Abstract The objective of the study was to carry out phytochemical prospection through colorimetric tests to determine the groups of secondary metabolites and also to determine the total content of phenolic compounds (TPC) present in plant extracts methanol (ME), ethyl acetate (EAE), hexane (HE) and dichloromethane (DE) from the leaves of Myrsine umbellata, as well as to investigate the antimicrobial activity against twelve standard ATCC strains by the broth microdilution technique; the antioxidant potential by the DPPH method and the ABTS method and the antibiofilm potential on the biofilm biomass of standard bacteria by the crystal violet technique and tetrazolium salt reduction (MTT) assay. Phytochemical prospection detected the presence of saponins, steroids, alkaloids, anthocyanins, anthocyanidins, flavonoids, and tannins. The results of the quantitative phytochemical estimation revealed a higher content of total phenolics in DE (280.24 ± 0.037 µM GAE g ext. -1) followed by ME (159.01 ± 0.031 µM GAE g ext. -1). The ME showed the best biological activities when compared to the other extracts tested. We observed antimicrobial activity against Gram-positive Staphylococcus epidermidis strain (MIC 3.12 and MBC 6.25), antioxidant percentage of 92.58% against the DPPH radical and 420.31 µM Trolox g ext. -1 against the ABTS radical, finally showed antibiofilm action against Gram-positive strain Staphylococcus aureus, with eradication of the biomass in 92.58%. The results suggest that EM from M. umbellata represents an alternative source of plant bioactives for the development of natura products. TPC (TPC ME, , (ME) EAE, EAE (EAE) HE (HE (DE MTT (MTT assay saponins steroids alkaloids anthocyanins anthocyanidins flavonoids tannins 280.24 28024 280 24 (280.2 0037 0 037 0.03 ext 1 159.01 15901 159 01 (159.0 0031 031 1. . tested Grampositive Gram positive MIC 312 3 12 3.1 6.25, 625 6.25 6 25 6.25) 9258 92 58 92.58 42031 420 31 420.3 - aureus M products (ME (EAE 280.2 2802 28 2 (280. 003 03 0.0 159.0 1590 15 (159. 3. 62 6.2 925 9 5 92.5 4203 42 420. 280. (280 00 0. 159. (159 6. 92. 4 (28 (15 (2 (1 (

Resumo O objetivo do estudo foi realizar a prospecção fitoquímica através de testes colorimétricos para determinar os grupos de metabólitos secundários e também determinar o teor total dos compostos fenólicos (TPC) presente nos extratos vegetais metanol (EM), acetato de etila (EAE), hexano (EH) e diclorometano (ED) das folhas de Myrsine umbellata, bem como investigar a atividade antimicrobiana contra doze cepas padrão ATCC pela técnica de microdiluição em caldo; o potencial antioxidante pelo método DPPH e pelo método ABTS e o potencial antibiofilme sobre a biomassa padrão de biofilmes bacterianos pela técnica do cristal violeta e ensaio de redução do sal de tetrazólio (MTT). A prospecção fitoquímica detectou a presença de saponinas, esteróides, alcaloides, antocianinas, antocianidinas, flavonoides e taninos. Os resultados da estimativa fitoquímica quantitativa revelaram maior teor de fenólicos totais em ED (175,15 ± 0,037 µM GAE g ext. -1) seguido de EM (159,02 ± 0,031 µM GAE g ext. -1). O EM apresentou as melhores atividades biológicas quando comparado aos demais extratos testados, observamos atividade antimicrobiana contra cepa Gram-positiva S. epidermidis (MIC 3.12 e MBC 6.25), percentual antioxidante de 92,58% frente ao radical DPPH e 420,44 mg Trolox g ext. -1 frente ao radical ABTS, por fim apresentou ação antibiofilme contra cepa Gram-positiva S. aureus, com erradicação da biomassa em 92,58%. Os resultados sugerem que o EM de M. umbellata representa uma fonte alternativa de bioativos vegetais para o desenvolvimento de produtos em natura. TPC (TPC EM, , (EM) EAE, EAE (EAE) EH (EH (ED caldo MTT. MTT . (MTT) saponinas esteróides alcaloides antocianinas antocianidinas taninos 175,15 17515 175 15 (175,1 0037 0 037 0,03 ext 1 159,02 15902 159 02 (159,0 0031 031 1. testados Grampositiva Gram positiva S MIC 312 3 12 3.1 6.25, 625 6.25 6 25 6.25) 9258 92 58 92,58 42044 420 44 420,4 - aureus M natura (EM (EAE (MTT 175,1 1751 17 (175, 003 03 0,0 159,0 1590 (159, 31 3. 62 6.2 2 925 9 5 92,5 4204 42 4 420, 175, (175 00 0, 159, (159 6. 92, (17 (15 (1 (

