ABSTRACT Over the past decade, the business of producing juice from grapes (Vitis labrusca L. and hybrids) has been expanding in response to increasing consumption encouraged by campaigns promoting the benefits grape juice can have on health. This study aimed to determine the effect of the production cycle, vine training system, and rootstock on the yield and physical and physical-chemical characteristics of ‘BRS Magna’ grapes grown in the Vale do Submédio São Francisco in the northeastern region of Brazil. The study was conducted in Petrolina, Pernambuco, over eight production cycles (2017 to 2020). The grapevines were trained in three vine training trellis systems: espalier, lyre, and pergola; and grafted onto two rootstocks: IAC 572 and IAC 766. The production cycle, training system, and rootstocks affected the yield components, vigor, and physical characteristics of the BRS Magna grapes. The combination of the pergola training system and rootstock IAC 766 stood out from the others, providing mean yields estimated at 26 t ha –1 per production cycle. The soluble solids content (SS), titratable acidity (TA), and SS TA –1 ratio were affected neither by the training system nor the rootstock, and higher values for SS and lower values for TA were obtained in the first, second, fourth and eighth production cycles. Thus, the pergola training system and rootstock IAC 766 are recommended for promoting yield gains in the ‘BRS Magna’ grape in the Vale do Submédio São Francisco.

ABSTRACT Sweet corn is susceptible to the attack of various pathogens that affect its metabolism and compromise its quality and production. This study aimed to identify the causal agent of stem rot in sweet corn plants under greenhouse conditions. The identity of the pathogenic isolate was confirmed by sequencing of internal transcribed spacer (ITS1/ITS4), beta-tubulin (BT2A/BT2B), calmodulin (CL1/CL2) and translation elongation factor 1α (TEF1). The morphological and sequencing characteristics showed that Fusarium sacchari, which belongs to the Fusarium fujikuroi complex, is directly associated with the symptoms observed in the field. This fungal isolate has never been associated with diseases in Zea mays (saccharata group) in Brazil; therefore, this is the first report of the fungus infecting sweet corn in a cultivated area.

RESUMO O milho doce está sujeito ao ataque de vários patógenos que afetam o seu metabolismo e comprometem a sua qualidade e produção. Objetivou-se identificar o agente causal da podridão do colmo em plantas de milho doce, em casa-de-vegetação. A identidade do isolado patogênico foi confirmada pelo sequenciamento do espaço interno transcrito (ITS1/ITS4), beta-tubulina (BT2A/BT2B), calmodulina (CL1/CL2) e fator de elongação da tradução 1α (TEF1). As características morfológicas e de sequenciamento revelaram que Fusarium sacchari, pertencente ao complexo Fusarium fujikuroi, está diretamente associado aos sintomas observados em campo. Esse isolado fúngico nunca foi associado a doenças em Zea mays (grupo saccharata) no Brasil; portanto, este é o primeiro relato do fungo infectando milho doce em área de cultivo.

ABSTRACT Objective: To evaluate the knowledge about scoliosis in teachers of municipal public schools. Methods: In total, 126 professionals were interviewed using a standard questionnaire containing issues related to scoliosis. Results: 31% of interviewees did not know what scoliosis is. Of those who knew 89.65% were partially correct about the definition. Of those who claimed to know how the scoliosis diagnosis is made, only 25.58% were completely correct. When questioned about the Adams test, 84.9% did not know it. Among the interviewees, 57.9% answered that it is impossible to identify scoliosis by a simple examination of their students and, off these, 86.3% stated the lack of knowledge about the subject; and 92.1% considered that training for the diagnosis and early identification of scoliosis in students. Conclusion: This study holds social impact since the interviewed teachers were not knowledgeable about the subject and had difficulty in providing a definition of the condition and in how to proceed with the investigation. Continuous education activities and the inclusion of this subject on the curricula of teacher education programs would improve the early diagnosis and treatment of scoliosis, with high success rates. Level of Evidence IV, Economic and Decision Analyses.

