ABSTRACT The aim of this study was genotypically characterize Leptospira sp. clinical isolates from Mexico which were previously identified as Leptospira interrogans serovar Pomona (POM) by phenotypic methods. The Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) method was used for DNA amplification with five oligonucleotides. A dendrogram was constructed using the Unweighted Pair Group Method Analysis (UPGMA). During the genotypic characterization, the studied isolates constituted a group which was associated with the reference strain L. interrogans serovar Pomona. The Minimum Spanning Networks (MST) analysis revealed the same cluster between Mexican isolates and the reference strain POM. Clinical isolates identified as L. interrogans serovar POM have a clonal reproduction type, suggesting that this clone is distributed in different regions of Mexico.

Background. In Mexico, a steady increase of patients with visceral leishmaniasis has been reported, especially in the states of Chiapas and Guerrero, yet only limited information exists on canine leishmaniasis in areas of visceral leishmaniasis in Mexico. A veterinary report of dogs with nonhealing cutaneous lesions in Pungarabato, Guerrero led us to investigate the possible presence of Leishmania infection in an area where Lutzomyia longipalpis and Lutzomyia evansi, both vectors of Leishmania infantum, have been described. Methods. We analyzed skin lesions of 25 dogs by immunohistochemistry and PCR. Results. We found a 60% prevalence of Leishmania-infected dogs, the infection rate being higher in males than females. Thus, we established a new focus of canine leishmaniasis, and although to date no patients have been reported in this municipality, it is close to and shares the same ecological characteristics of dry tropical forests as regions where visceral leishmaniasis has been reported in Mexico. We also include updated information of localities of visceral leishmaniasis in Mexico as well as the distribution of possible sand fly vectors. Conclusions. Our data show the need to ascertain the magnitude of this new focus in view of the current data on human visceral leishmaniasis, a disease that is surging in Mexico.

Chagasic cardiomyopathy is a common disease in Latin America, however similar clinical pictures exist that can be confused with this, as they give negative results to the tests that detects T. cruzi, like non Chagasic rural endemic chronic cardiopathy, highly common in Venezuela. Using histopathology techniques, "idiopathic cardiomyopathy" is frequently found as the cause of death when the etiology of this disease is not known. This paper presents the case of a man of 26 years old who died of dilated cardiomyopathy secondary to leptospirosis. Clinically, in addition to the cardiac failure, jaundice, hyperbilirubinemia, transaminases increase, proteinuria and hematuria were present. Initially it was suspected Chagasic cardiomyopathy but the epidemiologic background and the parasitologic and serologic tests for T. cruzi gave negative results. The dark field microscopy videorecording of blood and urine samples, argentic impregnation and immunohistochemistry tests as well as haemoculture in EMJH medium were positive for L. interrogans serovar Pomona. Postmortem we confirmed the presence of leptospira in different tissues through of histopathology, argentic impregnation, indirect immunofluorescence and immunohistochemistry.

La miocardiopatía chagásica es común en Latinoamérica, sin embargo, existen cuadros similares que se pueden confundir con ésta, pero son negativos a las pruebas para detectar T. cruzi, como la cardiopatía crónica endémica rural no chagásica, común en Venezuela. En México y otros países es común encontrar como causa de muerte la "miocardiopatía idiopática" cuando no se encuentra la etiología de la misma. Se presenta el caso de un hombre de 26 años que murió por miocardiopatía dilatada secundaria a leptospirosis. Clínicamente, además de la falla cardiaca destacaban ictericia, hiperbilirrubinemia, elevación de transaminasas, hematuria y proteinuria. Inicialmente se había sospechado miocardiopatía chagásica, pero los antecedentes epidemiológicos y las pruebas parasitológicas y serológicas para T. cruzi fueron negativos. Se le practicó videograbación en microscopía de campo oscuro en sangre y orina, impregnación argéntica, inmunohistoquímica y hemocultivo en medio EMJH, positivos todos a leptospirosis. El cultivo fue positivo a L. interrogans serovariedad Pomona. Postmortem se confirmó la detección de leptospira en tejidos mediante histopatología, impregnación argéntica, inmunofluorescencia indirecta e inmunohistoquímica.

