Abstract Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) are a heterogeneous group of foodborne pathogens causing a broad spectrum of human disease, from uncomplicated diarrhea to hemolytic uremic syndrome (HUS). In this study, we report an HUS case associated with an O59:NM H19 mstrain, harboring stx2a, iha, lpfAO26, lpfAO113 genes associated with STEC, and aatA, aap, pic, sigA, agg4A genes associated with enteroaggregative E. coli (EAEC), named Stx-EAEC. The strain showed low toxicity on Vero cells, and was resistant to streptomycin and trimethoprim/sulfonamides. The child carried the bacteria for more than 100 days. Since the large outbreak associated with Stx-EAEC O104:H4, many strains with similar profiles have been described. In Germany, an O59:NM[H19] strain, with comparable characteristics to the Argentine strain, was isolated from a bloody diarrhea case. In Argentina, this is the first report of an HUS case associated with a Stx-EAEC infection, and represents a new challenge for the surveillance system. © 2019 Published by Elsevier Espana, S.L.U. on behalf of Asociacion Argentina de Microbiolog´a. This is an open access article under the CC BY-NC-ND license (https://creativecommons.org/ licenses/by-nc-nd/4.0/).

Resumen Escherichia coli productor de la toxina Shiga (STEC) es un grupo heterogéneo de patógenos transmitidos por alimentos que causan un amplio espectro de enfermedades humanas, desde diarrea no complicada hasta síndrome urémico hemolítico (SUH). Nosotros informamos de un caso de SUH por O59:NM[H19], que portaba los genes stx2a, iha, lpfAo26, lpfAoii3 asociados con STEC, y los genes aatA, aap, pic, sigA, agg4A de E. coli enteroagregativo (EAEC), llamado EAEC-Stx. La cepa mostró baja citotoxicidad en las células Vero, y fue resistente a estreptomicina y trimetoprima/sulfonamidas. El niño excretó la bacteria durante más de 100 días. Desde el brote asociado con EAEC-Stx O104:H4, se describieron muchas cepas con perfiles similares. En Alemania se aisló una cepa O59:NM[H19] de una diarrea sanguinolenta, con características comparables a la cepa argentina. Este es el primer informe de un caso de SUH asociado a una infección por EAEC-Stx, y representa un nuevo desafío para el sistema de vigilancia. © 2019 Publicado por Elsevier Espana, S.L.U. en nombre de Asociación Argentina de Microbiología. Este es un artículo Open Access bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons. org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

Abstract On November 27, 2008, a foodborne disease outbreak associated with the consumption of chicken salad occurred in a kindergarten in the District of Hurlingham, Province of Buenos Aires. Thirty-seven children and 10 adults with gastrointestinal symptoms were affected. Five children were hospitalized with signs of dehydration, one of them requiring intensive care. Staphylococcus aureus subsp. aureus was isolated from the mentioned food in 4 out of 5 stool specimens from the patients, and in 3 out of 5 food handlers (nose of food handler #1, hands of food handlers #2 and 3). The isolates carried the genes coding for enterotoxins SEA and SED. The macrorestriction patterns showed 100% similarity by pulsed-field gel electrophoresis using the SmaI enzyme. A timely outbreak investigation allowed us to identify the causative agent of the food poisoning as well as the failures in food processing and to implement corrective measures.

Resumen El 27 de noviembre de 2008 ocurrió un brote de intoxicación alimentaria asociado al consumo de salpicón de ave en un jardín de infantes de Hurlingham, provincia de Buenos Aires. Treinta y siete niños y 10 adultos presentaron síntomas gastrointestinales. Cinco niños fueron internados con signos de deshidratación, y uno de ellos requirió cuidados intensivos. Se aisló Staphylococcus aureus subsp. aureus del alimento involucrado, de 4/5 muestras de materia fecal de pacientes y de 3/5 manipuladores (nariz del manipulador 1, manos de manipuladores 2 y 3). Las cepas aisladas portaban los genes que codifican las enterotoxinas SEA y SED. Por electroforesis de campo pulsado con la enzima SmaI, los patrones de macrorrestricción presentaron 100% de similitud. La investigación oportuna del brote permitió identificar al agente causal de la intoxicación, determinar las fallas en la elaboración del alimento e implementar las medidas correctivas correspondientes.

