Resumo Acacia modesta (AM) e Opuntia monocantha (OM) estão distribuídas no Paquistão, Afeganistão e Índia. Ambas as plantas têm propriedades farmacológicas diferentes. Este estudo foi desenhado para avaliar o potencial anticancerígeno de Acacia modesta (AM) e Opuntia monocantha (OM). A linha celular de câncer de fígado HepG2 foi usada para avaliação da atividade anticâncer. Para a avaliação dos efeitos antiproliferativos, a viabilidade celular e a morte celular em todos os grupos de células foram avaliadas através dos ensaios de MTT, cristal violeta e azul de tripano. Para a avaliação da apoptose foi realizado ELISA de p53. Além disso, o ensaio de LDH para descobrir a capacidade das células malignas de metabolizar o piruvato em lactato e a atividade das enzimas antioxidantes (GSH, CAT e SOD) no final da HPLC foi realizado para encontrar o composto ativo de AM e OM. Citotoxicidade (MTT), ensaios de viabilidade (azul de tripano, viabilidade de cristal, análise MUSE) mostraram mais células mortas e menos células vivas nos grupos tratados com plantas com aumento da concentração. O ensaio de arranhão para o efeito anti-migratório dessas plantas mostrou que os grupos tratados não têm capacidade de cicatrizar arranhão/ferida. ELISA de p53 para apoptose celular mostrou maior liberação de p53 nos grupos tratados. Ensaio antioxidante via glutationa (GSH), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) mostrou menor potencial antioxidante nos grupos de câncer tratados. O ensaio de LDH mostrou mais liberação de lactato desidrogenase nos grupos tratados em comparação com os não tratados. A análise de HPLC mostrou a presença de fitoquímicos como esteróides, alcalóides, fenóis, flavonóides, saponinas, taninos, antraquinona e aminoácidos nos extratos vegetais AM e OM. Com base em todos esses achados, pode-se concluir que os extratos etanólicos de Acacia modesta e Opuntia monocantha apresentam potencial anticancerígeno promissor.

Abstract Acacia modesta (AM) and Opuntia monocantha (OM) are distributed in Pakistan, Afghanistan and India. Both of these plants have different pharmacological properties. This study was designed to evaluate anticancer potential of Acacia modesta (AM) and Opuntia monocantha (OM). Liver cancer cell line HepG2 was used for assessment of anticancer activity. For the evaluation of anti-proliferative effects, cell viability and cell death in all groups of cells were evaluated via MTT, crystal violet and trypan blue assays. For the evaluation of apoptosis ELISA of p53 performed. Furthermore, LDH assay to find out the ability of malignant cells to metabolize pyruvate to lactate and antioxidant enzymes activity (GSH, CAT and SOD) at the end HPLC was performed to find active compound of AM and OM. Cytotoxicity (MTT), Viability assays (trypan blue, crystal viability, MUSE analysis) showed more dead, less live cells in plant treated groups with increase of concentration. Scratch assay for the anti-migratory effect of these plants showed treated groups have not ability to heal scratch/wound. ELISA of p53 for cellular apoptosis showed more release of p53 in treated groups. Antioxidant assay via glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) showed less anti-oxidative potential in treated cancer groups. LDH assay showed more lactate dehydrogenase release in treated groups compared with untreated. HPLC analysis showed the presence of phytochemicals such as steroids, alkaloids, phenols, flavonoids, saponins, tannins, anthraquinone and amino acids in AM and OM plant extracts. Based on all these findings, it can be concluded that ethanolic extracts of Acacia modesta and Opuntia monocantha have promising anti-cancer potential.

Resumo No presente estudo, diferentes níveis de alimentação da dieta formulada com Moringa oleifera foram comparados para analisar o desempenho de crescimento, taxa de conversão alimentar, eficiência de conversão alimentar e microbiologia intestinal de Oreochromis niloticus. O estudo foi composto por quatro grupos de tratamento, incluindo 4%, 8% e 12% de Moringa oleifera e um grupo de controle sem folhas de Moringa. O ensaio experimental foi realizado no laboratório de Zoologia do Instituto de Ciências Aplicadas e Sociais do Paquistão (PIASS), Kasur. Os parâmetros físico-químicos da água como temperatura, oxigênio dissolvido, pH, sólidos totais dissolvidos e salinidade em todos os aquários foram encontrados não significativamente diferentes entre si. Na condição controle T1, o ganho médio de peso foi de 14,89±16,90a gramas, enquanto o ganho médio de comprimento foi de 11,52±7,444a cm. No entanto, a contagem total viável em azul de metileno de eosina foi de 7,4×107, 5,8×107 em ágar de soja Tryptic e 5,8×107 em ágar Nutriente. Em T2, o ganho médio de peso foi de 16,22±16,09b gramas e o ganho médio de comprimento foi de 12,97±7,79b cm. A contagem total viável em azul de metileno de eosina foi 7×107, 5,5×107 em ágar de soja Tryptic e 5,8×107 em ágar Nutriente. Em T3, o ganho médio de peso foi de 37,88±27,43c gramas, enquanto o ganho médio de comprimento foi registrado como 16,48±12,56c cm. No entanto, a contagem total viável para o tratamento 3 foi de 6,4×10 em azul de metileno de eosina, 4,8×107 em ágar soja Tryptic e 5,2×107 em ágar Nutriente. Em T4, o ganho médio de peso foi de 44,22±31,67d gramas, enquanto o ganho médio de comprimento foi de 15,25±10,49d cm. A contagem total viável foi de 4,3×107 em Eosin metileno blue, 3,1×107 em Tryptic soy agar e 3,8×107 em Nutrient agar. O efeito da Moringa oleifera no crescimento de Oreochromis niloticus foi significativo e o extrato de Moringa a 12% apresentou ganho máximo de comprimento e peso e conversão alimentar mínima com a menor contagem microbiana no intestino dos peixes.