This work attempts to summarize the most important historical data concerning knowledge on Chagas' disease in Mexico and its correlation with other Latin-American countries, from the discovery of triatomines, whose transmission capacity was unknown at the time to recent works that treat elimination forms of transmission by vectors and blood transfusion, as well as intents to improve disease diagnosis by means of molecular biology. Among the most important data on Mexico, we mention those related with the discovery of Chagas' disease and its disease transmitters and reservoir, and the manner in which the Campaña Nacional de Erradicacion Paludica simultaneously controls malaria and Chagas' disease, which avoided Mexico becoming to be a hyperchagasic country. This national campaign employed the method of periodic spraying of DDT and other insecticides within the population's households. Thus, we additionally have noted the existence of visceral and congenital Chagas' disease. Other important information comprises epidemiologic data obtained through the Encuesta Nacional Seroepidemiologica vs Enfermedad de Chagas and the Encuesta sobre el Riesgo de Transmision de Trypanosoma cruzi by Hemotransfusion, in addition to the mains works of the most widely recognized Mexican authors from Mazzotti to date. We also attempt to recognize herein the sole researcher who achieved simultaneous discovery of the disease's transmitter, its etiologic agent, and the disease itself: Carlos Chagas. Finally, in view of that fact that at present frequent detection has occurred of cases of cardiomyopathy apparently due to Chagas' disease that are, on the one hand, negative for serology test and other diagnostic means for T. cruzi and that on the other hand have been confirmed as positive for Leptospira interrogans by tests including Leptospira isolates, we emphasize the importance of diagnosing the presence of this bacteria in the previously mentioned type of patient.

El trabajo intenta resumir los datos históricos más importantes sobre el conocimiento de la enfermedad de Chagas en México y su correlación con otros países latinoamericanos, desde el descubrimiento de los triatóminos, de los cuales se desconocía en ese entonces su capacidad de transmisión, hasta los recientes trabajos sobre eliminación de la transmisión vectorial y por hemotransfusión, así como los intentos de mejorar el diagnóstico de la enfermedad, utilizando métodos de biología molecular. Entre los datos más importantes sobre México, se citan los de los descubrimientos de la enfermedad de Chagas, de los transmisores y reservorios, así como la forma en que la Campaña Nacional de Erradicación Palúdica, simultáneamente al control de la malaria, evitó que México se convirtiera en un país hiperchagásico, mediante los rociados periódicos intradomiciliarios con DDT y otros insecticidas, la existencia de Chagas visceral y congénito, así como otros datos seroepidemiológicos obtenidos por la encuesta serológica nacional, los de riesgo de transmisión de Trypanosoma cruzi por hemotransfusión, además de los principales trabajos de los autores mexicanos más reconocidos, desde Mazzotti hasta nuestros días. También se hace un reconocimiento al único investigador que ha logrado simultáneamente, descubrir al transmisor, al agente etiológico y a la enfermedad: Carlos Chagas. Finalmente, en vista de que se están detectando casos frecuentes de miocardiopatía aparentemente chagásica negativos por serología y otros métodos diagnósticos a T. cruzi, y positivos, incluso por cultivo a Leptospira interrogans, se hace hincapié en el diagnóstico de esta bacteriosis en ese tipo de enfermos.

Se valoró que a pesar de ser la serología y particularmente la técnica de aglutinación microscópica, los métodos más recomendados para realizar el diagnóstico de leptospirosis, con frecuencia fracasa en el diagnóstico de casos individuales y brotes, en los cuales este termina realizándose postmortem, mediante impregnación argéntica e inmunohistoquímica, además de ser incapaz de diagnosticar leptospirosis crónica, porque en esta, los títulos de anticuerpos son muy bajos (≤1:80). Por ello y por la necesidad de un diagnóstico de laboratorio veraz y oportuno, se realizó un estudio comparativo de la videograbación en campo oscuro, apuntalada por la impregnación argéntica y la inmunohistoquímica en sangre y orina, contra la serología por la técnica de aglutinación microscópica, en 60 pacientes con leptospirosis crónica. La videograbación en campo oscuro, la impregnación argéntica y la inmunohistoquímica resultaron mucho más sensibles que la técnica de aglutinación microscópica, además de ser comparables entre sí, por lo que la videograbación es recomendable para realizar un diagnóstico rápido, temprano y económico, en particular si se asocia a la inmunohistoquímica o la impregnación argéntica. Asimismo, al cultivar estas muestras se obtuvieron 2 cepas de 82 % de primocultivos positivos, y se obtuvo una microfotografía electrónica en la sangre periférica de uno de los casos estudiados, lo que asegura el estudio y avala la existencia de la leptospirosis crónica.

