RESUMO Colubrina glandulosa (sobraji) é uma espécie madeireira de rápido crescimento e tronco retilíneo, com potencial de formar reflorestamento homogêneo ou associado com outras espécies. Em vista disso, buscou-se estabelecer um protocolo de micropropagação, por meio de sementes e segmentos nodais, visando à produção de mudas em escala comercial. As sementes foram desinfestadas em NaClO 6% por 10, 20 ou 30 minutos e semeadas em meio de cultura MS suplementado, ou não, com 0,5 mL L-1 de Comet®. Os segmentos nodais foram desinfestados em solução de NaClO 2% e de PPM™ 5%, introduzidos em meio de cultura WPM, suplementado com PPM™ (0; 0,2 ou 0,4%) e 0,5 mL L-1 de Comet® associado com 0,75 g L-1 de ampicilina sódica ou 2 mL L-1 Kasumin®. Na multiplicação, segmentos nodais foram cultivados em meio de cultura WPM suplementado com BAP (6-benzilaminopurina) ou mT (meta-topolina) (2; 4; 8 ou 12 µM), combinados com a presença ou ausência de ANA (ácido naftalenoacético) (2 µM) em três subcultivos. No enraizamento, utilizou-se o meio de cultura WPM/2 suplementado com AIB (ácido indolbutírico) (0; 2 ou 4 µM) associado, ou não, com 0,15% de carvão ativado. As mudas enraizadas foram aclimatizadas ex vitro. O maior percentual de germinação (78,57%) foi observado nas sementes tratadas com NaClO 6% por 10 minutos, sem fungicida no meio de cultura. A concentração de 0,2% de PPM™ proporcionou a maior porcentagem de sobrevivência de segmentos nodais (70%). A sucessão dos subcultivos incrementa significativamente a porcentagem de indução de brotos e o maior número de brotos por explante (3,28±1,8) ocorreu na concentração de 2 µM mT. A formação do maior número de raízes observou-se na ausência do carvão ativado sem a necessidade de auxina exógena e na aclimatização, verificou-se alta porcentagem de sobrevivência das mudas. Dessa forma, foi possível obter um protocolo viável de micropropagação, constituindo-se de uma metodologia promissora na produção de mudas.

ABSTRACT Colubrina glandulosa (sobraji) is a fast-growing timber species with a straight trunk, with the potential to form homogeneous reforestation, either by itself or associated with other species. In the view of this, we sought to establish a micropropagation protocol, using seeds and nodal segments, aiming at the production of seedlings on a commercial scale. The seeds were disinfected in NaClO 6% for 10, 20 or 30 minutes and sown in MS culture medium supplemented, or not, with 0.5 mL L-1 of Comet®. The nodal segments were disinfected in 2% NaClO and 5% PPM™ solution, introduced in WPM culture medium, supplemented with PPM™ (0; 0.2 or 0.4%) and 0.5 mL L-1 of Comet® associated with 0.75 g L-1 of sodium ampicillin or 2 mL L-1 Kasumin®. In multiplication, nodal segments were grown in WPM culture medium supplemented with BAP (6-benzylaminopurine) or mT (meta-topoline) (2; 4; 8 or 12 µM), combined with the presence or absence of ANA (naphthalenoacetic acid) (2 µM) in three subcultures. For rooting, the WPM/2 culture medium supplemented with IBA (indolbutyric acid) (0, 2 or 4 µM) was used, associated or not with 0.15% activated carbon. The rooted seedlings were acclimatized ex vitro. The highest percentage of germination (78.57%) was observed in seeds treated with 6% NaClO for 10 minutes, without fungicide in the culture medium. The 0.2% concentration of PPM™ provided the highest percentage of nodal segment survival (70%). The succession of subcultures significantly increases the rate of shoot induction and the highest number of shoots per explant (3.28 ± 1.8) occurred at a concentration of 2 µM mT. The formation of the largest number of roots was observed in the absence of activated carbon without the need for exogenous auxin and in acclimatization, there was a high percentage of seedling survival. In this way, it was possible to obtain a viable micropropagation protocol, constituting a promising methodology in the production of seedlings.