Resumo A espécie Eugenia involucrata DC. é uma planta nativa do Brasil e tradicionalmente utilizada para problemas intestinais, porém, poucas pesquisas documentam sobre seu potencial biológico e perfil fitoquímico. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar uma prospecção fitoquímica preliminar, o potencial antimicrobiano e antioxidante dos extratos de E. involucrata. A partir das folhas de E. involucrata, foram obtidos extratos aquosos e orgânicos com os seguintes solventes (etanol, metanol, hexano, acetona, diclorometano e acetato de etila). A prospecção fitoquímica detectou a presença de saponinas, esteroides, flavonóides e taninos nos extratos. Os extratos etanólico e metanólico apresentaram atividade antimicrobiana para a maioria das cepas bacterianas testadas, assim como para a levedura Candida albicans, com concentrações entre 3,12 e 50 mg/mL. Os extratos etanólico e metanólico apresentaram alto potencial de sequestro de radicais livres (> 90%). O extrato metanólico apresentou IC50 estatisticamente igual ao encontrado para o antioxidante comercial BHT (p <0,05). Os extratos brutos obtidos com etanol e metanol foram os mais promissores. Esses resultados sugerem que os extratos metanólico, etanólico e aquoso são uma fonte promissora de bioativos naturais.

Abstract The species Eugenia involucrata DC. is a plant native to Brazil and is traditionally used for intestinal problems, however, little research has documented about its biological potential and phytochemical profile. Thus, the objective of this study was to carry out preliminary phytochemical prospecting, antimicrobial and antioxidant potential of E. involucrata extracts. Using the E. involucrata leaves, aqueous and organic extracts were obtained using the following solvents (ethanol, methanol, hexane, acetone, dichloromethane and ethyl acetate). The phytochemical prospecting detected the presence of saponins, steroids, flavonoids and tannins in the extracts. Ethanolic and methanolic extracts presented antimicrobial activity for most of the bacterial strains tested, as well as for yeast Candida albicans, with concentrations between 3.12 and 50 mg/mL. The ethanolic and metanolic extract presented high free radical sequestration potential (>90%). The methanol extract showed an IC50 value statistically equal to that found for the commercial antioxidant BHT (p <0.05). The crude extracts obtained with ethanol and methanol were the most promising. These results suggest that methanolic, ethanolic and aqueous extracts are a promising source of natural bioactive.

Resumo Os produtos do metabolismo secundário das plantas têm despertado grande interesse econômico, dada sua diversidade química e atividades biológicas. Neste sentido, o estudo objetivou avaliar a composição fitoquímica, atividade antimicrobiana, inseticida e antioxidante dos extratos vegetais e óleo de Myrcia oblongata. Foram detectados a presença de saponinas, esteróides, triterpenóides, taninos e flavonóides. Os extratos apresentaram capacidade antimicrobiana sobre os microrganismos testados, exceto o extrato metanólico que não demonstrou atividade para P. mirabilis e S. Enteritidis. Quanto a análise de compostos antioxidantes observou-se que os extratos hexânico, acetato de etila e acetona apresentaram maiores atividades antioxidantes e também maior performance inseticida sobre a larva Alphitobius diaperinus e exibindo mortalidade de 80% na fase adulta. Os resultados aqui reportados mostram que pode haver uma relação entre potencial antioxidante e efeito inseticida do óleo de Myrcia oblongata; os componentes presentes tanto no extrato como o oléo podem ser utilizados como alternativa natural aos compostos sintéticos no controle biológico de parasitas e microrganismos patogênicos.