RESUMO Objetivo: Avaliar o conhecimento de professores de escola municipal sobre escoliose. Métodos: Foram entrevistados 126 profissionais por meio de formulário online padronizado contendo perguntas relativas à escoliose. Resultados: Dos entrevistados, 31% não sabiam o que é escoliose. Dos que sabiam, 89,65% estavam parcialmente corretos quanto à definição. Dos professores que responderam saber como era feito o diagnóstico de escoliose, apenas 25,58% estavam totalmente corretos. Quando questionados sobre o teste de Adams, 84,9% não sabiam do que se tratava. Dos entrevistados, 57,9% disseram que não é possível identificar escoliose por meio de um exame simples de seus alunos em sala de aula e, destes, 86,3% alegaram falta de conhecimento sobre o assunto; e 92,1% consideraram que é importante haver uma capacitação sobre o diagnóstico de escoliose para identificação precoce nos alunos. Conclusão: Este estudo tem impacto social, pois os professores entrevistados não apresentavam domínio sobre o assunto, demonstrando dificuldade em definir a condição e como proceder com a investigação. A realização de capacitações e a inclusão dessas questões no currículo profissional aumentaria o diagnóstico precoce de escoliose nas escolas, possibilitando o tratamento precoce e maiores chances de sucesso terapêutico. Nível de Evidência IV, Análise Econômica e de Decisão.

Resumo Porta enxertos são amplamente utilizados na viticucultura mundial e podem influenciar os componentes de produção e a qualidade das uvas, sucos e vinhos. O objetivo do presente trabalho foi determinar a influência do porta enxerto no desempenho produtivo, características físicas e físico químicas de uvas para suco ‘BRS Magna’ cultivada no Vale do Submédio São Francisco. O estudo foi realizado durante seis ciclos de produção no período de 2015 à 2019, no Campo Experimental de Bebedouro da Embrapa Semiárido em Petrolina, PE. As seguintes variáveis foram avaliadas: produtividade estimada; número de cachos por planta; massa fresca de ramos e folhas; massa do cacho; comprimento e largura do cacho; massa da baga; teor de sólidos solúveis totais (SS), acidez titulável (AT) e relação SS/AT. Efeitos significativos do porta enxerto foram observados em todas as variáveis com exceção do teor de SS. O porta enxerto IAC 572 promoveu aumentos de até 61% na produtividade de videiras ‘BRS Magna’, com respostas significativas nos demais componentes de produção. A dispersão gráfica em relação aos três primeiros componentes principais permitiu a separação dos porta enxertos em função dos ciclos de produção. Os valores médios para teor de SS e AT caracterizam esta cultivar no Vale do Submédio São Francisco, com alto conteúdo de sólidos solúveis e baixa acidez resultado em elevada relação SS/AT, com potencial para elaboração de sucos de elevada qualidade independente do porta enxerto utilizado.

Abstract Rootstocks are widely used in viticulture worldwide and can affect the yield components and quality of grapes and their juices and wines. The aim of the present study was to determine the effect of the rootstock on the yield performance and physical and physical-chemical traits of ‘BRS Magna’ juice grapes grown in the Submédio do Vale do São Francisco. The study was performed over six production cycles in the period from 2015 to 2019 in the Bebedouro experimental field of Embrapa Semiárido in Petrolina, PE, Brazil. The treatments consisted of seven grapevine rootstocks: IAC 572, IAC 766, IAC 313, Paulsen 1103, SO4, Harmony, and Freedom. The following variables were evaluated: estimated yield, number of grape bunches per plant, branch and leaf fresh matter, bunch weight, bunch length and width, berry weight, total soluble solids content (SS), titratable acidity (TA), and SS to TA ratio (SS:TA). Significant effects of the rootstock were observed in all the variables except for SS. The rootstock ‘IAC 572’ led to increases of up to 61% in the yield of ‘BRS Magna’ grapevines, or 32.78 ton.ha-1, with significant responses in the other yield components. Results of the scatterplot in relation to the first three principal components allowed separation of the rootstocks in accordance with production cycles. The mean values for SS and TA characterize this cultivar in the Vale do Submédio São Francisco, with high soluble solids content and low acidity resulting in high SS:TA, as having potential for preparation of high quality juices, regardless of the rootstock used.

