Abstract Athyrium decurtatum var. platense (= Thelypteris decurtata subsp. platensis) is transferred to the genus Amauropelta and raised to the species level based on morphological, palynological and geographical evidences. This fern species is endemic to the Delta of Paraná district, belonging to the Esteros del Iberá biogeographic province in the Southern Cone of South America.

Resumo Athyrium decurtatum var. platense (= Thelypteris decurtata subsp. platensis) é transferida para o gênero Amauropelta e elevada ao nível de espécie com base em estudos morfológicos, palinológicos e geográficos. Esta espécie é endêmica do distrito Delta do Paraná, pertencendo à província biogeográfica dos Esteros del Iberá, no Cone Sul da América do Sul.

Resumen Arana, M. D.; M. L. Luna, M. A. Ganem & G. E. Giudice. 2022. Caracterización de Asplenium achalense (Aspleniaceae), una especie poco comprendida de la flora argentina: evidencias morfológicas, palinológicas y distribucionales. Darwiniana, nueva serie 10(2): 527-536. Asplenium (Aspleniaceae) es uno de los géneros de helechos más complejos desde el punto de vista taxonómico, con unas 700 especies, de distribución casi cosmopolita. En Argentina, Asplenium constituye el género de helechos más rico en especies, con 38 taxones. Entre esas especies, la delimitación de Asplenium achalense sigue estando escasamente comprendida. Algunos autores consideran a A. serra como una variante de A. achalense, o incluso la última especie ha sido considerada como un complejo de especies. El hallazgo de una población de Asplenium achalense en Yungas después de tres décadas sin observaciones en la naturaleza y de no registrarse ejemplares de herbarios más recientes, hizo posible analizar material vivo y observar nuevos caracteres diagnósticos presentes en raquis y escamas de láminas, pelos glandulares en pecíolos y raquis, junto con características de la pared de las esporas, que son críticos para delimitar A. achalense como un taxón bien definido, endémico del Noroeste hasta el centro de Argentina.

Abstract Arana, M. D.; M. L. Luna, M. A. Ganem & G. E. Giudice. 2022. Characterizing Asplenium achalense (Aspleniaceae), a misunderstood species of Argentine flora: morphological, palynological and distributional evidences. Darwiniana, nueva serie 10(2): 527-536. Asplenium (Aspleniaceae) is taxonomically one of the most complex fern genera with about 700 species, nearly cosmopolitan in distribution. In Argentina, Asplenium constitutes the most species- rich fern genus, with 38 taxa. Among these species, the delimitation of Asplenium achalense remain poorly understood. Some authors consider A. serra as a variant of A. achalense, or even the last species has been considered as a complex of species. The finding of a population of Asplenium achalense in Yungas after three decades without observations in the wild and neither registering more recently herbarium specimens, made it possible to analyse living material and observe new diagnostic characters present in rachises and laminae scales, glandular hairs in petioles and rachises along with spore wall features, that are critical to delimitate A. achalense as a well-defined taxon, endemics of north-west to central Argentina.

Abstract The spore morphology and wall ultrastructure of 12 species of Ctenitis from Southern Cone of America were studied using light microscope, scanning and transmission electron microscope. The study was carried out with herbarium material from Argentine and Brazilian institutions. Equatorial diameters, polar diameters and laesura length were measured. The spores are monolete with echinate or folded ornamentation. In the echinate type, the spines are conical, with broad base and attenuate apex. In the rugate type, the folds are inflated, linear, sinuous, subglobose or handle-shape. The perispore surface is scabrate, rugulate, microverrucose or psilate. Stratification and ultrastructure in the species analyzed are very similar. The exospore is smooth and two-layered in section. Simple and branched channels are observed mainly in the outer exospore. The perispore is composed of two layers, the inner one forms the ornamentation and the outer covers all the outer and inner surfaces. Immature spores were found in all samples of C. fenestralis. The characteristics of the studied spores like macro-ornamentation, color and fold length provide relevant information to differentiate some species or groups of species within the genus.

