Species of the genus Leishmania parasitize mammals and have life cycles that alternate between vertebrate and invertebrate hosts. Most species develop in a hematophagous arthropod and infect a specific vertebrate host that may belong to diverse orders and families. Visceral leishmaniasis is a chronic zoonosis with a wide geographic distribution, affecting 350 million people globally, mostly in areas with a high risk of infection. In Brazil, this disease not only has a high incidence but is also expanding to new areas, both in urban centers and rural areas, including territories with tribal communities, due to increasing human intervention. The objective of this study was to perform cathepsin L-like gene-based molecular diagnosis of Leishmania infantum in the indigenous Tapirapé ethnic group in the state of Mato Grosso. From the 372 individuals assessed, only 0.8% (3/372) tested positive for L. infantum, all from the same village (Urubu Branco). Despite the small number of infected individuals, this study demonstrates the first human cases of Leishmania infantum infection in this population, suggesting the need for regular monitoring of visceral leishmaniasis in the area and leading to a broad discussion on the planning and implementation of public health measures for the indigenous population, while respecting their distinctive territories and culture.

O presente estudo relata a ocorrência de co-infecção entre o vírus da cinomose canina (CDV) e Toxoplama gondii em cães com sinais neurológicos. Amostras de soro e tecido nervoso (pos-mortem) de 21 cães, suspeitos de cinomose canina foram analisadas pela Reação de Imunofluorecência indireta (RIFI) para pesquisa de anticorpos contra T. gondii e N. caninum e por RT-PCR para CDV. Dezessete (80,9%) cães foram positivos para o CDV pela RT-PCR e 8 (38,1%) foram positivos para anticorpos contra T. gondii. Sete cães (41,1%) apresentaram-se positivos para ambos agentes, caracterizando processo de co-infecção. Somente 1 (4,7%) cão foi soropositivo para N. caninum (RIFI=100), entretanto este mesmo animal foi positivo para T. gondii (RIFI=4096) e para CDV (RT-PCR).

RESUMO O presente estudo determinou a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. em ovinos do Município de Monte Negro, RO. Foram examinados soros de 141 ovinos de raça, idade e sexo variados provenientes de 15 fazendas, pela técnica de Soroaglutinação Microscópica. Doze (80,0%) propriedades apresentaram pelo menos um animal reagente. Títulos de anticorpos iguais ou superiores a 100 foram detectados em 47 (33,3%) animais, e os sorovares mais frequentes foram Patoc (29,7%), Autumnalis (14,8%), Pyrogenes (10,6%), Australis (4,2%), Bratislava (4,2%), Hardjo (4,2%), Icterohaemorrhagiae (4,2%), Castellonis (2,1%) e Hebdomadis (2,1%). Em 11 (23,4%) soros não foi possível a determinação do provável sorovar envolvido na reação. Alerta-se também para a possibilidade de infecção no homem, tendo em vista as características regionais de fronteira agrícola amazônica.

ABSTRACT The present study determined the prevalence of anti-Leptospira spp.antibodies in 141 ovines from 15 farms of the Monte Negro Municipality, Rondonia State, Brazil, by the microscopic agglutination test. Twelve (80.0%) farms presented at least 1 reactive animal. Antibodies titers of ? 100 were detected in 47 (33.3%) animals, the most frequent serovars being Patoc (29.7%), Autumnalis (14.8%), Pyrogenes (10.6%), Australis (4.2%), Bratislava (4.2%), Hardjo (4.2%), Icterohaemorrhagiae (4.2%), Castellonis (2.1%) and Hebdomadis (2.1%). In 11 (23.4%) sera it was not possible to determine the most frequent serovar involved. The results raise a warning as to the possibility of infection in the human being by Leptospira in light of the regional characteristics of the Amazon agricultural frontier.

