Resumo Os antioxidantes são materiais que eliminam ou removem os radicais livres dos sistemas vivos. O processo de oxidação termina na produção de radicais livres. Esses radicais livres são o principal local de nascimento das células cancerosas. Os agentes antioxidantes removem os intermediários dos radicais livres ao encerrar os processos de oxidação ao serem eles próprios oxidados. Por outro lado, as doenças infecciosas afetam o mundo em grande escala. Para combater essas doenças, diversos compostos sintéticos têm sido utilizados. Os medicamentos à base de plantas desempenham um papel importante a este respeito. Assim, o objetivo da pesquisa atual é investigar o efeito antibacteriano e antioxidante do extrato da casca da raiz de Berberis lycium Royle (BLR). Berberis lycium Royle foi utilizado para análises fitoquímicas e também como agentes antimicrobianos e antioxidantes. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de difusão em ágar em poço. A partir do estudo atual, observou-se que o BLR era rico em fitoquímicos e tóxico contra bactérias patogênicas testadas. BLR apresentou maior atividade contra S. pyogenes (13,3 ± 0,8 mm). A menor atividade antibacteriana foi relatada contra E. coli (0 ± 0 mm). No caso de concentração inibitória mínima, observou-se que BLR com concentração de 10 μg / mL apresentou maior atividade, enquanto BLR 2,5 μg / mL apresentou menor atividade inibitória. A maior atividade antioxidante in vitro foi registrada como 65% a 100 µg / mL. No caso do nível de atividade antioxidante in vivo de CAT, GSH e SOD diminuiu, enquanto o de MDA aumentou nos grupos tratados com CCl4 em comparação com o grupo controle. O tratamento com extrato de BLR reverteu todas essas mudanças significativamente. Os resultados atuais indicam que o BLR é eficaz contra patógenos bacterianos e também tem atividade antioxidante.

Abstract Antioxidants are materials that scavenge or remove free radicals from living systems. The oxidation process ends in the production of free radicals. These free radicals are the chief birthplace of cancerous cells. Antioxidizing agents remove free radical intermediates by terminating oxidation processes by being oxidized themselves. On the other hand, infectious diseases affect the world on a large scale. To fight these diseases several synthetic compounds have been used. Plant based medications play important role in this regard. So, the current research aimed to investigate the antibacterial and antioxidant effect of Berberis lycium Royle root bark (BLR) extract. Berberis lycium Royle was used for phytochemical analysis and also as antimicrobial and antioxidant agents. The antimicrobial activity was evaluated by the agar well diffusion method. Current study revealed that BLR was rich in phytochemicals and toxic against tested pathogenic bacteria. BLR showed the highest activity against S. pyogenes (13.3±0.8 mm). The lowest antibacterial activity was reported against E. coli (0±0 mm). In case of minimum inhibitory concentration, it was observed that BLR with 10 μg/mL concentration showed the highest activity while 2.5 μg/mL of BLR showed the least inhibitory activity. The highest In vitro antioxidant activity was recorded as 65% at 100 µg/mL. In case of in vivo antioxidant activity level of CAT, GSH and SOD were decreased while that of MDA was enhanced in groups treated with CCl4 as compared to the control group. BLR extract treatment reversed all these changes significantly. Current results indicate that BLR is effective against bacterial pathogens and also has antioxidant potential.

Resumo Nigella sativa é conhecida pelo perfil de segurança, contendo uma grande variedade de compostos antivirais úteis. A principal protease (Mpro, 3CLpro) da síndrome respiratória aguda grave 2 (SARS-CoV-2) está sendo considerada como um dos alvos virais mais atraentes, processando as poliproteínas durante a patogênese e replicação viral. Na presente investigação analisamos a potência do componente ativo, timoquinona (TQ) de Nigella sativa contra SARS-CoV-2 Mpro. As estruturas de TQ e Mpro foram recuperadas de PubChem (CID10281) e Protein Data Bank (PDB ID 6MO3), respectivamente. O Mpro e o TQ foram acoplados e o complexo foi submetido a simulações de dinâmica molecular (MD) por um período de 50ns. O efeito de dobramento de proteínas foi analisado usando o raio de giração (Rg) enquanto a estabilidade e a flexibilidade foram medidas usando a raiz quadrada média dos desvios (RMSD) e a raiz média quadrada da flutuação (RMSF), respectivamente. Os resultados da simulação mostram que o TQ está exibindo boa atividade de ligação contra o SARS-CoV-2 Mpro, interagindo em muitos resíduos presentes no sítio ativo (His41, Cys145) e também o Glu166, facilitando o formato da bolsa. Além disso, são necessárias abordagens experimentais para validar o papel do TQ contra a infecção pelo vírus. O TQ está interferindo nos resíduos de manutenção do bolso, bem como no sítio ativo do vírus Mpro, que pode ser usado como um potencial inibidor contra o SARS-CoV-2 para um melhor gerenciamento da Covid-19.

