RESUMO Neste trabalho, apresentamos o mapeamento físico do locus 5S rDNA em seis taxa silvestres e cinco cultivados de Capsicum, obtido através do uso de uma sonda FISH gênero-específica. Em todos os taxa, um único locus 5S por genoma haplóide foi persistentemente mapeado no braço curto de um único par de cromossomos metacêntricos na posição intercalar, e foram observados sinais 5S de FISH de tamanho e intensidade de brilho quase semelhantes. Esta é a primeira caracterização citológica dos 5S nos taxa silvestres de Capsicum usando uma sonda gênero-específica e o estudo sobre o grupo das pimentas mais exaustivo e abrangente realizado até ao momento. A informação aqui fornecida irá ajudar a caracterização citomolecular do germoplasma das pimentas, permitindo avaliar a sua variabilidade e podendo ser usada para integrar mapas físicos, genéticos e genômicos já realizados no gênero.

ABSTRACT We present here the physical mapping of the 5S rDNA locus in six wild and five cultivated taxa of Capsicum by means of a genus-specific FISH probe. In all taxa, a single 5S locus per haploid genome that persistently mapped onto the short arm of a unique metacentric chromosome pair at intercalar position, was found. 5S FISH signals of almost the same size and brightness intensity were observed in all the analyzed taxa. This is the first cytological characterization of the 5S in wild taxa of Capsicum by using a genus-derived probe, and the most exhaustive and comprehensive in the chili peppers up to now. The information provided here will aid the cytomolecular characterization of pepper germplasm to evaluate variability and can be instrumental to integrate physical, genetic and genomic maps already generated in the genus.

Objective Characterize the foci of visceral leishmaniasis infection in Neiva with a clinical and epidemiological approach. Materials and Methods Six children consulted medical services with hepatosplenomegaly. They were found to have anemia and leukopenia. The diagnosis was performed by bone marrow (five patients) and spleen (1 patient) aspiration. An active search for cases was carried out in the community. Anti-Leishmania infantum antibodies were also sought out using indirect immunofluorescence (IIF) in symptomatic patients and in dogs (IFI, rK39). House calls were made in order to carry out educational activities and to collect disease vectors. Patients received miltefosine, amphotericin B or Glucantime®. Results LV was confirmed in seven children. In six of them, the bone marrow or spleen aspirate contained amastigotes. The IIF was positive in 4 patients and negative in 3. One child was detected throught the active community search, confirmed by the clinic with IIF (1:32). Six patients were cured with liposomal amphotericin B (o deoxycholate) and one patient was cured with Glucantime®. The canine seroprevalence in 1182 dogs was 6.1% (IFI and rK39); the positive animals were destroyed. L. longipalpis was found in the houses. This is the principal vector of LV in Colombia. Conclusions The study showed that two zones of Neiva have children infected with LV. Diagnostic confirmation must include aspiration of bone marrow and IIFs. Treatment with miltefosine was not helpful, but liposomal amphotericin B is an ideal therapy. To control LV, active case searching, community education and vector and reservoir control is necessary.

Objetivo Estudiar clínica y epidemiológicamente focos de leishmaniasis visceral (LV) urbana en Neiva (Colombia). Materiales y Métodos Seis niños consultaron por hepato-esplenomegalia. Presentaban anemia y leucopenia. Se realizó biopsia por aspiración de medula ósea (5 pacientes) y de bazo (1 paciente). Se hizo búsqueda activa de casos en la comunidad y de anticuerpos anti-Leishmania infantum por inmunofluorescencia indirecta (IFI) en los sintomáticos y en reservorios caninos (IFI, rK39). Se hicieron visitas domiciliarias para educación comunitaria y búsqueda de vectores. Los pacientes recibieron Miltefosina, Anfotericina B o Glucantime®. Resultados Se confirmó LV en siete niños. En seis, el aspirado de medula ósea o bazo demostró amastigotes. La IFI fue positiva en 4 pacientes y negativa en 3. Un niño se detectó por búsqueda activa comunitaria, con clínica de LV, confirmada por IFI (1:32). La miltefosina no fue útil en 6 de los 7 casos. La Anfotericina B liposomal o deoxicolato, curó 6 pacientes y el Glucantime® uno. La seroprevalencia en 1182 caninos (IFI y rK39) fue de 6.1 %; los animales positivos fueron sacrificados. Se demostró Lu. longipalpis, vector de LV, en el peridomicilio. Conclusiones Demostramos LV urbana en dos comunas de Neiva. La confirmación diagnóstica incluyó aspiración de medula ósea e IFI. La Miltefosina no fue útil. La Anfotericina B liposomal fue la terapia ideal. Para controlar la LV es necesario hacer BAC, educación comunitaria, control de vectores y reservorios.

The survival of Salmonella typhimurium alone or associated with Rhizopus sp. was analyzed on 'Cantaloupe' melons (Cucumis melo L.) var. reticulatus during cold storage under controlled atmospheres (CA). Melons of uniform size were inoculated with 8.2 log10 CFU of a strain of S. typhimurium ATCC2356, kanamycin resistant (Km) and stored under the atmospheres: AC1 at O2 3 %, CO2 12 % and N2 85 %; AC2 at O2 5 %, CO2 15 % and N2 80 %; and air (O2 20.95 %, CO2 0.03 %, and N(2)78.08 %) at 3.7 °C and relative humidity (RH) of 93.6 ±5.9 % by 192 h. Every 48 h inoculated tissue samples were taken from fruits for testing on enteric Hektoen agar with Km (50 μg mL-1). Results showed that S. typhimurium can survive on the surface of the fruit in chilled atmospheres AC1, AC2 and air, although under these conditions the bacteria showed a decrease (P ≤ 0.05) in the population of 3.7, 4.3 and 4.7 log10 CFU per fruit, respectively. The presence of Rhizopus sp. did not affect the bacteria ability to survive or its population level at similar conditions of temperature and RH. Therefore, it is demonstrated the ability of S. typhimurium to survive in atmospheres with high CO2 concentration and adverse temperature conditions, and the importance to prevent the contamination of 'Cantaloupe' melons during its production and marketing.

