanto, 25 pares (25 amostras por sexo) foram amostrados por meio de redes de névoa do distrito de Okara e Bahawalnagar, Punjab, Paquistão. As aves foram então anestesiadas com uma combinação de cetamina HCL (10 mg/kg) e diazepam (0,2 mg/kg) e submetidas a medidas morfométricas; 5 µL de sangue também foram retirados da veia jugular de cada ave anestesiada para análise hematológica. Poucos pares também foram dissecados para remover o trato gastrointestinal (GITs) para preferências alimentares. Os resultados revelaram que não há diferenças significativas nos parâmetros hematológicos e na preferência alimentar dos casais reprodutores de Columba livia. A análise intestinal revelou ainda que a maior parte do conteúdo intestinal consistia em ervilha e milho na maioria dos pares. Em relação às medidas mensurais, foram registradas diferenças significativas no peso corporal, comprimento da pena primária mais longa e circunferência torácica, enquanto os demais parâmetros estudados permanecem não significativos entre os sexos. Assim, conclui-se que além de três parâmetros morfométricos (peso corporal, comprimento da pena primária mais longa e circunferência torácica), ambos os sexos são semelhantes em termos de morfometria, hematologia e preferência alimentar.

Abstract The present study describes the haematological profile, feeding preference, and comparison of morphometric characters of blue rock pigeon (Columba livia) breeding pairs. For this purpose, 25 pairs (25 samples per sex) were sampled through Mist nets from district Okara and Bahawalnagar, Punjab, Pakistan. Birds were then anaesthetized with a combination of ketamine HCL (10 mg/kg) and diazepam (0.2 mg/kg) and subjected to morphometric measurements. 5µL blood also was taken from the jugular vein of each anaesthetized bird for haematological analysis. Few pairs were also dissected to remove gastrointestinal tracts (GITs) for food preferences. Results revealed that there are no significant differences in the haematological parameters and feeding preference of breeding pairs of Columba livia. The gut analysis further revealed, the major portion of gut contents consisted of pea and corn in most of the pairs. Regarding the mensural measurements, significant differences were recorded in the body weight, length of the longest primary feather, and chest circumference, whereas the rest of the studied parameters remain nonsignificant between sexes. So, it is concluded that apart from 3 morphometric parameters (body weight, length of longest primary feather and chest circumference), both sexes are alike in term of morphometry, haematology and food preference.

Resumo A indústria avícola está entre as indústrias altamente desenvolvidas do Paquistão, atendendo a demanda de proteína da população em rápido crescimento. Por outro lado, os resíduos de aves não tratados estão causando diversos problemas de saúde e ambientais. O presente estudo foi desenhado para verificar o potencial de espécies de fungos queratinolíticos para a conversão de resíduos de penas de frango em composto biofortificado. Para tanto, três espécies de fungos foram isoladas de amostras de solo. Essas cepas foram cultivadas puramente e, em seguida, caracterizadas fenotipicamente e genotipicamente. As pesquisas do BLAST da sequência de nucleotídeos do rDNA 18S dos isolados de fungos revelaram que os dois isolados de fungos pertenciam ao gênero Aspergillus e um pertencia ao gênero Chrysosporium. A temperatura ótima para Aspergillus flavus, Aspergillus niger e Chrysosporium queenslandicum foi de 29, 26 e 25 oC, respectivamente. A. flavus apresentou degradação máxima de penas (53%), A. niger degradou resíduos de penas em até 37%, enquanto C. queenslandicum apresentou 21% de atividade queratinolítica em penas de frango em suas respectivas temperaturas ótimas. O potencial de degradação dessas espécies de fungos mostrou sua capacidade de formar composto de importância agroindustrial.

