Abstract This study evaluated the antimicrobial activity of Lippia graveolens and Lippia alba extracts and essential oils against nine strains of Aeromonas spp., isolated from Oreochromis niloticus. The crude extracts were obtained by percolation technique and CO2 supercritical fluid extraction, while the essential oils by applying hydro-distillation technique using a Clevenger apparatus. The antimicrobial activity for each extract and essential oils was verified through the disc diffusion method at 24 hours. The essential oil of L. graveolens showed higher effectiveness to inhibit fish bacterial pathogens (100%) than the extracts, revealing an inhibition zone diameter that ranged from 25.20 - 36.94 mm. The extracts from supercritical fluid and from the percolation technique with ethyl acetate and cyclohexane presented the same effectiveness (77.78%). The crude extract obtained with ethanol 95% showed limited antimicrobial effect (22.22%), presenting the smallest inhibition zone (ranged from 8.34 to 9.57 mm). On the other hand, L. alba displayed a lower antibacterial activity, being the essential oil 66.67% effective, presenting an inhibition zone ranging between 10.68 to 16.29 mm. The result of this study indicates that essential oils from both L. graveolens and L. alba offer a promising alternative for the control of Aeromonas spp. growth.

Resumen El presente estudio evaluó la actividad antimicrobiana de extractos y aceites esenciales de Lippia graveolens y Lippia alba, frente a nueve cepas de Aeromonas spp., aisladas de Oreochromis niloticus. Los extractos crudos se obtuvieron por la técnica de percolación y a través de la extracción de CO2 supercrítico, mientras que los aceites esenciales se realizaron mediante la técnica de hidrodestilación empleando un equipo Clevenger. La actividad antimicrobiana para cada extracto y aceite esencial se verificó mediante el método de difusión en disco a las 24 horas. El aceite esencial de L. graveolens mostró mayor efectividad para inhibir patógenos bacterianos de peces (100%), en comparación con los extractos. Se obtuvo un diámetro de inhibición que osciló entre 25,20 a 36,94 mm. Los extractos de fluido supercrítico y de la técnica de percolación con acetato de etilo y ciclohexano presentaron la misma efectividad (77,78%). El extracto crudo obtenido con etanol al 95% mostró efecto antimicrobiano limitado (22,22%), presentando el menor halo de inhibición (8,34 y 9,57 mm). Por otro parte, L. alba mostró menor actividad antibacteriana. El aceite esencial inhibió únicamente el 66,67% de las bacterias patógenas, presentando un halo de inhibición que oscila entre 10,68 a 16,29 mm. El resultado de este estudio indica que los aceites esenciales de L. graveolens y L. alba son una alternativa prometedora para el control del crecimiento de Aeromonas spp.

Resumo Neste estudo avaliou-se a atividade antimicrobiana de extratos e óleos essenciais de Lippia graveolens e Lippia alba, contra nove cepas de Aeromonas spp., isoladas de Oreochromis niloticus. Os extratos brutos foram obtidos pela técnica de percolação e por extração supercrítica com CO2, enquanto os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilação em aparelho tipo Clevenger. A atividade antimicrobiana para cada extrato e óleo essencial foi verificada pelo método de disco-difusão em 24 horas. O óleo essencial de L. graveolens apresentou maior eficácia na inibição de patógenos bacterianos em peixes (100%), comparado aos extratos. Obteve-se um diâmetro de halo de inibição que variou entre 25,20 e 36,94 mm. Os extratos do fluido supercrítico e da percolação com acetato de etila e ciclohexano apresentaram a mesma eficácia (77,78%). O extrato bruto obtido com etanol 95% apresentou efeito antimicrobiano limitado (22,22%), apresentando o menor diámetro de halo de inibição (8,34 e 9,57 mm). Por outro lado, L. alba apresentou menor atividade antibacteriana. O óleo essencial inibiu apenas 66,67% das bactérias patogênicas, apresentando um halo de inibição que varia de 10,68 a 16,29 mm de diámetro. Os resultados deste estudo indica que os óleos essenciais de L. graveolens e L. alba são uma alternativa promissora para o controle do crescimento de Aeromonas spp.