Abstract In current study, different feeding levels of Moringa oleifera formulated diet was compared to analyze the growth performance, feed conversion ratio, feed conversion efficiency and gut microbiology of Oreochromis niloticus. The study was comprised of four treatment groups including 4%, 8% and 12% Moringa oleifera and one control group which was devoid of Moringa leaves. The experimental trial was conducted at the Zoology laboratory of Pakistan Institute of Applied and Social Sciences, (PIASS) Kasur. The physicochemical parameters of water such as temperature, dissolve oxygen, pH, total dissolved solids and salinity in all aquaria were found non-significantly different from each other. In control condition T1, the average weight gain was 14.89±16.90a grams, while average length gain was 11.52±7.444a cm. However, the total viable count on Eosin methylene blue was 7.4×107, 5.8×107 on Tryptic soy agar and 5.8×107on Nutrient agar. In T2, the average weight gain was 16.22±16.09b grams and average length gain was 12.97±7.79b cm. The total viable count on Eosin methylene blue was 7×107, 5.5×107 on Tryptic soy agar and 5.8×107on Nutrient agar. In T3, the average weight gain was 37.88±27.43c grams, while the average length gain was recorded as 16.48±12.56c cm. However, the total viable count for treatment 3 was 6.4×10 on Eosin methylene blue, 4.8×107 on Tryptic soy agar and 5.2×107on Nutrient agar. In T4, the average weight gain was 44.22±31.67d grams, while the average length gain was 15.25±10.49d cm. The total viable count was 4.3×107on Eosin methylene blue, 3.1×107 on Tryptic soy agar and 3.8×107 on Nutrient agar. The effect of Moringa oleifera on the growth of Oreochromis niloticus was found to be significant and 12% Moringa extract showed maximum length and weight gain and minimum feed conversion ratio with the least microbial count in fish intestine.

Resumo Surtos frequentes do vírus da gripe aviária H9N2 no Paquistão revelaram que esse subtipo se tornou endêmico na avicultura e, além das perdas econômicas, representa uma ameaça à saúde pública. O presente estudo descreve a caracterização molecular e as alterações patológicas em frangos de corte naturalmente infectados com a atual cepa H9N2 e sua dinâmica filogenômica. Neste estudo, amostras de tecidos (traqueia, pulmões, rim e intestino) de 100 lotes comerciais de frangos foram coletadas de julho de 2018 a agosto de 2019. As amostras foram submetidas à detecção molecular, filogenia e posterior exame patológico. O comprimento completo do gene HA foi amplificado com sucesso em cinco amostras. O sequenciamento de nucleotídeos revelou amostras positivas colocadas em um clado pertencente à sublinhagem B2 do genótipo G1 e categorizado como LPAIV com base na sequência de aminoácidos do gene da hemaglutinina (HA) no local de clivagem (PAKSSR/G). A análise genética do gene da HA revelou: nt = 80,5%-99,5%; aa = 83,8%-98,9% de homologia com cepas de H9N2 relatadas anteriormente no Paquistão e em países vizinhos (A/Quail/Hong Kong/G1/97). As lesões macroscópicas incluíram aerossaculite leve, hemorragias leves, congestão difusa e exsudato purulento na mucosa traqueal, cilindro fibrinonecrótico no lúmen da traqueia e congestão pulmonar leve. As alterações histopatológicas incluíram descamação de células epiteliais, infiltração de células inflamatórias na traqueia, infiltração de células mononucleares (MNCs), congestão pulmonar e exsudato no lúmen dos parabrônquios, congestão peritubular nos rins com degeneração das células epiteliais tubulares, alterações degenerativas nas células epiteliais das vilosidades intestinais e hiperplasia de células caliciformes. A análise imunoistoquímica confirmou a presença do antígeno AIVH9N2 na traqueia, nos pulmões, no rim e no intestino. A microscopia eletrônica revelou alterações ultraestruturais na traqueia, incluindo cílios degenerados, inchaço mitocondrial e retículo endoplasmático aumentado. Com base em todas as análises, o presente estudo revelou a distribuição do vírus H9N2 do genótipo G1 em Punjab, Paquistão, com patogenicidade de leve a moderada.