Abstract Poultry industry is amongst highly developed industries of Pakistan, fulfilling the protein demand of rapidly increasing population. On the other hand, the untreated poultry waste is causing several health and environmental problems. The current study was designed to check the potential of keratinolytic fungal species for the conversion of chicken-feather waste into biofortified compost. For the purpose, three fungal species were isolated from soil samples. These strains were pure cultured and then characterized phenotypically and genotypically. BLAST searches of 18S rDNA nucleotide sequence of the fungal isolates revealed that the two fungal isolates belonged to genus Aspergillus and one belonged to genus Chrysosporium. Optimum temperature for Aspergillus flavus, Aspergillus niger and Chrysosporium queenslandicum was 29, 26 and 25 oC, respectively. A. flavus showed maximum (53%) feather degradation, A. niger degraded feather waste up to 37%, while C. queenslandicum showed 21% keratinolytic activity on chicken feathers at their respective temperature optima. The degradation potential of these fungal species showed their ability to form compost that has agro-industrial importance.

The study aimed to test whether the ultrasonographic morphometry and characteristic traits of udders and teats could be used to identify clinical mastitis in forty-eight adult Holstein-Friesian dairy cows. The inclusion and exclusion criteria were also declared with the help of the California Mastitis Test and Somatic Cell Count. Clinically, dairy cows (n = 48) were in their third lactation in order to undergo both ultrasonographic and phenotypic morphometry. Udder parenchyma as echotexture, teat width, teat width at the rosette of Furstenberg, teat cistern width, teat wall thickness, teat canal length, and ratios of TC/TWT, TWT/TW and TC/TW, as well as supramammary lymph node size, were evaluated, whereas phenotypic morphometric traits, i.e., udder circumference, udder depth, udder length, teat length, teat circumference, teat diameter, and the shortest distance from teat ends to floor were measured. There was substantial difference between morphological parameters of the teat such as, teat width, teat width at the rosette of Furstenberg, teat wall thickness, ratio of TC/TWT, ratio of TWT/TW, ratio TC/TW, teat canal length, echogenicity variables, and phenotypic morphometric traits, except for the teat cistern width. Pearson correlation indicated a strong correlation between lymph node length and lymph node width. Clinical mastitis in cattle is related to udder and teat morphometric traits. Incorporating these characteristics into the selection and breeding programme may aid in the selection of animals for mastitis resistance. Ultrasound is an effective imaging and morphological assessment tool for the diagnosis and prognosis of clinical mastitis in dairy cows.

Resumo O experimento foi realizado em manga cv. Dusehri para investigar o efeito dos fertilizantes N, P e K no crescimento vegetativo, reprodutivo, produtividade e de qualidade do fruto. Foram utilizadas oito combinações diferentes de fertilizantes: T1 (controle), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) e T8 (NPK). Cada tratamento de N (1.000 g), P (750 g) e K (750 g) foi aplicado duas vezes durante a estação de crescimento em fevereiro e agosto. Todos os tratamentos influenciaram significativamente o crescimento vegetativo, floração, frutificação, produtividade e outros atributos físico-químicos da manga em relação ao controle. Menos efeito foi observado com a aplicação individual de fertilizante, enquanto os tratamentos combinados aumentaram a maioria dos parâmetros investigados. Especialmente as características qualitativas mostraram diferenças não significativas entre mangueiras tratadas e não tratadas. No entanto, entre os diferentes tratamentos, T8 (NPK) apresentou significância para aspectos de frutificação, como tamanho máximo de folgas de crescimento (177,51 mm), número total de panículas/árvore (845), número total de flores/panícula (974), razão sexual (69,18%), retenção de frutos (13,85%), número total de frutos/árvore (379), produção (82 kg/árvore), peso do fruto (197,5 g) e peso da polpa (135,5 g), além de parâmetros físico-químicos, como TSS (24,53), vitamina C (57,63 mg/100 mL) e açúcar total (20,84%). Em geral, a aplicação combinada de NPK (T8) foi a mais eficaz no aprimoramento dos aspectos de frutificação, produtividade, características físico-químicas, além da melhoria da qualidade dos frutos das mangueiras.