Abstract The secondary metabolism products of plants have influenced great economic interest, given their chemical diversity and biological activities. Because of this, this study evaluates the phytochemical composition, antimicrobial activity, insecticidal, and antioxidant activity of plant extracts and oil of Myrcia oblongata. Saponins, steroids, triterpenoids, tannins, and flavonoids were detected. The extracts showed antimicrobial capacity on the tested microorganisms, except for the methanolic extract, which showed no activity for P. mirabilis and S. enteritidis. Regarding the analysis of antioxidant compounds, the hexanic, ethyl acetate and acetone extracts showed higher antioxidant activities and also higher insecticidal performance on Alphitobius diaperinus larvae, resulting in 80% adult mortality. The results reported here show that there may be a relationship between antioxidant potential and the insecticidal effect of Myrcia oblongata DC. The components present in both the extract and the oil can be used as natural alternative to synthetic compounds in the biological control of parasites and pathogenic microorganisms.

Resumo A espécie Myrsine umbellata é uma planta nativa do Brasil, tradicionalmente suas cascas são empregadas em fitoterapia no tratamento de afecções do fígado e combate a hanseníase. Portanto, o objetivo do estudo foi realizar a prospecção fitoquímica dos extratos etanólico (EE) e acetônico (EA) por meio de testes colorimétricos e por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) do óleo essencial (OE) das folhas de M. umbellata; avaliar a atividade antimicrobiana frente a dozes cepas padrões ATCCs pela técnica de microdiluição em caldo; o potencial antioxidante pelo método de redução de DPPH e ação antibiofilme pela técnica do cristal violeta e a viabilidade celular foi determinada usando 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT) com base na densidade óptica. A prospecção fitoquímica dos EE e EA detectou a presença de esteroides livres, alcaloides, flavonoides (flavonas, flavononóis, flavonóis e xantonas) e taninos em ambos os extratos (EE e EA) e de saponinas somente no EE. No OE os compostos majoritários identificados foram elixeno, cariofileno (E), espatulenol, d-cadineno e aromadendreno. O EA apresentou atividade antimicrobiana com valores de CIM e CBM/CFM que variaram de 3,12 a 100 mg.mL-1, destacando sua eficiência sobre a cepa Gram-positiva S. epidermidis. Já EE apresentou potencial antimicrobiano na faixa que variou de 3,12 a 200 mg.mL-1, e a cepa Gram-negativa E. coli foi a mais suscetível. Entretanto, OE apresentou potencial bacteriostático frente às cepas S. Typhimurium, S. Abaetetuba, P. aeruginosa e S. epidermidis. A capacidade de sequestrar radicais livres foi evidenciada no extrato EA com atividade antioxidante de 89,55% e no EE com 63,05%. O potencial antibiofime foi observado no extrato EE que erradicou a biomassa do biofilme maduro de todas as bactérias testadas com elevada atividade (50% a 84,28%) e OE também apresentou efeito antibiofilme sobre o biofilme maduro das cepas E. coli enteroagreativa UEL, S. aureus e S. Enteritidis com percentual de redução de biomassa de 63,74%, 68,04% e 86,19%, respectivamente. Esses resultados indicam o potencial dos extratos e do OE de M. umbellata como fonte de bioativos vegetais para o desenvolvimento de novas estratégias alternativas para o controle de microrganismos resistentes de forma planctônica ou de biofilmes.