Resumo Considerando a falta de informação para extração de RNA de plantas arbóreas, especialmente as do Cerrado brasileiro, o objetivo do estudo foi testar métodos de extração de RNA para uma ampla variedade de espécies de plantas nativas deste bioma. Os métodos testados foram: (i) reagente TRIzol®, (ii) reagente TRIzol® com modificações, (iii) tampão CTAB e (iv) tampão CTAB modificado, inicialmente para amostras foliares de Xylopia aromatica e Piper arboreum. O procedimento com melhores resultados foi utilizado posteriormente para obtenção de RNA de 17 outras espécies nativas. Baseado na razão de absorbância A260/A280 o método com CTAB modificado mostrou-se melhor para extração de RNA destas espécies arbóreas. Dez das onze espécies testadas por meio de RT-PCR geraram fragmentos de tamanho esperado a partir do RNA total extraído utilizando o método selecionado, confirmando-o como melhor opção para obtenção de RNA de alta qualidade para análises moleculares e para uso na detecção de vírus infectando essas espécies arbóreas.

Abstract Considering the lack of information on RNA extraction from arboreal species, specially from the Brazilian Cerrado, the aim of this study was to test RNA extraction methods for a wide variety of native plant species from this biome. The methods tested consisted of: (i) TRIzol® reagent, (ii) TRIzol® reagent with modifications, (iii) CTAB buffer, and (iv) Modified CTAB buffer, initially for leaf samples of Xylopia aromatica and Piper arboreum. Later the procedure with the best results was used to obtain purified RNA from 17 other native species. Based on A260/A280 absorbance ratio the Modified CTAB method was the best for total RNA extraction for those woody species. Ten out of eleven species tested through RT-PCR generated fragments of the expected size from the total RNA extracted by the selected method, confirming it as the best option to obtain high-quality RNA for molecular analyses and for use in the detection of viruses infecting these tree species.

Resumo A espécie Zamioculcas zamiifolia (Araceae) está entre as espécies exóticas mais utilizadas e cultivadas no Brasil como plantas ornamentais e requisitada em projetos de paisagismo. Apesar de apresentar durabilidade no transporte e adaptação em ambientes com pouca luz, esta ornamental é acometida por diferentes patógenos. Assim o objetivo foi detectar e identificar o patógeno causador de podridão na haste de Z. zamiifolia em cultivos comerciais. Plantas de Z. zamiifolia apresentando sintomas de podridão nas hastes foram encaminhadas para diagnose fitossanitária. O isolado fúngico obtido, SR-001, apresentou, em meio de cultura, características morfológicas de micélio aéreo de aspecto cotonoso, hifas hialinas septadas, sem produção de esporos, e com formação de pequenos escleródios esféricos de coloração marrom. Para comprovar a patogenicidade, plantas de Z. zamiifolia foram inoculadas com o isolado SR-001 e, após quinze dias, procedeu-se o reisolamento do fungo quando do aparecimento dos mesmos sintomas de podridão. O isolado SR-001 foi identificado como Sclerotium rolfsii e a sequência representativa de S. rolfsii foi depositada no GenBank (Acesso MG694322). Este isolado fúngico não tem sido associado com doenças em Z. zamiifolia no Brasil, sendo assim este o primeiro relato do fungo infectando essa espécie de planta ornamental em área de cultivo.

Abstract Zamioculcas zamiifolia (Araceae) is one of the most widely grown exotic species in Brazil as ornamental plants and in landscape design. Despite tolerating transport and being well adapted to low-light environments, this ornamental is attacked by different pathogens. Thus, the aim was to detect and identify the pathogen that causes stem rot in commercial Z. zamiifolia crops. Z. zamiifolia plants exhibiting stem rot symptoms were sent for phytosanitary diagnosis. In a culture medium, the fungal isolate obtained (SR-001) displayed the following morphological characteristics: cotton-like aerial mycelium, septate hyaline hyphae with no spore production, and the formation of small brown spherical sclerotia. To confirm pathogenicity, Z. zamiifolia plants were inoculated with the SR-001 isolate and, after fifteen days, the fungus was re-isolated when the same rot symptoms emerged. The SR-001 isolate was identified as Sclerotium rolfsii and its representative sequence was deposited in GenBank (Access MG694322). This fungal isolate has not been associated with diseases in Z. zamiifolia in Brazil, and this is the first report of the fungus infecting this ornamental plant species in a cultivated area.