Summary Background and aims : The morphological characteristics of the spores provide information for the identification of fern taxa. To deepen the analyses of the morphological characteristics of the spores of the isosporated ferns inhabiting the Punta Lara Nature Reserve using light microscopy. M&M : The spores of the isosporate ferns that grow in the Punta Lara Nature Reserve (Buenos Aires Province, Argentina) were studied under a light microscope. The study was carried out with fresh materials collected during three years (2016-2018) at different sites of the Reserve. Twenty fern taxa, 16 native and 4 exotic, were analysed. The registered characteristics were: colour, shape, major and minor equatorial diameters, polar diameter, length and characteristics of the laesura and wall ornamentation. Results : The colour of the spores may be yellow, light brown, dark brown and only in Equisetum they are green (chlorophyllous). Most spores are monolete (13 species), other trilete (6 species) and only one species has alete spores. The spore walls may be smooth, wrinkled, folded, verrucated, tuberculated, reticulated and winged. Conclusions : The morphology of the spores allows the identification of the ferns of the Reserve at a generic and specific level and provides information for palaeopalynological and aeropalynological studies and of soil spore banks.

Resumen Introducción y objetivo : Las características morfológicas de las esporas brindan información para la identificación de taxa de helechos. Profundizar los análisis de las características morfológicas de las esporas de los helechos isosporados que habitan en la Reserva Natural de Punta Lara utilizando microscopía óptica. M&M : Se estudiaron con microscopio óptico las esporas de helechos isosporados que crecen en la Reserva Natural Punta Lara (provincia de Buenos Aires, Argentina). El estudio fue llevado a cabo con material fresco colectado durante 3 años (20162018) en diferentes sitios de la Reserva. Se analizaron 20 taxa de helechos, 16 nativos y 4 exóticos. Las características registradas fueron: color, forma, diámetros ecuatoriales mayor y menor, diámetro polar, longitud y características de la lesura y ornamentación de la pared. Resultados : El color de las esporas puede ser amarillo, castaño claro, castaño oscuro y solo en el caso de Equisetum son verdes (clorofílicas). La mayoría de esporas son monoletes (13 especies), otras triletes (6 especies) y una sola especie posee esporas aletes. Las paredes de las esporas pueden ser lisas, plegadas, verrucosas, tuberculadas, reticuladas y ruguladas-crestadas. Conclusiones : La morfología de las esporas permite la identificación de los helechos de la Reserva a nivel de género y especie y aporta información para estudios paleopalinológicos, aeropalinológicos y de bancos de esporas del suelo.

Abstract The recovery of soil spores is a strategy to strengthen in decline or disappeared populations from natural environments. In this work, we analyzed 25 soil samples extracted from a patch of gallery forest in an “albardón” of Punta Lara Reserve, Buenos Aires. The samples were distributed in 50 Petri dishes, 25 exposed to controlled temperature and light and another 25 kept in darkness. To contribute to the identification of gametophytes and sporophytes, spores of the local species were cultured in vitro. In 18 months of trial, the appearance of gametophytes and sporophytes was observed, in a greater proportion those belonging to a dominant species in the community: Doryopteris concolor. Numerous gametophytes and sporophytes from Gastoniella chaerophylla were also obtained, a taxon not found in the “albardón” for two years. The germination index (GI) was estimated and the morphological characteristics of the gametophytes and sporophytes were recorded. This is the first contribution to the knowledge of the spore banks in Argentina, in a protected area where several threats put at risk the survival of native species. The bases to implement methods of ex situ and in situ conservation of native ferns are provided.

Resumen La recuperación de esporas del suelo es una estrategia para reforzar poblaciones en disminución o desaparecidas de los ambientes naturales. En este trabajo se analizaron 25 muestras de tierra extraídas de un parche de selva en galería en un albardón de la Reserva Punta Lara, Buenos Aires. Las muestras fueron distribuidas en 50 cápsulas de Petri, 25 expuestas a temperatura y luz controladas y otras 25 mantenidas en oscuridad. Para contribuir a la identificación de los gametofitos y esporofitos se cultivaron in vitro esporas de las especies del lugar. En 18 meses de ensayo se observó la aparición de gametofitos y esporofitos, en mayor proporción los pertenecientes a una especie dominante en la comunidad: Doryopteris concolor. Se obtuvieron además numerosos gametofitos y esporofitos de Gastoniella chaerophylla, un taxón no encontrado en el albardón desde hace dos años. Se estimó el índice de germinación (IG) y se registraron las características morfológicas de los gametofitos y esporofitos. Esta es la primera contribución al conocimiento de los bancos de esporas en Argentina, en un área protegida donde diversas amenazas ponen en riesgo la supervivencia de especies nativas. Se brindan las bases para implementar métodos de conservación ex situ e in situ de los helechos nativos.