RESUMO A soroprevalência e os possíveis fatores de risco para a infecção por Brucella spp. foram estimados em 2.109 vacas do Município de Monte Negro, Rondônia. De cada animal selecionado foi coletado soro sangüíneo e para as propriedades envolvidas foi preenchido um questionário. As amostras coletadas foram analisadas pelas provas de Antígeno Acidificado Tamponado corado com Rosa Bengala, Soroalgutinação Lenta em Tubos e 2-Mercaptoetanol. A prevalência total da infecção por Brucella spp. em vacas no Município de Monte Negro foi de 15%, sendo 54 (63%) fazendas com animais reagentes. A regressão logística sugeriu que rebanhos com mais de 25 vacas (OD = 2,8; P = 0,02) e a presença de suínos (OD = 2,5; P = 0,04) foram fatores associados a soropositividade dos bovinos. Outras variáveis associadas à infecção pelo teste do Qui-Quadrado foram repetição de cio e nascimento de bezerros enfermos (P < 0,05).

ABSTRACT The seroprevalence of Brucella spp. and the possible associated risk factors were estimated for 2,109 adult cows in Monte Negro county, State of Rondônia, Brazil. A questionnaire was completed for each farm where cattle were sampled. Laboratory tests were Rose-Bengal Agglutination, Standard Tube agglutination, and Mercaptoethanol. The adjusted overall prevalence of Brucella spp. seropositive cows for Monte Negro county was 15% and at least 54 herds (63%) were positive. A logistic regression analysis suggested that the herd size of more than 25 cows and the presence of pigs were significant factors associated with the seropositivity (herd size: OD = 2.8; P=0.02; presence of pigs: OD = 2.5; P =0.04). Other significant variables associated to the infection, analysed by Chi-Square were the presence of seropositivity cows with the herd that were repeat breeders and birth of weak calves (P < 0.05).

Fecal samples from 1755 dogs and 327 cats were examined for the presence of helminths and protozoan forms. From the total samples, 486 (27.7%) dogs and 103 (31.5%) cats presented at least one parasite. The main genus of parasite in dogs were Ancylostoma (12.7%), Giardia (8.5%), Cystoisosopora (4.4%), Toxocara (2.6%), and Cryptosporidium (2.4%). The ocurrence of Ancylostoma was associated to male dogs, older than one year, while Giardia, Cryptosporidium, Cystoisospora and Toxocara were associated to dogs younger than one year (P<0.05). Among cats, the most frequent parasites were Cryptosporidium (11.3%), Giardia (8.3%), Cystoisosopora (8.3%), Toxocara (6.1%), and Ancylostoma (2.1%). Cryptosporidium and Cystoisosopora were more prevalent in cats younger than one year (P < 0.05).

Foram testados, pela técnica de soroaglutinação microscópica aplicada à leptospirose, 329 cães provenientes do município de Monte Negro, RO, dos quais 156 eram da área urbana e 173 da área rural. Simultaneamente foi aplicado questionário para verificar a existência de possíveis fatores de risco pela regressão logística. Abordaram-se questões referentes a idade, sexo, dieta, tipo de criação, ambiente, contato com outras espécies e hábito de caça. Foram detectadas reações com títulos >100 em 27,3%, com 90 cães positivos ao agente, das quais 23,7% eram da área (37/156) urbana e 30,6% (53/173), da área rural (P>0,05). Os sorovares predominantes, reatores com títulos mais elevados, foram Autumnalis (22%), Pyrogenes (12%), Canicola (10%) e Shermani (7,5%). Cães com idade acima de 12 meses apresentaram maior ocorrência de anticorpos quando comparados aos cães mais jovens (P<0,05). Dentre os fatores de risco analisados, foram significativos a alimentação (dieta à base de ração comercial - odds ratio: 3,3; intervalo de confiança: 95%: 1,2 - 9,2; P=0,02) e o sexo (macho - odds ratio: 2,3; intervalo de confiança: 95%: 1,3 - 3,9; P=0,003). Ressalta-se a ocorrência de reações para sorovares mantidos na natureza por animais silvestres.

The microscopic agglutination test was applied to 329 samples taken from 156 dogs from urban area and 173 from rural areas of Monte Negro County, Rondônia State, Brazil, to determine anti-Leptospira spp. antibodies. A survey was concomitantly done to detect eventual risk factors thru the use of logistic regression. Studied variables were age, sex, diet, management, environment, contact with other species and hunting habit. Titers >100 were detected in 27.3% (90/329) of the dogs, being 23.7% (37/156) urban and 30.6% (53/173) rural dogs. The most frequent serovars were Autumnalis (22.0%), Pyrogenes (12.0%), Canicola (10.0%) and Shermani (7.5%). Dogs older than 12 months showed higher positive frequencies than younger animals (P<0.05). Risk factor were associated with commercial food as compared to homemade food (odds ratio: 3.3; 95% confidence interval : 1.3 - 3.9; P=0.02) and associated with sex, with higher occurrence in males than in females (odds ratio: 2.3; 95% confidence interval: 1.3 - 3.9; P=0.003). It was emphasized the serological occurrence of serovars kept and spread in nature by wild animals.

