RESUMO: É notória a importância do casco na saúde dos equinos, mas o conhecimento em nível celular é pouco entendido. Estudos envolvendo o cultivo de queratinócitos equinos são escassos. Sabe-se que o desenvolvimento de cultivos de queratinócitos in vitro é uma condição para estudos sobre a biologia molecular, crescimento e diferenciação celular. Alguns métodos já estão estabelecidos, como para cultivo de queratinócitos de pele, mas poucas metodologias são encontradas para queratinócitos lamelares. O objetivo desse estudo foi padronizar o cultivo de queratinócitos provenientes de casco equino visando futuramente associar ao estudo da medicina regenerativa para assim estabelecer um modelo experimental in vitro e indicar o uso criterioso de terapias regenerativas para a laminite equina. Desta forma, o cultivo em monocamada e a caracterização de queratinócitos lamelares foram realizados. Para isso, o método de cultura primária utilizado foi através de explantes obtidos de três regiões do casco (dorso-medial, dorsal e dorso-lateral). As células foram caracterizadas para os marcadores anti pan-cytokeratin (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4) e Ki-67 (MIB-1) nos cultivos e nos explantes. As células foram cultivadas até terceira passagem, tendo marcação positiva para pan-CK, p63 e Ki-67 e fraca marcação para vimentina. Já as lâminas epidermais não tiveram marcação de vimentin e Ki-67, porém marcaram acentuadamente para pan-CK e p63. Este estudo demonstrou a exiquibilidade do uso de explantes lamelares do casco de equinos, como forma de isolamento de queratinócitos em cultivos primários, bem como caracterizou a habilidade de proliferação desses queratinócitos em monocamada.

ABSTRACT: The importance of the hoof to the horse health is clear, and the current knowledge regarding the cellular aspects of hoof keratinocytes is poor. Studies on equine keratinocyte culture are scarce. Developing keratinocyte cultures in vitro is a condition for studies on molecular biology, cell growth and differentiation. Some methods have already been established, such as those for skin keratinocyte culture. However, few methodologies are found for lamellar keratinocytes. The objective of this study was to standardize the equine hoof keratinocyte isolation and cultivation, and then characterize the cell immunophenotype. For this, the primary culture method used was through explants obtained from three regions of the equine hoof (medial dorsal, dorsal, and lateral dorsal). After the cell isolation and cultivation, the cell culture and its explants were stained with anti-pan cytokeratin (pan-CK) (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4), and Ki-67 (MIB-1) antibodies. Cells were grown to third passage, were positive for pan-CK, p63 and Ki-67, and few cells had vimentin positive expression. As for the explants, the epidermal laminae were not stained for vimentin or Ki-67. However, some cells presented positive pan-CK and p63 expression. This study demonstrated the viability of lamellar explants of equine hooves as a form of isolating keratinocytes in primary cultures, as well as characterized the proliferation ability of such keratinocytes in monolayers.

Respostas não conclusivas do cafeeiro adulto à fertilização com fósforo têm sido reportadas na literatura, de modo particular quando se trata da aplicação desse nutriente em sistemas adensados de plantio. Assim, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a resposta de cafeeiros adensados adultos, em franca produção, quanto à produtividade e bienalidade, à adição de diferentes fontes e doses de P, na região da Zona da Mata de Minas Gerais. O experimento, com cafeeiros da variedade Catucaí Amarelo 6/30, foi conduzido durante quatro safras. A matriz experimental utilizada foi o fatorial completo [(4 × 3)+1], composto por quatro fontes (fosfato monoamônico, superfosfato simples, fosfato natural reativo da Argélia (Djebel-Onk) e FH 550®), três doses de P (100, 200, e 400 kg ha-1 ano-1 de P2O5) e um tratamento adicional, correspondente à dose de 0 kg ha-¹ ano-¹ de P2O5. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados, com três repetições. As quatro safras constituíram faixas no tempo. Houve aumento dos teores de P no solo e nas folhas do cafeeiro com o aumento das doses aplicadas. Apesar disso, não houve efeito da adição de P sobre a produtividade e a bienalidade da produção das plantas, independentemente da fonte utilizada ao longo das quatro safras avaliadas.

Inconclusive responses of the adult coffee plant to phosphorus fertilization have been reported in the literature, especially when dealing with application of this nutrient in high density planting systems. Thus, this study was carried out for the purpose of assessing the response of adult coffee plants at high planting density in full production (in regard to yield and their biennial cycle/stability) to the addition of different sources and application rates of P in the Zona da Mata region of Minas Gerais, Brazil. The experiment with coffee plants of the Catucaí Amarelo 6/30 variety was carried out over four growing seasons. Treatments were arranged in a full factorial design [(4 × 3) + 1] consisting of four P sources (monoammonium phosphate, simple superphosphate, natural reactive rock phosphate from Algeria (Djebel-Onk), and FH 550®), three P rates (100, 200, and 400 kg ha-1 year-1 of P2O5), and an additional treatment without application of the nutrient (0 kg ha-¹ year-¹). A randomized block experimental design was used with three replicates. The four seasons were evaluated as subplots in a split plot experiment. The P contents in soil and leaves increased with increased rates of P application. However, there was no effect from P application on the yield and its biennial cycle/stability regardless of the source used over the four seasons assessed.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adubação com N e K sobre a produtividade e a bienalidade de produção de cafeeiros em plantio adensado, em estudo de longa duração. Foram avaliados dois experimentos, na região da Zona da Mata de Minas Gerais, conduzidos em blocos ao acaso, com parcelas subdivididas no tempo. No primeiro experimento, realizado no espaçamento de 1,5x0,7 m (9.523 plantas por hectare), foram avaliados os efeitos de sete doses de N + K2O na proporção 1:1 (0, 200, 400, 600, 800, 1.000 e 1.200 kg ha‑1 por ano), durante oito safras (2001/2002 a 2008/2009). Como o fertilizante utilizado tinha proporção 1:1, para obter a dose utilizada de cada elemento (N ou K2O), deve-se dividir a dose total por dois. O segundo experimento foi conduzido no espaçamento de 2,5x0,6 m (6.666 plantas por hectare), em arranjo fatorial, com cinco doses de N (0, 150, 300, 450 e 600 kg ha‑1 por ano) e cinco doses de K2O (0, 150, 300, 450 e 600 kg ha‑1 por ano), durante seis safras (2005/2006 a 2010/2011). As doses associadas à máxima produtividade de café beneficiado variaram de 424 a 560 kg ha‑1, para N, e de 21 a 338 kg ha‑1, para K2O. A adubação com N reduz os efeitos da bienalidade da produção do cafeeiro, e a adubação com K, em anos de baixa produtividade, favorece a recuperação da produtividade do cafeeiro no ano seguinte.