Abstract The spore morphology and wall ultrastructure of Dryopteris filix-mas, D. patula and D. wallichiana from Argentina were studied using light microscope, scanning and transmission electron microscope. The study was carried out with herbarium material from Argentine institutions. Equatorial diameters, polar diameters and laesura length were measured. The spores are monoletes with a rugate ornamentation. The folds are short to long, inflate, irregular in shape and size, and varying from subglobose to elongate. The perispore surface is rugulate. The exospore of all the species analyzed is two-layered in section. Simple and branched channels are also present. The perispore is composed of two layers, the inner one forms the ornamentation and the outer covers all the outer and inner surfaces. Some abnormalities, such as globose, triangular or twisted spores were observed. The morphology and ultrastructure of the species are very similar. The differences observed are related to the length and thickness of the perispore folds. The characteristics of these spores would not provide relevant information to differentiate species or sections within the genus, but can provide information for phylogenetic studies as well as for alterations in the biological cycles.

Background and aims: The morphology and the anatomy of the petioles provide useful information for taxonomic issues in ferns. The aim of this study was to analyze the diagnostic characters of petioles in 37 species of Asplenium that grow in Argentina, to contribute to their identifcation and to ascertain on their adaptive signifcance. M&M: Herbarium specimens and fresh material were employed. Materials were analyzed under stereoscopic and light microscopes; in the latter case, the samples were processed following the conventional histological techniques. The characters analyzed were: colour, length, presence of wings, sub-epidermic mechanical tissue, aeration lines, circumendodermal band (CB), shape and number of vascular bundles and xylem contour. Results: Some characteristics of the petioles allow the grouping of species. The diagnostic features are: colour, presence/absence of wings, number of vascular bundles, bundles contour, xylem contour and presence/absence of CB. Conclusions: Petiole characters alone do not allow the identifcation of the taxa at specifc level, although along with others they contribute to the systematics of the genus. The anatomy of the petiole does not show in general terms relationship with the habit of these plants. The type and distribution of subepidermic mechanical tissue and the presence of CB are associated with species that inhabit exposed and dry environments, but these features are not exclusive of the taxa that grow under these conditions.

Introducción y objetivos: Las características externas e internas de los pecíolos brindan información útil para los estudios taxonómicos en helechos. El objetivo de este trabajo fue analizar los caracteres diagnósticos del pecíolo en las 37 especies de Asplenium que crecen en Argentina, para contribuir a su identifcación e indagar sobre su signifcado adaptativo. M&M: Se emplearon especímenes de herbario y material fresco. Los materiales se analizaron con microscopios estereoscópico y óptico; en el último caso las muestras fueron procesadas siguiendo las técnicas histológicas convencionales. Los caracteres analizados fueron: color, longitud, presencia de alas, tejido mecánico sub-epidérmico, líneas de aireación, banda circumendodermal (BC), forma y número de los haces vasculares y contorno del xilema. Resultados: Algunas características de los pecíolos permiten el agrupamiento de especies. Los caracteres diagnósticos son: color, presencia/ausencia de alas, número de haces vasculares, contorno de los haces, contorno del xilema y presencia/ausencia de BC. Conclusiones: Los caracteres del pecíolo por si solos no permiten la identifcación de los taxa a nivel específco, si bien junto con otros contribuyen a la sistemática del género. La anatomía del pecíolo no evidencia en general relación con el hábito de estas plantas. El tipo y la disposición del tejido mecánico sub-epidérmico y la presencia de BC se asocian a especies que crecen en ambientes expuestos y secos, pero no son exclusivos de los taxa que crecen bajo estas condiciones.