Abstract Nigella sativa is known for the safety profile, containing a wealth of useful antiviral compounds. The main protease (Mpro, 3CLpro) of severe acute respiratory syndrome 2 (SARS-CoV-2) is being considered as one of the most attractive viral target, processing the polyproteins during viral pathogenesis and replication. In the current investigation we analyzed the potency of active component, thymoquinone (TQ) of Nigella sativa against SARS-CoV-2 Mpro. The structures of TQ and Mpro was retrieved from PubChem (CID10281) and Protein Data Bank (PDB ID 6MO3) respectively. The Mpro and TQ were docked and the complex was subjected to molecular dynamic (MD) simulations for a period 50ns. Protein folding effect was analyzed using radius of gyration (Rg) while stability and flexibility was measured, using root means square deviations (RMSD) and root means square fluctuation (RMSF) respectively. The simulation results shows that TQ is exhibiting good binding activity against SARS-CoV-2 Mpro, interacting many residues, present in the active site (His41, Cys145) and also the Glu166, facilitating the pocket shape. Further, experimental approaches are needed to validate the role of TQ against virus infection. The TQ is interfering with pocket maintaining residues as well as active site of virus Mpro which may be used as a potential inhibitor against SARS-CoV-2 for better management of COVID-19.

RESUMO O germoplasma local e exótico do tomate continua sendo uma importante fonte de melhoramento genético. A avaliação de linhagens para estresses bióticos, particularmente as doenças virais, é o critério mais importantes para seleção no Paquistão, onde o vírus da folha amarela do tomate (TYLCV) e o vírus do mosaico do tomateiro (ToMV) são as principais doenças/vírus. Um conjunto de 40 acessos (incluindo linhagens indígenas do Paquistão e germoplasma exótico da Europa, dos Estados Unidos e da Ásia) foi avaliado quanto à resistência/resposta à infecção ao ToMV com inoculação artificial em casa de vegetação. A resposta à infecção foi quantificada por meio de pontuação da doença e de teste DAS-ELISA (para ToMV). Um subconjunto de 24 linhas foi posteriormente rastreado para TYLCV usando pontuação de doença e TAS-ELISA. As linhas testadas apresentaram variabilidade significativa para resistência ao ToMV. Apenas um acesso (Acc-17878) foi resistente ao ToMV, enquanto sete acessos (Acc-17890, AVR-261, CLN-312, AVR-321, EUR-333, CLN-352 e CLN-362) expressaram resistência ao TYLCV. A correlação entre a avaliação fenotípica foi confirmada pelos resultados do ELISA nas duas doenças, embora ambas as ferramentas tenham se complementado para avaliar o estado da infecção viral. No futuro, os programas de melhoramento de tomate devem considerar aperfeiçoamentos para resistência ao ToMV e TYLCV (usando germoplasma identificado em nosso estudo) de modo a fornecer variedades de tomate resistentes a vírus.

Abstract Local and exotic germplasm of tomato remains a major source for genetic improvement. Assessment of such lines for biotic stresses particularly viral diseases are the most important criteria for selection in Pakistan, where Tomato Yellow Leaf Curl Virus (TYLCV) and Tomato Mosaic Virus (ToMV) are the major diseases/viruses. A set of 40 accessions (including indigenous Pakistani lines and exotic germplasm from Europe, the United States, and Asia) were evaluated for their resistance/infection response to ToMV with artificial inoculation under greenhouse conditions. Infection response was quantified through disease scoring and DAS-ELISA test (for ToMV). A subset of 24 lines, was further screened for TYLCV using disease scoring and TAS-ELISA. The tested lines showed significant variability for resistance to ToMV. Only one accession (Acc-17878) was resistant to the ToMV whereas seven accessions i.e. Acc-17890, AVR-261, CLN-312, AVR-321, EUR-333, CLN-352, and CLN-362 expressed resistance to TYLCV. Correlation between phenotypic evaluation was confirmed by the ELISA results in both diseases, although both tools complemented to assess the viral infection status. In future, tomato breeding programs must consider breeding for ToMV and TYLCV resistance (using identified germplasm in our study) so as to deliver virus resistant tomato varieties.

Resumo A Escherichia coli patogênica aviária (APEC) induz a colibacilose, uma doença aguda e sistêmica, resultando em perdas econômicas substanciais no setor avícola. Este estudo teve como objetivo investigar o padrão de resistência a antibióticos associado à frequente distribuição de genes de virulência em APEC O78:K80 que podem causar alterações patológicas em galinhas. O perfil do antibiograma mostrou alta resistência à eritromicina, cloranfenicol, tetraciclina, ampicilina e cotrimoxazol; resistência intermediária à ciprofloxacina, levofloxacina, enrofloxacina, norfloxacina, nitrofurantoína e cloridrato de doxiciclina; e sensível à amicacina, estreptomicina, gentamicina e colistina . A distribuição de genes de virulência identificou oito genes (irp-2, iutA, ompT, iss, iucD, astA, hlyF e iroN) por meio de uma reação em cadeia da polimerase convencional. A APEC O78:K80 causou concentrações significativamente altas de enzimas hepáticas, níveis séricos de interleucina-6 e fator de necrose tumoral alfa em aves experimentais. Além disso, aves infectadas apresentaram hipoproteinemia, hipoalbuminemia e hiperglobulinemia. O exame de necropsia revelou peri-hepatite e pericardite fibrinosa, pulmões congestos, hemorragias equimóticas do intestino e granulomatose necrosante do baço. O exame histopatológico mostrou degeneração hepatocelular, necrose miocárdica, nefrite intersticial, hemorragias intestinais e linfopenia no baço. Este estudo é a primeira evidência para avaliar o perfil de resistência a antibióticos associado a genes de virulência e potencial clínico-patológico de APEC O78:K80 em galinhas no Paquistão, o que pode ser uma abordagem útil e rápida para prevenir e controlar a doença por meio do desenvolvimento de estratégias de controle.