We describe the first isolation of an enteroaggregative Escherichia coli (EAEC) O104:H4 strain associated with an acute diarrhea case in Argentina. Two multiplex PCRs (mPCR) were performed as screening of genes mPCR1 (eae, lt, and st) and mPCR2 (IpaH, aggR, stx1 and stx2). A mPCR to detect the rfbO104, fliC H4 and terD genes, and PCR assays for the detection of pCVD432 plasmid, aaiC and lpfO113 genes were included. Biochemical and antimicrobial susceptibility assays as well as serotyping were performed. The identified E. coli strain was susceptible to all antimicrobials tested and harbored the aggR, aaiC, pCVD432 plasmid, lpfO113, rfbO104, fliC H4 and terD genes. Although serotype EAEC O104:H4 rarely spreads and sporadic cases have been reported, global concern increased after the large-scale outbreak in Europe in 2011. The finding of EAEC O104:H4 reinforces the need for improved methodologies for the detection of all E. coli pathotypes.

Se describe el primer aislamiento de una cepa de Escherichia coli enteroagregativo (EAEC) O104:H4 de un caso de diarrea aguda en Argentina. Se realizaron dos PCR múltiples como tamizaje: mPCR1 para los genes eae, lt y st, y mPCR2 para los genes IpaH, aggR, stx1y stx2. Se incluyó una mPCR para detectar los genes rfbO104, fliC H4 y terD, además de PCR simples para los genes del plásmido pCVD432, aaiC y lpfO113. Se realizaron ensayos bioquímicos, de sensibilidad a los antimicrobianos y de serotipificación. La cepa de E. coli identificada fue sensible a todos los antimicrobianos ensayados y presentó los genes aggR, aaiC, plásmido pCVD432, lpfO113, rfbO104, fliC H4 y terD. Si bien EAEC O104:H4 es un serotipo poco común, se han comunicado casos esporádicos, pero la preocupación global aumentó después del brote masivo ocurrido en Europa en 2011. El hallazgo de EAEC O104:H4 refuerza la necesidad de mejorar las metodologías para la detección de todos los patotipos de E. coli en Argentina.

An increase in the consumption of fruit juices and minimally processed fruits salads has been observed in recent years all over the world. In this work, the microbiological quality of artisan fruit salads was analysed. Faecal coliforms, Salmonella spp, Shigella spp, Yersinia enterocolitica and Escherichia coli O157:H7 were not detected; nevertheless, eleven strains of Staphylococcus aureus were isolated. By multiplex PCR, all isolates showed positive results for S. aureus 16S rRNA gene and 63.6% of them were positive for sea gene. Furthermore, PCR sea positive strains were able to produce the corresponding enterotoxin. Finally, the inactivation of these strains in fruit salads by nisin, lysozyme and EDTA, was studied. EDTA produced a total S. aureus growth inhibition after 60 h of incubation at a concentration of 250 mg/L. The presence of S. aureus might indicate inadequate hygiene conditions during salad elaboration; however, the enterotoxigenicity of the strains isolated in this study, highlights the risk of consumers' intoxication. EDTA could be used to inhibit the growth of S. aureus in artisan fruit salads and extend the shelf life of these products.

Staphylococcus aureus causes food poisoning due to its ability to produce enterotoxins. Food handlers carrying enterotoxin-producing S. aureus can contaminate food, thus leading to food poisoning. Samples were obtained from 88 food handlers in the Province of Misiones, Argentina. S. aureus was isolated from nasal swaps and PCR amplification was performed for genes encoding staphylococcal enterotoxins. A total of 37.5 % food handlers were positive for S. aureus. Expression of enterotoxin genes was found in 13 of the 33 (39.4 %) S. aureus isolates studied, accounting for 14.7 % of food handlers. Gene sea was detected in 10 isolates followed by gene sec in 3 isolates. All isolates were susceptible to teicoplanin, gentamicin and rifampicin. Four isolates were resistant to methicillin whereas 2 isolates were resistant to clindamycin and erythromycin. These results constitute a critical alert and indicate the need for developing rational measures to reduce the potential risk of food poisoning.

Staphylococcus aureus es una causa de intoxicaciones alimentarias por su capacidad de producir enterotoxinas. Los manipuladores de alimentos que portan S. aureus productores de enterotoxinas pueden provocar intoxicaciones alimentarias. Se estudiaron muestras tomadas de fosas nasales de 88 manipuladores de alimentos en la provincia de Misiones. El 37,5 % de los individuos analizados eran portadores de S. aureus. Mediante técnicas de amplificación (PCR), se detectaron genes que codifican la producción de enterotoxinas en 13 de los 33 aislamientos obtenidos (39,4 %) y en el 14,7 % de los manipuladores. De estos aislamientos, 10 portaban el gen sea y 3 el gen sec. El estudio de sensibilidad a los antibióticos mostró un 100 % de sensibilidad a teicoplanina, gentamiclna y rifampicina; 2 aislamientos fueron resistentes a clindamicina y a eritromicina y 4 resultaron resistentes a la meticilina. Estos resultados son un alerta e indicarían la necesidad de desarrollar medidas racionales para reducir el riesgo potencial de intoxicaciones alimentarias.