Abstract The species Myrsine umbellata is a native plant of Brazil, whose barks are traditionally used in herbal medicine to treat liver disorders and combat leprosy. Therefore, the aim of the study was to identify the phytochemical prospection of ethanolic (EE) and acetonic (EA) extracts by colorimetric tests and by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) of the essential oil (EO) of M. umbellata leaves; evaluate the antimicrobial activity in front of standard ATCC strains by the broth microdilution technique; the antioxidant potential by DPPH reduction method and antibiofilm action by crystal violet assay and cell viability was determined using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) based on optical density. Phytochemical prospection of EE and EA detected the presence of free steroids, alkaloids, flavonoids (flavones, flavononoids, flavonols and xanthons) and tannins in both extracts (EE and EA) and saponins only in EE. In EO, the majority compounds identified were elixene, caryophyllene (E), spatulenol, d-Cadinene and aromadendrene. EA showed antimicrobial activity with MIC and MBC/MFC values ranging from 3.12 to 100 mg.mL-1, highlighting its efficiency on the Gram-positive strain S. epidermidis. EE showed antimicrobial potential in the range of 3.12 to 200 mg.mL-1, and the Gram-negative E. coli strain was the most susceptible. However, OE showed bacteriostatic potential against S. Typhimurium, S. Abaetetuba, P. aeruginosa, and S. epidermidis strains. The ability to sequester free radicals was evident in EA extract with antioxidant activity of 89.55% and in EE with 63.05%. The antibiofilm potential was observed in EE extract which eradicated the mature biofilm biomass of all tested bacteria with high activity (50% to 84.28%) and EO also showed antibiofilm effect on mature biofilm of UEL enteroaggregative E. coli, S. aureus and S. Enteritidis strains with biomass reduction percentage of 63.74%, 68.04% and 86.19%, respectively. These results indicate the potential of M. umbellata extracts and as a source of plant bioactivity for the development of new alternative strategies for the control of planktonic or biofilm-resistant microorganisms.

Resumo Os ecossistemas aquáticos dos rios urbanos são contaminados pela disposição de resíduos, o que representa um problema de saúde pública. Esta pesquisa teve por objetivo avaliar a qualidade das águas utilizadas para recreação e abastecimento público de seis rios da cidade de Cascavel – Paraná, sendo eles: Cascavel, Quati, Bezerra, Antas, Clarito e Amambay. Amostras foram coletadas a cada 4 meses em 2017, e seus parâmetros físico-químicos e microbiológicos, bem como os perfis de resistência das cepas de Escherichia coli aos antimicrobianos distribuídos pelas farmácias da rede básica de saúde, foram avaliados. Parâmetros como temperatura da água, turbidez, nitrogênio total, fósforo total, coliformes totais e coliformes termotolerantes apresentaram diferenças significativas. O limite permitido para coliformes termotolerantes, estabelecido pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente, Resolução 357/2005, foi excedido em todos os seis rios analisados. Foi determinado que 48,1% das cepas de E. coli apresentaram resistência aos nove antimicrobianos testados. Os maiores níveis de resistência foram encontrados para ampicilina (27,7%), tetraciclina (27,7%) e amoxicilina (24,0%). Os resultados deste estudo contribuem para a compreensão dos riscos associados à contaminação de nascentes em centros urbanos com efluentes contendo bactérias resistentes. Portanto, o trabalho de recuperação é necessário nessas áreas, devido à importância dessas fontes de água para toda a região oeste do estado do Paraná.

Abstract Aquatic ecosystems of urban rivers are contaminated through waste disposal, which poses a public health problem. The objective of this research was to evaluate the quality of water used for recreation and public supply of six rivers in the city of Cascavel - Paraná, including Cascavel, Quati, Bezerra, Antas, Clarito and Amambay. Samples were collected every 4 months in 2017, and their physicochemical and microbiological parameters, as well as resistance profiles of strains of Escherichia coli to antimicrobials distributed by pharmacies of the primary healthcare network, were evaluated. Parameters such as water temperature, turbidity, total nitrogen, total phosphorus, total coliforms and thermotolerant coliforms showed significant differences. The allowed limit for thermotolerant coliforms, which was set by National Environment Council, Resolution 357/2005, was exceeded in all of the six analyzed rivers. It was determined that 48.1% of E. coli strains showed resistance to nine antimicrobial tested. The highest levels of resistance were found for ampicillin (27.7%), tetracycline (27.7%) and amoxicillin (24.0%). The results of this study contribute to the understanding of the hazards associated with the contamination of springs in urban centers with wastewater containing resistant bacteria. Therefore, recovery work is necessary in these areas because of the importance of these water sources for the entire western region of Paraná state.