Abstract Frequent outbreaks of avian influenza H9N2 virus in Pakistan revealed that this subtype has become endemic in the poultry industry and, besides economic losses, poses a threat to public health. The present study describes the molecular characterization and pathological alterations in naturally infected broiler chickens with the current H9N2 field strain and their phylogenomic dynamics. In this study, tissue samples (trachea, lung, kidney and intestine) from 100 commercial chicken flocks were collected from July 2018 to August 2019. Samples were subjected to molecular detection, phylogeny and subsequent pathological examination. The complete length of the HA gene was successfully amplified in five samples. Nucleotide sequencing revealed positive samples placed in a clade belonging to the B2 sub-lineage of the G1 genotype and categorized as LPAIV based on the amino acid sequence of the HA gene at the cleavage site (PAKSSR/G). Genetic analysis of the haemagglutinin (HA) gene revealed nt: 80.5%-99.5%; aa: 83.8%-98.9% homology to H9N2 strains reported previously from Pakistan, neighbouring countries, and (A/Quail/Hong Kong/G1/97). Gross lesions include a slight airsacculitis, mild hemorrhages, diffuse congestion and purulent exudate in tracheal mucosa, fibrinonecrotic cast in the trachea lumen and mild pulmonary congestion. Histopathological alterations include sloughing of epithelial cells and infiltration of inflammatory cells in the trachea, mononuclear cells (MNCs) infiltration, pulmonary congestion and exudate in the lumen of parabronchi, peritubular congestion in the kidneys with degeneration of tubular epithelial cells and degenerative changes in the intestinal villi epithelial cells and goblet cell hyperplasia. Immunohistochemistry analysis confirmed the presence of AIVH9N2 antigen in the trachea, lungs, kidney and intestine. Electron microscopy revealed ultrastructural changes in the trachea, including degenerated cilia, mitochondrial swelling and enlarged endoplasmic reticulum. Based on all essential analysis, the present study revealed the distribution of the H9N2 virus of G1 genotype in Punjab, Pakistan, with mild to moderate pathogenicity.

Resumo O veneno do escorpião contém uma variedade de neurotoxinas que interagem com os canais iônicos e afetam suas atividades. O presente estudo foi desenhado para avaliar o potencial do veneno de escorpião como inibidor da acetilcolinesterase (AChE) usando o Aedes aegypti como organismo modelo. Venenos de duas espécies, Hottentota tamulus (Fabricus, 1798) e Androctonus finitimus (Pocock, 1897) foram selecionados para este estudo. Dois peptídeos (36 kDa de H. tamulus e 54 kDa de A. finitimus) foram separados do veneno de escorpião usando HPLC. Peptídeos selecionados causaram mortalidade significativamente maior em larvas e adultos de Aedes aegypti do que o controle (não foram observadas mortalidades nos grupos controle). O potencial inibitório significativo da acetilcolinesterase (AChE) de ambos os peptídeos foi registrado por espectrofotômetro. O peptídeo de A. finitimus causou mortalidade significativamente maior (95 ± 1,53% em larvas e 100% em adultos) que o peptídeo de H. tamulus (84,33 ± 2,33% em larvas e 95,37 ± 1,45% em adultos). Enquanto o peptídeo de H. tamulus foi mais eficiente na redução da atividade da AChE (0,029 ± 0,012 em larvas e 0,03 ± 0,003 em adultos) do que o peptídeo de A. finitimus (0,049 ± 0,005 em larvas e 0,047 ± 0,001 em adultos). Concluiu-se que o peptídeo do veneno de H. tamulus foi mais eficiente na redução da atividade da AChE, podendo ser um potencial bioinseticida que pode ser sintetizado em escala industrial para o controle de insetos nocivos.

Abstract Scorpion venom contains a variety of neurotoxins which interact with ion channels and affect their activities. The present study was designed to evaluate the potential of scorpion venom as acetylcholinesterase (AChE) inhibitor by using Aedes aegypti as model organism. Venoms of two species, Hottentota tamulus (Fabricus, 1798) and Androctonus finitimus (Pocock, 1897) were selected for this study. Two peptides (36 kDa from H. tamulus and 54 kDa from A. finitimus) were separated from scorpion venom by using HPLC. Selected peptides caused significantly higher mortality in larvae and adults of Aedes aegypti than control (no mortalities were observed in control groups). Significant acetylcholinesterase (AChE) inhibitory potential of both peptides was recorded by spectrophotometer. The peptide of A. finitimus caused significantly higher mortality (95±1.53% in larvae and 100% in adults) than the peptide of H. tamulus (84.33±2.33% in larvae and 95.37±1.45% in adults). While H. tamulus peptide was more efficient in reducing AChE activity (0.029±0.012 in larvae and 0.03±0.003 in adults) than the peptide of A. finitimus (0.049±0.005 in larvae and 0.047±0.001 in adults). It was concluded that H. tamulus venom peptide was more efficiently reducing AChE activity, thus it could be a potential bio-insecticide which can be synthesized at industrial scale for the control of harmful insects.

Resumo O tempo de transplante e o genótipo contribuem para melhorar a produtividade e a qualidade da cultura da berinjela (Solanum melongena L.). Um experimento de campo foi conduzido para investigar o impacto da aplicação foliar de triacontanol (TRIA) e genótipos de berinjela 25919, Nirala, 28389 e Pak-10927, transplantados em 1 de março, 15 de março e 1 de abril de exposição a condições de alta temperatura do ar. O experimento foi realizado de acordo com o Randomized Complete Block Design e os dados foram analisados pelo teste de Tuckey. O TRIA foi aplicado a 10 µM na fase de floração; água destilada foi utilizada como controle. Taxa de fotossíntese e transpiração, condutância estomática, eficiência do uso da água e efeitos sobre as enzimas antioxidantes (superóxido dismutase, catalase e peroxidase) foram avaliados. O TRIA 10 µM aumentou a taxa de fotossíntese e a eficiência do uso da água e o rendimento foi melhorado em todos os genótipos transplantados nas diferentes datas. A aplicação foliar de TRIA 10µM aumentou as atividades das enzimas antioxidantes (SOD, POD e CAT) e melhorou os atributos fisiológicos e bioquímicos de genótipos de berinjela expostos a condições de alto calor. A atividade mais elevada da enzima dismutase 5,41mg / 1g FW foi registrada no genótipo Nirala no segundo transplante. Considerando que o mais baixo foi observado em PAK-10927 (2,30 mg / g FW). A produtividade máxima de frutos foi encontrada no acesso 25919 (1,725 kg por planta) no 1º transplante com Triacontanol, enquanto o acesso PAK-10927 deu a menor produção (0,285 kg por planta) no tratamento de controle no 3º transplante. Genótipo, data de transplante e aplicação de TRIA, melhoramento do crescimento, rendimento e atributos de qualidade sob estresse térmico em berinjela.

