INTRODUÇÃO: O cobre é um nutriente essencial para os humanos, e a manutenção dos seus níveis é importante, uma vez que seu metabolismo está envolvido com estresse oxidativo e patologias, como a Doença de Wilson. Neste trabalho, um método de espectrofotometria visível (espectrofotometria Vis) foi validado, aplicado em indivíduos jovens e comparado com espectrometria de absorção atômica com chama (EAA-chama). MÉTODOS: Concentrações séricas de cobre foram medidas por EAA-chama e por espectrofotometria Vis, através da reação de cobre com batocuproína, l = 484 nm. Curvas analíticas em solução aquosa e com adição de padrão foram efetuadas para verificar linearidade, recuperação e precisão do método espectrofotométrico. Amostras de sangue de 12 indivíduos (média de idade 22 anos) foram analisadas por ambos os métodos e comparadas entre si. Os resultados foram expressos em média ± desvio-padrão. RESULTADOS: As curvas com adição de padrão e aquosa (n = 5) apresentaram coeficientes de regressão superiores a 0,99 e de variação inter e intradia inferiores a 15%. Os valores de cobre sérico encontrados para o método espectrofotométrico foram 1,17 ± 0,39 e 0,73 ± 0,14 mg/l para mulheres e homens, respectivamente. Para EAA-chama foram encontrados 1,13 ± 0,43 e 0,59 ± 0,13 mg/l para mulheres e homens, respectivamente. Os resultados mostraram correlação de Pearson significativa (r = 0,946; p < 0,05). Os níveis séricos de cobre foram significativamente maiores em mulheres do que em homens (p < 0,05). CONCLUSÃO: O método espectrofotométrico visível demonstrou ser linear, reprodutível e aplicável, oferecendo uma alternativa confiável à quantificação de cobre por EAA-chama. Além disso, é uma técnica simples, rápida e barata, que pode ser utilizada na rotina laboratorial clínica.

BACKGROUND: Copper is an essential nutrient for humans and maintenance of its adequate levels is important, since its metabolism is involved with oxidative stress and patolologies, such as Wilson's disease. In this work, a visible spectrophotometric method was validated, applied in young subjects and compared to flame atomic absorption spectrometry (FAAS) in serum copper levels determination. METHODS: Serum copper concentrations were measured by FAAS and by spectrophotometry, through copper reaction with bathocuproine, l = 484 nm. Aqueous curves and spiked serum curves were realized to verify linearity, recovery and precision of the visible spectrophotometric method. Blood samples from 12 subjects (mean 22 years) were analyzed in both methodologies and compared to each other. The results were expressed by mean ± standard deviation. RESULTS: Spiked serum and aqueous curves (n = 5) showed coefficient of regression superior to 0.99 and inter and intra-day coefficient of variation lower than 15%. The serum copper values found to Vis spectrophotometric method were 1.17 ± 0.39 and 0.73 ± 0.14 mg/l to women and men, respectively. To FAAS 1.13 ± 0.43 and 0.59 ± 0.13 mg/l were found to women and men, respectively. Both results showed a significant Pearson correlation (r = 0.946; p < 0.05). Besides, serum copper levels were significantly higher in women than in men (p < 0.05). CONCLUSION: The Vis spectrophotometric method demonstrated to be linear, reproducible and applied, offering a reliable alternative to FAAS copper quantification. Moreover, Vis spectrophotometry is a simple, quickly and not expensive technique, and it could be widely used as routine in clinical laboratory.

Large differences in reduced glutathione (GSH) levels have been found in different investigations, also in healthy people. GSH oxidation in vitro has been associated with sample acidification in the presence of oxihemoglobin. In this work, the influence of different acids on GSH determination utilizing HPLC with UV detection was evaluated. The results showed that metaphosphoric acid and sulfosalicylic acid were inadequate for analysis, because metaphosphoric acid showed to be inefficient for deproteinization and with sulfosalicylic acid loss of GSH was observed. Trichloroacetic acid did not effect GSH quantification, since the deproteinized form was immediately derivatized with 5, 5´-dithio-bis (2-nitrobenzoic) acid. Methods with TCA deproteinization presented linear results from 0.5 to 3.0 mM. The correlation coefficient between aqueous curves and GSH spiked RBC exceeded 0.99. Precision calculations showed CV lower than 10% and bias within ± 10% for concentrations of 0.5; 1.5 and 3.0 mM GSH. The recovery was higher than 94%. Moreover, GSH blood concentrations were independent of hemoglobin concentrations.

Este trabalho descreve um estudo sistemático do comportamento voltamétrico da anfepramona no eletrodo de mercúrio de gota pendente (HMDE) por voltametria cíclica (CV) e voltametria de corrente alternada (AC). Os estudos mostraram o comportamento adsortivo da anfepramona no HMDE e foram realizados em soluções de H2SO4 0,1 mol L-1 (pH 1.0) e tampão de Ringer (pH 11,0) como eletrólito suporte. A faixa linear para a determinação de anfepramona por voltametria de pulso diferencial de varredura linear (DPV) foi de 0,05 a 2,0 mg L-1 (r = 0,998) em meio ácido e de 0,25 a 4,0 mg L-1 (r = 0,994) em meio alcalino. Os desvios padrão relativos calculados para 5 medidas de anfepramona 0,5 mg L-1 em meio ácido e meio alcalino foram de 2,5 e 4,0%, respectivamente. Os limites de detecção calculados para a determinação de enfepramona em meio ácido e meio alcalino foram de 0,035 e 0,18 mg L-1, respectivamente. As metodologias foram aplicadas para a determinação de anfepramona por DPV em cápsulas e comprimidos de formulações farmacêuticas usadas no tratamento da obesidade. Os valores de recuperação entre 90,0 e 101,0% para anfepramona adicionada a misturas sintéticas contendo femproporex, mazindol, sibutramina, fluoxetina, cafeína, diazepan e metformina provam a aplicabilidade do método para a sua determinação na presença de outras drogas normalmente adicionadas de forma ilegal a formulações farmacêuticas comercializadas como medicamentos naturais.

This paper describes a systematic study of the voltammetric behavior of amfepramone at the hanging mercury drop electrode (HMDE) by cyclic (CV) and alternating current (AC) voltammetric methods. The studies showed the adsorptive behavior of amfepramone at the HMDE and were performed in H2SO4 0.1 mol L-1 (pH 1.0) and Ringer buffer (pH 11.0) as supporting electrolytes. The linear range for the amfepramone determination by differential pulse voltammetry (DPV) was 0.05 to 2.0 mg L-1 (r = 0.998) in acidic medium and 0.25 to 4.0 mg L-1 (r = 0.994) in alkaline medium. The relative standard deviation calculated was 2.5% and 4.0 % for five measurements of 0.5 mg L-1 amfepramone in acidic and alkaline medium, respectively. The detection limits calculated for the amfepramone determination in acidic and alkaline medium were 0.035 e 0.18 mg L-1, respectively.The methods were applied for the determination of amfepramone by DPV in tablets and capsules of pharmaceutical formulations used in the treatment of obesity. Recoveries values ranging from 90.0 to 101.0% for amfepramone added to synthetic mixtures containing fenproporex, mazindol, sibutramine, fluoxetine, caffeine, diazepam, and metformin as interferents prove the applicability of the method for its determination in the presence of other drugs normally added illegally to pharmaceutical formulations commercialized as natural medicaments.