Avaliou-se a presença de T. gondii em cortes comerciais de carne suína (pernil, lombo, costela e paleta), por meio do bioensaio e PCR, em animais experimentalmente inoculados. Dois grupos (G) foram formados. Os animais do G1 (n=10) foram inoculados com 4 x10(4) oocistos da cepa VEG e os do G2 (n=8) permaneceram como grupo-controle, não inoculado. Todos os animais foram abatidos no dia 59 após a infecção, quando foram colhidas as amostras de carne para a realização das provas de bioensaio e da PCR. Todos os suínos do G1 apresentaram-se positivos a pelo menos um dos testes de diagnóstico ou a ambos, e os do grupo-controle permaneceram negativos. Não houve diferenças significativas em relação aos tipos de cortes comerciais e à presença do parasita no bioensaio (P>0,05). O bioensaio foi capaz de detectar T. gondii em 27/40 (67,5%) amostras e a PCR em 9/40 (22,5%). O estudo mostrou diferença entre o bioensaio e a PCR (P<0,01).

The distribution of T. gondii in commercial cuts of pork (ham, tenderloin, spareribs and arm picnic) by PCR and bioassay from experimentally infected pigs, was evaluated. Eighteen mixed breed pigs were divided into two groups (G). The G1 animals (n=10) were infected with 4 x10(4) oocysts of the T. gondii VEG strain and the G2 animals (n=8) were used as control. Pigs of both groups were slaughtered at 59th day after infection, and meat samples were collected for bioassay and PCR. All animals from G1 were positive by at least one or both tests, and all control animals were negative. T. gondii was identified in pork by mouse bioassay and PCR in 27/40 (67.5%) and in 9/40 (22.5%) of the evaluated samples, respectively. There were no statistical differences in the distribution of tissue cysts from commercial cuts of pork by bioassay (P>0.05). However, statistical differences were observed when mouse bioassay and PCR were compared (P<0.01).

RESUMO Foram avaliados soros de suínos provenientes de propriedades rurais que desenvolvem agricultura familiar no Município de Monte Negro, Rondônia, frente a agentes bacterianos e virais. Para a pesquisa de anticorpos contra Brucella spp., foram utilizados o Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), a Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL) e a prova do 2-Mercaptoetanol (2-ME). Para a pesquisa de Leptospira spp. utilizou-se a Soroaglutinação Microscópica (SAM) contra 24 sorovares de leptospira. Anticorpos contra Parvovírus Suíno (PVS) foram pesquisados pela Inibição da Hemaglutinação (IH), enquanto que o vírus da Peste Suína Clássica (PSC) e da Doença de Aukeszky (DA) por Ensaio Imunoenzimático (ELISA). Apenas uma (0,9%) das 104 amostras testadas foi reagente na AAT e nenhuma na SAL e 2-ME. Para Leptospira spp. foram testados 88 soros, sendo detectados anticorpos em 29 amostras (32,9%) e os sorovares mais freqüentes foram Castellonis, Bratislava e Canicola. Foram detectados anticorpos contra PVS em 7,7% (8/104) dos soros testados. Nenhuma amostra foi reagente para PSC e DA.

ABSTRACT Sera from swine fromfamily-employed farms in Monte Negro County, state of Rondônia, Brazil, were evaluated againstbacterial and viral agents. Brucellosis was evaluated by Rose-Bengal agglutination (RBA), standard tube agglutination (STA), and mercaptoethanol (ME); and leptospirosis by microscopic agglutination test (MAT) against 24 leptospira serovars. Anti-porcine parvovirus antibodies were tested by haemmaglutination inhibition assay, and ELISA technique was used for detection of antibodies against classical swine fever virus and Aujeszky disease virus. Only 1 (0.9%) from 104 tested sera reacted by RBA, and no samples reacted in STA and ME. Leptospira spp. antibodies were detected in 29 (32.9%) of 88 tested sera and the most frequent serovars detected were Castellonis, Bratislava and Canicola. Antibodies against porcine parvovirus were detected in 7.7% (8/104) of the sera. None of the examined samples reacted to classical swine fever virus or Aujeszky disease virus.