RESUMO O tratamento térmico de toletes para a formação de mudas de cana-de-açúcar é a principal forma de manejo de Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), atualmente, no Brasil. Quando imersos, as enzimas e proteínas da célula bacteriana são desnaturadas, sem causar prejuízos às gemas dos toletes. Devido a possíveis escapes à detecção e consequente sobrevivência da bactéria à termoterapia, o que pode dar origem a mudas assintomáticas, objetivou-se realizar a detecção da bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli em toletes de cana-de-açúcar, utilizando-se técnicas moleculares e combinações de tempo e temperatura, com ou sem a adição de antibióticos. A técnica PCR convencional detectou o DNA bacteriano de Lxx somente no controle positivo, constituído de planta altamente suscetível, com alta concentração bacteriana. Já pela nested-PCR, o DNA de Lxx foi detectado em todos os tratamentos utilizados. Assim, nenhum dos tratamentos adotados na termoterapia foi capaz de eliminar a Lxx dos toletes, bem como o uso de kasugamicina também não propiciou a eliminação da bactéria, mas reduziu sua população nos tratamentos testados. Estes resultados atestam a nested-PCR como ferramenta útil para a comprovação da presença da fitobactéria em toletes que serão utilizados como mudas.

ABSTRACT The thermotherapy of sugarcane setts is currently the primary management method for Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), in Brazil. When they are immersed, the enzymes and proteins of the bacterial cell are denatured without harming the setts buds. Due to possible escapes from detection and consequent bacterium survival to thermotherapy, what may result in asymptomatic seedlings, this study aimed to detect the Leifsonia xyli subsp. xyli bacterium in sugarcane setts using molecular techniques and different time and temperature combinations, with or without the addition of antibiotics. The conventional PCR method detected the Lxx bacterial DNA only in the positive control, consisting of a highly susceptible plant with a high bacterial concentration. Using the nested-PCR, the Lxx DNA was detected in all the treatments used. Thus, none of the treatments adopted in the thermotherapy was able to eliminate the Lxx from the setts, and the use of kasugamicin also did not eliminate the bacterium, but reduced the bacterial population in the tested treatments. These results confirm that the nested-PCR is a useful tool to detect the presence of this phytobacterium in setts that will be used as seedlings.

BACKGROUND Serological evidence of West Nile virus (WNV) infection has been reported in different regions of Brazil from equine and human hosts but the virus had never been isolated in the country. OBJECTIVES We sought to identify the viral etiology of equine encephalitis in Espírito Santo state. METHODS We performed viral culture in C6/36 cells, molecular detection of WNV genome, histopathology and immunohistochemistry from horse cerebral tissue. We also carried out sequencing, phylogenetic analysis and molecular clock. FINDINGS Histopathologic analysis from horse cerebral tissue showed injury related to encephalitis and WNV infection was confirmed by immunohistochemistry. The virus was detected by reverse transcription quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) from brain tissue and subsequently isolated in C6/36 cells. WNV full-length genome was sequenced showing the isolated strain belongs to lineage 1a. The molecular clock indicated that Brazilian WNV strain share the same common ancestor that were circulating in US during 2002-2005. MAIN CONCLUSIONS Here we report the first isolation of WNV in Brazil from a horse with neurologic disease, which was clustered into lineage 1a with others US WNV strains isolated in beginning of 2000’s decade.

Abstract We surveyed healthy captive cockatiels (Nymphicus hollandicus) for Escherichia coli and Salmonella spp. Cloacal swabs were collected from 94 cockatiels kept in commercial breeders, private residencies and pet shops in the cities of São Paulo/SP and Niterói/RJ (Brazil). Three strains of E. coli from each individual were tested for the presence of ExPEC-, APEC- and DEC-related genes. We evaluated the blaTEM, blaSHV, blaOXA, blaCMY, blaCTX-M, tetA, tetB, aadA, aphA, strAB, sul1, sul2, sul3, qnrA, qnrD, qnrB, qnrS, oqxAB, aac (6)′-Ib-cr, qepA resistance genes and markers for plasmid incompatibility groups. Salmonella spp. was not detected. E. coli was isolated in 10% of the animals (9/94). Four APEC genes (ironN, ompT, iss and hlyF) were detected in two strains (2/27–7%), and iss (1/27–4%) in one isolate. The highest resistance rates were observed with amoxicillin (22/27–82%), ampicillin (21/27–79%), streptomycin (18/27–67%), tetracycline (11/27–41%). Multiresistance was verified in 59% (16/27) of the isolates. We detected strAB, bla TEM, tetA, tetB, aadA, aphaA, sul1, sul2, sul3 resistance genes and plasmid Inc groups in 20 (74%) of the strains. E. coli isolated from these cockatiels are of epidemiological importance, since these pets could transmit pathogenic and multiresistant microorganisms to humans and other animals.

