RESUMEN La viabilidad denota el potencial que tiene una semilla para germinar, la cual está ligada al éxito o fracaso reproductivo de las poblaciones y de esta manera es una de las primeras variables a evaluar cuando se trabaja con semillas. Nuestro objetivo fue determinar el mejor método para evaluar la viabilidad en 17 especies altoandinas; se comparó la viabilidad mediante dos pruebas: Tetrazolio, para la cual se probaron variaciones de concentración, acondicionamiento y tiempo de exposición; y germinación, que se trabajó bajo condiciones controladas a 20/10 °C, fotoperiodo y termoperiodo de 12 horas. Se utilizó la prueba Kruskal-Wallis para evaluar diferencias. Se encontraron diferencias en el valor de viabilidad entre las pruebas. En 11 especies se recomienda la prueba de Tetrazolio, donde la mejor condición de evaluación fue [1-1,5 %] TZ, 40 °C y 24 horas de exposición. En Puya, Hypericum y Gaultheria la prueba de germinación fue mejor para evaluar la viabilidad. La comparación de las pruebas permitió detectar la presencia de dormancia en algunas especies donde se evidenció una alta viabilidad pero baja germinación. Los resultados permitieron determinar el método más confiable para evaluar la viabilidad en las diferentes especies, aportar información sobre sus requerimientos germinativos y potencial para la propagación sexual, así como detectar la posible presencia de dormancia y la necesidad de profundizar en la evaluación de los métodos de ruptura que permitan aumentar los porcentajes de germinación en algunas de las especies.

ABSTRACT Viability denotes the potential of a seed to germinate, which is linked to the reproductive success or failure of the populations and in this way is one of the first variables to evaluate when working with seeds. Our aim was to determine the best method to assess the viability in 17 high Andean species; the viability obtained by two tests was compared: Tetrazolium, for which variations in concentration, conditioning and exposure time were tested; and germination, which was worked under controlled conditions at 20/10 °C, photoperiod and thermoperiod of 12 hours. The Kruskal-Wallis test was used to evaluate differences. Differences were found between tests. In 11 species the Tetrazolium test is recommended, where the best evaluation condition was [1-1.5 %] TZ, 40 °C and 24 hours of exposure. In Puya, Hypericum, and Gaultheria, the germination was the better test for viability evaluation. The comparison of the tests allowed to detect dormancy in some species where a high viability but low germination was recorded. The results allowed to determine the most reliable method to evaluate the viability in the different species, provide information about their germinative requirements and potential for sexual propagation, as well as detect the possible presence of dormancy and the need to deepen the evaluation of the methods of rupture that allow to increase the percentage of germination in some of the species.

RESUMEN La conservación ex situ de semillas es una de las formas más efectivas de preservación de la biodiversidad y especialmente de la diversidad genética. En el marco del cambio climático su aplicación es una estrategia importante que se debe fortalecer e integrar con la conservación in situ. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la tolerancia a la desecación y la germinación de cuatro especies del género Puya y proporcionar herramientas para su conservación ex situ. Estas especies están distribuidas en el páramo, un ecosistema amenazado a pesar de su valor como reservorio y proveedor de agua para la población urbana. En las semillas se realizó la toma de medidas morfológicas y del contenido de humedad (CH), se realizaron ensayos de germinación en tres contenidos de humedad (semillas frescas, 10-12 % y 3-5 %) y se evaluó el porcentaje de germinación y tiempo medio de germinación. Se registró una germinación superior al 80 % en las cuatro especies y no se encontraron diferencias significativas al disminuir el CH. El tiempo medio de germinación no varió entre especies y la viabilidad fue alta comparada con otras especies de páramo. Los resultados indican que son semillas ortodoxas y las variables morfológicas apoyan esta tendencia. Por tanto, este género presenta un gran potencial para ser conservado en bancos de germoplasma lo que contribuye a la conservación de su diversidad, con las cuales se pueden implementar protocolos de germinación para la propagación y reintroducción en programas de restauración.

