Abstract This study explored the migration of follicular fluid (FF)-derived extracellular vesicles (EVs) of the uterine environment to the bloodstream and their interaction with neutrophils in vivo and in vitro. For the in vivo experiment, six Nellore heifers (Bos indicus) received an intrauterine infusion seven days after ovulation with 1X PBS only (sham group; n=1), 1X PBS stained with lipophilic dye PKH26 (control group; n=2), or FF-derived EVs stained with PKH26 (treated group; n=3). Plasma was collected at 0, 10, 30, 60-, 180-, 360-, 720-, and 1440-min post-infusion to obtained EVs for analysis by nano flow cytometry. Labeled EVs were present in the bloodstream at 30- and 60-min post-infusion in the treatment group. Additionally, plasma derived-EVs from all groups were positive for Calcein-AM, Alix, Syntenin, and Calnexin, which confirm the presence of EVs. The second experiment utilized the plasma-derived EVs from the heifers from 30 and 60 min timepoints to evaluate if neutrophils can uptake EVs in vitro. As results, it was possible to observe the presence of labeled EVs in neutrophils treated with plasma derived-EVs from the treatment group. In summary, our results suggest that labeled EVs can migrate from the uterine environment rapidly and interact with circulating immune cells in bovine. FFderived FF derived (EVs vitro Bos indicus X sham group n=1, n1 n n=1 , 1 n=1) PKH PKH2 control n=2, n2 n=2 2 n=2) n=3. n3 n=3 . 3 n=3) 0 10 60, 60- 180, 180 180- 360, 360 360- 720, 720 720- 1440min 1440 postinfusion post cytometry 60min Additionally derivedEVs CalceinAM, CalceinAM Calcein AM, AM Calcein-AM Alix Syntenin Calnexin plasmaderived 6 summary bovine n= 18 36 72 144 7 14

RESUMO O dinamômetro manual é um equipamento portátil e de fácil uso na prática clínica. Entretanto, sua utilização necessita de parâmetros de confiabilidade e reprodutibilidade em posições de ombro com e sem estabilização. O objetivo deste estudo foi avaliar a confiabilidade inter e intraexaminador na medida de força dos músculos rotadores do ombro nas posições a 0° e 90° de abdução com avaliadores inexperientes. Vinte sujeitos (27,05±8,17 anos; 76,6±10,97kg; 1,74±0,07m) de ambos os sexos e sem queixas anteriores ou atuais de dor no ombro e cervical participaram do estudo. A avaliação dos rotadores mediais e laterais do ombro foi realizada por meio de um dinamômetro manual digital (MicroFET 2, Hoggan Health Industries, West Jordan, UT, USA) em duas posições: sentado, com 0° de abdução do ombro, e em supino, com 90° de abdução de ombro. A confiabilidade interexaminador e a reprodutibilidade intraexaminador foram avaliadas pelo coeficiente de correlação intraclasse (ICC) considerando o intervalo de confiança de 95% (p<0,05). Houve uma excelente reprodutibilidade na análise intra-avaliador e níveis de confiabilidade muito bons para as medidas interavaliador na maioria das variáveis analisadas. As posições de 0° e 90° de abdução do ombro demonstraram resultados confiáveis e reprodutíveis com a utilização do dinamômetro manual digital por avaliadores sem experiência clínica.

ABSTRACT The handheld dynamometer is a portable device of easy use in clinical practice. However, its use requires reliability and reproducibility parameters in shoulder positions with and without stabilization. The objective of this study was to evaluate the inter- and intra-examiner reliability of the shoulder rotator strength measurement at 0° and 90° abduction with inexperienced examiners. Twenty subjects (27.05 ± 8.17 years, 76.6 ± 10.97 kg, 1.74 ± 0.07 m) of both sexes and no previous or current complaints of shoulder and neck pain participated in this study. The evaluation of the internal and external shoulder rotators was performed using a handheld dynamometer (MicroFET 2, Hoogan Health Industries, West Jordan, UT, USA) in two positions: sitting with 0° shoulder abduction and supine and with 90° shoulder abduction. Inter- and intra-examiner reliability and reproducibility were assessed through the intraclass correlation coefficient (ICC) considering a 95% confidence interval (p<0.05). There was excellent reproducibility in the intra-examiner analysis and very good levels of reliability measures in the inter-examiner analysis for most variables. The positions of 0° and 90° shoulder abduction showed reliable and reproducible results when using the handheld dynamometer with examiners that had no clinical experience.

RESUMEN El dinamómetro manual es un equipamiento portátil y de fácil uso en la práctica clínica. Sin embargo, su uso requiere de parámetros de confiabilidad y reproducibilidad en posiciones del hombro con y sin estabilización. Se objetivó en este estudio evaluar la confiabilidad inter e intraexaminador en la medida de fuerza de los músculos rotadores del hombro en las posiciones 0° y 90° de abducción con evaluadores inexpertos. Veinte personas (27.05±8.17 años; 76.6±10.97kg; 1.74±0.07m) de ambos sexos, sin problemas anteriores o actuales de dolores en el hombro y cervical participaron del estudio. Se evaluaron los rotadores medianos y laterales del hombro a través de un dinamómetro manual digital (MicroFET 2, Hoggan Health Industries, West Jordan, UT, USA) en dos posiciones: sentado, con 0° de abducción del hombro, y en supino, con 90° de abducción de hombro. Se evaluaron la confiabilidad interexaminador y la reproducibilidad intraexaminador por el coeficiente de correlación intraclase (ICC) considerándose el intervalo de confianza del 95% (p<0.05). Hubo una excelente reproducibilidad en el análisis intraevaluador y niveles de confiabilidad muy buenos para las medidas interevaluador en la mayoría de las variables analizadas. Las posiciones de 0° y 90° de abducción del hombro demostraron resultados confiables y reproducibles con la utilización del dinamómetro manual digital por evaluadores sin experiencia clínica.