O objetivo foi avaliar as propriedades e a expressão gênica de isoformas de β-galactosidase isoladas de caules de plântulas de feijão-de-corda cv Pitiúba em diferentes estádios de desenvolvimento semeadas na ausência e presença de NaCl. As sementes foram semeadas em folhas de papel filtro embebidas em água destilada (controle) e em solução de NaCl 100 mM. As plântulas foram coletadas nos estádios de desenvolvimento III (ED III) e VIII (ED VIII). As isoformas da enzima, β-gal I, II e III, apresentaram massas moleculares de 89; 146 e 124 kDa, respectivamente, e o mesmo pH (4,0) e temperatura ótima de ensaio (55 °C), em todas as condições estudadas. As três isoformas mostraram-se estáveis até a temperatura de 50 °C. As curvas de termoinativação em função do tempo para as enzimas mostraram que, na temperatura de 60 °C, as curvas foram bifásicas. As análises da expressão gênica de β-galactosidases foram feitas usando primers degenerados e RNA total de caules de plântulas semeadas em condições controle e com tratamento salino, nos ED III e ED VIII. Os resultados revelaram maior nível de transcritos no ED VIII, com redução dos níveis de transcritos de β-galactosidases quando submetidos ao tratamento salino. Os resultados mostraram que as β-gal I, II e III não sofrem modificações ao longo dos estádios iniciais de desenvolvimento. Há algumas diferenças entre as propriedades das três isoformas. A salinidade afetou a expressão gênica das enzimas. As enzimas foram expressas diferentemente nos ED III e ED VIII.
The aim of this work was to evaluate the properties and gene expression of isoforms of β-galactosidase, isolated from the stems of seedlings of the cowpea cv. Pitiuba, at different stages of development and sown in the absence and presence of NaCl. Seeds were sown onto sheets of filter paper soaked in distilled water (control) and a 100 mM NaCl solution. The plants were collected at the III (ED III) and VIII (ED VIII) stages of development. Isoforms of the enzyme β-gal I, II and III presented molecular weights of 89, 146 and 124 kDa respectively, and the same pH (4.0) and optimum test temperature (55 °C) under all the conditions studied. The three isoforms were stable up to 50 °C. The thermal inactivation curves of the enzymes as a function of time were biphasic at a temperature of 60 °C. Analysis of the gene expression of β-galactosidase was carried out using degenerate primers and total RNA from the stems of seedlings at ED III and ED VIII, sown both as control and under saline treatments. The results showed higher transcript levels at ED VIII, with reduced levels of β-galactosidase transcripts under saline treatment, and that β-gal I, II and III do not undergo changes during the early stages of development. There are a few differences in the properties of the three isoforms. Salinity affected the gene expression of enzymes. The enzymes were expressed differently for ED III and ED VIII.