Resumo Os óleos essenciais são compostos extraídos de plantas e podem apresentar propriedades antimicrobianas e antioxidantes. O objetivo deste trabalho foi (a) determinar a composição química do óleo essencial de Guarea kunthiana A. Juss pelo método de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM); (b) avaliar o potencial antimicrobiano deste óleo pelo método de microdiluição em caldo frente a diferentes micro-organismos, sendo cinco bactérias Gram-negativas, quatro Gram-positivas uma levedura e (c) por fim, determinar a atividade antioxidante do óleo pelo método de captura do radical livre 2,2-difenil-1-picril hidrazil (DPPH). As análises de CG-EM resultaram na identificação de 13 constituintes, representando 96,52% da composição do óleo essencial. Os principais compostos identificados foram α-Zingibereno (34,48%), β-Sesquifelandreno (22,90%) e α-Curcumeno (16,17%). Em relação à atividade antimicrobiana, o óleo essencial foi efetivo frente a todos os micro-organismos testados exceto para as bactérias E. coli e K. pneumoniae, as quais se apresentaram resistentes à ação do óleo. Em geral, as bactérias Gram-positivas foram mais suscetíveis à ação do óleo essencial em relação às Gram-negativas. O óleo essencial apresentou potencial.

Abstract The essential oils are extracted from plant compounds and can present activities antimicrobial and antioxidant properties. The goals of the present study were: (a) to determine the chemical composition of the essential oil of Guarea kunthiana A. Juss using the method of gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS); (b) to evaluate the antimicrobial potential of this oil using the broth microdilution method against different microorganisms: five Gram-negative bacteria, four Gram-positive bacteria and a yeast and (c) to determine the antioxidant activity of the oil using the DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) free radical assay. The GC-MS analyses allowed identifying 13 constituents, representing 96.52% of the essencial oil composition. The main compounds identified were α-zingiberene (34.48%), β-sesquiphellandrene (22.90%), and α-curcumene (16.17%). With respect to the antimicrobial activity, the essential oil was effective against all the microorganisms tested, except for the bacteria E. coli and K. pneumoniae, which were resistant to the action of the oil. From a general point of view, Gram-positive bacteria were more susceptible to the action of the essential oil than Gram-negative bacteria. The essential oil exhibited antioxidant potential.

Resumo Os objetivos do trabalho foram determinar as atividades antimicrobiana e antioxidante do óleo essencial e dos extratos vegetais aquoso e etanólico de Psidium cattleianum Sabine; a composição química do óleo essencial P. cattleianum e a triagem fitoquímica dos extratos vegetais aquoso e etanólico da mesma planta. Quanto à atividade antimicrobiana, o extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana moderada frente as bactérias K. pneumonieae e S. epidermidis, enquanto frente aos demais micro-organismos apresentou atividade considerada fraca. O extrato aquoso e o óleo essencial apresentaram atividade considerada fraca, embora tenham inibido o crescimento dos micro-organismos. Em relação ao potencial antioxidante, os extratos etanólico e aquoso apresentaram índice de sequestro superior a 90%, enquanto o óleo essencial não apresentou atividade antioxidante significativa. Para a composição fitoquímica, a maior classe de compostos voláteis identificados no óleo essencial de P. cattleianum foram os hidrocarbonetos terpênicos, sendo eles: α-copaeno (22%), eucaliptol (15%), δ-cadineno (9,63%) e α-selineno (6,5%). Na triagem fitoquímica dos extratos verificou-se a presença de taninos, flavonóides e triterpenóides tanto para o extrato aquoso quanto etanólico. Os extratos e óleo essencial inibiram o crescimento dos micro-organismos e os extratos vegetais apresentaram atividade antioxidante significativa. Também, a caracterização fitoquímica do óleo essencial mostrou a presença de compostos de interesse comercial, assim como os extratos apresentaram a presença de classes e compostos com importantes atividades biológicas.