Abstract Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) induces colibacillosis, an acute and systemic disease, resulting in substantial economic losses in the poultry sector. This study aimed to investigate the antibiotic resistance pattern associated with frequent virulence gene distribution in APEC O78:K80 that may cause pathological alterations in chickens. The antibiogram profile showed high resistance to erythromycin, chloramphenicol, tetracycline, ampicillin, and co-trimoxazole, followed by intermediate resistance to ciprofloxacin, levofloxacin, enrofloxacin, norfloxacin, nitrofurantoin, and doxycycline hydrochloride, and sensitive to amikacin, streptomycin, gentamicin, and colistin. Virulence gene distribution identifies eight (irp-2, iutA, ompT, iss, iucD, astA, hlyF, iroN) genes through a conventional polymerase chain reaction. APEC O78:K80 caused significantly high liver enzyme concentrations, serum interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels in experimental birds. Also, infected birds have hypoproteinemia, hypoalbuminemia, and hyperglobulinemia. Necropsy examination revealed fibrinous perihepatitis and pericarditis, congested lungs, intestinal ecchymotic hemorrhages and necrotizing granulomatosis of the spleen. Histopathological examination depicted hepatocellular degeneration, myocardial necrosis, interstitial nephritis, intestinal hemorrhages and lymphopenia in the spleen. This study is the first evidence to assess the antibiotic resistance profile linked with virulence genes and clinicopathological potential of APEC O78:K80 in chickens in Pakistan, which could be a useful and rapid approach to prevent and control the disease by developing the control strategies.

Resumo O protocolo de imersão floral mediado por Agrobacterium é o método de transformação mais amplamente utilizado para uma planta-modelo Arabidopsis thaliana. Existem vários métodos úteis para transformações de Arabidopsis mediados por Agrobacterium tumefaciens, mas são demorados e com baixa eficiência de transformação. Aqui, desenvolvemos uma linha transgênica de Arabidopsis TET12p::TET12-RFP em um curto período de tempo e eficiência de transformação aprimorada usando um método de transformação modificado por meio da aplicação de estresse hídrico após o mergulho floral. Neste protocolo, células de Agrobacterium transportando vetores recombinantes TET12p::TET12-RFP foram ressuspensas em uma solução de 5% de sacarose, 0,05% (v/v) silwet L-77 para transformar gametas femininos de inflorescências de Arabidopsis em desenvolvimento. Arabidopsis tratadas foram então aplicadas com diferentes níveis de estresse hídrico para estimular as plantas a utilizar o máximo de energia da planta no processo de maturação das sementes. Os estresses aplicados alcançaram a rápida maturação das inflorescências já tratadas enquanto paravam o crescimento de inflorescências não tratadas recém-surgidas, diminuindo, assim, as chances de coleta errada de sementes não transformadas. Consequentemente, as sementes coletadas eram principalmente transgênicas, com uma frequência de transformação de pelo menos 10%; portanto, a triagem para seleção dos transformantes positivos foi mais vantajosa em um meio seletivo em comparação com um método clássico de imersão floral. Dentro de 2-3 meses, 200 plantas transgênicas individuais foram produzidas a partir de apenas 10 plantas infiltradas. Este estudo conclui que a aplicação de estresse hídrico em um estágio específico da planta é uma estratégia benéfica para alcançar a Arabidopsis transgênica em um curto período de tempo com alta eficiência de transformação.

Abstract The Agrobacterium-mediated floral dip protocol is the most extensively used transformation method for a model plant Arabidopsis thaliana. Several useful methods for Agrobacterium tumefaciens–mediated transformations of Arabidopsis are existing, but they are time consuming and with low transformation efficiency. Here, we developed a transgenic Arabidopsis lines TET12p::TET12-RFP in a short period of time and enhanced transformation efficiency by using a modified transformation method by applying drought stress after floral dip. In this protocol, Agrobacterium cells carrying TET12p::TET12-RFP recombinant vectors were resuspended in a solution of 5% sucrose, 0.05% (v/v) silwet L-77 to transform female gametes of developing Arabidopsis inflorescences. Treated Arabidopsis were then applied with different levels of drought stresses to stimulate plants for the utilization of maximum plant energy in seed maturation process. The applied stresses achieved the fast maturation of already treated inflorescences while stopped the growing of newly arising untreated inflorescence, thus decreased the chances of wrong collection of untransformed seeds. Consequently, the collected seeds were mostly transgenic with a transformation frequency of at least 10%, thus the screening for positive transformants selection was more advantageous on a selective medium as compared to a classical floral dip method. Within 2-3 months, two hundred of individual transgenic plants were produced from just 10 infiltrated plants. This study concludes that application of drought stresses in a specific stage of plant is a beneficial strategy for achieving the transgenic Arabidopsis in a short period of time with high transformation efficiency.

Resumo Devido à extensa aplicação de antibióticos como promotores de crescimento na alimentação animal, a resistência aos antimicrobianos aumentou. Para superar esse desafio, os microbiologistas do rúmen buscam novos probióticos para melhorar a produtividade do gado. O presente estudo teve como objetivo isolar e avaliar bactérias lácticas específicas de raças (BAL) como potenciais probióticos animais. 12 cepas foram isoladas de diferentes amostras, incluindo leite, rúmen e fezes de búfalos Nilli Ravi. Esses isolados foram avaliados quanto ao seu potencial antimicrobiano contra patógenos animais comuns (Bacillus spp., E. coli, Staphylococcus aureus, Salmonella spp., Listeria spp.). Todos os isolados foram identificados por meio do sequenciamento do gene 16S rRNA e as análises filogenéticas inferiram que essas cepas apresentaram estreita relação com as espécies de vários gêneros; Enterococcus lactis, Pediococcus pentosaceus, Bacillus subtilis, Weissella cibaria, Weissella soli, Bacillus tequilensis, Weissella bombi, Bacillus licheniformis, Lactococcus lactis, Bacillus megaterium, Lactobacillus ruminis e Lactococcus lactis. O perfil probiótico dos isolados foi obtido usando critérios padrão, particularmente com propriedades probióticas animais.

