Abstract The purpose of this study was to isolate Toxoplasma gondii from tissues of free-range chickens in the southwestern region of Goiás, to detect and molecularly characterize the genetic material of the parasite, and to determine the seroprevalence of the protozoan parasite in these animals. A seroprevalence of T. gondii antibodies of 76% (19/25) was found among the chickens, while genetic material from their tissues was detected in 56% (14/25). A total of 14 isolates was obtained in the bioassay, ten of which were considered acute, eight were considered isolates of high virulence lethal to mice, and four of low virulence, considered non-lethal but with the ability to chronify the infection. Seven of the ten isolates showed significant morphometric differences from the RH strain, in terms of nucleus-complex-apical distance, length and width. Genotyping of the acute isolates was performed by RFLP-PCR, using 11 genetic markers: SAG1, SAG2 (3’SAG2 and 5’SAG2), alt.SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, and APICO. The results were compared and classified according to the genotypes listed on the ToxoDB Platform, where different profiles were observed indicating the presence of two known genotypes (#7 and #63) and five new genotypes (NEW 3, NEW4, NEW5, NEW6, NEW 7). The results showed high seroprevalence, isolation rate, molecular detection and genotypic variations of T. gondii in free-range chickens in the southwestern region of Goiás. freerange free range Goiás animals T 76 19/25 1925 19 25 (19/25 56 14/25. 1425 14/25 . (14/25) 1 bioassay mice nonlethal non infection strain nucleuscomplexapical nucleus complex apical distance width RFLPPCR, RFLPPCR RFLP PCR, PCR RFLP-PCR markers SAG1 SAG 3SAG2 3 (3’SAG 5SAG2, 5SAG2 5 , 5’SAG2) altSAG2 altSAG alt alt.SAG2 SAG3 BTUB GRA6 GRA c228, c228 c c22 8, 8 c22-8 c292, c292 c29 2, 2 c29-2 L358 L PK1 PK APICO Platform #7 7 (# #63 63 NEW4 NEW5 NEW6 7. 7) rate 19/2 192 (19/2 142 14/2 (14/25 3SAG 5SAG 5’SAG2 alt.SAG c2 c22- c29- L35 # ( #6 6 19/ (19/ 14/ (14/2 5’SAG L3 (19 (14/ (1 (14
Resumo O objetivo deste estudo foi isolar Toxoplasma gondii de tecidos de galinhas caipiras da região sudoeste de Goiás, detectar e caracterizar molecularmente o material genético do parasito e determinar a soroprevalência do protozoário nestes animais. A soropositividade para anticorpos anti- T. gondii, nas galinhas caipiras, foi de 76% (19/25), enquanto a detecção do material genético dos tecidos foi de 56% (14/25). Por meio do bioensaio foi obtido um total de 14 isolados, sendo 10 agudos, dos quais oito foram considerados isolados de elevada virulência, sendo letais para camundongos; e quatro de baixa virulência, com capacidade de cronificar a infecção, considerados não letais. Em sete dos dez isolados foram identificadas diferenças morfométricas significativas em relação à cepa RH, quanto à distância núcleo-complexo apical, comprimento e largura. A genotipagem dos isolados agudos por RFLP-PCR foi realizada, utilizando-se 11 marcadores genéticos SAG1, SAG2 (3´SAG2 e 5´SAG2), alt.SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, APICO. Os resultados foram comparados e classificados de acordo com os genótipos presentes na Plataforma ToxoDB, nos quais diferentes perfis foram observados indicando a presença de dois genótipos conhecidos (#7 e #63) e cinco genótipos novos (NEW 3, NEW4, NEW5, NEW6, NEW 7). Os resultados demonstraram elevada soroprevalência, taxa de isolamento, detecção molecular e variações genotípicas de T. gondii em galinhas caipiras da região sudoeste de Goiás. Goiás animais anti T 76 19/25, 1925 19/25 , 19 25 (19/25) 56 14/25. 1425 14/25 . (14/25) 1 virulência camundongos infecção RH núcleocomplexo núcleo complexo apical largura RFLPPCR RFLP PCR realizada utilizandose utilizando se SAG1 SAG 3´SAG2 3SAG2 3 (3´SAG 5´SAG2, 5SAG2 5´SAG2 5 5´SAG2) altSAG2 altSAG alt alt.SAG2 SAG3 BTUB GRA6 GRA c228, c228 c c22 8, 8 c22-8 c292, c292 c29 2, 2 c29-2 L358 L PK1 PK APICO ToxoDB #7 7 (# #63 63 NEW4 NEW5 NEW6 7. 7) isolamento 192 19/2 (19/25 142 14/2 (14/25 3´SAG 3SAG 5SAG 5´SAG alt.SAG c2 c22- c29- L35 # ( #6 6 19/ (19/2 14/ (14/2 L3 (19/ (14/ (19 (14 (1