ABSTRACT Fertilization with boron (B) is a crucial aspect in the management of tropical soils to achieve high yield and wood quality in forest species. However, studies are still needed for a better understanding of the effects of B on the anatomy and physiology of African mahogany to improve borate fertilization programs in terms of doses and sources of B. The objective was to characterize the morphology and anatomy of African mahogany leaves subjected to doses and sources of B, as well as to investigate leaf lesions caused by excess B. In a 3 × 3 factorial scheme, a randomized block design was used with four replications, resulting in a total of 36 experimental units. The treatments consisted of three sources of B: borax (sodium tetraborate), ulexite, and colemanite, and three doses of B: 0, 1.5, and 3 mg dm –3 . After 120 days of transplanting, leaf samples with and without toxicity lesions were collected for morphological and anatomical evaluations. Following the collection, the samples were photographed and fixed in Karnovsky’s solution. The plants cultivated in the control treatment did not exhibit any symptoms of B deficiency in the leaf tissue. Borax and ulexite sources, and higher doses of B resulted in greater lesions, accompanied by the accumulation of phenols in the necrotic region. In contrast, the source of lower solubility (colemanite) and lower dose of B demonstrated the highest accumulation of starch. African mahogany is sensitive to applying high doses (3 mg dm –3 ) and high solubility sources of Boron (borax). Excessive B levels cause necrosis and structural disorganization of African mahogany leaf tissues. (B species However scheme replications units sodium tetraborate, tetraborate , tetraborate) colemanite 0 15 1 5 1.5 – 12 transplanting evaluations collection Karnovskys Karnovsky s solution tissue region contrast (colemanite starch ( borax. (borax) tissues 1. (borax

Resumo A leprose dos citros é responsável por causar grandes danos à citricultura. Nos troncos e ramos a doença caracteriza-se por causar lesões corticosas de tonalidade avermelhada. Dependendo do estágio da doença, as lesões podem ser denominadas pústulas e apresentar fendas no sentido longitudinal. O objetivo desse estudo foi analisar a evolução das lesões da leprose do tipo CiLV - C e as alterações anatômicas nos ramos de plantas provenientes do campo a fim de compará-las com a evolução das lesões foliares e com as lesões de ramos de plantas inoculadas descritas na literatura. Para tal, amostras de lesões em diferentes estágios de desenvolvimento foram coletadas, fotografadas e fixadas em solução de Karnovsky. Posteriormente, as amostras foram submetidas à desidratação em série etílica e infiltradas em resina hidroxi-etil-metacrilato (Leica Historesin). As amostras foram seccionadas em micrótomo rotativo a 5-7 μm de espessura e coradas com azul de toluidina para as análises histológicas usuais. Também foram realizados testes histoquímicos. A captura de imagens digitais dos materiais preparados em lâminas foi realizada em microscópio equipado com câmera de vídeo. A evolução das lesões nos ramos seguiu o mesmo padrão descrito para as lesões foliares, ou seja, houve a formação de uma pontuação necrótica central e de um halo necrótico circundante. Na região da necrose havia o acúmulo de compostos lipídicos. O parênquima cortical e floemático apresentava hiperplasia. Em ambas as lesões houve a diminuição da quantidade de amido, aumento de cristais de oxalato de cálcio e a presença de ductos traumáticos gomosos. citricultura caracterizase caracteriza se avermelhada longitudinal comparálas compará las literatura tal coletadas Karnovsky Posteriormente hidroxietilmetacrilato hidroxi etil metacrilato Leica Historesin. Historesin . Historesin) 57 5 7 5- usuais histoquímicos vídeo seja circundante lipídicos hiperplasia amido gomosos