Resumen Pleopeltis macrocarpa y Microgramma mortoniana son dos helechos epífitos de la familia Polypodiaceae hallados con baja frecuencia en la Reserva Natural Punta Lara (Buenos Aires, Argentina). El objetivo de este trabajo fue estudiar la morfogénesis de gametófitos epífitos para fortalecer poblaciones vulnerables y contribuir a su conservación. Se recolectaron hojas fértiles. Las esporas se sembraron en placas de Petri con medio de cultivo Dyer. Las esporas se caracterizaron por ser monoletes, elipsoidales, amarillentas y con ornamentación verrucosa. La germinación fue del tipo Vittaria y el desarrollo del gametofito es del tipo Drynaria. El esporofito de P. macrocarpa surgió a los 500 días y el de M. mortoniana a los 120. El patrón de germinación, el desarrollo del gametofito, el glóbulo lipídico en la célula protálica y los pelos unicelulares capitados en el margen podrían considerarse en la sistemática del grupo. La demora en la formación de esporofitos a través de la reproducción sexual, permite inferir que el éxito de su propagación estaría sujeto a la reproducción vegetativa.

Abstract The Punta Lara Natural Reserve is located on the riverside of the La Plata River in the province of Buenos Aires, Argentina. It is the Southernmost relict in the world of subtropical riparian forest. The epiphytic ferns studied in this work belong to the Polypodiaceae family: Microgramma mortoniana and Pleopeltis macrocarpa. Plant communities are subject to high levels of anthropization and introduction of exotic species. The goals of this work are to provide information on the morphogenesis of epiphytic gametophytes and to extend knowledge of their life cycles, contributing to their conservation. Sowing was carried out in Dyer medium. In both species the spores are monolete, ellipsoidal, yellowish and with verrucate sculpture. The equatorial diameter is 60-61 μm, the polar diameter is 39-42 μm. The germination is the Vittaria type; in M. mortoniana occurs at 20 days, while in P. macrocarpa occurs at six days. The filaments are uniseriate of 3-6 cells in length. The gametophyte development is Drynaria type. The cordated form is given after 40 days. In M. mortoniana, buds originated after 40 days. In P. macrocarpa, after 120 days, clathrate trichomes scale-like appear mainly on the margins of the gametophyte. The gametangia are typical of leptosporangiate ferns. The sporophyte of M. mortoniana emerged after 120 days and that of P. macrocarpa arose after 500 days, its blades are simple, spatulate and unicellular and multicellular branching hairs were observed. The germination pattern, gametophyte development, the presence of a lipid globule in the prothalic cell and the formation of unicellular capitated hairs are relevant characters that could be considered for systematic group. The delay in the formation of sporophytes through sexual reproduction, allows us to infer that the success of their establishment in situ would be given by the vegetative reproduction through creeping rhizomes and buds of gametophytes. Rev. Biol. Trop. 66(3): 1078-1089. Epub 2018 September 01.

The spore germination and gametophyte development of Ctenitis submarginalis from Punta Lara Natural Reserve, Buenos Aires province were studied as a contribution to the conservation of the species in this protected area. Spores collected from natural populations were sowing in Dyer medium and germinated in six day with a percentaje of 88 % fifteen days after sowing. The germination is Vittaria type and the gametophyte development is Aspidium type. The gametophyte of Ctenitis submarginalis is cordate, with a deep notch and well developed and symmetric wings. The gametangia appear 50 days after sowing. The sporophyte emerges 190 days after sowing and two different hairs were observed in the first lamina. The in-vitro spore germination is a successful method for obtaining numerous sporophytes of Ctenitis submarginalis. The sporophytes obtained were gradually acclimated, transplanted to its natural habitat in the reserve and will be monitored frequently to contribute to the conservation of the species.

Se estudió la germinación de las esporas y el desarrollo del gametofito de Ctenitis submarginalis de la Reserva Natural Punta Lara, provincia de Buenos Aires como contribución a la conservación de la especie en ésta área protegida. Las esporas colectadas de las poblaciones naturales fueron sembradas en medio de Dyer y la germinación se produjo a los seis días, con un porcentaje de germinación del 88 % a los 15 días después de la siembra. La germinación es del tipo Vittaria y el desarrollo del gametofito tipo Aspidium. El gametofito de Ctenitis submarginalis es cordado, con una profunda escotadura y alas simétricas bien desarrolladas. Los gametangios aparecen a los 50 días después de la siembra. El esporofito emerge a los 190 días después de la siembra y dos tipos diferentes de pelos se observaron en la primera lámina. La germinación in-vitro a través de esporas es un método exitoso para la obtención de numerosos esporofitos de Ctenitis submarginalis. Los esporofitos obtenidos fueron gradualmente aclimatados, transplantados a su hábitat natural en la reserva y serán periódicamente monitoreados para contribuir a la conservación de la especie.

