ABSTRACT INTRODUCTION Legionella genus includes species that are found in a variety of aquatic environments, but must be incorporated into aerosols and inhaled to produce disease. Although most cases of pneumonia are caused by L. pneumophila, of the 58 species that constitute this genus, 24 were related to human disease. The aim of this study was to evaluate the presence of Legionella species in residential reservoirs of drinking water of Resistencia, Chaco. METHODS Forty six water samples taken from different points in the city were studied. Legionella detection In the samples was performed by culture as set out in the ISO standard 11731:1998. Real-time polymerase chain reaction (qPCR) assays were applied to isolates obtained by culture and identified as Legionellaspp. according to the ISO standard. The target sequences used corresponded to 23S rRNA gene, for the confirmation of the genus, and mip gene specific for the species L. pneumophila. RESULTS In 16 (34.8%) of the 46 samples studied Legionella spp. was recovered. Molecular technique confirmed the presence of Legionella pneumophila in 15 samples. In addition, 3 of these samples (6.5%) were also positive for anotherspecies of the genus Legionella. CONCLUSIONS This study demonstrated the presence of L. pneumophila and other species in residential drinking water reservoirs in Resistencia.

RESUMEN INTRODUCCIÓN El género Legionella comprende especies que se encuentran en ambientes acuáticos, pero se deben incorporar a aerosoles e inhalar para producir enfermedad. Si bien la mayoría de los casos de neumonía son causados por L. pneumophila, de las 58 especies que constituyen este género, 24 se relacionaron a enfermedad humana. El objetivo del trabajo fue evaluar la presencia de especies de Legionella en reservorios domiciliarios de agua potable de Resistencia, Chaco. MÉTODOS Se estudiaron 46 muestras de agua tomadas en diferentes puntos de la ciudad. La detección de Legionella se realizó por cultivo según lo establecido en la norma ISO 11731:1998. La técnica molecular de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real con colorante intercalante (Syber Green) se aplicó a los aislamientos obtenidos por cultivo e identificados como Legionella spp. Las secuencias diana utilizadas correspondieron a fragmentos conservados del gen 23SrRNA para la confirmación del género y el gen mip específico para la especie L. pneumophila. RESULTADOS En 16 (34,9%) de las 46 muestras estudiadas se recuperaron cepas de Legionella spp. Por la técnica molecular se confirmó la presencia de Legionella pneumophila en 15 de las muestras positivas por cultivo. Además, 3 de estas muestras (6,5%) también resultaron positivas para otras especies del género Legionella. CONCLUSIONES Este trabajo demostró la presencia de L. pneumophila y otras especies en los reservorios domiciliarios de agua potable en Resistencia.

Legionella spp. is an environmental bacterium that can survive in a wide range of physicochemical conditions and may colonize distribution systems of drinking water and storage tanks. Legionella pneumophila is the major waterborne pathogen that can cause 90% of Legionnaires' disease cases. The aim of this study was to detect the presence of Legionella spp. in household drinking water tanks in the city of Resistencia, Chaco. The detection of Legionella in water samples was performed by culture methods as set out in ISO 11731:1998. Thirty two water samples were analyzed and Legionella spp. was recovered in 12 (37.5%) of them. The monitoring of this microorganism in drinking water is the first step towards addressing the control of its spread to susceptible hosts.

Legionella spp. es una bacteria ambiental capaz de sobrevivir en un amplio intervalo de condiciones fisicoquímicas y puede colonizar los sistemas de distribución y almacenamiento del agua potable. Legionella pneumophila es el principal patógeno trasmitido por el agua y produce el 90% de los casos de legionelosis. El objetivo del presente trabajo fue detectar por cultivo la presencia de Legionella spp. en depósitos domiciliarios de agua potable de la ciudad de Resistencia, Chaco. La detección de Legionella en las muestras de agua se realizó por cultivo según lo establecido en la norma ISO 11731:1998. Se analizaron 32 muestras de agua y de 12 (37,5%) de ellas se recuperaron cepas de Legionella spp. La vigilancia de este microorganismo en el agua de consumo humano representa el primer paso para controlar su diseminación hacia huéspedes susceptibles.

Groundwater is an important source of drinking water for many communities in Northern Argentina; particularly, in the province of Chaco, where about 14 % of households use this natural resource. Enteroaggregative Escherichia coli is an emerging pathogen whose global importance in public health has increased in recent years. Despite the significant risk of disease linked to contaminated water exposure, the prevalence of E. coli pathotypes in aquatic environments is still not so well defined. The aim of the present study was to detect the presence of typical enteroaggregative E. coli through the recognition of its virulence factors aap, AA probe and aggR by molecular techniques. A total of 93 water samples from different small communities of Chaco were analyzed. E. coli was identified in 36 (38.7 %) of the tested samples. Six strains isolated from different samples harbored the studied genes. Of these 6 isolates, 3 carried the aap gene, 2 the AA probe and the last one the combination of aap/aggR genes. The prevalence of E. coli isolates harboring enteroaggregative virulence genes in groundwater sources was 6.4 %. This work represents the first contribution to the study of the presence and distribution of virulence genes of EAEC in groundwater sources in this region of Argentina.

