RESUMO O objetivo do estudo foi avaliar o efeito de intervalos de pulsos de auxina na indução de embriões somáticos de Eucalyptus grandis x E. urophylla e a descrição do comportamento embriogênico de calos sob efeito do estresse auxínico. Cotilédones foram inoculados em meio de cultura contendo 207,07 µM de picloram, tratamento considerado como pulso de auxina. Explantes que estavam no tratamento de pulso de auxina foram transferidos para meio semissólido ou líquido, contendo 20,71 µM de picloram, após um, dois, quatro ou oito dias de pulso de auxina. Num segundo experimento, explantes que estavam no tratamento de pulso de auxina foram transferidos para meio semissólido contendo 20,71 µM de picloram, após um, dois ou três dias de pulso de auxina. Tratamentos com pulso da auxina picloram (207,02 µM) podem ser utilizados como fonte de estresse inicial para aquisição da competência embriogênica. A oxidação de explantes cotiledonares pode ser considerada um indício de formação de calos embriogênicos. A presença de pectinas em regiões periféricas de pró-embriões somáticos pode ser considerada como marcador de embriogênese somática em explantes cotiledonares de Eucalyptus gradis x E. urophylla.

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate the effect of auxin pulse intervals on the induction of somatic embryos of Eucalyptus grandis x E. urophylla and to describe the embryogenic behavior of callus under the effect of auxinic stress. Cotyledons were inoculated in culture medium containing 207.07 µM picloram, a treatment considered as auxin pulse. Explants that were in the auxin pulse treatment were transferred to semisolid or liquid medium containing 20.71 µM picloram after one, two, four or eight days of auxin pulse. In a second experiment, explants that were on auxin pulse treatment were transferred to semi-solid medium containing 20.71 µM picloram after one, two or three days of auxin pulse. Auxiliary picloram pulse treatments (207.02 µM) can be used as an initial source of stress for the acquisition of embryogenic competence. The oxidation of cotyledonary explants may be considered as an indication of the formation of embryogenic calli. The presence of pectins in peripheral regions of somatic pro-embryos can be considered as a marker of somatic embryogenesis in cotyledonary explants of Eucalyptus grandis x E. urophylla.

RESUMO O objetivo do presente estudo foi testar o efeito do tipo de explante e concentrações de auxinas na indução, bem como o efeito do meio de cultura e de concentrações de auxina na proliferação de embriões somáticos de Eucalyptus grandis x E. urophylla. Sementes e cotilédones foram utilizados como explantes e inoculados em meio de cultura de indução contendo 1,13; 2,26; 3,39 e 4,52 µM de dicamba ou 4,14; 10,35; 20,71 e 31,06 µM de picloram. Calos embriogênicos induzidos nos tratamentos com picloram foram utilizados como explantes e inoculados em meio semissólido ou líquido contendo 4,14; 10,35; 20,71 e 31,06 µM de picloram, mantendo-se a origem dos calos embriogênicos (sementes ou cotilédones) e a concentração de picloram em que os mesmos estavam na fase de indução. Foram realizadas análises estatísticas, descritivas e anatômicas. A indução de pró-embriões somáticos em material vegetal juvenil de Eucalyptus grandis x E. urophylla pode ser realizada utilizando-se sementes ou cotilédones como fonte de explantes, e dicamba e picloram como reguladores de crescimento adicionados ao meio de cultura. O uso de cotilédones como fonte de explantes e a concentração de 4,1 µM de picloram adicionado ao meio de cultura resultou em maiores médias na indução de pró-embriões somáticos, A proliferação de pró-embriões somáticos secundários pode ser obtida utilizando meio liquido adicionado de picloram.

ABSTRACT The objective of the present study was to test the effects of explant type, auxin concentrations, culture media, and auxin concentrations on the induction and proliferation of somatic embryos of Eucalyptus grandis x E. urophylla. Seeds and cotyledons were used as explants and inoculated in culture media containing 1.13, 2.26, 3.39 and 4.52 µM dicamba or 4.14, 10.35, 20.71 and 31.06 µM picloram. Embryogenic calli induced in the picloram treatments were used as explants and inoculated in semisolid or liquid media containing 4.14, 10.35, 20.71 and 31.06 µM picloram and keeping the origin of the embryogenic callus (seeds or cotyledons) and the concentration of picloram in those who were in the induction phase. Statistical, descriptive and anatomical analyses were performed. Induction of somatic pro-embryos into the juvenile plant material of Eucalyptus grandis x E. urophylla was performed using seeds or cotyledons as the source of explants, with the addition of dicamba and picloram as growth regulators. The use of cotyledons as a source of explants and the concentration of 4.1 µM picloram added to the culture media resulted in a higher induction of somatic pro-embryos. Proliferation of secondary somatic embryos was achieved using liquid medium added with picloram.