Resumen Este estudio muestra el trabajo realizado durante el año 2018-2019, donde se identificaron los principales patógenos bacterianos que afectan los cultivos de la tilapia en Guatemala, al mismo tiempo se evaluó la resistencia a los antibióticos de mayor uso en la industria acuícola de esta zona. Se recolectaron peces con peso de 50 a 1 000 g, en diversos centros de producción. Por cada organismo se registró la signología macroscópica externa e interna más frecuente, posteriormente se aislaron muestras bacteriológicas de fluido sanguíneo, úlceras y otras áreas hemorrágicas, riñón anterior, bazo, meninges, hígado y corazón. Las bacterias patógenas aisladas fueron identificadas a nivel de especie, a través de pruebas bioquímicas. Finalmente se evaluó la susceptibilidad con los antibióticos: oxitetraciclina (40 µg), florfenicol (40 µg), enrofloxacina (40 µg) y fosfomicina (40 µg) por el método de difusión de disco. Los organismos evidenciaron, en su mayoría, ulceras cutáneas, áreas hiperémicas, melanización corporal, hígado pálido y friable, vasculitis en hígado, congestión y hemorragia intestinal. Se lograron aislar 16 cepas bacterianas patógenas para la tilapia, los géneros más frecuentes fueron: Aeromonas (70 %: 3 spp), seguido por Plesiomonas, Burkholderia, Pseudomonas, Shewanella y Streptococcus (6 %: 1 sp). Se observó que las cepas bacterianas aisladas mostraron resistencia hacia los antibióticos oxitetraciclina (25 %) y fosfomicina (25 %). Todas las cepas bacterianas aisladas evidenciaron sensibilidad a florfenicol y enrofloxacina. La determinación de los patógenos más frecuentes, así como su resistencia antimicrobiana en la industria acuícola, es el primer reporte que se genera para Guatemala.

Resumo Este estudo mostra o trabalho realizado durante os anos 2018 e 2019, em que foram identificados os principais patógenos bacterianos que afetam os cultivos da tilápia na Guatemala e, conjuntamente, avaliada a resistência aos antibióticos mais usados na indústria aquícola desta zona. Foram coletados peixes com peso de 50 a 1000g, em diversos centros de produção. Por cada organismo, houve o registro dos sinais macroscópicos externos e internos mais frequente, posteriormente foram isoladas amostras bacteriológicas de: fluxo sanguíneo, úlceras e outras áreas hemorrágicas, rim anterior, baço, meninges, fígado e coração. As bactérias patógenas isoladas foram identificadas por espécie, através de provas bioquímica. Finalmente, a susceptibilidade foi avaliada com os antibióticos: oxitetraciclina (40 µg), florfenicol (40 µg), enrofloxacino (40 µg) e fosfomicina (40 µg) por meio do método de disco-difusão. Os organismos evidenciaram, em sua maioria, úlceras cutâneas, áreas hiperêmicas, melanização corporal, fígado pálido e friável, vasculites no fígado, congestão e hemorragia intestinal. Foi possível o isolamento de 16 cepas bacterianas patógenas para a tilápia, sendo os gêneros mais frequentes: Aeromonas (70 %: 3 spp.), seguido por Plesiomonas, Burkholderia, Pseudomonas, Shewanella e Streptococcus (6 %: 1 sp.). Observou-se que as cepas bacterianas isoladas mostraram resistência com relação aos antibióticos oxitetraciclina (25 %) e fosfomicina (25 %). Todas as cepas bacterianas isoladas mostraram sensibilidade ao florfenicol e ao enrofloxacino. A determinação dos patógenos mais frequentes, assim como sua resistência antimicrobiana na indústria aquícola é o primeiro relatório gerado para a Guatemala.