Abstract Transplanting time and genotype contribute to improving crop yield and quality of eggplant (Solanum melongena L.). A field experiment was conducted to investigate the impact of foliar applied of triacontanol (TRIA) and eggplant genotypes 25919, Nirala, 28389 and Pak-10927,transplanted on 1 March,15 March, and 1 April on exposure to high air temperature conditions. The experiment was performed according to Randomized Complete Block Design and the data was analyzed by using Tuckey,s test . The TRIA was applied at 10µM at flowering stage; distilled water was used as the control. Rate of photosynthesis and transpiration, stomatal conductance, water use efficiency, and effects on antioxidative enzymes (superoxide dismutase, catalase and peroxidase) were evaluated. The 10µM TRIA increased photosynthesis rate and water use efficiency and yield was improved in all genotypes transplanted at the different dates. Foliar application of 10µM TRIA increased antioxidative enzyme activities (SOD, POD & CAT) and improved physiological as well as biochemical attributes of eggplant genotypes exposed to high heat conditions. Highest activity of dismutase enzyme 5.41mg/1g FW was recorded in Nirala genotype in second transplantation. Whereas, lowest was noted in PAK-10927 (2.30mg/g FW). Maximum fruit yield was found in accession 25919 (1.725kg per plant) at 1st transplantation with Triacontanol, whereas accession PAK-10927 gave the lowest yield (0.285 kg per plant) at control treatment on 3rd transplantation. Genotype, transplanting date and application of TRIA improved growth, yield and quality attributes under of heat stress in eggplant.

Resumo O crescimento das plantas é severamente reduzido devido ao estresse hídrico, afetando a fotossíntese, incluindo a atividade do fotossistema II (PSII) e o transporte de elétrons. Este estudo enfatizou as mudanças comparativas e prioritárias na atividade do PSII devido à seca progressiva em sete populações de Panicum antidotale (P. antidotale) coletadas no Deserto do Cholistão e regiões fora do Cholistão. Perfilhos de igual crescimento de sete populações de P. antidotale cultivadas em vasos de plástico cheios de solo foram submetidos à seca progressiva, retendo a irrigação com água por três semanas. A seca progressiva reduziu o teor de umidade do solo, teor de água relativo nas folhas, pigmentos fotossintéticos e biomassa fresca e seca dos brotos em todas as sete populações. Populações de Dingarh Fort, Dingarh Grassland e Haiderwali tiveram maior crescimento do que as de outras populações. As populações de Cholistani, especialmente em Dingarh Grassland e Haiderwali, apresentaram maior capacidade de ajuste osmótico, refletido pelo potencial osmótico e maior acúmulo de proteínas solúveis totais. H2O2 máximo sob estresse hídrico foi observado em populações de Muzaffargarh e Khanewal, mas estas foram intermediárias no conteúdo de MDA. Sob estresse hídrico, as populações de Muzaffargarh e Dingarh Fort tiveram maior acúmulo de K+ em suas folhas. Durante a seca progressiva, as populações não cholistanesas mostraram rolagem completa das folhas após 23 dias de seca, e essas populações não conseguiram suportar mais condições de estresse hídrico, enquanto as populações cholistani toleraram mais condições de estresse hídrico por 31 dias. Além disso, a seca progressiva causou danos ao PSII após 19 dias e tornou-se severa após 23 dias em populações não cholistanesas de P. antidotale do que em populações cholistanesas.

Abstract Growth of plants is severely reduced due to water stress by affecting photosynthesis including photosystem II (PSII) activity and electron transport. This study emphasised on comparative and priority targeted changes in PSII activity due to progressive drought in seven populations of Panicum antidotale (P. antidotale) collected from Cholistan Desert and non-Cholistan regions. Tillers of equal growth of seven populations of P. antidotale grown in plastic pots filled with soil were subjected progressive drought by withholding water irrigation for three weeks. Progressive drought reduced the soil moisture content, leaf relative water content, photosynthetic pigments and fresh and dry biomass of shoots in all seven populations. Populations from Dingarh Fort, Dingarh Grassland and Haiderwali had higher growth than those of other populations. Cholistani populations especially in Dingarh Grassland and Haiderwali had greater ability of osmotic adjustment as reflected by osmotic potential and greater accumulation of total soluble proteins. Maximum H2O2 under water stress was observed in populations from Muzaffargarh and Khanewal but these were intermediate in MDA content. Under water stress, populations from Muzaffargarh and Dingarh Fort had greater K+ accumulation in their leaves. During progressive drought, non-Cholistani populations showed complete leaf rolling after 23 days of drought, and these populations could not withstand with more water stress condition while Cholistani populations tolerated more water stress condition for 31 days. Moreover, progressive drought caused PSII damages after 19 days and it became severe after 23 days in non-Cholistani populations of P. antidotale than in Cholistani populations.

