Several distorted Mexican lime [Citrus aurantiifolia (Christm). Swingle] fruit, leaf, and twig samples with lime anthracnose symptoms were collected from three trees in residential areas of Brownsville, Texas. The causal fungal organism, Colletotrichum acutatum J. H. Simmonds was isolated from leaves and fruit. Amplification of nuclear ribosomal DNA repeat region using ITS1 and ITS4 primers and intron 2 of the glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase gene using GDF and GDR from fungal DNA resulted in approximately 520 bp and 260 bp amplicons, respectively. Similarity search for the nucleotide sequences obtained from 520 bp and 260 bp fragments at Basic Local Alignment Search Tool (BLASTn) program showed 99% identity to C. acutatum and 100% identity to several Colletotrichum species, respectively. The fungal isolates were further confirmed as C. acutatum by selective amplification of about 490 bp PCR fragment using species specific primer CaInt2 in combination with primer ITS4. Phylogenetic tree constructed using ITS nucleotide sequence data separated the isolate from the postbloom fruit drop (PFD) isolates and placed it in the group of key lime anthracnose (KLA) isolates. Pathogenicity assays by inoculation of detached leaves, flowers, and fruit showed that thornless Mexican lime and common Mexican lime showed typical symptoms of KLA while inoculated detached leaves of Rio Red grapefruit, Valencia sweet orange, Bearss lime, pink Eureka lemon, Eustis limequat, Ponderosa lemon, kaffir lime, seedless Lisbon lemon, and Meyer lemon did not develop any lesions.
Varias muestras de fruto, hojas y ramas de limón mexicano [Citrus aurantiifolia (Christm). Swingle] afectadas con síntomas típicos de antracnosis del limón fueron recolectadas de tres árboles en zonas residenciales de Brownsville, Texas. El hongo causante de la antracnosis, Colletotrichum acutatum J. H. Simmonds fue aislado de las muestras de hoja y de fruto. La amplificación de la región de repetición del ADN ribosomal del núcleo usando primers ITS1 y ITS4 y intron 2 del gen de la gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa usando GDF y GDR del ADN del hongo resultó en amplicones de aproximadamente 520 pb y 260 pb, respectivamente. La búsqueda de similitud entre las secuencias de nucleótidos obtenidos de los fragmentos de 520 pb y 260 pb con el programa BLASTn (Basic Local Alignment Search Tool) del Centro Nacional para la Información Biotecnológica (NCBI) mostró un grado de identidad del 99% con C. acutatum y del 100% con varias especies de Colletotrichum, respectivamente. Los aislamientos del hongo fueron confirmados como de C. acutatum por amplificación selectiva de un fragmento de PCR de unas 490 bp usando el primer especie específico CaInt2 en combinación con el primer ITS4. El árbol filogenético que fue construido usando los datos de la secuencia del nucleotido ITS separo los aislados de postbloom fruit drop (PFD) y los colocó en el grupo de aislados de key lime anthracnose (KLA). Los ensayos de patogenicidad por inoculación de muestras de hojas, flor, y fruto mostraron que tanto el limón mexicano sin espinas como el limón mexicano común mostraron síntomas típicos de key lime anthracnose (KLA), mientras que hojas inoculadas del toronjo Rio Red, el Naranjo dulce Valencia, el limón Bearss, el limón pink Eureka, el limequat Eustis, el limón Ponderosa, la lima kaffir, el limón sin semilla Lisbon, y el limón Meyer no desarrollaron ninguna lesión.