Abstract The aim of this study was to identify the main bacterial pathogens affecting tilapia aquaculture in Guatemala during 2018-2019 and evaluate their resistance to the most widely used antibiotics in the aquaculture industry of the area. Fish weighing between 50 and 1,000 g were collected from different production centers. The most frequent external and internal macroscopic signs were recorded for each organism. In addition, bacteriological samples of blood fluid, ulcers and other hemorrhagic areas, anterior kidney, spleen, meninges, liver, and heart were isolated. The isolated pathogenic bacteria were identified at the species level through biochemical tests. Finally, susceptibility was assessed with the following antibiotics oxytetracycline (40 µg), florfenicol (40 µg), enrofloxacin (40 µg), and fosfomycin (40 µg) by the disk diffusion method. The most common clinical signals were skin ulcers, hyperemic areas, body melanization, pale and soft liver, liver vasculitis, and intestinal congestion and bleeding. A total of 16 pathogenic bacteria strains were isolated from tilapia samples. The most frequent genera were Aeromonas (70%: 3 spp), followed by Plesiomonas, Burkholderia, Pseudomonas, Shewanella, and Streptococcus (6%; 1 sp). Isolated bacteria strains showed resistance to oxytetracycline (25%) and fosfomycin (25%) and sensitivity to florfenicol and enrofloxacin. This is the first report related to the most frequent bacterial pathogens and their antimicrobial resistance in tilapia culture in Guatemala.

ABSTRACT Wolf cichlid, Parachromis dovii, is a species with a high potential for aquaculture in Central America; however, the knowledge of the digestive physiology in larvae period is limited. For these reason, this study evaluated the changes on digestive enzymes (alkaline and acid proteases, trypsin, chymotrypsin, aminopeptidase, carboxypeptidase, lipases, amylases, and phosphatases) during early ontogeny by biochemical analysis. All digestive enzymes were detected at first feeding (6 days after hatching, DAH, 9.49 mm, 168 degree-days DD). Afterwards all enzymes reached two main peaks in activity at 14 or 22 DAH (15.10 mm, 364 DD and 20.83 mm, 550 DD, respectively). Later, there was a gradual decrease in activity for trypsin and acid and alkaline phosphatases until reach the lowest values at 41 DAH. In the case of acid proteases, chymotrypsin, aminopeptidase, carboxypeptidase, lipase and amylase, all activities reached their maximum values at the end of the larval period, except for alkaline proteases, which showed the maximum value at 14 DAH (15.10 mm, 364 DD). Parachromis dovii larvae have an early capability to hydrolyze exogenous food, agreeing with other carnivorous neotropical cichlid species, for this reason we proposed that the weaning process could begin at 14 DAH.

RESUMEN El guapote lagunero (Parachromis dovii) es una especie con un alto potencial para la acuicultura en la región de América Central; sin embargo, existe un conocimiento limitado sobre la capacidad digestiva en el periodo larval. Por este motivo, este estudio evaluó los cambios de las enzimas digestivas (proteasas alcalinas y ácidas, tripsina, quimotripsina, aminopeptidasa, carboxipeptidasa, lipasas, amilasas y fosfatasas) durante la ontogenia temprana mediante análisis bioquímico. Todas las enzimas digestivas analizadas se detectaron en la primera alimentación (6 días después de la eclosión, DAH, 9.49 mm, 168 día-grados DD). Después, todas las enzimas alcanzaron dos picos máximos a los 14 o 22 DAH (15.10 mm, 364 DD and 20.83 mm, 550 DD, respectivamente). Después las actividades tripsina, fosfatasas ácidas y alcalina disminuyeron a sus valores más bajos a los 41 DAH. En el caso de las proteasas ácidas y alcalinas, quimotripsina, aminopeptidasa, carboxipeptidasa, lipasa y amilasa, los niveles de actividad aumentaron y alcanzaron su máximo valor al final del período larvario, excepto las proteasas alcalinas, que mostraron su máximo valor a los 14 DAH (15.10 mm, 364 DD). Las larvas de P. dovii tienen una capacidad temprana para hidrolizar alimentos exógenos, lo que concuerda con otras especies de cíclidos neotropicales carnívoros, por lo que proponemos que el proceso de destete inicie a los 14 DAH.