Abstract Due to extensive application of antibiotics as growth promoters in animal feed, antimicrobial resistance has been increased. To overcome this challenge, rumen microbiologists search for new probiotics to improve the rate of livestock production. The present study was aimed to isolate and evaluate breed-specific lactic acid bacteria (LAB) as potential animal probiotics. The current study was conducted during 10 months from July 2020 to April 2021, in which a total of n=12 strains were isolated from different samples including milk, rumen, and feces of Nilli Ravi Buffaloes. These isolates were evaluated for their antimicrobial potential against common animal pathogens (Bacillus spp., E. coli, Staphylococcus aureus, Salmonella spp., Listeria spp.). All the isolates were identified using 16S rRNA gene sequencing and the phylogenetic analyses inferred that these strains showed close relations to the species of various genera; Enterococcus lactis, Pediococcus pentosaceus, Bacillus subtilis Weissella cibaria, Weissella soli, Bacillus tequilensis, Weissella bombi, Bacillus licheniformis, Lactococcus lactis, Bacillus megaterium, Lactobacillus ruminis, and Lactococcus lactis. NMCC-Ru2 has exhibited the enormous potential of antimicrobial activity, 28 mm, for Salmonella typhimurium;23 mm for Listeria monocytogenes 21 mm for E.coil. Highest resistance was seen in NMCC-Ru2 agasint test antbiotic, like 25.5 mm for Tetracycline. Overall results revesl that the probiotic profile of isolates was achieved using standard criteria, particularly with animal probiotic properties

Resumo A salinidade é um dos parâmetros ambientais mais críticos em relação à fisiologia dos peixes, modificando a ingestão de alimentos e o desempenho de crescimento em muitas espécies. O presente estudo investigou os efeitos de diferentes níveis de salinidade no desempenho de crescimento, alimentação e sobrevivência de jovens espécies de robalos asiáticos Lates calcarifer, as quais foram criadas sob salinidade 0 (T1), 5 (T2), 22 (T3), 36 (T4) e 42 (T5) ppt. Aproximadamente 830 indivíduos de peixes com peso médio de 1,24 ± 0,52 g foram distribuídos aleatoriamente (166 peixes / tanque) em cinco tanques de concreto (cada tanque tinha 30 × 6 × 4 pés (9,1 x 1,8 x 1,2 metros), com volume de 19,12 litros) por 40 dias. Os peixes foram inicialmente alimentados com uma dieta contendo 42% de proteína bruta a uma taxa de 6% do seu peso corporal por dia. Os resultados mostraram que o nível de salinidade teve um efeito significativo no ganho de peso (GP), ganho de peso médio diário (GPMD), taxa de crescimento específico (TCE), taxa de conversão alimentar (TCA), taxa de sobrevivência (TS), biomassa total e índices de saúde (p < 0,05). O maior GP (39,11 ± 1,49 g), GPMD (1,00 ± 0,12 g), TCE (8,74 ± 0,03% d-1) e o menor TCA (0,96 ± 0,20) foram observados com o tratamento T3, que foi significativamente superior em comparação com os outros tratamentos (p < 0,05). Entre os índices de saúde, os maiores índices hepatossomáticos e viscerossomáticos foram encontrados no tratamento T3, significativamente superior do que os demais grupos (p < 0,05). Não foram encontradas diferenças significativas entre os tratamentos quanto à TS (p > 0,05), mas a TS máxima (98,89 ± 0,0%) foi observada nos tratamentos T3 e T2. O nível máximo de proteína bruta (19,99 ± 1,4%) foi encontrado na composição bioquímica dos corpos dos jovens robalos asiáticos no grupo T3. A regressão polinomial de segunda ordem mostrou que a salinidade de 20 ppt é ótima para o melhor crescimento do robalo asiático. Assim, o presente estudo recomenda salinidade de 20 a 36 ppt para o cultivo comercial de robalo asiático em sistema de aquicultura fechado.

Abstract Salinity is one of the most critical environmental parameters regarding fish physiology, modifying food intake and growth performance in many fish species. The present study has investigated the effects of different salinity levels on growth performance, feeding and survival of Asian seabass Lates calcarifer juveniles. Asian seabass juveniles were reared at 0 (T1), 5 (T2), 22 (T3), 36 (T4), and 42 (T5) ppt salinity. Approximately eight hundred thirty fish individuals with an average weight of 1.24±0.52 g were randomly distributed (166 fish/Tank) in 5 concrete tanks (each tank 30×6×4 ft, volume 19,122 L) for forty days. Juveniles were initially fed 42% crude protein-containing diets at a rate of 6% of their body weight per day. The results showed that salinity level had a significant effect on the weight gain (WG), average daily weight gain (ADWG), specific growth rate (SGR), feed conversion ratio (FCR), survival rate (SR), total biomass and health indices (p<0.05). The highest WG (39.11±1.49 g), ADWG (1.00±0.12 g), SGR (8.74±0.03% d-1) and lowest FCR (0.96±0.20) were observed with T3 treatment, which was significantly higher compared to other treatment groups (p<0.05). Among the health indices, the highest hepatosomatic index and viscerosomatic index were found with T3 treatment, significantly higher than the other groups (p<0.05). No significant differences were found among the treatments in terms of survival rate (p>0.05), but the maximum survival rate (98.89±0.0%) was observed in the T3 and T2 treatments. The maximum level of crude proteins (19.99±1.4%) was found in the whole-body biochemical composition of Asian seabass juveniles in the T3 treatment group. The second-order polynomial regression showed that 20 ppt salinity is optimum for the best growth of Asian seabass. Thus, the present study recommends 20 to 36 ppt salinity for the commercial farming of Asian seabass under a closed aquaculture system.