Abstract The experiment was carried out on mango cv. Dusehri to investigate the effect of N, P and K fertilizers on vegetative, reproductive growth, yield and fruit quality. Eight different fertilizer combinations such as T1 (control), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) and T8 (NPK) were used. Individual or combine fertilizer application of N (1000 g), P (750 g) and K (750 g) were applied during growing season in February and August. All the treatments significantly influenced on vegetative growth, flowering, fruiting, yield and other physiochemical attributes of mango as compared to control. Least effect was observed with individual fertilizer application while combine fertilizer treatments enhanced most of the investigated parameters. Especially, qualitative traits showed non-significant differences between treated and untreated mango trees. However, among the different treatments T8 (NPK) showed significance for fruiting aspects such as maximum size of growth flushes (177.51 mm), total number of panicles/tree (845), total number of flowers/panicle (974), sex ratio (69.18%), fruit retention (13.85%), total number of fruits/tree (379), yield (82 kg/tree), fruit weight (197.5 g), pulp weight (135.5 g) and physiochemical parameters namely TSS (24.53), Vit. C (57.63 mg/100 mL) and total sugar (20.84%). In general, combine application of NPK (T8) were the most effective in enhancing fruiting aspects, yield, physiochemical characteristics as well as improved fruit quality of mango trees.

Resumo A alta resistência aos antimicrobianos está associada à formação de biofilme responsável por micróbios infecciosos para suportar condições severas. Portanto, novas alternativas são necessárias como inibidores de biofilme para controlar infecções. Neste estudo, as atividades antimicrobiana e antibiofilme dos extratos de Fagonia indica foram avaliadas contra isolados clínicos MDR. O extrato exibiu seu efeito antibiofilme ao alterar a aderência e a desintegração da parede celular bacteriana. Fagonia indica tem efeito antibacteriano com valores de concentração inibitória mínima (CIM) variando de 125 a 500 µg mL-1, e valor de concentração bactericida mínima (MBC) de 500-3000 µg mL-1 contra isolados clínicos multirresistentes (MDR). O extrato exibiu seu efeito antibiofilme ao alterar a aderência e a desintegração da parede celular bacteriana. Fagonia indica teve efeito antibacteriano com valores de concentração inibitória mínima (CIM) variando de 125 a 500 µg mL-1, e concentração bactericida mínima (MBC) de 500-3000 µg mL-1 contra isolados MDR. Os efeitos inibitórios máximos do extrato de clorofórmio Fagonia indica na formação de biofilme foi observada em Staphylococcus aureus (71,84%), seguido por Klebsiella pneumoniae (70,83%) após 48 horas, mostrando que a inibição também é dependente do tempo. Nossos resultados sobre extravasamento de proteínas de células bacterianas indicaram que isolados MDR tratados com extrato clorofórmico de Fagonia indica apresentaram vazamento máximo de proteínas de K. pneumoniae (59,14 µg mL-1), seguido por S. aureus (56,7 µg mL-1). Ensaios de fixação de células indicaram que o extrato de clorofórmio resultou em uma inibição de 43,5-53,5% da aderência das células a uma superfície de poliestireno. Nossos resultados revelaram que extratos de Fagonia indica inibiram significativamente a formação de biofilme entre isolados clínicos MDR, portanto, poderiam ser aplicados como agentes antimicrobianos e inibidores de biofilme de baixo custo contra esses isolados MDR.

Abstract High resistance to antimicrobials is associated with biofilm formation responsible for infectious microbes to withstand severe conditions. Therefore, new alternatives are necessary as biofilm inhibitors to control infections. In this study, the antimicrobial and antibiofilm activities of Fagonia indica extracts were evaluated against MDR clinical isolates. The extract exhibited its antibiofilm effect by altering adherence and disintegration of bacterial cell wall. Fagonia indica has antibacterial effect as minimum inhibitory concentration (MIC) values ranging from 125 to 500 µg mL-1 and minimum bactericidal concentration (MBC) value was 500-3000 µg mL-1 against multidrug resistant (MDR) clinical isolates. The extract exhibited its antibiofilm effect by altering adherence and disintegration of bacterial cell wall. Fagonia indica had antibacterial effect as minimum inhibitory concentration (MIC) values ranging from 125 to 500 µg mL-1 and minimum bactericidal concentration (MBC) value was 500-3000 µg mL-1 against MDR isolates. The maximum inhibitory effects of Fagonia indica chloroform extract on biofilm formation was observed on Staphylococcus aureus (71.84%) followed by Klebsiella pneumoniae (70.83%) after 48 hrs showing that inhibition is also time dependent. Our results about bacterial cell protein leakage indicated that MDR isolates treated with chloroform extract of Fagonia indica showed maximum protein leakage of K. pneumoniae (59.14 µg mL-1) followed by S. aureus (56.7 µg mL-1). Cell attachment assays indicated that chloroform extract resulted in a 43.5-53.5% inhibition of cell adherence to a polystyrene surface. Our results revealed that extracts of Fagonia indica significantly inhibited biofilm formation among MDR clinical isolates, therefore, could be applied as antimicrobial agents and cost effective biofilm inhibitor against these MDR isolates.

