Resumo Os aspectos macroscópicos, histológicos e moleculares de Sarcocystis spp. foram examinados nos tecidos de dois bovinos e quatro ovinos, 16 e oito fragmentos analisados, respectivamente, condenados no matadouro. Todas as 24 amostras foram coletadas e analisadas para detecção de macrocistos e lesões macroscópicas. Posteriormente, subdivididas para exame direto, reação em cadeia da polimerase e exame histopatológico. Todas as amostras de tecidos de ovelha apresentavam cistos grosseiramente visíveis, caracterizados como brancos, de redondos a ovais e estruturas variando de 0,3 a 1 cm de diâmetro. Em contraste, os tecidos de bovinos não apresentavam cistos grosseiramente visíveis, mas tinham focos branco-amarelos com contornos irregulares, distribuídos aleatoriamente. Todas as amostras de bovinos e ovinos apresentavam cistos microscópicos. No exame histológico de tecidos ovinos foram observadas estruturas basofílicas circulares a alongadas, encapsuladas, variando de 30 a 3.000 µm de comprimento e 20 a 1.000 µm de largura dentro das fibras do músculo esquelético. Nos tecidos de bovinos, todos os quatro fragmentos de músculo cardíaco analisados continham estruturas basofílicas circulares a alongadas, dentro dos cardiomiócitos e em algumas fibras de Purkinje. PCRs foram realizadas utilizando-se os "primers" 2L e 3H. Em conclusão, todos os 24 tecidos estavam infectados com Sarcocystis spp., sendo S. gigantea (em ovinos) e S. cruzi (em bovinos) as espécies identificadas por sequenciamento.

Abstract The macroscopic, histological, and molecular aspects of Sarcocystis spp. were examined in the tissues of two cattle and four sheep, 16 and eight fragments analyzed respectively, condemned in the slaughterhouse. All 24 samples were collected and analyzed for detecting macrocysts and macroscopic lesions. Subsequently, subdivided for direct examination, polymerase chain reaction and histopathological examination. All sheep tissues samples had grossly white round to oval tissue cysts, ranging from 0.3 to 1 cm in diameter. In contrast, cattle tissues did not present grossly visible cysts but had randomly distributed white-yellow foci with irregular contours. All samples from cattle and sheep had microscopic cysts. In the histological examination of sheep tissues, circular to elongated, encapsulated, basophilic structures ranging from 30 to 3,000 µm in length and 20 to 1,000 µm in width were observed within the skeletal muscle fibers. In cattle tissues, all cardiac muscle four fragments analyzed contained circular to elongated basophilic structures inside cardiomyocytes and in some Purkinje fibers. PCR were performed using the primers: 2L and 3H. In conclusion, all 24 tissues were infected with Sarcocystis spp., and S. gigantea (in sheep) and S. cruzi (in cattle). were the identified species by sequencing.

Resumo Sarcocystis spp., Neospora spp. e Toxoplasma gondii são protozoários que pertencem ao filo Apicomplexa e que podem afetar equinos. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos contra Sarcocystis spp., Neospora spp. e T. gondii. A presença de lesões histológicas, cistos teciduais e DNA de Sarcocystis spp. no miocárdio de equinos abatidos no sul do Brasil também foi investigado. Um total de 197 amostras de soro juntamente com as respectivas amostras de coração, foram avaliadas por sorologia e exame microscópico direto. Destas amostras, 50 foram selecionadas e submetidas a análise histopatológica e PCR. Anticorpos contra pelo menos um dos protozoários foi detectado em 146 (74,1%) das amostras de soro. As frequências de sorologia positiva foram: 36% (71/197) para Sarcocystis spp., 39,1% (77/197) para Neospora spp. e 47,2% (93/197) para T. gondii. Não foram encontradas lesões histopatológicas, cistos e DNA de Sarcocystis spp. nas amostras de miocárdio dos equinos. As frequências de soropositividade para Sarcocystis spp., Neospora spp. e T. gondii mostra que os equinos podem ser frequentemente infectados por estes parasitas no sul do Brasil. A ausência de sarcocistose no coração dos equinos é compatível com seu papel como hospedeiro errático/acidental no ciclo de vida deste protozoário.