Abstract The citrus leprosis is responsible for causing major damage in fruit production. The disease, in the stems, is characterized by caused “scaly bark” lesions of reddish tone, depending on the stage they can be called blisters and make ruptures in the longitudinal direction. The aim of this study was to analyze the evolution of leprosis lesions of type CiLV-C and the anatomical alterations in the twigs of field-collected plants in order to compare to the evolution of the foliar and twigs lesions of inoculated plants already described in literature. For anatomical analysis, the samples were fixed in Karnovsky solution, dehydrated in a graded ethylic series, embedded in hidroxy-ethyl methacrylate resin (Leica Historesin), sectioned (5-7 μm thick), and stained with Toluidine blue for usual histological analysis. Histochemical tests were also carried out. The digital images were capture in a microscope with video camera. The analyzed lesion followed the same pattern as described to foliar lesions, i.e., there was a necrotic center surrounded by a halo also necrotic. In the necrotic region there was the accumulation of lipid compounds. The cortical and, or phloematic parenchyma exhibited hyperplasia. In both lesions it was verified the decrease of starch amount and the increase of quantity of prismatic calcium oxalate crystals, and the presence of gummosis traumatic ducts. production disease stems scaly bark tone direction CiLVC CiLV C fieldcollected field collected literature analysis solution series hidroxyethyl hidroxy ethyl Leica Historesin, Historesin , Historesin) 57 5 7 (5- thick, thick thick) out camera ie i e i.e. compounds hyperplasia crystals ducts (5 i.e (

Resumo A aplicação de reguladores de crescimento vegetal, principalmente os produtos inibidores de giberelina, é o principal recurso utilizado para o controle do crescimento de plantas ornamentais, no entanto, é crescente a busca por produtos alternativos devido ao risco de toxicidade ambiental causado. O metil jasmonato (MeJa) é uma substância natural encontrada em plantas e considerado de baixa toxicidade quando utilizado adequadamente, seu uso como regulador de crescimento tem se mostrado promissor para o controle do crescimento de plantas, mas seus efeitos não foram totalmente explorados na restrição do crescimento de ornamentais. O presente trabalho investigou os efeitos da aplicação foliar de diferentes concentrações de MeJa (0, 50, 100 e 150 µM) no crescimento e na anatomia foliar de Begônia ‘Dragon Wing’ Pink e Red. Foram avaliados parâmetros de crescimento das plantas e conduzidas análises histológicas quali-quantitativas da folha da Begônia. O MeJa foi eficiente em compactar a planta, reduzindo a altura em 17.57% e diâmetro em 8.98% sem comprometer a biomassa, crescimento radicular e aspectos do florescimento. A concentração média estudada também provocou alterações na anatomia foliar, aumentando a espessura da epiderme abaxial, reduzindo a espessura do mesofilo, número de cristais de oxalato de cálcio e o tamanho e o número de estômatos. Os resultados demonstraram o efeito promissor do MeJa no controle de crescimento de plantas ornamentais envasadas. vegetal giberelina entanto causado (MeJa adequadamente 0, 0 (0 50 10 15 µM Dragon Wing Red qualiquantitativas quali quantitativas planta 1757 17 57 17.57 898 8 98 8.98 biomassa florescimento abaxial mesofilo estômatos envasadas ( 5 1 175 17.5 89 9 8.9 17. 8.

Abstract The application of plant growth regulators, primarily gibberellin inhibitors, is the main approach used for controlling the growth of ornamental plants. However, there is a growing interest in alternative products due to the risk of environmental toxicity associated with traditional methods. Methyl jasmonate (MeJa) is a natural substance found in plants and is considered to have low toxicity when used appropriately. Its use as a growth regulator has shown promise for controlling plant growth, but its effects have not been extensively explored in ornamental growth restriction. This study investigated the effects of foliar application of different concentrations of MeJa (0, 50, 100, and 150 µM) on the growth and leaf anatomy of Begonia ‘Dragon Wing’ Pink and Red. Plant growth parameters were evaluated, and qualitative-quantitative histological analyses of Begonia leaves were conducted. MeJa was efficient in compacting the plants, reducing height in 17.57% and diameter in 8.98% without compromising biomass, root growth, and flowering aspects. The average concentration studied also caused changes in leaf anatomy, increasing the thickness of the abaxial epidermis, reducing mesophyll thickness, the number of calcium oxalate crystals, and the size and number of stomata. The results demonstrated the promising effect of MeJa on controlling the growth of potted ornamental plants. regulators inhibitors However methods (MeJa appropriately restriction 0, 0 (0 50 100 15 µM Dragon Wing Red evaluated qualitativequantitative qualitative quantitative conducted 1757 17 57 17.57 898 8 98 8.98 biomass aspects epidermis crystals stomata ( 5 10 1 175 17.5 89 9 8.9 17. 8.