RESUMO O objetivo do presente estudo foi avaliar a prevalência e efeitos hematológicos de Toxoplasma gondii em ovelhas e cabras no distrito Dera Ghazi Khan. Amostras de sangue (n=204) foram coletadas para incluir cabras (n=101) e ovelhas (n=103), além de idade, gênero e raça dos animais. Amostras foram coletadas aleatoriamente de 25 rebanhos de 7 conselhos sindicais: Vehova, Tibbi Qaisrani, Lakhani, Kohar, Tuman Qaisrani, Nutkani e Kot Qaisrani of Tehsil Taunsa Sharif com pelo menos 4 animais em cada rebanho. Todos os ruminantes foram divididos em três grupos baseados em idade, raça e gênero. A prevalência foi detectada usando dois kits, LAT e ELISA. A prevalência total suspeita em cabras através dos kits LAT e ELISA foi (35.64%), (32.67%) e em ovelhas foi (25.24%), (23.30%) respectivamente. O Toxoplasma gondii teve efeito significativo em cabras em grupos de idade e não significativo em todos os outros grupos de cabras e ovelhas. Toxoplasma gondii teve efeito significativo em todos os parâmetros hematológicos como hemoglobina, células totais de leucócitos, granulócitos, linfócitos, plaquetas e glóbulos vermelhos, exceto monócitos. O presente estudo conclui que toxoplasmose é prevalente entre ruminantes, e revela a possibilidade de transmissão para humanos com o uso de animais hospedeiros como fonte de proteína.

ABSTRACT The present study was carried out to evaluate the prevalence and hematological effects of Toxoplasma gondii in sheep and goat in district Dera Ghazi Khan. Blood samples (n=204) were collected comprise goats (n=101) and sheep (n=103) alongwith age, gender and breeds of animals. Samples were collected randomly from 25 flocks of 7 different union council Viz. Vehova, Tibbi Qaisrani, Lakhani, Kohar, Tuman Qaisrani, Nutkani and Kot Qaisrani of Tehsil Taunsa Sharif at least 4 animals from each flock. All ruminants divide into three groups based on age, breed and gender. The prevalence was detected through two different kits Viz. LAT and ELISA kit. The overall prevalence suspected in goats through LAT and ELISA kit was (35.64%), (32.67%) and in sheep was (25.24%), (23.30%) respectively. The Toxoplasma gondii had a significant effect on goats in age groups and non-significant all other groups of goats and sheep. Toxoplasma gondii had a significant effect on all hematological parameters like Hemoglobin, total leukocyte cells, granulocytes, lymphocytes, platelets, and red blood cells, except monocytes. In conclusion of the current study, toxoplasmosis is prevalent among ruminants, reveals the possibility of transmission to humans on the use of host animals as protein source.