Resumo A tendência de produção de biocombustíveis a partir de triacilgliceróis de microalgas está aumentando, porque esse substrato é uma boa alternativa sustentável e vantajosa ao combustível de petróleo e gás. No presente estudo, isolados de microalgas indígenas foram selecionados de amostras de água (n = 30) e solo (n = 30) coletadas em três distritos de Punjab, Paquistão, para avaliar seu potencial de produção de biocombustíveis. As amostras foram inoculadas em placas de meio BG – 11 agar por incubação em temperatura ambiente de 25°C proporcionando 1000 lux por 16h de ciclo claro seguido de 8h de escuro por 15 dias. As amostras de água foram ricas em microalgas e 65.33% de microalgas (49 isolados) foram isolados do distrito de Faisalabad. Com base na morfologia microscópica, isolados de microalgas (n = 180) foram selecionados e submetidos à detecção de lipídios por ensaio de coloração com vermelho do Nilo. Isolados positivos para vermelho do Nilo (n = 23) foram processados para caracterização bioquímica (lipídica, proteica e de carboidratos). O isolado AIN63 apresentou maior teor de lipídios (17.4%) conforme detectado pelo ensaio de microvanilina. O isolado de alga AIN128 apresentou os melhores teores de proteína (42.91%) detectados pelo ensaio de Bradford, e o isolado AIN172 apresentou maiores teores de carboidratos (73.83%), conforme detectado pelo ensaio de anthrone. Os isolados de algas selecionados também foram analisados por espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) para confirmação da análise de carboidratos, proteínas e lipídios. Essas algas nativas têm potencial para a produção de biocombustíveis in vitro a partir de resíduos agrícolas.

Abstract Trend of biofuel production from microalgal triacylglycerols is enhancing, because this substrate is a good sustainable and advantageous alternative to oil and gas fuel. In the present study, indigenous micro algal isolates were screened from water (n=30) and soil (n=30) samples collected from three districts of Punjab, Pakistan to evaluate their biofuel production potential. The samples were inoculated on BG – 11 agar medium plates by incubating at room temperature of 25°C providing 1000 lux for 16h light cycle followed by 8h of dark cycle for 15 d. Water samples were found to be rich in microalgae and 65.33% microalgae (49 isolates) were isolated from Faisalabad district. On the basis of microscopic morphology microalgal isolates (n=180) were selected and subjected to lipid detection by Nile red staining assay. Nile red positive isolates (n=23) were processed for biochemical (lipid, protein and carbohydrates) characterization. AIN63 isolate showed higher lipids (17.4%) content as detected by micro vanillin assay. Algal isolate AIN128 showed best protein contents (42.91%) detected by Bradford assay and AIN172 isolate showed higher carbohydrate contents (73.83%) as detected by anthrone assay. The selected algal isolates were also analyzed by Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy for confirmation of carbohydrate, protein and lipid analysis. These indigenous algae have the potential for in-vitro biofuel production from agricultural waste.

Resumo A febre aftosa (FMD) é responsável por graves perdas econômicas para a indústria pecuária do Paquistão. Este estudo teve como objetivo usar camundongos albinos suíços como um modelo animal experimental de baixo custo para estudar diferentes aspectos imunológicos e histopatológicos do FMDV em vez de espécies naturais como o gado. Após o isolamento dos isolados de campo do FMDV na linhagem celular BHK-21, calculou-se o título biológico do vírus e a dose infecciosa dos camundongos50. O vírus foi injetado em 45 camundongos albinos suíços (grupo A) por via intraperitoneal. As lesões macroscópicas, histopatológicas e imunopatológicas no coração, traqueia e pulmões foram registradas em diferentes intervalos de dias. Histopatologicamente, o coração apresentava congestão, hemorragias e necrose dos músculos cardíacos. A traqueia apresentava epitélio deciliado e os pulmões apresentavam hemorragias, edema brônquico e enfisema alveolar. Estudos imuno-histoquímicos revelaram a presença de vírus em músculos cardíacos, epitélio traqueal e orçamentárias para pesquisas adicionais sobre a febre aftosa

Abstract Foot-and-mouth disease is responsible for severe economic losses to the livestock industry of Pakistan. This study aimed to use Swiss albino mice as a cost-effective experimental animal model to study different immunological and histopathological aspects of FMDV instead of natural targeted species like cattle. After isolation of field isolates FMDV on BHK-21 cell line, biological titer of the virus and mice infectious dose50 was calculated. Virus was injected in 45 Swiss albino mice (group A) through intraperitoneal route. The gross, histopathological and immunopathological lesions in heart, trachea and lungs were recorded at different day’s intervals. Histopathologically, the heart showed congestion, hemorrhages and necrosis of cardiac muscles. Trachea showed deciliated epithelium and lungs showed hemorrhages, bronchial edema and alveolar emphysema. Immunohistochemical studies revealed the presence of virus in cardiac muscles, tracheal and bronchial epithelium and alveolar lumen. The findings evoked a thought that laboratory animals could be an alternative to large animals to meet budget limitations for further research on foot-and-mouth-disease.