RESUMO O maracujá-suspiro (Passiflora nitida) tem sido utilizado como porta-enxerto para o maracujá-azedo (P. edulis), com o objetivo de controlar a murcha e a podridão do colo causadas por Fusarium spp. No entanto, acredita-se que ele seja suscetível ao nematoide-das-galhas (Meloidogyne incognita), que está amplamente distribuído em campos de cultivo tropical. Foram realizados dois ensaios para avaliar o efeito de M. incognita no crescimento de um acesso de P. nitida, e um terceiro ensaio foi conduzido para avaliar o efeito no crescimento de P. edulis enxertado em P. nitida e as alterações anatômicas induzidas por esse nematoide em P. nitida. Em vista da alta taxa de multiplicação desse nematoide em P. nitida, causando galhas intensas nas raízes e reduzindo o crescimento das plantas, tanto de P. nitida quanto de P. edulis, P. nitida não deve ser usado como porta-enxerto, ou mesmo cultura principal, em campos infestados por M. incognita. maracujásuspiro maracujá suspiro Passiflora portaenxerto porta enxerto maracujáazedo azedo P (P , edulis) spp entanto acreditase acredita se nematoidedasgalhas Meloidogyne incognita, incognita) tropical M plantas portaenxerto, enxerto, principal

ABSTRACT Breath passion fruit (Passiflora nitida) has been used as rootstock for sour passion fruit (P. edulis) in order to control wilting and collar rot caused by Fusarium spp. However, it is supposedly susceptible to root-knot nematode (Meloidogyne incognita), which is widespread in tropical crop fields. Two trials were carried out to assess the effect of M. incognita on the growth of a P. nitida accession, and a third one was performed to assess the effect on the growth of P. edulis grafted onto P. nitida and the anatomical changes induced by this nematode in P. nitida. In view of the high multiplication rate of this nematode in P. nitida, causing intense root galling and reducing plant growth of both P. nitida and P. edulis, P. nitida should not be used as rootstock, or even main crop, in M. incognita-infested fields. Passiflora P (P spp However rootknot knot Meloidogyne incognita, , incognita) fields M accession incognitainfested infested

Resumo Novas abordagens para o desenvolvimento de organismos geneticamente modificados, resistentes a doenças, incluem alvos específicos de expressão gênica, visando a aumentar as chances de controle do patógeno. A expressão gênica, induzida por promotores de genes de Citrus sinensis, derivados do floema, poderia ser avaliada e comparada com aquela induzida por um promotor constitutivo no mesmo tecido, levando à produção de laranjas-doces transgênicas, potencialmente mais resistentes a doenças causadas por bactérias de floema. Plantas de citrange ‘Carrizo’ [Poncirus trifoliata (L.) Raf. x Citrus sinensis (L.) Osbeck] foram transformadas, via Agrobacterium tumefaciens, com o vetor binário pCAMBIA2301 contendo o gene uidA (ß-glucuronidase), dirigido pelo promotor constitutivo CaMV35S (CaMV35S :: uidA) ou pelos promotores de citros CsPP2.B1 (CsPP2 .B1 :: uidA) ou CsVTE2 (CsVTE2 :: uidA). Brotos regenerados in vitro foram enxertados em limão ‘Cravo’ (C. limonia Osbeck). A transformação genética foi confirmada por análises de Southern blot. A expressão do gene uidA foi avaliada por RT-qPCR, e a histolocalização do gene, dirigida por esses três promotores, foi acessada por seções de ramos tratadas com X-GLUC. A expressão do gene uidA, exibida por promotores específicos de tecido, foi, em geral, menor do que a do promotor constitutivo CaMV35; no entanto, as construções dirigidas por promotores específicos de tecido podem levar à expressão em tecidos restritos. Os promotores CsPP2.B1 e CsVTE2 podem ser considerados adequados para utilização em construções gênicas, visando à resistência a doenças.