Herein, a polysaccharide-based hydrogel from seeds of Salvia spinosa (SSH) was evaluated as a pH-responsive, superporous, hemocompatible, non-toxic, and sustained release material. The SSH-based tablets showed pH-dependent swelling (pH 7.4 > 6.8 > 4.5 > 1.2) as well as swelling and de-swelling behavior at pH 7.4 and 1.2, respectively. Sustained release of febuxostat was achieved by mimicking the gastrointestinal tract conditions for 14 h and following the zero-order kinetics and super case-II transport mechanism. Scanning electron microscopy revealed the porous nature of SSH even after compression. SSH was found to be hemocompatible with antioxidant properties. Acute toxicity studies ensured the safety of SSH at a maximum dose level of 2.0 g kg-1 body weight of the animals. SSH was also found as non-irritant to the eye. The histopathology of vital organs did not show any lesions or inflammation. Conclusively, SSH can be considered a safe ingredient for oral, dermal, and ophthalmic formulations.

ABSTRACT Introduction: Repeat transcatheter mitral valve replacement (rTMVR) has emerged as a new option for the management of high-risk patients unsuitable for repeat surgical mitral valve replacement (rSMVR). The aim of this study was to compare hospital outcomes, survival, and reoperations after rTMVR versus surgical mitral valve replacement. Methods: We compared patients who underwent rTMVR (n=22) from 2017 to 2019 (Group 1) to patients who underwent rSMVR (n=98) with or without tricuspid valve surgery from 2009 to 2019 (Group 2). We excluded patients who underwent a concomitant transcatheter aortic valve replacement or other concomitant surgery. Results: Patients in Group 1 were significantly older (72.5 [67-78] vs. 57 [52-64] years, P<0.001). There was no diference in EuroSCORE II between groups (6.56 [5.47-8.04] vs. 6.74 [4.28-11.84], P=0.86). Implanted valve size was 26 (26-29) mm in Group 1 and 25 (25-27) mm in Group 2 (P=0.106). There was no diference in operative mortality between groups (P=0.46). However, intensive care unit (ICU) and hospital stays were shorter in Group 1 (P=0.03 and <0.001, respectively). NYHA class improved significantly in both groups at one year (P<0.001 for both groups). There was no group effect on survival (P=0.84) or cardiac readmission (P=0.26). However, reoperations were more frequent in Group 1 (P=0.01). Conclusion: Transcatheter mitral valve-in-valve could shorten ICU and hospital stay compared to rSMVR with a comparable mortality rate. rTMVR is a safe procedure; however, it has a higher risk of reoperation. rTMVR can be an option in selected high-risk patients.

Abstract The present study was designed to evaluate functional potential of Aloe vera juice against (CCl4 induced) hepatotoxicity using animal model. Biochemical analyses including liver, renal enzymes, bone biomarkers and lipid profile were conducted after 4 weeks of oral Aloe vera juice administration. Liver enzymes, AST, ALP and total bilirubin were reduced up to 15-7%, 60-32.52% and 29-48%, respectively in Aloe vera juice treated rats i.e., 10 mL/kg and 20 mL/kg doses. Reduction in serum cholesterol (8%), LDL (12%) and triglycerides (15%) were observed. Urea was significantly reduced up to 11% which further reduced up to 30% at higher dose. Increased content of serum proteins (23-50%) and albumin (40-116%) were found at the different doses. Vitamin D was found maximum in G4 i.e., 38.63 mg/dL as compared to lowest i.e., 5.12 mg/dL in G2, similarly improvement in calcium i.e., 11-22% was observed in G3 and G4. The serum oxidative stress markers indicated raised superoxide dismutase (9%), glutathione (15%), catalase (9%) and reduced lipid peroxidation 78% at higher concentration of Aloe vera juice consumption. In addition, histological evaluation also depicted positive impact on hepatic and renal portfolio in all treated rats. All of the findings enlighten the potential of Aloe vera juice as a functional beverage.

Abstract Cobalt metal is considered as an essential trace element for the animals. Present investigation was undertaken in the peri-urban area to analyze the cobalt availability in animal food chain by using different indices. Cow, buffalo and sheep samples along with forage and soil samples were collected from the three different sites of District Jhang and analyzed through atomic absorption spectrophotometer. Cobalt values differed in soil samples as 0.315-0.535 mg/kg, forages as 0.127-0.333 mg/kg and animal samples as 0.364-0.504 mg/kg. Analyzed cobalt concentration in soil, forage and animal samples was found to be deficient in concentration with respect to standard limits. Soil showed the minimum cobalt level in Z. mays while maximum concentration was examined in the forage C. decidua samples. All indices examined in this study has values lesser than 1, representing the safer limits of the cobalt concentration in these samples. Enrichment factor (0.071-0.161 mg/kg) showed the highly deficient amount of cobalt enrichment in this area. Bio-concentration factor (0.392-0.883) and pollution load index (0.035-0.059 mg/kg) values were also lesser than 1 explains that plant and soil samples are not contaminated with cobalt metal. The daily intake and health risk index ranged from 0.00019-0.00064 mg/kg/day and 0.0044-0.0150 mg/kg/day respectively. Among the animals, cobalt availability was maximum (0.0150 mg/kg/day) in the buffaloes that grazed on the C. decidua fodder. Results of this study concluded that cobalt containing fertilizers must be applied on the soil and forages. Animal feed derived from the cobalt containing supplements are supplied to the animals, to fulfill the nutritional requirements of livestock.