Resumo A contaminação ambiental com metais pesados é uma ameaça aos organismos devido à sua toxicidade, persistência e bioacumulação nas cadeias alimentares. O estudo teve como objetivo avaliar o efeito do Cd sobre o nível de Ca em ossos de peixes de água doce Channa gachua. Quarenta e dois indivíduos de peixes foram mantidos em seis aquários; marcado aq. 0, 1, 2, 3, 4 e 5 no laboratório para tratamento. Aq. 0 foi o grupo controle e aq. 1, 2, 3, 4, 5 foram experimentais com solução de tratamento de Cd 0, 0,1 ppm, 0,5 ppm, 1 ppm, 2,5 ppm e 5 ppm respectivamente por três meses. Após a exposição, o tecido ósseo foi examinado quanto ao acúmulo de Cd e concentração de Ca. O maior acúmulo de Cd foi registrado em aq. 5 com média de 46,86 ± 0,46 mgkg-1 e o menor no grupo controle com média de 0,61 ± 0,06 mgkg-1. A ordem de bioacumulação de Cd nos ossos foi aq. 5 > aq. 4 > aq. 3 > aq. 2 > aq. 1 > aq. 0. A concentração mais alta de Ca foi observada em aq. 0 (grupo controle) média de 7.888,06 ± 4.827,22 mgkg-1 e a mais baixa foi de 1.132,36 ± 203,73 mgkg-1 em aq. 5 (a 5,0 ppm). Geralmente um padrão de diminuição do nível de Ca foi observado com cada aumento da bioacumulação de Cd aq. 0 > aq. 1 > aq. 2 > aq. 3 > aq. 4 > aq. 5. O estudo atual indicou que o acúmulo de Cd tem efeito substancial no nível de Ca nos ossos e, portanto, no sistema esquelético. Regras estritas devem ser implementadas pelo governo para controlar a poluição por metais e a exploração da biota.

Abstract Environmental contamination with heavy metals is a threat to the organisms due to their toxicity, persistence and bioaccumulation in food chains. The study was aimed to assess cadmium (Cd) effect on calcium (Ca) level in bones of a freshwater fish Channa gachua. 42 fish individuals were kept into six (6) aquaria; labelled aq.0, 1, 2, 3,4 and 5 in the laboratory for treatment. Aq.0 was control group and aq.1, 2,3,4,5 were experimental with treatment solution of Cd 0, 0.1ppm, 0.5ppm, 1ppm, 2.5ppm and 5ppm respectively for three months. After exposure, bones tissue were examined for Cd accumulation and Ca concentration. Highest accumulation of Cd were recorded in aq.5 mean 46.86 ± 0.46 mgkg-1 .and lowest in the control group with mean 0.61 ± 0.06 mgkg-1. The order of Cd bioaccumulation in bones were aq.5 > aq.4 >aq.3 > aq.2 > aq.1 > aq.0. Highest concentration of Ca were noted in aq.0 (Control group) mean 7888.06 ± 4827.22 mgkg-1 and lowest were 1132.36 ± 203.73 mgkg-1 in aq.5 (at 5.0 ppm). Generally a pattern of decreasing Ca level were observed with each rise of Cd bioaccumulation aq.0 > aq.1 > aq.2 > aq.3 > aq.4 > aq.5. Current study indicated that Cd accumulation have substantial effect on Ca level in bones and hence on skeleton system. Strict rules must be implemented by government to control metals pollution and exploitations of biota.

Abstract The present study aimed to produce a monosex population of all male Nile tilapia (Oreochromis spp.) using 17α-methyl testosterone and common carp testes (as a source of natural androgen). Trial was conducted into two consecutive phases, the first was fry (4-5 days old)administration with negative control (without hormone) and positive control (with hormone) feed viz., MT1:60mg/kg, MT2:70mg/kg (17α-MT), carp testis CT1:70% and CT2:80% for 30 days to reverse the sex of male fish and the second phase was nursing the fingerlings for two months on control diet (32% Crude protein).Results revealed a significant growth rate (P<0.05) in the control group where final weight (4.8±0.34ab) and weight gained was recorded as 0.66±0.03ac. In proximate chemical composition of body meat, CT2 treatment showed maximum retention of crude protein, crude fat, and ash whereas dry matter showed maximum retention in MT2 and CT1 treatments. Morphological and histological examination revealed significant difference (p<0.05) in phenotypic males of Nile tilapia fed with the highest percent in MT-treated diet (MT2) of 95±0.58a while MT1, CT2 and CT1 had males of 85±6.0b, 70±5.0b and 65±6.5b, respectively. It was concluded that synthetic androgen (17αMT) was more effective for masculinization but natural androgen scan be an alternative method to produce male tilapia population in an environment-friendly manner as they are inexpensive, eco-friendly, and radially available. These results suggested that synthetic and natural androgen supplementation in the diet plays a significant role in improving growth performance and body composition.