RESUMO A cadeia produtiva de bambu, no Brasil, ainda é incipiente, e tem baixa oferta de mudas devido aos métodos convencionais de propagação. Objetivou-se, aqui, estabelecer um protocolo de micropropagação para Guadua chacoensis. Explantes de matrizes cultivadas em ambiente controlado resultaram em menor contaminação, relativamente aos de plantas cultivadas em campo. A contaminação foi ainda mais reduzida quando se adicionaram 2 mL L-1 de Plant Preservative Mixture (PPM™) ao meio de cultura, resultando em maior taxa de estabelecimento. As culturas foram multiplicadas por meio de segmentos nodais de plantas in vitro ou por divisão de touceiras em concentrações crescentes (0 µM, 10 µM, 20 µM, 30 µM ou 40 µM) de 6-Benzilaminopurina (BAP). O número de brotações aumentou com o incremento na concentração de BAP; porém, isto reduziu a taxa de enraizamento e o comprimento de raízes. Plantas aclimatizadas sob 0 %, 35 % ou 65 % de sombreamento apresentaram rendimento quântico máximo do fotossistema II (Fv/Fm) dinâmico, o qual diminuiu nos primeiros sete dias após a transferência para condições ex vitro e, em seguida, aumentou até atingir valores estáveis de 0,775, aos 17 dias. Além disso, o sombreamento aumentou as taxas de sobrevivência das plantas, em comparação ao tratamento sem sombreamento, o qual apresentou sintomas de fotoinibição e fotodano.

ABSTRACT The bamboo productive chain is still incipient in Brazil, and the low supply of plantlets due to low-efficient conventional propagation methods presents a significant bottleneck to its development. This study aimed to establish a micropropagation protocol for Guadua chacoensis. Explants from donor plants cultivated under controlled environment showed less contamination, if compared to explants from plants grown in the field. The contamination rate was even lower when 2 mL L-1 of Plant Preservative Mixture (PPM™) were added to the culture medium, leading to a higher establishment rate. The obtained cultures were then multiplied using either in vitro-derived nodal segments or clump division in the presence of increasing contents (0 mM, 10 mM, 20 mM, 30 mM or 40 mM) of 6-Benzylaminopurine (BAP). The number of shoots increased with increasing BAP concentrations, but this also resulted in a reduced rooting rate and root length. Plants acclimatized under 0 %, 35 % or 65 % of shading showed a dynamic maximum quantum yield of photosystem II (Fv/Fm), which initially decreased within the first seven days after the transfer to ex vitro conditions, but then increased until reaching stable values of 0.775 after 17 days. Additionally, the shading improved the plant survival rates, if compared to those under non-shaded conditions, which presented photoinhibition and photodamage symptoms.

RESUMO A contaminação por micro-organismos e oxidação dos explantes no estabelecimento in vitro de bambu são problemas recorrentes na sua micropropagação. Avaliaram-se os efeitos do biocida Plant Preservative Mixture (PPM®), do antibiótico casugamicina e da consistência do meio de cultura no estabelecimento in vitro de Bambusa vulgaris,Phyllostachys bambusoides e Dendrocalamus asper. A presença de PPM® no meio de cultura apresentou efeito significativo nas concentrações de 2 mL L-1 ou 4 mL L-1, assim como o meio de cultura líquido no aumento de plantas estabelecidas no outono. A casugamicina promoveu respostas variáveis para as três espécies, dependendo da estação do ano. Houve interação entre os fatores, demonstrando que maiores índices de plantas viáveis podem ser obtidos aliando-se diferentes estratégias para diminuir a oxidação e a contaminação. Para o estabelecimento in vitro de B. vulgaris,P. bambusoides e D. asper, é recomendada a adição de 2 mL L-1 ou 4 mL L-1 de PPM® ao meio de cultura líquido.

ABSTRACT The contamination by microorganisms and oxidation of explants in the in vitro establishment of bamboo are recurrent problems for its micropropagation. In the present study, effects of the biocide Plant Preservative Mixture (PPM™), the antibiotic kasugamycin and the consistency of the culture medium were evaluated in the in vitro establishment of Bambusa vulgaris,Phyllostachys bambusoides and Dendrocalamus asper. The presence of PPM™ in the culture medium had a significant effect using 2 mL L-1 or 4 mL L-1 concentrations, as well as in the liquid culture medium, increasing the plants established in the autumn. Kasugamycin promoted variable responses for all the three species, depending on the season. There was interaction among the factors, demonstrating that higher rates of viable plants can be obtained by combining different strategies to reduce the oxidation and contamination. For the in vitro establishment of B. vulgaris,P. bambusoides and D. asper, it is recommended to add 2 mL L-1 or 4 mL L-1 of PPM™ to the liquid culture medium.