RESUMO A mancha-alvo da soja (Corynespora cassiicola) tornou-se uma importante doença na maioria das regiões produtoras de soja no Brasil. A sensibilidade de 34 isolados de Corynespora cassiicola a 11 fungicidas foi avaliada pela inibição do crescimento micelial (boscalida, carbendazim, ciproconazol, fluopiram, fluxapiroxada, protioconazol e tiofanato-metílico) ou inibição da germinação de esporos (azoxistrobina, picoxistrobina, piraclostrobina e trifloxistrobina). Além disso, a eficácia de cinco fungicidas para controlar mancha-alvo foi testada em quatro ensaios no campo, conduzidos durante três safras: 2011/2012, 2012/2013 e 2013/2014. Os isolados do fungo foram coletados de plantas de soja em diversas regiões produtoras de soja do Brasil. A concentração efetiva para inibir o crescimento micelial ou a germinação dos esporos em 50% (EC50), para cada fungicida, foi calculada para todos os isolados. Fluxapiroxada e protioconazol proporcionaram as maiores inibições de crescimento micelial do patógeno e piraclostrobina a menor porcentagem de germinação de esporos, com os menores valores de EC50. Nos ensaios de campo, ciproconazol e carbendazim apresentaram percentuais de controle de mancha-alvo variando de 26% a 29%. Por outro lado, fluxapiroxada e protioconazol preveniram a epidemia da doença na ordem de 45% e 55%, respectivamente. No geral, a eficácia dos fungicidas no campo refletiu as médias de sensibilidade in vitro. Foi detectada ampla redução da sensibilidade aos benzimidazóis (MBC) indicando que esse grupo de fungicidas não deve ser mais usado no controle de mancha-alvo. Houve uma correlação negativa e significativa (-0,265) entre severidade da doença e produção da soja. O patógeno mostrou variabilidade na sensibilidade aos grupos fungicidas carboxamidas (SDHI), triazóis (DMI) e estrobilurinas (QoI), o que demonstra alto risco de seleção para resistência.

ABSTRACT Soybean target spot (Corynespora cassiicola) has become an important disease in most soybean growing regions in Brazil. The sensitivity of 34 isolates of C. cassiicola to 11 fungicides was evaluated based on mycelial growth inhibition (boscalid, carbendazim, cyproconazole, fluopyram, fluxapyroxad, prothioconazole and thiophanate-methyl) or spore germination inhibition (azoxystrobin, picoxystrobin, pyraclostrobin and trifloxystrobin). In addition, the efficacy of five fungicides to control target spot was tested in four field trials carried out during three crop seasons: 2011/2012, 2012/2013 and 2013/2014. Fungal isolates were collected from soybean plants in several soybean growing areas in Brazil. The effective concentration of each fungicide to inhibit fungal growth or spore germination by 50% (EC50) was calculated for all isolates. Fluxapyroxad and prothioconazole provided the greatest mycelial growth inhibition and pyraclostrobin led to the lowest spore germination percentage, with the lowest EC50 values. At field experiments, cyproconazole and carbendazim showed target spot control ranging from 26% to 29%. On the other hand, fluxapyroxad and prothioconazole prevented an epidemic of the disease by 45% to 55%, respectively. In general, the efficacy of fungicides in the field reflected the in vitro sensitivity averages. Large sensitivity reduction was detected to benzimidazoles (MBC), indicating that this group of fungicides should no longer be used for target spot control. There was a negative and significant correlation (-0.265) between target spot severity and soybean yield. The pathogen showed variability in sensitivity to the fungicide groups carboxamides (SDHI), triazoles (DMI) and strobilurins (QoI), which denotes a high risk of selection for resistance.