Anogramma chaerophylla belongs to a fern genus with annual sporophytes and potentially perennating gametophytes. In the studied area, Natural Reserve Punta Lara, the plants grow stressed mainly by pollution and the invasion of exotic species. As a part of a project on conservation of ferns inhabiting Buenos Aires province, the objectives of this work were to evaluate in Anogramma chaerophylla the conditions for in-vitro spore germination and to analyse the different stages of its reproductive cycle. Spores were sterilized in an aqueous solution 10 % of NaCIO during different times and then sown in Petri dishes with Murashige & Skoog medium, without the addition of sucrose. The dishes were kept under laboratory conditions, at 12 h light/ darkness photoperiod and a temperature of 22 (± 2) °C. After two weeks, the percentage of germination was 80%. The spore germination pattern corresponds to the Vittaria type and the prothallus development was Ceratopteris type. Gametangia developed first in the bended thalloid region of the prothallus and then bisexual tubercles originated near this zone. The sporophytes developed only in association with the tubercles. During culture in plastic pots the sporophytes gave origin to a second generation of prothalli. Our preliminary findings demonstrate that the in vitro culture technique is suitable for A. chaerophylla propagation as a strategy for ex-situ conservation.

Anogramma chaerophylla pertenece a un género de helechos con esporofitos anuales y gametofitos potencialmente perennes. En el área de estudio, la Reserva Natural Punta Lara, la vegetación crece bajo estrés debido principalmente a la contaminación y la invasión de especies exóticas. Como parte de un proyecto de conservación de helechos que habitan en la provincia de Buenos Aires, los objetivos del trabajo fueron evaluar en Anogramma chaerophylla las condiciones para la germinación de esporas in-vitro y analizar las distintas etapas de su ciclo reproductivo. Las esporas fueron desinfectadas en solución 10 % de NaCIO durante distintos tiempos y sembradas luego en medio de cultivo Murashige - Skoog, sin agregado de sacarosa. Las cápsulas se incubaron con un fotoperíodo de 12 h luz/oscuridad y una temperatura de 22 (± 2) °C. A las dos semanas germinaron el 80% de las esporas. El patrón de germinación fue tipo Vittaria y el desarrollo del protalo tipo Ceratopteris. Los gametangios aparecieron primero en la región engrosada del protalo donde posteriormente se originaron los tubérculos bisexuales. Los esporofitos se desarrollaron solo en asociación con los tubérculos. Durante su cultivo en macetas, éstos dieron origen a una segunda generación de protalos. Nuestros resultados demuestran que la técnica de cultivo in vitro es apropiada para la propagación de Anogramma chaerophylla y como estrategia para su conservación ex-situ.

The spores of Schizaea fistulosa from Chile were studied using light microscopy (LM), scanning (SEM) and transmission electron microscopy (TEM). The spores are monolete and elliptic in polar view. The major equatorial diameter is 71-85 µm and the polar diameter is 54-61 µm. The laesurae are 50-60 µm long and, in some cases, bifurcated. The sporoderm ultrastructure is first mentioned and described here. The exospore is two-layered in section, verrucate-tuberculate with single or fused elements forming short ridges. The perispore is single-layered, 10-30 nm thick and it is only visible under transmission electron microscopy. On the spore surface, numerous, single or fused, spheroids and nanospheroids of different sizes were observed attached to the perispore surface. The results are discussed and compared with previous studies in Schizaea.

Se estudiaron las esporas de Schizaea fistulosa de Chile con microscopía óptica (MO), electrónica de barrido (MEB) y transmisión (MET). Las esporas son monoletes y elípticas en vista polar. El diámetro ecuatorial mayor es de 71-85 µm y el diámetro polar de 54-61 µm. Las lesuras son de 50-60 µm de longitud y en algunos casos están bifurcadas. La ultraestructura de la esporodermis se describe por primera vez. El exosporio en sección posee dos capas y es verrucoso-tuberculado con elementos aislados o fusionados formando lomos cortos. El perisporio posee una sola capa, de 10-30 nm de espesor y solamente es visible con microscopía electrónica de transmisión. Sobre la superficie de la espora, se observan numerosos esferoides y nanoesferoides de diferentes tamaños, adheridos a la superficie. Se discuten los resultados y se los compara con estudios previos en Schizaea.