Resumo O metal cobalto é considerado um oligoelemento essencial para os animais. A presente investigação foi realizada na área periurbana para analisar a disponibilidade de cobalto na cadeia alimentar animal usando diferentes índices. Amostras de vacas, búfalos e ovelhas, juntamente com amostras de forragem e solo foram coletadas em três locais diferentes do Distrito Jhang e analisadas por meio de espectrofotômetro de absorção atômica. Os valores de cobalto diferiram em amostras de solo como 0,315-0,535mg/kg, forragens como 0,127-0,333 mg/kg e amostras de animais como 0,364-0,504 mg/kg. A concentração de cobalto analisada no solo, forragem e amostras de animais foi considerada deficiente em relação aos limites padrão. O solo apresentou o teor mínimo de cobalto em Z. mays enquanto a concentração máxima foi examinada nas amostras de forragem C. decidua. Todos os índices examinados neste estudo possuem valores menores que 1, representando os limites mais seguros da concentração de cobalto nestas amostras. O fator de enriquecimento (0,071-0,161 mg/kg) mostrou a quantidade altamente deficiente de enriquecimento de cobalto nesta área. Os valores do fator de bioconcentração (0,392-0,883) e do índice de carga de poluição (0,035-0,059 mg/kg) também foram menores que 1, o que explica que as amostras de plantas e solo não estão contaminadas com cobalto metálico. A ingestão diária e o índice de risco à saúde variaram de 0,00019-0,00064 mg/kg/dia e 0,0044-0,0150 mg/kg/dia, respectivamente. Entre os animais, a disponibilidade de cobalto foi máxima (0,0150 mg/kg/dia) nos búfalos que pastaram na forragem de C. decidua. Os resultados deste estudo concluíram que fertilizantes contendo cobalto devem ser aplicados no solo e nas forragens. A ração animal derivada dos suplementos contendo cobalto é fornecida aos animais, para atender às necessidades nutricionais do gado.

ABSTRACT Aspergillus fumigatus is a respiratory pathogen, which has the potential to cause brooder pneumonia in poultry chicks and aspergillosis in birds and farmers. Frequent and irrational use of antifungals has led to the development of resistance in the fungal species. The present study aimed to evaluate the antifungal activity of essential oils (EOs) from four different spices against multi-drug resistant (MDR) A. fumigatus isolated from 40 poultry feed samples. Twenty fungal isolates were identified to be A. fumigatus based on the macroscopic and microscopic characteristics, which were confirmed by targeting and amplifying the species-specific rodA gene (313 bp). Five (5/20) isolates were found to be MDR by the disk diffusion method. EOs were tested as an alternative strategy for 5 MDR isolates of A. fumigatus. Clove EO provided better activity by 6 log10 reduction for 30-90 min exposure as compared to other EOs, therefore, shortlisted for well-diffusion and minimum inhibitory concentration (MIC) method. Clove EO provided promising results as compared to fluconazole, amphotericin B, ketoconazole, nystatin and voriconazole as its mean ZOI (39.6 ± 6.34) were better than all other commercial antifungals (p< 0.001). Mean MIC was reported to be 0.195 ± 0.11 µl/ml. Safety testing of the EO produced 74-82% cell viability for the range of 0.390 - 0.097 µl/ml as compared to DMSO. Findings of the present study highlight that clove EO can be source of a good therapeutic agent for infections of MDR isolates of A. fumigatus.