Resumo O presente estudo teve como objetivo produzir uma população monossexuada de todos os machos de tilápia do Nilo (Oreochromis spp.) usando 17α-metil testosterona e testículos de carpa comum como fonte de andrógeno natural. O ensaio foi conduzido em duas fases consecutivas, a primeira foi a administração de alevinos (4-5 dias) com controle negativo (sem hormônio) e controle positivo (com hormônio), viz., MT1:60mg/kg, MT2:70mg/kg (17α -MT), testículos de carpa CT1:70% e CT2:80% por 30 dias para inverter o sexo dos peixes machos e a segunda fase foi amamentar os alevinos por dois meses com dieta controle (32% de proteína bruta), e analisar a taxa de crescimento (p < 0,05) no grupo controle, em que o peso final (4,8 ± 0,34 ab) e o peso ganho foram registrados como 0,66 ± 0,03 ac. Na composição química aproximada da carne corporal, o tratamento CT2 mostrou retenção máxima de proteína bruta, gordura bruta e cinzas, enquanto a matéria seca apresentou retenção máxima nos tratamentos MT2 e CT1. O exame morfológico e histológico revelou diferença significativa (p < 0,05) nos machos fenotípicos de tilápia do Nilo alimentados com o maior percentual na dieta tratada com MT (MT2) de 95 ± 0,58a enquanto MT1, CT2 e CT1 tiveram machos de 85 ± 6,0b, 70 ± 5,0 e 65 ± 6,5b, respectivamente. Concluiu-se que o andrógeno sintético (17αMT) foi mais eficaz para a masculinização, entretanto os andrógenos naturais podem ser um método alternativo para produzir população de tilápias machos de maneira ecológica, pois são baratos, ecológicos e estão disponíveis radialmente. Esses resultados sugerem que a suplementação de andrógenos sintéticos e naturais na dieta desempenha um papel significativo na melhoria do desempenho do crescimento e da composição corporal.

Abstract Most of the treatment strategies for tumors and other disorders is photodynamic therapy (PDT). For several years, increasing the efficiency of nanostructured treatment devices, including light therapy, has been considered in different treatment methods. Light Dynamics The use of nanomaterial in this method's production and progress. The use of nanoparticles as carriers is a promising accomplishment, since all the criteria for an ideal photodynamic therapy agent can be given with these nanomaterials. The kinds of nanoparticles that have recently been used in photodynamic therapy are mentioned in this article. Latest advancements are being explored in the use of inorganic nanoparticles and biodegradable polymer-based nanomaterial as carriers of photosynthetic agents. Photosynthetic nanoparticles, self-propagating nanoparticles, and conversion nanoparticles are among the successful photodynamic therapy nanoparticles addressed in this report.

Resumo A maioria das estratégias de tratamento para tumores e outros distúrbios consiste na terapia fotodinâmica (PDT). Por vários anos, observou-se o aumento da eficiência de dispositivos de tratamento nanoestruturados, incluindo terapia de luz, que tem sido considerada em diferentes métodos de tratamento. Desse modo, este trabalho visa analisar a utilização de nanomateriais na produção e evolução deste método. A utilização de nanopartículas como carreadores é uma conquista promissora, pois todos os critérios para um agente de terapia fotodinâmica ideal podem ser obtidos com esses nanomateriais. Os categorias de nanopartículas que têm sido utilizados recentemente na terapia fotodinâmica são mencionados neste artigo. Os últimos avanços estão sendo explorados na utilização de nanopartículas inorgânicas e nanomateriais à base de polímeros biodegradáveis como portadores de agentes fotossintéticos. Nanopartículas fotossintéticas, nanopartículas autopropagantes e nanopartículas de conversão estão entre as nanopartículas de terapia fotodinâmica bem-sucedidas abordadas neste trabalho.

ABSTRACT A 42-year-old female patient had vision loss and chronic epiphora in her left eye. Her best-corrected visual acuity was 10/10 in the right eye and 0.3/10 in the left eye. The anterior segment examination results were normal. In fundus examination, choroidal folds were detected. Optical coherence tomography showed elevation on the macula and choroidal folds. Ultrasonography revealed a T-sign. Magnetic resonance imaging revealed an ethmoidal mucocele that compresses the orbital tissues. Surgical treatment was performed in the otorhinolaryngology department. Postoperatively, choroidal folds recovered, and the best-corrected visual acuity improved, but subretinal fluid accumulated. During the follow-up period without any treatment, subretinal fluid totally disappeared.

RESUMO Paciente do sexo feminino, 42 anos, com perda visual e epífora crônica no olho esquerdo. Sua acuidade visual melhor corrigida foi de 10/10 no olho direito e 0,3/10 no olho esquerdo. O exame do segmento anterior foi normal. No exame de fundo de olho, foram detectadas pregas coroidais. A tomografia de coerência óptica revelou elevação na mácula e pregas coroidais. A ultrassonografia revelou sinal T. A imagem de ressonância magnética mostrou mucocele etmoidal que comprime os tecidos orbitários. O Departamento de Otorrinolaringologia realizou o tratamento cirúrgico. No pós-operatório, as dobras coroidais se recuperaram, a acuidade visual melhor corrigida foi melhorada, mas ocorreu líquido sub-retiniano. Durante o período de acompanhamento sem qualquer tratamento, o líquido sub-retiniano recuperou-se totalmente.