The present research aimed to investigate the effects of Bacillus subtilis (B. subtilis) on performance, immune system, gut, and lymphoid organs' microarchitecture in broilers. A total of 120 day-old broiler chicks were randomly distributed into four groups. The birds were fed a corn-soy-based basal diet (BD) (control) or the same BD supplemented with 10% zinc bacitracin (ZnB), 0.05 g/kg or 0.1 g/kg of B. subtilis (BS). The broilers fed 0.1 g/kg of B. subtilis had superior mean bodyweight and lower feed conversion ratio compared with the non-supplemented or ZnB-fed groups. The BS-0.1 group registered higher antibody titer against the Newcastle disease (ND) virus. Cell-mediated immune response post Phytohaemagglutinin-P (PHA-P) injection was attained by both BS-0.1 and BS-0.05 groups. Histomorphological study revealed increased thymus cortical width, and cortex/medulla ratio in BS-0.1 group compared with control. Area of bursal follicles and germinal centres of spleen also improved in BS-0.1 group. Compared to ZnB and control, higher villus height (VH) and villus crypt ratio of the duodenum and jejunum were recorded on day 21, and higher VH of duodenum and ileum was noted on day 35 in BS-0.1 and BS-0.05 groups. In conclusion, B. subtilis-type probiotics contributed positively to better growth performance, improved immune system and modulated morphology of lymphoid organs and gut mucosa in broilers.

RESUMO Bredo (Trianthema portulacastrum) e tiririca (Cyperus rotundus) são duas plantas daninhas do tipo C4 que causam grandes perdas de rendimento na cultura do milho. Foi realizado um experimento de campo com duração de dois anos para estimar a interferência de T. portulacastrum e C. rotundus e avaliar o potencial alelopático dos extratos aquosos no manejo eficaz de plantas daninhas no milho. Cinco extratos aquosos de espécies vegetais em dez combinações binárias foram aplicados nas folhas em um delineamento experimental de blocos casualizados, com três repetições. As parcelas foram tratadas com o herbicida comercial atrazina, e a testemunha sem capina (controle) foi utilizada para fins de comparação. A maior densidade de ambas as espécies de plantas daninhas foi observada 45 dias após a semeadura (DAS), enquanto a biomassa seca das plantas daninhas foi maior aos 60 DAS. A combinação binária de sorgo-girassol resultou na maior redução de densidade das plantas daninhas, biomassa seca e índice de persistência (88-92% para T. portulacastrum e 65-81% para C. rotundus) em comparação com a testemunha sem capina. Esta combinação de tratamento também registrou um aumento de 125% no índice de resistência da cultura, 84% no índice de área foliar, 41% na taxa de crescimento da cultura aos 60-75 DAS, levando assim, ao aumento de 51% na produção de grãos. A combinação binária de girassol-colza resultou em máximo benefício líquido marginal, enquanto a combinação milho-sorgo permitiu estimar o valor máximo da taxa marginal de retorno. Além do manejo eficaz de plantas daninhas e do maior rendimento, a combinação sorgo-girassol trouxe os melhores benefícios econômicos líquidos entre as diferentes combinações de extratos vegetais, sugerindo, portanto, que a aplicação exógena do extrato de sorgo-girassol pode ser uma ferramenta eficaz no controle destas plantas daninhas em lavouras de milho.

ABSTRACT Horse purslane (Trianthema portulacastrum) and purple nutsedge (Cyperus rotundus) are two noxious C4 weeds of maize crop causing extensive yield losses. A two years field experiment was performed to estimate interference of T. portulacastrum and C. rotundus and to evaluate the role of allelopathic water extracts for effective weed management in maize. Five plant water extracts in ten binary combinations were foliar applied in triplicated randomized complete block design. Plots treated with commercial herbicide atrazine and weedy check (control), were also maintained for comparison. The highest density of both weed species was observed at 45 days after sowing (DAS) while weed dry biomass was higher at 60 DAS. Binary combination of sorghum-sunflower depicted greater suppression for weed density, dry biomass and persistence index (88-92% for T. portulacastrum and 65-81% for C. rotundus) as compared with weedy check. This treatment combination has also recorded an enhancement of 125% in crop resistance index, 84% in leaf area index and 41% in crop growth rate at 60-75 DAS thus, leading to 51% improvement in grain yield. Binary combination of sunflower-brassica returned maximum marginal net benefit, while sorghum-maize combination anticipated the peak value for marginal rate of return. Along with the effective weed management and higher yield, sorghum-sunflower documented the maximum net economic benefits among different plant extract combinations therefore, suggesting that exogenous application of sorghum-sunflower extract can be effectively used for controlling these weeds in maize field.