RESUMO Aspergillus fumigatus é um patógeno respiratório, que tem o potencial de causar pneumonia incubadora em pintos e aspergilose em aves e criadores. O uso frequente e irracional de antifúngicos tem levado ao desenvolvimento de resistência nas espécies fúngicas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antifúngica de óleos essenciais (OEs) de quatro diferentes especiarias contra A. fumigatus multirresistente (MDR) isolado de 40 amostras de ração de aves. Vinte isolados fúngicos foram identificados como A. fumigatus com base nas características macroscópicas e microscópicas, que foram confirmadas pelo direcionamento e amplificação do gene rodA espécie-específico (313 pb). Cinco (5/20) isolados foram considerados MDR pelo método de difusão em disco. OEs foram testados como uma estratégia alternativa para 5 isolados MDR de A. fumigatus. Clove EO forneceu melhor atividade por redução de 6 log10 para exposição de 30-90 min em comparação com outros OEs, portanto, pré-selecionado para difusão e método de concentração inibitória mínima (MIC). Clove EO forneceu resultados promissores em comparação com fluconazol, anfotericina B, cetoconazol, nistatina e voriconazol, com ZOI médio (39,6 ± 6,34) melhor do que todos os outros antifúngicos comerciais (p < 0,001). A MIC média foi de 0,195 ± 0,11 µl/ml. O teste de segurança do EO produziu 74-82% de viabilidade celular para a faixa de 0,390 - 0,097 µl/ml em comparação com DMSO. Os resultados do presente estudo destacam que o EO de cravo pode ser fonte de um bom agente terapêutico para infecções de isolados multirresistentes de A. fumigatus.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo A tangerina ‘Kinnow’ (Citrus nobilis L. × Citrus deliciosa T.) é uma importante fruta comercializável do mundo. É o esteio da indústria cítrica no Paquistão, com grande potencial de exportação. Mas, da produção total do país, apenas 10% da produção atendem o padrão internacional de qualidade para exportação. A queda da fruta antes da colheita e a baixa qualidade da fruta podem estar associadas a vários problemas, incluindo a nutrição da planta. A maioria dos agricultores não se preocupa com o fornecimento de micronutrientes que já são deficientes no solo. Além disso, sua mobilidade dentro das plantas também é uma questão. O zinco (Zn) está entre os micronutrientes que afetam a qualidade e a vida pós-colheita da fruta, e sua deficiência em solos paquistaneses já é relatada por diversos pesquisadores. Portanto, este estudo foi realizado para avaliar a influência da aplicação pré-colheita de sulfato de zinco (ZnSO4; 0, 0,4%, 0,6% ou 0,8%) na queda dos frutos na pré-colheita, produtividade e qualidade dos frutos da tangerina ‘Kinnow’ em colheita. Os tratamentos foram aplicados durante o mês de outubro, ou seja, 4 meses antes da colheita. As pulverizações de Zn aplicadas tiveram efeito significativo no rendimento e na qualidade da fruta ‘Kinnow’. Entre as diferentes aplicações foliares de ZnSO4 efetuadas quatro meses antes da colheita, 0,6% de ZnSO4 reduziu significativamente a queda de frutos antes da colheita (10,08%) em comparação com as árvores de controle não tratadas (46,45%). Da mesma forma, número máximo de frutos colhidos por árvore (627), peso do fruto (192,9 g), porcentagem de suco (42,2%), sólidos solúveis totais (9,5 ° Brix), teor de ácido ascórbico (35,5 mg / 100 g-1) e os teores de açúcar (17,4) também foram significativamente maiores com o tratamento com 0,6% de ZnSO4 em comparação com o restante dos tratamentos e o controle. A aplicação foliar de 0,6% de ZnSO4 também melhorou significativamente os antioxidantes totais (TAO) e os teores fenólicos totais (TPC) nas frutas. Em conclusão, a pulverização foliar de ZnSO4 (0,6%) quatro meses antes da colheita reduziu a queda de frutos antes da colheita e aumentou o rendimento com a melhoria da qualidade da fruta tangerina ‘Kinnow’.

Abstract ‘ Kinnow’ mandarin (Citrus nobilis L.× Citrus deliciosa T.) is an important marketable fruit of the world. It is mainstay of citrus industry in Pakistan, having great export potential. But out of total production of the country only 10% of the produce meets the international quality standard for export. Pre-harvest fruit drop and poor fruit quality could be associated with various issues including the plant nutrition. Most of the farmers do not pay attention to the supply of micro nutrients which are already deficient in the soil. Furthermore, their mobility within plants is also a question. Zinc (Zn) is amongst those micronutrients which affect the quality and postharvest life of the fruit and its deficiency in Pakistani soils is already reported by many researchers. Therefore, this study was carried out to evaluate the influence of pre-harvest applications of zinc sulfate (ZnSO4; 0, 0.4%, 0.6% or 0.8%) on pre-harvest fruit drop, yield and fruit quality of ‘Kinnow’ mandarin at harvest. The treatments were applied during the month of October i.e. 4 months prior to harvest. The applied Zn sprays had significant effect on yield and quality of the “Kinnow” fruit. Amongst different foliar applications of ZnSO4applied four months before harvest, 0.6% ZnSO4 significantly reduced pre-harvest fruit drop (10.08%) as compared to untreated control trees (46.45%). Similarly, the maximum number of fruits harvested per tree (627), fruit weight (192.9 g), juice percentage (42.2%), total soluble solids (9.5 °Brix), ascorbic acid content (35.5 mg 100 g-1) and sugar contents (17.4) were also found significantly higher with 0.6% ZnSO4 treatment as compared to rest of treatments and control. Foliar application of 0.6% ZnSO4 also significantly improved total antioxidants (TAO) and total phenolic contents (TPC) in fruit. In conclusion, foliar spray of ZnSO4 (0.6%) four months prior to harvest reduced pre-harvest fruit drop, increase yield with improved quality of ‘Kinnow’ mandarin fruit.