En la provincia del Chaco, el agua subterránea representa una fuente alternativa, y muchas veces única, para el consumo humano; esta es utilizada en el 14 % de los hogares. A pesar de que se reconoce el riesgo de la exposición al agua contaminada, la prevalencia de los diferentes patotipos de Escherichia coli en ambientes acuáticos no ha sido bien caracterizada. E. coli enteroagregativo (ECEA) es un patógeno emergente cuya importancia en la salud pública mundial se incrementó y quedó claramente establecida en los últimos años. El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de ECEA típico mediante el reconocimiento de los factores de virulencia aap, AA probe y aggR por reacción en cadena de la polimerasa, en fuentes de agua subterráneas de la provincia del Chaco. Se identificó E. coli en 36 (38,7 %) de las 93 muestras estudiadas, provenientes de diferentes localidades. De esos 36 aislamientos, se identificaron 6 (16,7 %) portadores de los genes de ECEA, lo que representa una prevalencia del 6,4 % considerando las 93 fuentes de agua subterránea estudiadas. De esos 6 aislamientos, 3 eran portadores del gen aap, 2 del gen AA probe y uno de la combinación aggR/aap. El presente trabajo representa el primer aporte en el estudio de la presencia y distribución de genes de virulencia de ECEA en fuentes de agua subterránea de la región.

In Corrientes (Argentina), from January 2004 to April 2005, fecal samples from under 5 years-old children with acute diarrhea were collected; the stool samples were cultured onto selective media, and those colonies suspected to be Salmonella, Vibrio, Aeromonas, Shigella, or Escherichia coli O157 were identified. The antimicrobial susceptibility was assessed by the disk diffusion method. Among 590 samples, the 7.7% were positive (Salmonella spp 32.6% and Shigella spp 67.4%). Of 31 Shigella isolates, 81% were S. flexneri, and 19% were S. sonnei. S. flexneri serotype 2 was the more frequent. S. flexneri strains showed higher multidrug resistance than S. sonnei strains. Among the Salmonella enterica serotypes, S. typhimurium and S. newport were the most frequent. Two isolates of Salmonella presented with multidrug resistance. This paper was a contribution to the knowledge of bacterial gastroenteritis etiology in our region and it called the attention to the emergence of multidrug-resistant enteropathogenic strains.

Se recolectaron muestras de materia fecal de niños menores de 5 años con diarrea aguda, en Corrientes, Argentina, entre enero de 2004 y abril de 2005, se cultivaron en medios selectivos, se identificaron colonias sospechosas de Salmonella, Vibrio, Aeromonas, Shigella o Escherichia coli O157 y se estudió la susceptibilidad antimicrobiana mediante difusión con discos. De 590 muestras 7,7 % fueron positivas (Salmonella spp. 32,6 % y Shigella spp. 67,4 %). Sobre 31 aislamientos de Shigella, 81 % correspondió a S. flexneri, y 19 % a S. sonnei. El serotipo 2 de Shigella flexneri fue el más frecuente. Las cepas de S. flexneri mostraron mayor multirresistencia que las de S. sonnei. Los serotipos de Salmonella enterica más frecuentes fueron S. typhimurium y S. newport. Dos aislamientos de Salmonella presentaron multirresistencia. El presente trabajo constituyó un aporte al conocimiento de la etiología de las gastroenteritis bacterianas en la región y alertó acerca del surgimiento de cepas enteropatógenas multirresistentes.

OBJECTIVES: To evaluate the antibiotic resistance of strains of Shigella spp. isolated from feces samples from northeastern Argentina and to characterize the strains in terms of their molecular epidemiology. METHODS: We studied 132 isolates of Shigella spp. obtained from feces samples from 132 patients with diarrhea who were seen at various private and public laboratories in the Argentine provinces of Chaco and Corrientes during the period of 1998 to 2002. Each strain was characterized according to its serotype, its resistance to 13 individual or combination antibiotics, and its sensitivity to pyocins. With 52 strains selected in relation to their antimicrobial susceptibility profiles we conducted plasmid profile analysis using alkaline lysis, and the repetitive extragenic palindromic sequences were determined by amplifying repetitive DNA segments using polymerase chain reaction. The chi-square test was used to compare proportions, with a level of statistical significance of 0.05. RESULTS: Shigella flexneri was the most common species (78%), followed by S. sonnei (22%). In general, the resistance of S. flexneri to the antibiotics studied was greater than that of S. sonnei, and this difference was statistically significant (P < 0.001) for ampicillin, tetracycline, chloramphenicol, and the combination of ampicillin and sulbactam. The S. flexneri strains also showed multiple resistance more often than S. sonnei strains (84.5% vs. 31.0%; P < 0.001). The strains isolated from S. flexneri were grouped into five pyocin types, three plasmid profiles, and five patterns of repetitive palindromic sequences. The strains of S. sonnei formed three pyocin types, two plasmid profiles, and three patterns of repetitive palindromic sequences. CONCLUSIONS: Given that the Shigella species that were studied showed a high level of resistance to the most frequently used antibiotics, surveillance activities should be implemented in order to detect and control the appearance of new resistant strains. Applying epidemiological typing techniques can provide more precise information about the distribution and evolution of resistant strains of circulating microorganisms.

