RESUMO: O objetivo deste trabalho foi produzir microcápsulas de pectina, contendo Lactobacillus acidophilus por gelificação iônica externa, seguida da adsorção de proteína de soro de leite e multicamadas formadoras de pectina. Além disso, a viabilidade de lactobacilos livres e microencapsulados, após exposição in vitro a condições gastrintestinais, foi avaliada após simulação de tratamentos térmicos e, finalmente, estabilidade a -18 ºC, 5 ºC e 25 ºC durante 120 dias de armazenamento. A exposição a diferentes pHs, simulando a passagem pelo trato gastrointestinal, mostrou que os tratamentos das microcápsulas com apenas pectina (LA/P0) e com uma e duas camadas proteína do soro (tratamentos LA/P1 e LA/P3, respectivamente), foram capazes de proteger o Lactobacillus acidophilus , enquanto as microcápsulas aumentaram a liberação de probióticos do estômago para o intestino. As células livres diminuíram suas contagens no curso do sistema. Em relação aos tratamentos térmicos aplicados, pode-se afirmar que a microcápsula com uma camada de proteína do soro (LA/P1) resistiu e manteve a viabilidade de Lactobacillus acidophilus (9,57 log CFU / g-1). A melhor viabilidade foi obtida no armazenamento a -18 ° C, com uma contagem de 7,86 log CFU / g-1 para essa mesma microcápsula (LA/P1) no final do armazenamento (120 dias) e 6,55 log CFU / g-1 para as microcápsulas com duas camadas de proteína do soro (LA/P3) por 105 dias. Este estudo indica que a gelificação iônica externa é eficaz e pode ser usada para a produção de microcápsulas de pectina com multicamadas de proteína de soro para promover maior proteção e viabilidade ao Lactobacillus acidophilus.

ABSTRACT: This study produced pectin microcapsules containing Lactobacillus acidophilus by external ionic gelation, followed by the adsorption of whey protein and pectin to form multilayers. The viability of free and microencapsulated lactobacilli was evaluated after in vitro exposure to gastrointestinal conditions. They were also assessed by heat treatment, and stability was examined at -18 °C, 5 °C and 25 °C for 120 days. Exposure to different pHs, simulating passage through the gastrointestinal tract, showed that treatment of the microcapsules with only pectin (LA/P0) and with one and two layers of whey protein (treatments LA/P1 and LA/P3, respectively), were able to protect Lactobacillus acidophilus , with microcapsules increasing the release of probiotics from the stomach into the intestines. Free cells showed a decrease in their counts over the course of the simulated gastrointestinal system. Regarding heat treatments, microcapsules with a layer of whey protein (LA/P1) maintained the viability of their encapsulated Lactobacillus acidophilus (9.57 log CFU/g-1). The best storage viability was at -18 °C, with a count of 7.86 log CFU/g-1at 120 days for microcapsule LA/P1,with those consisting of two layers of whey protein (LA/P3)having a 6.55 log CFU/g-1 at 105 days. This study indicated that external ionic gelation was effective and could be used for the production of pectin microcapsules, with multilayer whey protein promoting greater protection and viability of Lactobacillus acidophilus.

RESUMO: Nanoemulsão óleo/água (O/A) contendo extrato de goldenberry foi elaborada utilizando método de banho ultrassônico de alta energia. A caracterização físico-química da formulação foi realizada pela determinação do pH, diâmetro médio de gotas, índice de polidispersão (PDI) e potencial zeta. A toxicidade das nanoemulsões foi avaliada utilizando ensaios in vitro com linhas celulares tumorais e não tumorais e in vivo utilizando Caenorhabditis elegans. O pH da nanoemulsão foi de 3,84, o diâmetro médio das gotículas foi de 268 ± 7 nm, PDI 0,113 e o potencial zeta -13,94 mV. Os resultados dos ensaios de citotoxicidade empregando células não tumorais indicaram que o extrato associado ou não à nanoemulsão manteve a viabilidade celular em diferentes concentrações testadas. Nos ensaios, utilizando linhagem tumoral, observou-se que a nanoemulsão contendo o extrato apresentou maior atividade antitumoral do que o extrato livre. Quanto aos testes in vivo, não houve mudança na taxa de sobrevivência dos vermes.

ABSTRACT: Oil-in-water (O/W) nanoemulsion containing goldenberry extract was elaborated using a high-energy ultrasonic bath method. Physicochemical characterization of the formulation was carried out by determining pH, mean droplet diameter, polydispersity index (PDI) and zeta potential. Nanoemulsion toxicity was assessed using in vitro assays with tumor and non-tumor cell lines, and in vivo using Caenorhabditis elegans. The pH of the nanoemulsion was 3.84, the mean droplet diameter was 268 ± 7 nm, PDI 0.113 and zeta potential -13.94 mV. Results of the cytotoxicity assays employing non-tumor cells indicated that the extract associated or not with nanoemulsion maintained cell viability at different concentrations tested. In the assays using tumor lineage, it is observed that the nanoemulsion containing the extract had higher antitumor activity than the free extract. As for the in vivo tests, there was no change in the survival rate of the worms.