First record of Asplenium harpeodes (Aspleniaceae) for the Argentinian flora. The first finding of Asplenium harpeodes in Argentina is disclosed. This species was found growing in Jujuy and Salta provinces, inhabiting the Yungas. A description and an illustration are given, and information about its distribution and the habitat is provided. A key to differentiate this species from nearby ones with pinnate lamina is also presented.

Se da a conocer el primer hallazgo de Asplenium harpeodes para la Argentina. Esta especie crece en las provincias de Jujuy y Salta, en las Yungas. Se presenta la descripción e ilustración del taxón y se brindan datos de su distribución y hábitat. Se brinda una clave para diferenciar esta especie de las más afines con lámina pinnada.

The morphology of the spores and the gametophyte development of Thelypteris abbiattii and T. hispidula from Punta Lara Natural Reserve (Buenos Aires, Argentina) were studied. Spores are monolete, folded, the folds have an equinated margin and a supralesural fold is also observed. The spore germination was conducted in Dyer medium and occurred between 7-12 days. In both species the germination is Vittaria type and the gametophyte development is Aspidium type. Adult gametophytes were observed after 50 days, are typical cordate and bisexual. Depending on the species, sporophyte formation occurs between 90 to 130 days. There were differences between the species analyzed in the time of appearance of the hairs of the gametophyte and pubescence of first leaves of the sporophyte. The results contribute to the systematic of these ferns and to conservation studies that develop in Argentina.

Se estudiaron la morfología de las esporas y el desarrollo de los gametofitos de Thelypteris abbiattii y Thelypteris hispidula de material proveniente de la Reserva Natural Punta Lara (Buenos Aires, Argentina). Las esporas son monoletes, plegadas, con pliegues de margen equinado y con pliegue supralesural. La germinación de las esporas se realizó en medio de Dyer y se produjo entre los 7 a 12 días. En ambas especies la germinación es del tipo Vittaria y el desarrollo del gametofito tipo Aspidium. Los gametofitos adultos se observaron a partir de los 50 días, poseen forma cordiforme típica y son bisexuales. Dependiendo de las especies, la formación del esporofito se produce entre los 90 a 130 días. Se encontraron diferencias entre las especies analizadas en cuanto al tiempo de aparición de los pelos del gametofito y la pubescencia de las primeras hojas del esporofito. Los resultados encontrados contribuyen a la sistemática del grupo y a los estudios de conservación que se desarrollan en la Argentina.

Palynological study in Asplenium species (Aspleniaceae) from Argentina. The genus Asplenium L. is represented in Argentina by about 38 species, being its habit terrestrial, saxicolous or ephiphytic. In this contribution we complete the palynological study of the genus in this country. The material was processed according to standard techniques for observation under light and scanning electron microscopes. The spores are monolete, the wall formed by the homogeneous exospore, with smooth surface, and the camerate and folded perispore. Two types of folds, winged and ridged, are registered. A variability in the density of the perforations in the outer layer of the perispore, and the margin and sculptural elements of the folds and in the areas between them, are also observed. Spores of analyzed taxa are described and illustrated with pictures using scanning electron microscope.

El género Asplenium L. se halla representado en Argentina por cerca de 38 especies, siendo su hábito terrestre, saxícola o epífito. En la presente contribución se completa el estudio palinológico del género en este país. El material fue procesado de acuerdo a técnicas clásicas para su observación con microscopios óptico y electrónico de barrido. Las esporas son monoletes, la pared está conformada por el exosporio homogéneo de superficie lisa, y el perisporio camerado y plegado. Se distinguen dos tipos de pliegues: alados y lomados y se observa variabilidad en cuanto a la densidad de las perforaciones del estrato externo del perisporio, a los tipos de margen y los elementos esculturales de los pliegues y a las áreas entre pliegues. Se describen las esporas de los taxa estudiados y se ilustran con fotografías al microscopio electrónico de barrido.