Abstract Sarcocystis spp., Neospora spp., and Toxoplasma gondii are Apicomplexa protozoa that can infect horses. This study aimed to investigate the occurrence of antibodies against Sarcocystis spp., Neospora spp., and T. gondii in horses slaughtered in southern Brazil. The presence of histological lesions, tissue cysts, and Sarcocystis spp. DNA in the hearts of these horses was also investigated. A total of 197 paired serum and heart samples were evaluated by serology and direct microscopic examination; 50 of these samples were subjected to histopathological and PCR analyses. Antibodies against at least one of the protozoa were detected in 146 (74.1%) of the serum samples. The frequencies of positive serology were: 36% (71/197) against Sarcocystis spp., 39.1% (77/197) against Neospora spp., and 47.2% (93/197) against T. gondii. No cysts, Sarcocystis spp. DNA, or histopathological lesions were observed in myocardial tissue samples. The frequencies of antibody seropositivity against Sarcocystis spp., Neospora spp., and T. gondii showed that horses are frequently infected by these parasites in southern Brazil. The absence of sarcocysts in horse tissues is compatible with their role as aberrant/accidental hosts in the life cycle of Sarcocystis spp..

RESUMO: Infecções causadas por protozoários da família Sarcocystidae apresentam distribuição mundial, sendo comuns em ruminantes, responsáveis por causar importantes perdas econômicas. Este estudo avaliou infecções de Sarcocystis spp., Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos da região sudoeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Foram coletadas amostras de miocárdio de 80 ovinos criados em sistema extensivo. Cistos teciduais foram detectados por exame direto, com a presença dos agentes confirmada por PCR. A avaliação macroscópica não revelou alterações, porém, no exame microscópico direto, foram verificados cistos em 76,2% (61/80, 95% IC: 66,9-85,9) das amostras, sendo todos morfologicamente semelhantes ao Sarcocystis tenella ou Sarcocystis arieticanis. A PCR detectou DNA de Sarcocystis spp. em 21,2% (17/80, IC: 12,3-30,2) das amostras testadas e DNA de T. gondii em 15% (12/80, IC: 7,2-22,8). Em 6,2% (5/80, IC: 2,1-13,9), foram detectados DNA de ambos os protozoários. Todas as amostras positivas no PCR (23,7%-19/80, IC: 14,4-33,1) também foram positivas no exame direto (cistos microscópicos). Assim, uma alta ocorrência de cistos teciduais microscópicos em ovinos da região sudoeste do Rio Grande do Sul foi detectada. Apesar de a PCR não ter mostrado uma boa sensibilidade na identificação dos agentes causadores desses cistos, foi possível verificar a presença de Sarcocystis spp. e T. gondii em amostras do músculo cardíaco de ovinos. Dessa maneira, a presença destes protozoários pode predispor a contaminação de humanos e animais.

ABSTRACT: Infections caused by protozoa belonging to the Sarcocystidae family have worldwide distribution and are common in ruminants, leading to considerable economic losses. This study evaluates Sarcocystis spp., Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections in sheep from Southwest region of Rio Grande do Sul, Brazil. Myocardium samples of 80 sheep raised on extensive system were collected. Tissue cysts were detected by direct examination and presence of infective agents was confirmed by PCR. Macroscopic evaluation did not reveal changes, but direct microscopic examination showed cysts in 76.2% (61/80, 95% CI: 66.9 - 85.9) samples, and all cysts were morphologically similar to those caused by Sarcocystis tenella or Sarcocystis arieticanis. PCR detected Sarcocystis spp. DNA in 21.2% (17/80, CI: 12.3-30.2) of the tested samples and T. gondii DNA in 15% (12/80, CI: 7.2-22.8). Moreover, 6.2% (5/80, CI: 2.1-13.9) samples contained DNA of both protozoan. The presence of N. caninum nucleic acids was not observed in tested samples. However, all PCR-positive samples (23.7%-19/80, CI: 14.4-33.1) were also positive by direct examination (microscopic cysts). Thus, a high occurrence of microscopic tissue cysts was detected in sheep from southwest region of Rio Grande do Sul State. Although PCR did not show good sensitivity to identify the causative agents of these cysts, it revealed the presence of Sarcocystis spp. and T. gondii in ovine cardiac muscle samples. This may predispose the contamination of animals and humans by these protozoa.