RESUMO De julho a agosto de 2001, foram colhidas amostras de fezes de 95 cães (13,8% da população canina) da área urbana do Município de Monte Negro, Rondônia. As amostras de fezes foram examinadas pelos métodos coproparasitológicos de Willis, centrífugo-flutuação em solução de sacarose e centrífugo-sedimentação em água-éter. Das 95 amostras de fezes, somente 15 (15,8%) foram negativas. Foram encontrados helmintos pertencentes a 5 gêneros: Ancylostoma, Toxocara, Trichuris, Spirocerca, Physalopterae 5 protozoários: Sarcocystis, Giardia, Cystoisospora, Cryptosporidium, Hammondia-Neospora. Ovos de Ancylostoma spp. foram os mais prevalentes (73,7% de amostras positivas), seguidos por ovos de Toxocara canis (18,9%) e esporocistos de Sarcocystis spp. (18,9%). Os demais parasitos tiveram prevalências abaixo de 10%. Os resultados encontrados foram comparados com outros trabalhos brasileiros, demonstrando que o gênero Ancylostoma é o mais freqüentemente diagnosticado em cães no Brasil.

ABSTRACT From July to August 2001, individual fecal samples were collected from 95 dogs (13.8% of the canine population) living in the urban area of Monte Negro, Rondônia. The fecal samples were processed by the following coproparasitological methods: Willis (simple flotation), centrifugal flotation employing sacarose solution, and centrifugal sedimentation employing water-ether. Only 15 (15.8%) out of 95 fecal samples were negative. Five helminth genera were found: Ancylostoma, Toxocara, Trichuris, Spirocerca, Physaloptera; as well as 5 protozoan genera: Sarcocystis, Giardia, Cystoisospora, Cryptosporidium, Hammondia-Neospora. Ancylostoma spp. eggs were the most prevalent (73.6% of positive samples), followed by Toxocara canis eggs (18.9%) and Sarcocystis spp. sporocysts (18.9%). Prevalence of the remaining parasites was less than 10%. The results were compared with other Brazilian studies, showing that the genus Ancylostoma is the most frequently found on dogs in Brazil.

Amostras de 10 e 14 pulgas Ctenocephalides felis felis foram coletadas de cães nos municípios de Pedreira e Mogi das Cruzes, respectivamente, no estado de São Paulo, para pesquisa de Rickettsia spp. As pulgas foram individualmente submetidas à reação em cadeia pela polimerase, tendo como alvo os genes 17-kDa e 190-kDa (OmpA) de Rickettsia, sendo esse último específico para o GFM. Nove pulgas de Pedreira (90%) e quatro pulgas de Mogi das Cruzes (28%) foram positivas para o gene 17-kDa, e oito pulgas de Pedreira (80%) e quatro de Mogi das Cruzes (28%) foram positivas para o gene 190-kDa. As seqüências de nucleotídeos do gene 190-kDa de uma pulga de Pedreira e de uma pulga de Mogi das Cruzes foram 100% idênticas; quando comparadas com dados existentes no GenBank, foram 100% idênticas com a seqüência parcial do gene 190-kDa de Rickettsia felis. Esse foi o primeiro relato de sua ocorrência no estado de São Paulo.

Samples of 10 and 14 Ctenocephalides felis felis fleas were collected on dogs from Pedreira and Mogi das Cruzes municipalities, respectively, in the State of São Paulo, Brazil, for detection of Rickettsia spp. Individual fleas were submitted to Polymerase Chain Reaction targeting the 17-kDa and the 190-kDa (OmpA) genes of Rickettsiae. This later gene is specific for spotted fever group. Nine fleas from Pedreira (90%) and four fleas from Mogi das Cruzes (28%) were positive for the 17-kDa gene, and eight fleas from Pedreira (80%) and four from Mogi das Cruzes (28%) were positive for 190-kDa gene. The nucleotide sequence of the 190-kDa products of one flea from Pedreira and one flea from Mogi das Cruzes were 100% identical to each other, and when compared to the GenBank Data, they were 100% identical to the 190-kDa sequence of R. felis. This was the first report of its occurrence in the State of São Paulo.