ABSTRACT Psittacine birds have been identified as reservoirs of diarrheagenic Escherichia coli, a subset of pathogens associated with mortality of children in tropical countries. The role of other orders of birds as source of infection is unclear. The aim of this study was to perform the molecular diagnosis of infection with diarrheagenic E. coli in 10 different orders of captive wild birds in the state of São Paulo, Brazil. Fecal samples were analyzed from 516 birds belonging to 10 orders: Accipitriformes, Anseriformes, Columbiformes, Falconiformes, Galliformes, Passeriformes, Pelecaniformes, Piciformes, Psittaciformes and Strigiformes. After isolation, 401 E. coli strains were subjected to multiplex PCR system with amplification of genes eae and bfp (EPEC), stx1 and stx2 for STEC. The results of these tests revealed 23/401 (5.74%) positive strains for eae gene, 16/401 positive strains for the bfp gene (3.99%) and 3/401 positive for stx2 gene (0.75%) distributed among the orders of Psittaciformes, Strigiformes and Columbiformes. None of strains were positive for stx1 gene. These data reveal the infection by STEC, typical and atypical EPEC in captive birds. The frequency of these pathotypes is low and restricted to few orders, but the data suggest the potential public health risk that these birds represent as reservoirs of diarrheagenic E. coli.

RESUMO A pinta preta ou mancha preta dos citros, causada pelo fungo Guignardia citricarpa, é considerada uma doença quarentenária, que impõe restrições ao transporte de frutas frescas para países da União Europeia. A ocorrência de infecções latentes e o tempo para o diagnóstico por métodos convencionais levam à necessidade de validar protocolos moleculares rápidos, eficientes e reprodutíveis para detecção do patógeno em tecidos assintomáticos. Assim, este trabalho visou detectar G. citricarpa em tecidos de frutos sintomáticos e em folhas assintomáticas de laranja Pêra por PCR convencional e por PCR em tempo real. A especificidade e o limite de detecção foram avaliados em amostras de tecidos de lesões em frutos e em folhas assintomáticas. Em folhas assintomáticas a presença do fungo foi detectada em baixas concentrações, nessas condições, a PCR em tempo real demonstrou ser viável, reprodutível e altamente sensível para a detecção do patógeno.

ABSTRACT Citrus black spot, a fungal disease caused by the quarantine fungus Guignardia citricarpa, restricts the exportation of fresh fruit to countries in the European Union. The occurrence of latent infections and the time required for diagnosis using conventional methods have brought about the need to validate fast, efficient and reproducible molecular techniques to detect the pathogen in asymptomatic tissue. As such, this study aims to detect G. citricarpa in the symptomatic fruit and asymptomatic leaf tissue of sweet oranges by conventional and real-time polymerase chain reaction (PCR). Specificity and limit of detection (LOD) were assessed in tissue samples of fruit lesions and asymptomatic leaves. Low concentrations of the fungus were found in asymptomatic leaves. Under these conditions, real-time PCR proved to be viable, reproducible and highly sensitive to detection of the pathogen.

RESUMO Murchas vasculares em tomateiro constituem importante grupo de doenças causadas por patógenos habitantes do solo, com destaque para Verticillium dahliae, que ocasiona perdas significativas na produção. A dificuldade de controle dessa doença advém de características intrínsecas do patógeno, como alta adaptabilidade ao ambiente subterrâneo, em associação com o hospedeiro, e produção de estruturas de resistência que permanecem viáveis no solo por longo tempo. A introgressão de genes que expressam resistência destaca-se como principal medida de controle, o que requer um programa contínuo de caracterização de acessos resistentes. Objetivou-se avaliar e identificar acessos de tomateiro (Solanum lycopersicum) resistentes a V. dahliae, pelos métodos fenotípico e genotípico. A reação de 33 acessos de tomateiro a diferentes isolados de V. dahliae foi corroborada com análises empregando-se marcadores moleculares ligados aos genes de resistência Ve. A combinação de bioensaios e marcadores moleculares específicos mostrou elevada correlação (94,3 %), com a seleção de 25 acessos resistentes a V. dahliae.

ABSTRACT Vascular wilting in tomato plants is an important disease caused by soil-inhabiting pathogens, especially Verticillium dahliae, which results in significant production losses. Control measures against this disease are difficult to implement due to intrinsic pathogen characteristics, such as high adaptability to the subterranean environment, in association with the host, and development of resistance structures that remain viable in the soil for long periods. The introgression of genes that express resistance is the main control measure and requires a continuous characterization program of resistant accessions. This study aimed at identifying tomato (Solanum lycopersicum) accessions resistant to V. dahlia, by using the phenotypic and genotypic methods. The reaction of 33 tomato accessions to different V. dahliae isolates was reinforced by molecular analysis, through markers linked to Ve resistance genes. The combination of bioassays and specific molecular markers showed a high correlation (94.3 %), with the selection of 25 accessions resistant to V. dahliae.