RESUMO: A extração assistida com ultrassom de alta intensidade (HIU) é uma das técnicas mais simples, rápidas e eficientes na extração de compostos fenólicos e antioxidantes de plantas. Este trabalho foi o primeiro a utilizar HIU na extração destes compostos presentes na fruta goldenberry. As técnicas HIU e extração convencional apresentaram resultados semelhantes com relação aos compostos fenólicos e capacidade antioxidante. Entretanto, o tempo necessário na HIU (5min) foi 24 vezes menor que na extração convencional (120min). Os compostos fenólicos encontrados foram ácido clorogênico, ácido cafeico e rutina. Ensaios de citotoxicidade in vitro foram usados para avaliação dos extratos e os resultados demonstraram que, em ampla faixa de concentração, o extrato mantém a viabilidade celular, indicando assim possível segurança para utilização em alimentos.

ABSTRACT: The high intensity ultrasound-assisted extraction (HIU) is one of the most simple, quick and efficient techniques for the extraction of phenolic and other antioxidant compounds from plants. This is the first application of HIU for the extraction of these compounds from goldenberry fruit. The HIU and conventional extraction techniques showed similar results regarding to phenolic compounds and antioxidant capacity. However, the time required for HIU extraction (5min) was 24 times lower than conventional extraction (120min). Phenolic compounds reported were chlorogenic acid, caffeic acid and rutin. In vitro cytotoxicity assays were used for evaluation of extracts and the results showed that in a wide range of concentration, the extract maintains cell viability, thus indicating the possibility to use it as food with safety.

RESUMO: Micropartículas de Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) e Bifidobacterium Bb-12 (MB) foram produzidas em diferentes temperaturas de secagem no spray dryer. A influência das diferentes temperaturas sobre a viabilidade, eficiência de encapsulação, atividade de água e umidade foram avaliadas. As micropartículas que apresentaram maior viabilidade foram submetidas a análises de resistência térmica, simulação gastrointestinal, estabilidade ao armazenamento, morfologia e tamanho de partícula. A temperatura de secagem de 130°C mostrou maior eficiência de encapsulação, 84.61 e 79.73% para micropartículas de Lactobacillus acidophillus (ML) e Bifidobacterium Bb-12 (MB), respectivamente. Na avaliação da resistência térmica e simulação gastrointestinal as micropartículas de Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) apresentaram maior sobrevivência que Bifidobacterium Bb-12 (MB) nestas condições. Na viabilidade ao armazenamento somente as micropartículas Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) mantiveram-se viáveis em todas as temperaturas avaliadas durante os 120 dias. Os tamanhos de partícula encontrados foram de 4.85 para Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) e 8.75 para Bifidobacterium Bb-12 (MB), estando de acordo aos valores desejáveis para produtos obtidos por spray dryer. Por fim, as micropartículas de Lactobacillus acidophilus La-5 (ML) demostraram ser mais resistentes frente as condições avaliadas neste estudo.

ABSTRACT: Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) and Bifidobacterium Bb-12 (MB) microparticles were produced at different temperatures by spray dryer. The influence of different temperatures on the viability, encapsulation efficiency, water activity and moisture were evaluated. Microparticles that presented more viability were submitted to thermal resistance, gastrointestinal simulation, storage stability, morphology and particle size analyses. Drying temperature of 130°C showed higher encapsulation efficiency, 84.61 and 79.73% for Lactobacillus acidophillus (ML) and Bifidobacterium Bb-12 (MB) microparticles, respectively. In the evaluation of thermal resistance and gastrointestinal simulation, the microparticles of Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) presented higher survival than Bifidobacterium Bb-12 (MB) under these conditions. In storage viability only the Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) microparticles remained viable at all evaluated temperatures during the 120 days. The particle sizes reported were 4.85 for Lactobacillus acidophillus La-5 (ML) and 8.75 for Bifidobacterium Bb-12 (MB), being in agreement with the desired values for products obtained by spray dryer. Finally, the Lactobacillus acidophilus La-5 (ML) microparticles were shown to be more resistant under the conditions evaluated in this study.