Abstract The goals of the study were to determinethe antimicrobial and antioxidant activities of essential oil and plant extracts aqueous and ethanolic of Psidium cattleianum Sabine; the chemical composition of the essential oil of P. cattleianum; and the phytochemical screening of aqueous and ethanolic extracts of the same plant. Regarding the antimicrobial activity, the ethanolic extract exhibited moderate antimicrobial activity with respect to bacteria K. pneumoniae and S. epidermidis, whereas, regarding other microorganisms, it showed activity considered weak. The aqueous extract and the essential oil showed activity considered weak, although they inhibited the growth of microorganisms. About the antioxidant potential, the ethanolic and aqueous extracts exhibited a scavenging index exceeding 90%, while the essential oil didn´t show significant antioxidant activity. Regarding the phytochemical composition, the largest class of volatile compounds identified in the essential oil of P. cattleianum included the following terpenic hydrocarbons: α-copaene (22%); eucalyptol (15%), δ-cadinene (9.63%) and α-selinene (6.5%). The phytochemical screening of extracts showed the presence of tannins, flavonoids, and triterpenoids for aqueous and ethanolic extracts. The extracts and essential oils inhibit the growth of microrganisms and plant extracts showed significant antioxidant activity. Also, the phytochemical characterization of the essential oil showed the presence of compounds interest commercial, as well as extracts showed the presence of important classes and compounds with biological activities.

No presente estudo, foram investigadas diferentes substâncias para atuarem como modificadores químicos na determinação direta de cádmio em soro e urina humanos sem digestão prévia das amostras. A preparação da amostra foi feita diretamente nos copos do amostrador automático por diluição 1+4 de soro e 1+1 de urina com ácido nítrico 1% v/v contendo 0.02% v/v de cloreto de tricetil metil amônio (CTAC). Foram investigadas as melhores condições de determinação por meio de curvas de temperatura de pirólise e atomização na presença da matriz e do analito levando-se em conta a forma do pulso de absorção, baixas temperaturas na atomização, fundo corrigido e sensibilidade. Foram efetuados estudos na ausência de modificador e com a mistura universal em solução de Pd e Mg (10 e 15 µg, respectivamente) e com rutênio (500 µg) e irídio (500 µg) como modificadores permanentes. Para Ir permanente, as massas características foram 0.8 pg para soro e 0.7 pg para urina (recomendado de 2 pg). Na investigação do uso de Ir permanente, foi observado que o pico foi simétrico, retornando à linha de base em 3s e com fundo corrigido completamente com valores ótimos por pirólises e atomização de 300 e 1000°C para soro e 300 e 1100ºC para urina. A calibração foi feita por ajuste de matriz e apresentou coeficiente de correlação de regressão linear típico de 0.999. Análises de soro e urina fortificados mostraram recuperações que variaram entre 99.3 e 103.2 com um desvio padrão relativo (RSD, n=3) menor que 12% para soro e entre 93.1 e 102.2% com um RSD menor que 3% para urina. O limite de detecção (k=3, n=10) foi de 8 e 9 pg para soro e urina, respectivamente.

In the present study, different substances were investigated as chemical modifiers in the direct determination of cadmium in human serum and urine without previous digestion of the samples. The preparation of the sample was made directly in autosampler cups by dilution 1+4 of serum and 1+1 of urine with nitric acid 1 % v/v containing 0.02 % v/v of cetiltrimethyl ammonium chloride. The optimum determination conditions through pyrolysis and atomization curves in the presence of the matrix and analyte taking into account the form of the absorption pulses, low atomization temperatures, background correction and sensitivity were investigated. Tests were carried out without chemical modifier, with the universal mixture of Pd and Mg (10 and 15 µg, respectively), with ruthenium (500 µg) and iridium (500 µg) permanent modifiers. For permanent Ir, the m o was 0.8 pg for serum and 0.7 pg for urine (recommended of 2 pg). Upon the investigation of the use of Ir permanent, it was observed that the peak was symmetrical, returned to the baseline in 3s and that the background was fully corrected with optimum values for pyrolysis and atomization at 300 and 1000°C for serum and 300 and 1000ºC for urine. Calibration was made by matrix matching method, and presented r² (coefficient of correlation of linear regression) higher than 0.999. Analyses of spiked serum and urine samples yielded recoveries varying between 99.3 and 103.2 with a relative standard deviation (RSD, n=3) lower than 12% for serum and between 93.1 and 102.2 % with an RSD lower than 3% for urine. The detection limit (k=3, n=10) were 8 and 9 pg for serum and urine, respectively.