Resumo: Este artigo aponta como as Micro e Pequenas Empresas estão sendo incluídas e apresentam perspectivas de usufruírem da oportunidade de ampliar sua participação em processos de licitação para compras públicas federais, por meio do Pregão Eletrônico, na vigência da Lei Complementar n. 123/2006 e da aprovação da nova Lei Complementar n. 147/2014. Considera-se que o avanço das políticas públicas de inclusão das Microempresas e Empresas de Pequeno Porte nas compras governamentais tem sido fundamental para a sustentabilidade delas e para o Desenvolvimento Local.

Abstract: This article indicates how the Micro and Small Enterprises are being included and present perspectives from enjoying the opportunity to expand their participation in bidding processes for federal public procurement through the Electronic Trading, in the presence of Complementary Law n. 123/2006 and the approval of the new Complementary Law n. 147/2014. It is considere that the advancement of public policies for the inclusion of Micro and Small Businesses in government procurement has been key to its sustainability and local development.

Resumen: En este artículo señala cómo están siendo incluidas las micro y pequeñas empresas y presentar perspectivas de disfrutar de la oportunidad de ampliar su participación en los procesos de licitación para la contratación pública federal através del Electrónico de Negociación en presencia de la Ley Complementaria n. 123/2006 y la aprobación de la nueva Ley complementaria n. 147/2014. Se considera que el avance de las políticas públicas para la inclusión de micro y pequeñas empresas en la contratación pública han sido clave para su sostenibilidad y el desarrollo local.

Résumé: Cet article indique comment les micro et petites entreprises sont inclus et présentent des perspectives de profiter de la possibilité d'élargir leur participation aux processus d'appel d'offres pour les marchés publics du gouvernement fédéral, par le biais du commerce électronique, en présence de Loi complémentaire n. 123/2006 et l'approbation de la nouvelle loi complémentaire n. 147/2014. On considère que la promotion des politiques publiques pour l'inclusion des micros et petites entreprises dans les marchés publics ont été la clé de sa durabilité et le développement local.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi elaborar e validar um protocolo de detecção simultânea, via reação em cadeia da polimerase multiplex (PCR multiplex), de regiões genômicas do tomateiro (Solanum lycopersicum) associadas a fatores de resistência às três raças fisiológicas de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL). Os pares de iniciadores empregados foram SSR-67 (específico para o gene I-1), TFusrr (específico para o gene I-2) e SSRD (específico para o gene I-3). Os resultados de genotipagem com marcadores moleculares foram comparados aos resultados de fenotipagem de uma coleção de germoplasma de tomateiro, em bioensaios de inoculação de isolados das três raças de FOL em plântulas, pelo método de imersão das raízes. A resistência ou a suscetibilidade foi confirmada por PCR, por meio de visualização dos âmplicons específicos para as regiões-alvo ligadas aos fatores de resistência às distintas raças de FOL. O protocolo elaborado para o uso conjunto dos marcadores moleculares, em PCR multiplex, permite a seleção de acessos de tomateiro resistentes às raças 1, 2, e 3 de F. oxysporum f. sp. lycopersici de maneira similar à realizada com a utilização de cada um separadamente. O PCR multiplex representa uma ferramenta viável para monitorar a incorporação desses fatores de resistência em linhagens de tomateiro.

Abstract: The objective of this work was to develop and validate a protocol for simultaneous detection by multiplex polymerase chain reaction (multiplex PCR) of tomato (Solanum lycopersicum) genomic regions associated with factors of resistance to three physiological races of Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL). The employed primer pairs were SSR-67 (specific to the I-1 gene), TFusrr (specific to the I-2 gene), and SSRD (specific to the I-3 gene). Genotyping results with molecular markers were compared with the phenotyping ones of a tomato germplasm collection, in bioassays of isolate inoculation of the three FOL races in seedlings by root dipping. The resistance or susceptibility was confirmed by PCR, through the visualization of specific amplicons corresponding to the target regions linked to the factors of resistance to distinct FOL races. The elaborated protocol for the joint use of the molecular markers, by multiplex PCR, allows of the selection of tomato accessions that are resistant to the races 1, 2, and 3 of F. oxysporum f. sp. lycopersici in a similar way to that done with each one separately. PCR multiplex is a viable tool to monitor the incorporation of these resistance factors into tomato inbred lines.