During March 2007 there was an epidemic outbreak associated with the consumption of ultrapasteurized milk. Four hundred people were affected and 60 required hospitalization. S. aureus subspecies aureus was isolated from 5 patients, 3 operators and 3 milk samples. All strains produced enterotoxins. Strains isolated from 3 patients, one operator and all the milk samples carried the genes encoding enterotoxins C (sec) and D (sed), and showed an indistinguishable macrorestriction pattern (SmaI-PFGE). Milk was identified as the source of intoxication and a production line operator as the source of contamination. This is the first foodborne outbreak reported in Paraguay whose agent was isolated, characterized and subtypified in the production plant, the food and the affected people.

Durante marzo de 2007 ocurrió un brote epidémico asociado al consumo de leche ultrapasteurizada que afectó a las ciudades de San Lorenzo, Ciudad del Este y Asunción, de la República del Paraguay. Las personas afectadas fueron 400, de las cuales 60 requirieron hospitalización. Se aisló S. aureus subespecie aureus de 5 pacientes, 3 operarios y 3 muestras de leche. Todas las cepas fueron productoras de enterotoxinas. Las aislamientos de 3 pacientes, de un operario y de las muestras de leche portaron los genes que codifican las enterotoxinas C (sec) y D (sed), y presentaron un patrón único de macrorrestricción (SmaI-PFGE). Se identificó a la leche como fuente de intoxicación y a un operario de la línea de producción como origen de la contaminación. Este es el primer brote de ETA denunciado en Paraguay en el cual se pudo aislar, caracterizar y subtipificar el agente etiológico en la planta de elaboración, en el alimento y en las personas afectadas.

Argentina has the highest rate oteases of hemolytic uremic syndrome (HUS) in the world. Outbreaks and sporadic cases of HUS have been associated with 0157:H7 Shiga toxin-producer Escherichia coli (STEC). The aim ofthisstudy was to compare the genetic diversity and clonal relatedness of Escherichia coli 0157-.H7 biotype B. Four biotype B strains were isolated from two patients with HUS and two asymptomatic household contaets in the city of Mar del Plata. PCR was performed to detect stx1, stx2, rfbO157, eae, ehxA and fliCh7 genes, and pulsed-field gel electrophoresis (Xbal-PFGE) to establish the genetic diversity and the clonai relatedness. All strains harbored the stx2 stx2c(vh-a), eae, ehxA and fliCh7 genes and belongea to phage type 2. By means of Xbal-PFG , , three patterns were identified, showing high clonai relatedness and related to the same event, but there was no established epidemiológica! link between cases of HUS. These patterns of Xbal-PFGE were new, because they were not included in the datábase of E.coli 0157 in Argentina. Using tools of detection and classification for diagnosis, reference laboratories will be able to detect the emergence of new clones associated with human diseases.

Argentina tiene el índice más alto de casos de síndrome urémico hemolítico (SUH) en el mundo. Brotes y casos esporádicos de SUH se han asociado a Escherichía coli O157:H7 productor de toxina Shiga (STEC). El objetivo del estudio fue comparar la diversidad genética y la relación clonal de Escherichía coli O157:H7 biotipo B. Cuatro cepas biotipo B fueron aisladas de dos pacientes con SUH y de dos contactos asintomáticos convivientes, en la ciudad de Mar del Plata. Se realizó PCR para detectar los genes stx h stx2, rfbO157, eae, ehxA y fl/Ch7yelectroforesis en gel en campos pulsados (Xbal-PFGE) para establecer la diversidad genética y la relación clonal. Todas las cepas presentaron los genes stx2, stx2c(vh-a), eae, ehxAy fliCh7, y pertenecieron al fagotipo 2. Por XbaI-PFGE fueron identificados tres patrones que demostraron alta relación clonal y fueron considerados relacionados al mismo acontecimiento, sin nexo epidemiológico establecido entre los casos de SUH. Estos patrones de Xbal-PFGE eran nuevos, porque no estaban incluidos en la base de datos de Ecoli O157 en Argentina. Usando herramientas estandarizadas de detección y tipificación para el diagnóstico, los laboratorios de referencia podrán detectar la aparición de nuevos clones asociados con enfermedades humanas.