A imunidade ao Toxoplasma gondii foi estudada em suínos, após a vacinação com antígenos de T. gondii incorporados a complexos imunoestimulantes (iscoms). Nove animais (grupo 1-G1) foram inoculados, via subcutânea, com três doses de iscoms (amostra LIV-5) em intervalos de 21 e 13 dias. Para comparar os resultados obtidos, outros três grupos com nove suínos cada foram formados: o grupo 2 (G2) foi imunizado com os antígenos da amostra LIV-5 sem o iscom, o grupo 3 (G3) foi inoculado com taquizoítas da amostra RH de T. gondii e o grupo 4 (G4) não foi imunizado. Quatro animais não receberam a vacina nem o desafio com o T. gondii (grupo 5-G5). Trinta dias após as imunizações os suínos foram desafiados, via oral, com 5´10(4) oocistos da amostra AS-28 de T. gondii. Os animais foram sacrificados 47 dias após o desafio e fragmentos de coração, músculo, cérebro, fígado, língua e retina foram colhidos para a inoculação experimental em camundongos. Três dos nove suínos do G2 e um dos nove suínos do G4 apresentaram temperatura elevada após o desafio. A resposta humoral (IgG) foi analisada pela reação de imunofluorescência indireta. A primeira vacinação com o iscom induziu baixos níveis de anticorpos, a segunda e a terceira resultaram em altos níveis, semelhantes aos encontrados na infecção com a amostra RH (G3). O Western blotting indicou que a resposta humoral do G1, após o desafio, foi mais intensa que a dos animais não vacinados. O T. gondii não foi isolado no bioensaio das amostras de tecido dos suínos vacinados com iscom, mas foram recuperados em quatro suínos do G4, um suíno do G2 e um do G3.

Immunity to Toxoplasma gondii was studied in pigs, after vaccination with T. gondii antigens incorporated into immunostimulating complexes. Nine pigs (group 1 - G1) were inoculated subcutaneously with T. gondii iscoms (LIV-5 sample) and three doses were given at 21 and 13 day-intervals. The results were compared in other three groups of nine pigs each: animals in group 2 (G2) were immunized with the LIV-5 antigens without Quil A, animals in group 3 (G3) were inoculated with tachyzoites of RH T. gondii isolate, and animals in group 4 (G4) received no vaccination. Four animals were neither vaccinated nor challenged with T. gondii (group 5 - G5). Thirty days after vaccination, pigs were challenged orally with 5´10(4) oocysts at AS-28 T. gondii isolate. Euthanasia was carried out 47 days after challenge and specimens of the heart, muscle, brain, liver, tongue and retina were inoculated into mice. Three out of nine pigs from G2 and one out of nine pigs from G4 showed hypertermia after the challenge. Antibody response was analysed by indirect fluorescent antibody test. The first iscom immunization (G1) induced low antibody levels, the second and third produced high antibody levels, similarly to the RH isolate infection (G3). Western blotting analysis indicated that the antibody response in animals in G1, after challenge, was more intense than in animals in the non-vaccinated group. T. gondii was not isolated by bioassays from tissues of iscom vaccinated pigs, while recovery was obtained from four animals in G4, one in G2 and one in G3.

During January and February, 2000, 133 dogs from 21 farms located in eight diferent counties at the northern region of Paraná, Brazil, were examined for ticks. Ticks found on dogs were collected and identified. Information about dog rearing system was also obtained. Fifty-five ticks were collected on 19 dogs (14.3%) from 11 farms (52.4%). Four species were identified: Rhipicephalus sanguineus (20 ticks on nine dogs from seven farms), Boophilus microplus (15 ticks on five dogs from five farms), Amblyomma ovale (nine ticks on six dogs from four farms) and Amblyomma aureolatum (11 ticks on three dogs from one farm). The results are discussed considering the behavior of some dogs used to stroll into the woods and pasture areas whereas other dogs remained closer to the human facilities.