Resumo O tempo de transplante e o genótipo contribuem para melhorar a produtividade e a qualidade da cultura da berinjela (Solanum melongena L.). Um experimento de campo foi conduzido para investigar o impacto da aplicação foliar de triacontanol (TRIA) e genótipos de berinjela 25919, Nirala, 28389 e Pak-10927, transplantados em 1 de março, 15 de março e 1 de abril de exposição a condições de alta temperatura do ar. O experimento foi realizado de acordo com o Randomized Complete Block Design e os dados foram analisados pelo teste de Tuckey. O TRIA foi aplicado a 10 µM na fase de floração; água destilada foi utilizada como controle. Taxa de fotossíntese e transpiração, condutância estomática, eficiência do uso da água e efeitos sobre as enzimas antioxidantes (superóxido dismutase, catalase e peroxidase) foram avaliados. O TRIA 10 µM aumentou a taxa de fotossíntese e a eficiência do uso da água e o rendimento foi melhorado em todos os genótipos transplantados nas diferentes datas. A aplicação foliar de TRIA 10µM aumentou as atividades das enzimas antioxidantes (SOD, POD e CAT) e melhorou os atributos fisiológicos e bioquímicos de genótipos de berinjela expostos a condições de alto calor. A atividade mais elevada da enzima dismutase 5,41mg / 1g FW foi registrada no genótipo Nirala no segundo transplante. Considerando que o mais baixo foi observado em PAK-10927 (2,30 mg / g FW). A produtividade máxima de frutos foi encontrada no acesso 25919 (1,725 kg por planta) no 1º transplante com Triacontanol, enquanto o acesso PAK-10927 deu a menor produção (0,285 kg por planta) no tratamento de controle no 3º transplante. Genótipo, data de transplante e aplicação de TRIA, melhoramento do crescimento, rendimento e atributos de qualidade sob estresse térmico em berinjela.

Abstract Transplanting time and genotype contribute to improving crop yield and quality of eggplant (Solanum melongena L.). A field experiment was conducted to investigate the impact of foliar applied of triacontanol (TRIA) and eggplant genotypes 25919, Nirala, 28389 and Pak-10927,transplanted on 1 March,15 March, and 1 April on exposure to high air temperature conditions. The experiment was performed according to Randomized Complete Block Design and the data was analyzed by using Tuckey,s test . The TRIA was applied at 10µM at flowering stage; distilled water was used as the control. Rate of photosynthesis and transpiration, stomatal conductance, water use efficiency, and effects on antioxidative enzymes (superoxide dismutase, catalase and peroxidase) were evaluated. The 10µM TRIA increased photosynthesis rate and water use efficiency and yield was improved in all genotypes transplanted at the different dates. Foliar application of 10µM TRIA increased antioxidative enzyme activities (SOD, POD & CAT) and improved physiological as well as biochemical attributes of eggplant genotypes exposed to high heat conditions. Highest activity of dismutase enzyme 5.41mg/1g FW was recorded in Nirala genotype in second transplantation. Whereas, lowest was noted in PAK-10927 (2.30mg/g FW). Maximum fruit yield was found in accession 25919 (1.725kg per plant) at 1st transplantation with Triacontanol, whereas accession PAK-10927 gave the lowest yield (0.285 kg per plant) at control treatment on 3rd transplantation. Genotype, transplanting date and application of TRIA improved growth, yield and quality attributes under of heat stress in eggplant.

Resumo O presente estudo envolve a análise química e bacteriológica de água de diferentes fontes, ou seja, furo, poços, garrafa e torneira, dos distritos de Peshawar, Mardan, Swat e Kohat da província de Khyber Pakhtunkhwa (KP), Paquistão. De cada distrito, 50 amostras de água (10 amostras de cada fonte), independentemente do status urbano e rural, foram coletadas dessas fontes e analisadas para sulfatos, nitratos, nitritos, cloretos, sólidos solúveis totais e coliformes (E. coli). Os resultados indicaram que a maioria das fontes de água tinha uma contagem inaceitável de E. coli, ou seja, > 34 UFC / 100 mL. As amostras positivas para E. coli foram elevadas no distrito de Mardan, seguido por Kohat, Swat e distrito de Peshawar. Além disso, algumas fontes de água também foram contaminadas quimicamente por diferentes fertilizantes inorgânicos (nitratos/nitritos de sódio, potássio), mas em níveis seguros, enquanto os resíduos agrícolas e industriais (compostos de cloreto e sulfato) estavam em níveis inseguros. Entre todos os distritos, a qualidade da água foi considerada comparativamente mais deteriorada nos distritos de Kohat e Mardan do que nos distritos de Peshawar e Swat. Essas fontes de água química e bacteriologicamente impróprias para beber podem causar problemas à saúde humana.

Abstract The present study involves the chemical and bacteriological analysis of water from different sources i.e., bore, wells, bottle, and tap, from Peshawar, Mardan, Swat and Kohat districts of Khyber Pakhtunkhwa (KP) province, Pakistan. From each district, 50 water samples (10 samples from each source), regardless of urban and rural status, were collected from these sources and analysed for sulphates, nitrates, nitrites, chlorides, total soluble solids and coliforms (E. coli). Results indicated that majority of the water sources had unacceptable E. coli count i.e.> 34 CFU/100mL. E. coli positive samples were high in Mardan District, followed by Kohat, Swat and Peshawar district. Besides this, the some water sources were also chemically contaminated by different inorganic fertilizers (nitrates/nitrites of sodium, potassium) but under safe levels whereas agricultural and industrial wastes (chloride and sulphate compounds) were in unsafe range. Among all districts, the water quality was found comparatively more deteriorated in Kohat and Mardan districts than Peshawar and Swat districts. Such chemically and bacteriologically unfit water sources for drinking and can cause human health problems.