Abstract New approaches for developing disease-resistant genetically modified organisms have included specific targets for gene expression to enhance the chances for pathogen control. Gene expression driven by phloem-derived Citrus sinensis gene promoters could be evaluated and compared with the expression induced by a strong constitutive promoter in the same tissue, leading to the production of transgenic sweet oranges potentially more resistant to diseases caused by phloem-limited bacteria. ‘Carrizo’ citrange [ (Poncirus trifoliataL.) Raf. x Citrus sinensis (L.) Osbeck] was transformed, via Agrobacterium tumefaciens, with the binary vector pCAMBIA2301 bearing the uidA gene (ß-glucuronidase) driven by the CaMV35S constitutive promoter (CaMV35S::uidA) or by the CsPP2.B1 (CsPP2.B1::uidA) or by the CsVTE2 (CsVTE2::uidA) citrus promoters. In vitro regenerated shoots were grafted onto ‘Rangpur’ lime (C. limonia Osbeck). The genetic transformation was confirmed by Southern blot analyses. uidA gene expression was evaluated by RT-qPCR, and gene histolocalization controlled by these three promoters was accessed by X-GLUC treated stem sections. uidA gene expression exhibited by tissue-specific promoters was overall lower than from the constitutive promoter CaMV35; however, constructs driven by tissue-specific promoters may lead to expression in restricted tissues. CsPP2.B1 and CsVTE2 promoters can be considered adequate for the utilization in gene constructs aiming disease resistance.

O gênero botânico Clerodendrum pertence à família Lamiaceae e compreende várias espécies ornamentais, Manchas cloróticas e necróticas em folhas de coração-sangrento foram observadas pela primeira vez em um jardim de Piracicaba, SP, associadas à infestação com Brevipalpus phoenicis (Acari: Tenuipalpidae). Exames de secções de tecidos das lesões foliares ao microscópio eletrônico revelaram ocorrência de efeitos citopáticos do tipo nuclear e concluiu-se que os sintomas eram causados por um vírus transmitido por Brevipalpus (VTB), o qual foi designado de mancha clorótica de Clerodendrum (Clerodendrum Chlorotic Spot Virus- ClCSV). O ClCSV é transmitido mecanicamente de coração-sangrento para coração-sangrento. Em ensaios preliminares foi transmitido por B. phoenicis e mecanicamente para várias outras plantas, além da ocorrência de sua disseminação natural por este ácaro para outras espécies. Visando complementar a caracterização do ClCSV foram feitos estudos sobre alterações anatômicas em folhas de plantas infectadas pelo ClCSV. Foram examinadas secções histológicas de folhas sadias e infectadas pelo ClCSV de C. x speciosum e de outras hospedeiras como Hibiscus schizopetalus, Salvia leucantha, Malvaviscus arboreus e Annona muricata. Constatou-se que o ClCSV causa alterações celulares semelhantes nas diferentes hospedeiras e os sintomas causados por este vírus são similares aos causados por outros vírus transmitidos por Brevipalpus como o vírus da leprose dos citros citoplasmático (Citrus Lepros Virus Cytoplasmic- CiLV-C) e nuclear (Citrus Leprosis Virus Nuclear- CiLV-N), mancha anular do cafeeiro (Coffee Ringspot Virus- CoRSV), mancha anular de Solanum violaefolium (Solanum violaefolium Ringspot Virus- SvRSV) e "Orchid Fleck Vírus" (OFV), representadas por hipertrofia e hiperplasia frequentemente acompanhadas de necrose nos tecidos do parênquima paliçádico e lacunoso.