ABSTRACT Ex-situ seed conservation is one of the most effective tools for biodiversity and genetic diversity protection. In the context of global climate change, ex situ conservation has become an important strategy that must be strengthen and integrated with in situ conservation strategies. The main objective of this study was to document the desiccation tolerance and germination properties of four species from Puya and provide tools that allow the ex situ conservation of this and other closely related species. These species are distributed in Páramo, a threatened ecosystem despite of its value as a water reservoir and supplier for urban population. Seed morphological variables and moisture content (MC) were measured before a test of germination was conducted with three different moisture contents (fresh seeds, 10-12 % and 3-5 %). Germination percentage and the mean germination time were evaluated. The germination was above 80 % in all the species with no significant differences when decreasing MC. There were no significant differences in mean germination time. Seed viability for the four species was high, as compared to other Páramo species. The results indicate that all species are orthodox. Therefore, this genus has great potential to be conserved in seed banks, which will contribute to diversity conservation of native species from tropical Andean highlands, and can be implemented in germination protocols for their propagation and reintroduction in restoration programs.

At first Rickettsia conorii was implicated as the causative agent of spotted fever in Uruguay diagnosed by serological assays. Later Rickettsia parkeri was detected in human-biting Amblyomma triste ticks using molecular tests. The natural vector of R. conorii, Rhipicephalus sanguineus, has not been studied for the presence of rickettsial organisms in Uruguay. To address this question, 180 R. sanguineus from dogs and 245 A. triste from vegetation (flagging) collected in three endemic localities were screened for spotted fever group (SFG) rickettsiosis in southern Uruguay. Tick extracted DNA pools were subjected to PCR using primers which amplify a fragment of the rickettsial gltA gene. Positive tick DNA pools with these primers were subjected to a second PCR round with primers targeting a fragment of the ompA gene, which is only present in SFG rickettsiae. No rickettsial DNA was detected in R. sanguineus. However, DNA pools of A. triste were found to be positive for a rickettsial organism in two of the three localities, with prevalences of 11.8% to 37.5% positive pools. DNA sequences generated from these PCR-positive ticks corresponded to R. parkeri. These findings, joint with the aggressiveness shown by A. triste towards humans, support previous data on the involvement of A. triste as vector of human infections caused by R. parkeri in Uruguay.

Inicialmente, Rickettsia conorii fue señalada como el agente causal de la fiebre manchada en Uruguay, diagnosticada mediante pruebas serológicas. Posteriormente, Rickettsia parkeri fue detectada mediante técnicas moleculares en garrapatas Amblyomma triste colectadas sobre humanos. El vector natural de R. conorii, Rhipicephalus sanguineus, no ha sido estudiado en cuanto a rickettsias en Uruguay. Para abordar este tema, 180 R. sanguineus fueron colectados sobre perros y 245 A. triste sobre vegetación en tres localidades consideradas endémicas para fiebres manchadas en el sur de Uruguay. El ADN de las garrapatas fue extraído en pools y sometido a una primera PCR utilizando cebadores que amplifican un fragmento del gen gltA, presente en prácticamente todas las especies de Rickettsia. Las muestras positivas fueron sometidas a una segunda PCR con cebadores que amplifican un fragmento del gen ompA, presente sólo en rickettsias del grupo de las fiebres manchadas (GFM). No se detectó ADN rickettsial en R. sanguineus. Sin embargo, muestras de A. triste fueron positivas a rickettsiales en dos de las tres localidades estudiadas, con prevalencias de pools positivos del 11.8 y 37.5% respectivamente. La secuenciación del ADN evidenció la presencia de R. parkeri. Basados en estos resultados junto a los anteriores y la agresividad de A. triste hacia los humanos, se concluye que esta garrapata es vector de rickettsiosis humana por R. parkeri en Uruguay.