Se analizó la sobrevivencia de Salmonella typhimurium sola y asociada con Rhizopus sp. en frutos de melón 'Cantaloupe' (Cucumis melo L.) var. reticulatus durante el almacenamiento en frío con atmósferas controladas (AC). Frutos de tamaño uniforme se inocularon con 8.2 logio UFC de una cepa de S. typhimurium ATCC2356, resistente a kanamicina (Km), y se almacenaron en las atmósferas: AC1con O2 3 %, CO2 12 % y N2 85 %; AC2 con O2 5 %, CO2 15 % y N2 80 %; y aire con O2 20.95 %, CO2 0.03 % y N2 78.08 %, a 3.7 °C y humedad relativa (HR) de 93.6 ±5.9 % por 192 h. Cada 48 h se extrajo un fruto en el que se tomaron muestras de tejido inoculado para pruebas de detección en agar entérico Hektoen con Km (50 µg mL-1). Los resultados mostraron que S. typhimurium puede sobrevivir en la superficie del fruto en las atmosferas refrigeradas AC1, AC2 y aire; sin embargo, bajo estas condiciones la población bacteriana registró un decremento (P ≤ 0.05) de 3.7, 4.3 y 4.75 log10 UFC por fruto, respectivamente. La presencia de Rhizopus sp. no afectó la capacidad de sobrevivir de la bacteria ni el nivel de su población en AC2 y aire en condiciones similares de temperatura y HR. Se evidencia así la capacidad de S. typhimurium para sobrevivir en atmósferas con alta concentración de CO2 y condiciones adversas de temperatura, así como de la importancia de prevenir la contaminación del melón 'Cantaloupe' durante su producción y comercialización.

Individuals of Toxoptera citricida (Kirkaldy) and Aphis spiraecola (Patch) collected in 16 commercial citrus orchards of the São Paulo and Minas Gerais States of Brazil were analyzed for virus presence. Orchards of Minas Gerais were selected because citrus trees exhibit symptoms of citrus sudden death (CSD) and in São Paulo due the presence of severe strains of Citrus tristeza virus (CTV), in order to detect genomic sequences of any of these strains that could be associated to CSD. Samples made up of 20 aphids from the localities of Comendador Gomes, Frutal, Prata and Uberlândia, in the State of Minas Gerais, a CSD associated virus (CSDaV) was often found through nested RT-PCR; in samples from São Paulo, none showed positive for the same primers. With the aim to find relationships between the presence of a specific strain of CTV and the expression of CSD, specific probes were used for sequences associated to severity of isolates. The results were negative and the most promising option was to detect CTV sequence variants acquired by aphids through SSCP, to determine if there was a preference for any of the variants. No CTV sequence variants exclusive to trees with CSD symptoms were detected in aphids, but CTV was more prevalent than CSDaV in both aphid species (98 and 90% vs. 42 and 10%). Results confirm the presence of CSDaV in aphids colonizing trees with or without CSD symptoms. However, detection of CSDaV was more frequent under the CSD condition and five times higher in T. citricida.

Se analizaron individuos de Toxoptera citricida (Kirkaldy) y Aphis spiraecola (Patch) recolectados en 16 huertas comerciales de cítricos en los Estados de São Paulo y Minas Gerais, para evaluar la presencia de virus. Las huertas de Minas Gerais se seleccionaron debido a que los árboles de cítricos exhibían síntomas de muerte súbita de los cítricos (MSC) y en São Paulo debido a la presencia de variantes severas del Citrus tristeza virus (CTV), que pudieran permitir detectar secuencias genómicas de cualquiera de estas variantes en asociación con MSC. En grupos muestrales de 20 áfidos, provenientes de las localidades de Comendador Gomes, Frutal, Prata y Uberlândia, del Estado de Minas Gerais, se encontró con frecuencia un CSD associated virus (CSDaV) mediante el uso de RT-PCR y PCR anidado; en muestras de São Paulo, ninguna fue positiva para los mismos iniciadores. Con el objetivo de encontrar relación entre la presencia de una variante específica de CTV y la expresión de MSC, se usaron sondas específicas para secuencias asociadas a la severidad de los aislamientos. Los resultados fueron negativos y la opción más viable fue detectar variantes de secuencias de CTV adquiridas por áfidos a través de SSCP para determinar si existió preferencia por alguna de las variantes. No se detectaron en áfidos variantes de secuencias de CTV exclusivas a árboles con síntomas de MSC, pero el CTV fue más común que el CSDaV en ambas especies de áfidos (98 y 90% vs. 42 y 10%). Los resultados confirman la presencia del CSDaV en áfidos que colonizaron árboles con o sin síntomas de MSC. Sin embargo, la detección del CSDaV fue más frecuente en la condición de MSC y cinco veces mayor en T. citricida.