Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar as frequências alélicas e genotípicas do polimorfismo do C242T no gene da aromatase em ovinos pertencentes a quatro grupos raciais. Foram coletadas amostras de sangue de 187 animais de quatro grupos raciais: Dorper, Santa Inês, Texel e White Dorper, provenientes de rebanhos da região de Maringá, PR - BR. O DNA genômico foi extraído utilizando o método de extração alcalina, com posterior amplificação dos fragmentos via PCR com primer específico. As amostras resultantes da amplificação foram submetidas ao processo de digestão com auxilio da enzima restrição Dpn II e submetido à eletroforese em gel de poliacrilamida de 10,0% e corado nitrato de prata. Foram observados três genótipos distintos: Homozigoto (CC), heterozigoto (CT) e homozigoto para não corte (TT). Os dados resultantes foram analisados utilizando o software POPGENE com significância de 5%. As frequências genotípicas entre os grupos raciais foram: Texel (CC - 0,426; CT - 0,511; TT - 0,064), Dorper (CC - 0,073; CT - 0,732; TT - 0,439), White Dorper (CC - 0,021; CT - 0,255; TT - 0,723) e Santa Inês (CC - 0,115; CT - 0,462; TT - 0,423).

Abstract The objective of this study was to evaluate the frequency of C242T polymorphism on the aromatase gene and the allelic and genotypic frequency of these variants in sheep belonging to four breed groups. Blood samples were collected from 187 animals of four breed groups: Dorper, Santa Inês, Texel and White Dorper, originated from herds in the region of Maringá/PR, Brazil. The genomic DNA was extracted using alkaline extraction, with subsequent amplification of the fragments via PCR with specific primer. The samples resulting from amplification were subjected to digestion process using the Dpn II restriction enzyme and to polyacrylamide gel electrophoresis 10.0% and stained with silver nitrate. Three distinct genotypes were observed: homozygous (CC), heterozygous (CT) and homozygous for no cut (TT). The resulting data were analyzed using the POPGENE software with 5% significance. Genotypic frequencies among the breed groups were: Texel (CC - 0.426; CT - 0.511; TT - 0.064), Dorper (CC - 0.073; CT - 0.732; TT - 0.439), White Dorper (CC - 0.021; CT - 0.255; TT - 0.723) and Santa Inês (CC - 0.115; CT - 0.462; TT - 0.423).

A estrutura de um biomaterial para regeneração óssea é fator chave para seu sucesso clínico. Não existe um único biomaterial usado para reparo e regeneração óssea capaz de preencher todos os requisitos para um enxerto ósseo ideal. Assim, optou-se por utilizar neste estudo dois biomateriais largamente utilizados na engenharia de tecido ósseo, a policaprolactona (PCL) e cerâmica bifásica (BCP). Neste estudo, compósitos porosos tridimensionais de PCL:BCP (3:1 e 1:1 p:p) foram fabricados utilizando a combinação das técnicas de evaporação do solvente e lavagem de partículas de sal com ou sem a adição de Angiotensina (Ang)-(1-7). Os compósitos de PCL:BCP com alta porosidade e interconectividade obtidos foram analisados usando microtomografia computadorizada (µ-CT). A viabilidade dos compósitos com e sem a adição da Ang-(1-7) foram analisados utilizando osteoblastos de cultura primária nos períodos de 3 e 7 dias utilizando o teste de MTT e secreção de Fosfatase Alcalina. Diferenças significativas de todas as variáveis foram testadas através de análises multivariáveis (p<0,05). Demonstrou-se uma estrutura mais uniformemente distribuída quando a razão PCL/BCP foi aumentada. A conectividade dos poros foi mensurada através do índice de fragmentação (FI) demonstrando estruturas desconexas nas amostras analisadas possuindo valores de FI próximos. Quanto maior a razão PCL/BCP, maior a dimensão fractal (FD). Análises in vitro utilizando o teste do MTT demonstraram que as amostras contendo ou não Ang-(1-7) possuíram efeitos citotóxico médio e moderado, respectivamente. A análise da atividade de fosfatase alcalina não monstrou diferença entre as amostras no período de 3 dias decrescendo sua atividade nas amostras contendo Ang-(1-7) no período de 7 dias. Dessa forma, utilizando a combinação das técnicas de evaporação do solvente e lavagem do sal, obtiveram-se estruturas porosas tridimensionais, desejável para defeitos ósseos tendo capacidade para sistema de transporte de drogas podendo ser avaliada em futuros testes in vivo.

Highly porous three-dimensional biodegradable scaffolds was obtained from beta-tricalcium phosphate-hydroxyapatite bioceramic (BCP), PCL, and Angiotensin-(1-7). We used the solvent casting and particulate leaching methods (SC/PL). The processed scaffolds were characterized by X-ray microtomography (µ-CT). Biocompatibility tests in vitro were performed during three and seven days using MTT and Alkaline Phosphatase Activity (APA) assays. Both the MTT activity and APA were evaluated using a one-way ANOVA test. The µ-CT results showed that the increase of the PCL:BCP weight ratio leads to structures with lower pore sizes. The pore interconnectivity of the processed scaffolds was evaluated in terms of the fragmentation index (FI). We observed that the obtained composites present poorly connected structures, with close values of FI. However, as the polymer phase is almost transparent to the X-rays, it was not taken into consideration in the µ-CT tests. The MTT activity assay revealed that scaffolds obtained with and without Angiotensin-(1-7) present mild and moderate cytotoxic effects, respectively. The APA assay showed that the rat osteoblasts, when in contact for three days with the PCL composites, presented an APA similar to that observed for the control cells. Nevertheless, for an incubation time of seven days we observed a remarkable decrease in the alkaline phosphatase activity. In conclusion, using the solvent casting and salt leaching method we obtained 3D porous that are composites of PCL, BC and Ang-(1-7), which have suitable shapes for the bone defects, a high porosity and interconnect pores. Furthermore, the viability in vitro showed that the scaffolds have potential for drug delivery system and could be used in future in vivo tests.