Foram estudados os efeitos fitotóxicos da planta daninha invasora Parthenium hysterophorus, por meio de extratos aquosos de plantas integrais, folhas e raízes em concentrações de 0, 2,5, 5,0, 7,5 e 10% (w/v), sobre a germinação e o crescimento inicial de plântulas de trigo e canola. Foram realizados estudos tanto em placas de Petri com papel-filtro quanto em substrato colocado em condições controladas e vasos de plástico cheios de solo colocados em ambientes abertos. Variação pronunciada foi observada na atividade fitotóxica de diferentes partes da planta Parthenium, nas concentrações de extrato aquoso, na espécie de teste e nas técnicas de bioensaio. Extratos aquosos de Parthenium inibiram ou retardaram a germinação e o crescimento suprimido de plântulas das espécies de teste, em relação ao controle. Para ambas as espécies de teste, todos os atributos de germinação foram suprimidos em uma extensão maior em placas de Petri do que em vasos de plástico. Os extratos de folhas foram mais supressivos à germinação de espécies de teste do que as plantas integrais e os extratos de raízes. O aumento da concentração do extrato além de 2,5% causou redução significativa na biomassa seca de plântulas nas duas espécies de teste. O extrato aquoso de Parthenium diminuiu os teores de clorofila em trigo e canola em 32-63% e 29-69%, respectivamente. No entanto, aumentos de 9-172% e 22-60% em conteúdo fenólico de trigo e canola foram registrados. A canola pareceu ser mais suscetível do que o trigo a todas as concentrações do extrato. Concluiu-se que bioensaios realizados sob condições controladas, utilizando papel-filtro como substrato, podem ser enganosos devido à sobrestimação da resposta alelopática e variação no potencial das espécies receptoras e doadoras. Além disso, isso sugere que os limites de concentrações de aleloquímicos para as espécies de teste em placas de Petri raramente são atingidos em condições de campo.

Phytotoxic effects of invasive weed Parthenium hysterophorus were studied by using whole plant, leaf and root aqueous extracts at 0, 2.5, 5.0, 7.5 and 10% (w/v) concentrations against germination and early seedling growth of wheat and canola. Studies were carried out both in Petri plates with filter paper as substratum placed in controlled conditions and soil-filled plastic pots placed in open environments. Pronounced variation was noted for phytotoxic activity of different plant parts of parthenium, aqueous extract concentrations, test species, and bioassay techniques. Aqueous parthenium extracts either inhibited or delayed the germination and suppressed seedling growth of test species over control. For both test species, all the germination attributes were suppressed to a greater extent in Petri plates than in plastic pots. Leaf extracts were more suppressive to germination of test species than whole plant and root extracts. Increasing extract concentration beyond 2.5% caused significant reduction in seedling dry biomass of both test species. Aqueous parthenium extract diminished chlorophyll contents of wheat and canola by 32-63% and 29 69%, respectively. Nevertheless, an increase of 9-172% and 22-60% in phenolic contents of wheat and canola was recorded. Canola appeared to be more susceptible than wheat at all extract concentrations. Present study concluded that bioassays conducted under controlled condition using filter paper as substratum may be misleading due to over estimation of allelopathic response and variation in potential of receiver and donor species. Furthermore, it implies that threshold concentrations of allelochemicals for test species in Petri plates are rarely reached under field conditions.

Schiff bases, 2-{[(2-hydroxyphenyl)methylidene]amino}phenol (4) and 2-{[3-4-(dimethylamino)phenyl-2-propenylidene]amino}phenol (5), have been synthesized by the condensation of 2-aminophenol (1) with 2-hydroxybenzaldehyde (2) and 4-dimethylaminocinnamaldehyde (3), respectively. They showed good lipoxygenase inhibition and antioxidant activities, as compound 4 showed potent antioxidant activity. The products also showed good activities against Gram-positive: S. intermedius, B. subtilis and S. aureus, and Gram-negative: E. coli and S. typhi bacteria, as compounds 5 and 4 are excellent active against B. subtilis and S. typhi, respectively. These good to potent activities may be due to the presence of free hydroxyl and amino groups. They showed non-significant urease inhibition activity.