OBJETIVOS: Evaluar la resistencia a antibióticos de cepas de Shigella spp. aisladas de muestras de heces en el nordeste argentino y caracterizarlas desde el punto de vista de su epidemiología molecular. MÉTODOS: Se estudiaron 132 aislamientos de Shigella spp. obtenidos de las heces de igual número de pacientes con diarrea que asistieron a diferentes laboratorios privados y estatales de las provincias del Chaco y Corrientes, Argentina, durante el período de 1998 a 2002. Cada cepa se caracterizó según su serotipo, su resistencia a 13 antibióticos individuales o combinados y su sensibilidad a las piocinas. A 52 cepas seleccionadas en función de sus perfiles de susceptibilidad antimicrobiana se les determinaron la dotación plasmídica mediante lisis alcalina y las secuencias repetitivas palindrómicas extragénicas mediante la amplificación de segmentos repetitivos de ADN con la reacción en cadena de la polimerasa (REP-RCP). Se aplicó la prueba de ji al cuadrado para comparar proporciones. El nivel de significación estadística fue de 0,05. RESULTADOS: Shigella flexneri fue la especie más frecuente (78%), seguida de S. sonnei (22%). En general, la resistencia de S. flexneri a los antibióticos estudiados fue mayor que la de S. sonnei y esta diferencia fue estadísticamente significativa (P <0,001) frente a ampicilina, tetraciclina, cloramfenicol y la combinación de ampicilina con sulbactama. Las cepas de S. flexneri también mostraron mayor multirresistencia que las de S. sonnei (84,5% frente a 31,0%; P <0,001). Las cepas aisladas de S. flexneri pudieron agruparse según 5 piocinotipos, 3 perfiles plasmídicos y 5 patrones de secuencias repetitivas palindrómicas. Por su parte, las cepas de S. sonnei conformaron 3 piocinotipos, 2 perfiles plasmídicos y 3 patrones de secuencias repetitivas palindrómicas. CONCLUSIONES: Las especies de Shigella estudiadas mostraron una elevada resistencia a los antibióticos de uso más frecuente, por lo que se deben poner en marcha actividades de vigilancia a fin de detectar y controlar la aparición de nuevas cepas resistentes. La aplicación de técnicas de tipificación epidemiológica puede ayudar a conocer con mayor precisión la distribución y evolución de cepas de microorganismos resistentes circulantes.

Salmonella Infantis has been the second most common serovar in Argentina in the last two years, being isolated mostly from paediatric hospitalised patients. In order to determine the clonal relationship among Salmonella Infantis strains, we examined 15 isolates from paediatric patient faeces in Argentina (12 geographically related and 3 geographically non-related) by using antimicrobial susceptibility, plasmid profiling, repetitive extragenic palindromic (REP) PCR, enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC) PCR, and low-frequency restriction analysis of chromosomal DNA by pulsed field gel electrophoresis (PFGE). Four Spanish strains were included as controls of clonal diversity in molecular techniques. Antibiotype and plasmid profile was not useful as epidemiological tools. PFGE and REP-PCR were able to discriminate between Argentinean and Spanish isolates of Salmonella Infantis allowing to detect genetically related strains in three different cities. This finding indicates that a possible spread of a clone of this serovar in the North-eastern Region of Argentina has taken place in 1998.

Salmonella Infantis ha sido el segundo serovar más común en la Argentina en los últimos dos años, siendo aislada principalmente, a partir de pacientes pediátricos hospitalizados. La relación clonal entre 15 aislamientos de Salmonella Infantis obtenidos de heces de pacientes pediátricos en Argentina se estudió mediante la susceptibilidad antimicrobiana, el perfil plasmídico, amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de las secuencias repetitivas REP y ERIC, y electroforesis de ADN total en campo pulsátil (PFGE). Cuatro cepas españolas fueron incluidas como control de diversidad clonal. El antibiotipo y el perfil plasmídico no fueron herramientas útiles en la tipificación. PFGE y REP-PCR fueron capaces de discriminar entre las cepas argentinas y españolas de Salmonella Infantis, permitiendo detectar cepas genéticamente relacionadas en tres ciudades diferentes. Este hallazgo indica que una posible diseminación clonal de este serovar ha tenido lugar en la región nordeste de Argentina en 1998.