RESUMO O presente trabalho tem como objetivo avaliar o efeito de doses de AIB e de coletas sucessivas de microestacas na micropropagação de clones de Eucalyptus grandis x E. urophylla e Eucalyptus urophylla x E. globulus. Tufos contendo de seis a oito gemas dos clones in vitro, foram transferidos para frascos de vidro -250 mL, em meio semissólido JADS, sendo feitas coletas a cada 20 dias para o clone Eucalyptus grandis x E. urophylla e a cada 30 dias para o Eucalyptus urophylla x E. globulus. Nas condições in vitro, foram avaliados: número de brotos > 0,5 cm, número de microestacas > 2 cm, comprimento da maior microestaca e vigor dos brotos. Nas condições ex vitro, na casa de vegetação e casa de sombra, foram avaliados: altura da muda, sobrevivência, diâmetro do colo, porcentagem de emissão de raiz na extremidade inferior do tubete, vigor das mudas. Em pleno sol (ex vitro), foram avaliados: altura da muda, sobrevivência, diâmetro do colo, número de raízes, volume de raiz, vigor das mudas, e matéria seca da parte aérea e da raiz. Observou-se boa produtividade de microestacas in vitro no decorrer das coletas, sendo ajustados níveis de AIB para cada clone, variando de 0,25 a 0,50 mg L-1 para o clone Eucalyptus grandis x E. urophylla e de 0,75 a 1,0 mg L-1 para o clone Eucalyptus urophylla x E. globulus. Nas condições ex vitro, a dosagem de AIB apresentou efeito residual, proporcionando bom enraizamento e sobrevivência, entre 0,25 a 0,50 mg L-1 de AIB para o clone Eucalyptus grandis x E. urophylla e 0,50 a 1,0 mg L-1 para o clone Eucalyptus urophylla x E. globulus.

ABSTRACT This study aims to evaluate the effect of IBA concentrations and microcuttings successive collections in the micropropagation of Eucalyptus grandis x E. urophylla and Eucalyptus urophylla x E. globulus clones. Clumps containing six to eight buds of clones established in vitro were transferred to a 250 mL glass flask in JADS semisolid medium. Successive collections were performed every 20 days for Eucalyptus grandis x E. urophylla clone and every 30 days for Eucalyptus urophylla x E. globulus clone. The following variables were evaluated under in vitro conditions: number of shoots > 0.5 cm, number of microcuttings > 2 cm, length of the longest microcutting, and shoots vigor. Under ex vitro conditions, in the greenhouse and shade house, the following variables were evaluated: seedling height, percentage of survival, stem diameter, percentage of root observed at the lower end of the tube, and seedling vigor. In full sun (ex vitro), the following variables were analyzed: seedling height, stem diameter, survival, number of roots, root volume, seedling vigor, and shoot and root dry matter. Good in vitro microcuttings productivity was observed over the successive collections. IBA levels were adjusted for each clone, ranging from 0.25 to 0.50 mg L-1 for Eucalyptus grandis x E. urophylla clone, and from 0.75 to 1.0 mg L-1 for Eucalyptus urophylla x E. globulus clone. IBA concentrations led to residual effects under ex vitro conditions, providing good rooting and survival for Eucalyptus grandis x E. urophylla and Eucalyptus urophylla x E. globulus clones at IBA concentrations between 0.25 and 0.50 mg L-1 and between 0.50 and 1.0 mg L-1, respectively.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso de reguladores de crescimento, aditivos antioxidantes, tipo de explantes e intensidade de cobertura de mudas aclimatizadas, na micropropagação de sucupira-preta (Bowdichia virgilioides) por meio de gemas axilares. Os explantes foram cultivados para a multiplicação em meio de cultura básico WPM, suplementado com concentrações de benzilaminopurina (BAP). No alongamento, os tratamentos foram combinações de ácido naftalenoacético (ANA) e BAP adicionadas ao meio. Para o enraizamento, as brotações foram colocadas em meio com concentrações de ácido indolbutírico, ou em meio com combinações dos aditivos polivinilpirrolidona e carvão ativado, em diferentes concentrações de ANA. As plantas foram transplantadas para copos de plástico, com substrato, e cobertas com saco de polietileno. Posteriormente, esses sacos foram retirados, ou perfurados, ou não retirados, o que constituiu os tratamentos de pré-aclimatização in vitro. A aclimatização ex vitro foi realizada após o período de pré-aclimatização in vitro. A sucupira-preta apresentou melhor micropropagação com emprego de: segmentos cotiledonares e 0,3 mg L-1 de BAP, na multiplicação; 0,3 mg L-1 de ANA e 0,03 mg L-1 de BAP, no alongamento; e carvão ativado (2,0 mg L-1), no enraizamento e na pré-aclimatização in vitro, com uso de cobertura de plástico transparente em torno da muda.

The objective of this work was to evaluate the use of growth regulators, antioxidant additives, type of explants, and coverage intensity of acclimatized seedlings in the micropropagation of sucupira-preta (Bowdichia virgilioides) through axillary buds. Explants were cultured for multiplication on WPM medium, supplemented with concentrations of benzylaminopurine (BAP). In the elongation phase, treatments consisted of naphthaleneacetic acid (NAA) and BAP combinations added to the medium. For rooting, shoots were inoculated in medium containing concentrations of indolbutyric acid or combinations of the additives polyvinylpyrrolidone and charcoal, in different NAA concentrations. Plants were transplanted to plastic cups with substrate, and covered with polyethylene bags. Later, the bags were withdrawn, or perforated, or not withdrawn, which constituted the in vitro pre-acclimatization treatments. Ex vitro acclimatization was carried out after the period of in vitro pre-acclimatization. Sucupira-preta had the best micropropagation using: cotyledon segments and 0.3 mg L-1 BAP, for multiplication; 0.3 mg L-1 NAA and 0.03 mg L-1 BAP, for elongation; and 2,0 mg L-1 activated carbon for rooting and for the in vitro pre-acclimatization, with the use of a transparent plastic cover around seedling.