The botanical genus Clerodendrum belongs to the family Lamiaceae and includes several ornamental species. Necrotic and chlorotic spots on leaves of bleeding heart were observed for the first time in a residential garden from Piracicaba Municipality, São Paulo State, Brazil, associated with an infestation by the flat mite Brevipalpus phoenicis (Acari: Tenuipalpidae). Tissue section analysis of the leaf lesions under transmission electron microscope showed characteristic cytopathic effects of the nuclear type, indicating that the symptoms were caused by a Brevipalpus-transmitted virus (BTV), named Clerodendrum Chlorotic Spot Virus (ClCSV). This virus was shown to be transmitted mechanically and by B. phoenicis to several plant species. In order to complete ClCSV characterization, anatomical changes in the leaf lesions of ClCSV-infected leaves were evaluated. Histological sections of healthy, control leaves and leaf lesions of ClCSV-infected plants of C. x speciosum, Hibiscus schizopetalus, Salvia leucantha, Malvaviscus arboreus and Annona muricata were analyzed. ClCSV infection resulted in similar tissue alterations caused by other BTV as Citrus Leprosies Virus Cytoplasmic (CiLV-C) and Nuclear (CiLV-N), Coffee Ringspot Virus (CoRSV), Solanum violaefolium Ringspot Virus (SvRSV) and Orchid Fleck Virus (OFV). Such symptoms consisted of hypertrophy and hyperplasia frequently followed by necrosis in palisade and spongy parenchyma tissues.

O objetivo deste trabalho foi apresentar a descrição anatômica dos tecidos lesionados pelo Citrus leprosis virus do tipo citoplasmático (CiLV-C), em ramos e folhas de laranjeira-doce (Citrus sinensis (L.) Osbeck) 'Pêra', e fornecer dados para a compreensão das interações entre o vírus e a planta hospedeira. Tecidos que apresentavam lesões foram seccionados em micrótomo rotativo (5-7 µm de espessura) e, posteriormente, as lâminas foram coradas e montadas em resina sintética. Nas análises realizadas no microscópio eletrônico de varredura, as amostras, depois de fixadas, foram imersas em glicerina 30% e, em seguida, criofraturadas, desidratadas em série etílica, secadas ao ponto crítico de CO2, e cobertas com uma delgada camada de ouro. As lesões foliares se iniciaram como pontuações necróticas, envolvidas por halos cloróticos que limitam o crescimento da lesão. Nos ramos, ocorreram dois tipos de lesões com fendas. Na região da fenda, houve intensa hiperplasia do parênquima cortical e floemático, que promoveu a obliteração das células condutoras do floema. A formação de ductos gomosos traumáticos nas lesões caulinares foi descrita. As alterações verificadas no floema podem explicar porque o vírus torna-se não-sistêmico.

The objective of this work was to present the anatomical description of tissues lesioned by Citrus leprosis virus cytoplasmatic type (CiLV-C), in leaves and twigs of 'Pêra' sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck) providing new data to understand the interactions between the virus and the plant host, in Brazil. Leprosis lesions were cut on a rotary microtome (5-7 µm thick), stained and mounted in synthetic resin. For scanning electron microscope analysis, fixed tissues were immersed in glycerin 30% and criofractured, dehydrated in a graded ethylic series, critical point drying and coated with gold. Foliar lesions began as necrotic points surrounded by a yellow halo that inhibited the lesion expansion. The twigs presented two different lesions: depressed ones and pustules with ruptures. There was hyperplasia of the cortical and phloematic parenchyma cells causing the obliteration of phloematic vessels. These histological alterations of the phloem tissue could explain why the virus does not become systemic even occasionally infecting phloem parenchyma cells. The development of gummosis traumatic ducts in twig lesions was described here.