The objective of this work was to evaluate the effect of N and K fertilization on the yield and production bienniality of dense coffee plantations, in a long‑term study. Two experiments were evaluated in the Zona da Mata region of Minas Gerais, Brazil, under a randomized complete block design, split‑plotted in time. In the first experiment, carried out with 1.5x0.7 m spacing (9,523 plants per hectare), the effects of seven doses of N + K2O in the proportion of 1:1 were evaluated (0, 200, 400, 600, 800, 1,000, and 1,200 kg ha‑1 per year) during eight crop seasons (2001/2002 to 2008/2009). Since the fertilizer had 1:1 proportion, in order to obtain the dose for each nutrient (N or K2O), the total dose must be divided by two. The second experiment was done with 2.5x0.6 spacing (6,666 plants per hectare), under a factorial arrangement, with five doses of N (0, 150, 300, 450, and 600 kg ha‑1 per year) and five doses of K2O (0, 150, 300, 450, and 600 kg ha‑1 per year), during six crop seasons (2005/2006 to 2010/2011). The doses related to the maximum yield of processed coffee ranged from 424 to 560 kg ha‑1, for N, and from 21 to 338 kg ha‑1, for K2O. Nitrogen fertilization reduces the effect of production bienniality of coffee plants, and K2O fertilization, in years of low productivity, promotes yield recovery of coffee plants in the next year.

As recomendações de fertilizantes utilizadas para a maior parte das culturas são baseadas em curvas de resposta. Ensaios de campo são realizados em determinada região, não sendo os resultados extrapoláveis para outras regiões. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um Sistema de Recomendação de Corretivos e Fertilizantes para a Cultura do Coqueiro baseado no balanço nutricional, no qual, o Sistema considera, para estimar as doses de fertilizantes, a produtividade desejada, a variedade cultivada, a estimativa da disponibilidade de nutrientes no solo, assim como outras formas de adição de nutrientes. O Sistema define o balanço de nutrientes ao comparar a demanda de nutrientes com o seu suprimento. Se o balanço para determinado nutriente for negativo, calcário e, ou, fertilizante são adicionados; se positivo, não há adição. Para a fertilização de coqueiros, o sistema é dividido em três etapas: fertilização da cova de plantio, fertilização de formação e início de produção e fertilização de produção. A quantidade do nutriente exigida pela planta menos o seu suprimento por fontes diversas gera a recomendação de fertilizantes. As informações necessárias para o desenvolvimento do Sistema foram obtidas na literatura. Foram comparados os resultados obtidos pelo Sistema com as principais tabelas de recomendação de fertilizantes para o coqueiro no Brasil. As principais diferenças entre os dois procedimentos foram para a dose de P aplicada no plantio, que foi maior no Sistema proposto porque as tabelas não consideram o volume da cova, entretanto, para N e K, foram menores. A demanda por K pela cultura é elevada e os valores recomendados pelo Sistema são superiores àqueles recomendados pelas tabelas no estádio de formação e produção inicial. As recomendações de fertilizantes pelo Sistema, que foram maiores durante a fase de formação do coqueiro, comparativamente à fase de produção devem-se ao fato de que maior quantidade de biomassa é produzida na primeira fase.

Fertilizer recommendation to most agricultural crops is based on response curves. Such curves are constructed from field experimental data, obtained for a particular condition and may not be reliable to be applied to other regions. The aim of this study was to develop a Lime and Fertilizer Recommendation System for Coconut Crop based on the nutritional balance. The System considers the expected productivity and plant nutrient use efficiency to estimate nutrient demand, and effective rooting layer, soil nutrient availability, as well as any other nutrient input to estimate the nutrient supply. Comparing the nutrient demand with the nutrient supply the System defines the nutrient balance. If the balance for a given nutrient is negative, lime and, or, fertilization is recommended. On the other hand, if the balance is positive, no lime or fertilizer is needed. For coconut trees, the fertilization regime is divided in three stages: fertilization at the planting spot, band fertilization and fertilization at the production phase. The data set for the development of the System for coconut trees was obtained from the literature. The recommendations generated by the System were compared to those derived from recommendation tables used for coconut crop in Brazil. The main differences between the two procedures were for the P rate applied in the planting hole, which was higher in the proposed System because the tables do not pay heed to the pit volume, whereas the N and K rates were lower. The crop demand for K is very high, and the rates recommended by the System are superior to the table recommendations for the formation and initial production stage. The fertilizer recommendations by the System are higher for the phase of coconut tree growth as compared to the production phase, because greater amount of biomass is produced in the first phase.