Resumo Durante este estudo de um ano, amostras de sangue e fezes de pombos (Zenaida asiatica), patos (Anas platyrhynchos), pombos (Columba livia), perdizes (Alectoris chukar), perus (Meleagris gallopavo) e ganso (Chen caerulescens) foram coletados para avaliar a prevalência de parasitas nessas aves. As aves foram mantidas no Centro de Conservação e Pesquisa de Aves, Departamento de Vida Selvagem e Ecologia, Universidade de Veterinária e Ciências Animais, Lahore. Todas essas espécies de aves foram mantidas em gaiolas separadas e todo o seu corpo foi inspecionado regularmente para registrar parasitas externos. Para parasitas internos, foram analisadas 100 amostras de sangue e 100 amostras fecais de cada espécie. Durante o presente estudo, duas espécies de ectoparasitas, ou seja, carrapatos de aves (Args persicus) e ácaros (Dermanyssus gallinae), enquanto 17 espécies de endoparasitas, três de sangue e 14 de amostras fecais, foram identificadas. Os parasitas sanguíneos prevalentes foram Plasmodium juxtanucleare, 29,3%, Aegyptinella pullorum, 15%, e Leucoctoyzoon simond, 13%. As espécies parasitas registradas em amostras fecais incluíram 6 espécies de nematoides viz. Syngamus traqueia com prevalência parasitária de 50%, Capillaria anatis, 40%, Capillaria annulata, 37,5%, Heterakis gallinarum, 28,3%, Ascardia galli, 24% e Allodpa suctoria, 2%. Da mesma forma, duas espécies de trematódeos viz. Prosthogonimus ovatus com prevalência parasitária de 12,1% e Prosthogonimus macrorchis, 9,1%, também foram registrados nas amostras fecais das aves. Espécies de cestoide único Raillietina echinobothrida com prevalência parasitária de 27% e 3 espécies de protozoários, ou seja, Eimeria maxima tendo prevalência de 20,1%, Histomonas meleagridis, 8%, e Giardia lamblia, 5,3%, foram registradas. Em nossa recomendação, são indicados medicação adequada e saneamento das casas e gaiolas dos pássaros para evitar parasitas.

Abstract During this one year study, blood and fecal samples of doves (Zenaida asiatica), ducks (Anas platyrhynchos), pigeons (Columba livia), partridges (Alectoris chukar), turkeys (Meleagris gallopavo) and goose (Chen caerulescens) were collected to assess the parasitic prevalence in these birds. The birds were kept at Avian Conservation and Research Center, Department of Wildlife and Ecology, University of Veterinary and Animal Sciences, Lahore. All these avian species were kept in separate cages and their entire body was inspected on regularly basis to record external parasites. For internal parasites, 100 blood and 100 fecal samples for each species were analyzed. During present study, two species of ectoparasites i.e. fowl ticks (Args persicus) and mite (Dermanyssus gallinae) while 17 species of endoparasites; three from blood and 14 from fecal samples were identified. Prevalence of blood parasites was Plasmodium juxtanucleare 29.3%, Aegyptinella pullorum 15% and Leucoctoyzoon simond 13%. Parasitic species recorded from fecal samples included 6 species of nematodes viz. Syngamus trachea with parasitic prevalence of 50%, Capillaria anatis 40%, Capillaria annulata 37.5%, Heterakis gallinarum 28.3%, Ascardia galli 24% and Allodpa suctoria 2%. Similarly, two species of trematodes viz. Prosthogonimus ovatus having parasitic prevalence of 12.1% and Prosthogonimus macrorchis 9.1% were also recorded from fecal samples of the birds. Single cestode species Raillietina echinobothrida having parasitic prevalence of 27% and 3 protozoan species i.e. Eimeria maxima having prevalence 20.1%, Histomonas meleagridis 8% and Giardia lamblia 5.3% were recorded. In our recommendation, proper medication and sanitation of the bird’s houses and cages is recommended to avoid parasites.

Resumo Um ensaio nutricional de 90 dias foi dirigido para explorar os efeitos do cromo dietético na composição corporal, atividade enzimática intestinal e estado fisiológico de Cirrhinus mrigala usando milho G & NG. Seis dietas experimentais foram preparadas usando diferentes níveis de cloreto de cromo hexa-hidratado (0, 0,2, 0,4 mg/kg, cada um com milho G e NG). Para este ensaio experimental, 480 alevinos, independentemente do sexo, foram distribuídos em seis aquários, cada um com réplicas. Os resultados revelaram que o milho gelatinizado, juntamente com o aumento do nível de Cr2Cl3.6H2O, tem um impacto positivo na composição corporal dos peixes. A hematologia foi positivamente correlacionada com a suplementação de cloreto de cromo hexa-hidratado em milho gelatinizado. A enzima amilase intestinal também apresentou aumento significativo (P <0,05) no grupo alimentado com dieta suplementada com cloreto de cromo hexa-hidratado (milho G). No entanto, o milho com suplementação de hexahidrato de cloreto de cromo não revelou nenhum impacto significativo na atividade da enzima protease intestinal. Desses resultados, pode-se concluir que tanto o cloreto de cromo hexa-hidratado quanto o milho gelatinizado na alimentação de peixes são muito benéficos para melhorar a composição corporal, a atividade de enzimas e o estado fisiológico de saúde dos peixes.

Abstract A ninety days nutritional trial was directed to explore the effects of dietary chromium on body composition, gut enzyme activity and physiological status of Cirrhinus mrigala by using G & NG corn. Six experimental diets were prepared by using different levels of chromium chloride hexahydrate (0, 0.2, 0.4 mg/kg, each with G & NG corn). For this experimental trial, 480 fingerlings, irrespective of sex were distributed in six aquariums each with replicate. Results revealed that gelatinized corn along with increasing level of Cr2Cl3.6H2O have a positive impact upon body composition of fish. Hematology was positively correlated with chromium chloride hexahydrate supplementation in gelatinized corn. Amylase gut enzyme also showed significant (P<0.05) increase in group fed with chromium chloride hexahydrate supplemented diet (G corn). However, corn with chromium chloride hexahydrate supplementation did not revealed any significant impact on gut protease enzyme activity. From these results it can be concluded that both chromium chloride hexahydrate and gelatinized corn in fish feed are very beneficial to improve body composition, enzymes activity and physiological health status of fish.