26 patients with active posterior uveitis were studied by methodologies for the confirmation of leptospirosis. ELISA-IgG was positive in 10 patients and MAT in 21. Leptospiras were observed in blood and urine. The results suggest that posterior uveitis may be caused by pathogenic leptospiras.

Se estudiaron 26 pacientes de uveitis posterior activa mediante metodologías para la confirmación de leptospirosis. ELISA-IgG fue positivo en 10 pacientes y MAT en 21. Se observaron leptospiras en sangre y orina. Los resultados sugieren que la uveitis posterior puede ser causada por leptospiras patógenas.

400 patients were studied by microscopic videorecording in dark field and MAT. The videorecording in blood was positive in 93 % and, in urine, in 95 %. Of the total of cases, 96 % presented antibody titers. The wide symptomatic range gave origin to more than 50 different diagnoses in the studied patients, who were confirmed that they suffered from chronic leptospirosis by the diverse tests made.

Se estudiaron 400 pacientes mediante videograbación microscópica en campo oscuro y MAT. La videograbación en sangre fue positiva en 93 % y en orina en 95 %. Del total de los casos, 96 % presentó títulos de anticuerpos. La amplia gama sintomática dio origen a más de 50 diagnósticos diferentes en los pacientes estudiados, a los que se les comprobó por las diferentes pruebas realizadas que padecían leptospirosis crónica.

Two cases of chronic leptospirosis in bicitopenic and pancitopenic patients. respectively, with mucocutaneous and visceral bleedings were presented. They were diagnosed myeloblastic leukemia M3 and acute lymphoblastic leukemia L2 by bone marrow aspiration and they were treated as such at the hematology department of a general hospital. Both patients died after one of them had considerably improved on being treated with sodium crystalline penicillin at high doses. The histopathological studies could not demonstrate the presence of neoplastic cells in bone marrow but leptospiras were found by means of silver stained preparations (Warthin - Starry) and immunofluorescence, both in this organ and in other tissues studied: kidney., spleen, liver and lungs. The histopathological diagnoses were generalized leptospirosis with medullary aplasia and generalized leptospirosis with myelodisplastic syndrome, respectively. It was reviewed the possibility that leptospira could cause leukemoid syndromes and/or leukemia. Based on these results, it is recommended to hematologists, infectologists, pathologists, and others, to use again the technques of argentic impregnation, immunohystochemistry and immunofluorescence to study the bone marrow and other tissues in order to detect the possible presence of leptospira that would allow to treat the patients more effectively, particularly, patients like these that had serological titres considered negatives so as to avoid the false security existing in the official health institutions about the minimum or null impact that leptospirosis cause in public health, which imply the absence of control systems for this spirochetosis.

Se presentaron 2 casos de leptospirosis crónica, en pacientes bicitopénico y pancitopénico respectivamente, con sangrados mucocutáneos y viscerales, diagnosticados de leucemia mieloblástica M3 y leucemia linfoblástica aguda L2, mediante aspirados de médula ósea y tratados como tales por el servicio de Hematología de un Hospital General. Ambos pacientes fallecieron, después de que uno de ellos había mostrado mejoría importante al ser tratado con penicilina sódica cristalina a dosis altas. Los estudios histopatológicos no pudieron demostrar la presencia de células neoplásicas en médula ósea y sí de leptospiras, mediante preparaciones teñidas con plata (Warthin-Starry) e inmunofluorescencia, tanto en este órgano, como en otros tejidos estudiados: riñones, bazo, hígado y pulmones. Los diagnósticos histopatológicos fueron los de leptospirosis generalizada con aplasia medular y leptospirosis generalizada con síndrome mielodisplásico, respectivamente. Se revisó la posibilidad de que Leptospira pueda causar síndromes leucemoides y/o leucemia y basados en los resultados se recomienda a hematólogos, infectólogos, patólogos, y otros, a volver a utilizar las técnicas de impregnación argéntica, inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, al estudiar médula ósea y otros tejidos, para detectar la posible presencia de leptospiras y así tratar de forma eficaz al paciente; particularmente en pacientes que como estos tuvieron títulos serológicos considerados como negativos, para evitar la falsa seguridad en las instituciones sanitarias oficiales acerca del mínimo o nulo impacto de la leptospirosis en la salud pública, lo que implica la ausencia de sistemas de control para esta espiroquetosis.