<p>Três métodos são propostos para a quantificação de cloridrato de raloxifeno em sua forma farmacêutica de comprimidos: espectrofotometria no ultravioleta (UV), cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese capilar micelar (MEKC). Estes métodos desenvolvidos e validados demonstraram linearidade, precisão e exatidão. Também foram específicos e robustos. Os métodos HPLC e MEKC foram desenvolvidos para indicar a estabilidade do fármaco e demonstraram ter este atributo. O método UV usou metanol como solvente e comprimento de onda de 284nm, obedecendo a Lei de Lambert-Beer nestas condições. Os parâmetros cromatográficos para o método HPLC foram: coluna NST C18 (250 x 4,6 mm x 5 µm), fase móvel composta de água:acetonitrila:trietilamina (67:33:0,3 v/v), pH 3,5, vazão da fase móvel de 1,0 mL min^-1, volume de injeção de 20 µl, detecção no comprimento de onda de 287 nm e temperatura de análise de 30°C. O método MEKC foi realizado utilizando capilar de sílica fundida (40 cm de comprimento efetivo x 50 µm de diâmetro interno) usando como fase móvel solução tampão borato 35.0 mmol L^-1 e solução de dodecil sulfato de sódio (SDS) 50.0 mmol L^-1 pH 8,8. A temperatura de análise foi de 32 °C, com voltagem aplicada de 25 kV, detecção no comprimento de onda de 280 nm e injeção da amostra realizada a 45 mBar por 4 s em modo hidrodinâmico. Para este método MEKC, foi utilizado diclofenaco de potássio (200.0 µg mL^-1) como padrão interno. Todos os métodos foram analisados estatisticamente e demostraram ser equivalentes para a análise quantitativa de raloxifeno em comprimidos e foram aplicados com sucesso na determinação do fármaco.</p>

<p>Three methods are proposed for the quantitative determination of raloxifene hydrochloride in pharmaceutical dosage form: ultraviolet method (UV) high performance liquid chromatography (HPLC) and micellar capillary electrophoresis (MEKC). These methods were developed and validated and showed good linearity, precision and accuracy. Also they demonstrated to be specific and robust. The HPLC and MEKC methods were tested in regards to be stability indicating methods and they showed to have this attribute. The UV method used methanol as solvent and optimal wavelength at 284 nm, obeying Lambert-Beer law in these conditions. The chromatographic conditions for the HPLC method included: NST column C18 (250 x 4.6 mm x 5 µm), mobile phase water:acetonitrile:triethylamine (67:33:0,3 v/v), pH 3.5, flow rate 1.0 mL min^-1, injection volume 20.0 µl, UV detection 287 nm and analysis temperature 30 °C. The MEKC method was performed on a fused-silica capillary (40 cm effective length x 50 µm i.d.) using as background electrolyte 35.0 mmol L^-1 borate buffer and 50.0 mmol L^-1 anionic detergent sodium dodecyl sulfate (SDS) at pH 8.8. The capillary temperature was 32°C, applied voltage 25 kV, UV detection at 280 nm and injection was perfomed at 45 mBar for 4 s, hydrodimanic mode. In this MEKC method, potassium diclofenac (200.0 µg mL^-1) was used as internal standard. All these methods were statistically analyzed and demonstrated to be equivalent for quantitative analysis of RLX in tablets and were successfully applied for the determination of the drug.</p>

A introdução da terapia oral com inibidores da fosfodiesterase tipo 5, em 1998, revolucionou o tratamento da disfunção erétil. A disfunção erétil é o problema sexual mais comum em homens. Muitas vezes tem um efeito profundo nas relações íntimas e na qualidade de vida. A análise de produtos farmacêuticos é uma parte importante do processo de desenvolvimento de fármacos, bem como para a análise de rotina e controle de qualidade das formulações comerciais. Enquanto a determinação do citrato de sildenafila, vardenafila e tadalafila está bem documentada por uma variedade de métodos, existem poucas publicações sobre a determinação de udenafila, carbonato de lodenafila, mirodenafila e avanafila. O artigo apresenta uma breve revisão do mecanismo de ação, efeitos adversos, farmacocinética e os mais recentes métodos analíticos, que podem determinar a concentração do fármaco em matrizes biológicas e formulações farmacêuticas destes quatro fármacos.

The introduction of oral phosphodiesterase type 5 inhibitor therapy in 1998 revolutionized the treatment of erectile dysfunction. Erectile dysfunction is the most common sexual problem in men. It often has a profound effect on intimate relationships and quality of life. The analysis of pharmaceuticals is an important part of the drug development process as well as for routine analysis and quality control of commercial formulations. Whereas the determination of sildenafil citrate, vardenafil and tadalafil are well documented by a variety of methods, there are few publications about the determination of udenafil, lodenafil carbonate, mirodenafil and avanafil. The paper presents a brief review of the action mechanism, adverse effects, pharmacokinetics and the most recent analytical methods that can determine drug concentration in biological matrices and pharmaceutical formulations of these four drugs.

Um método simples de eletroforese capilar de zona (CZE) foi desenvolvido e validado para análise de carbonato de lodenafila em comprimidos. A metodologia de superfície de resposta foi utilizada para a otimização do pH, concentração do tampão, voltagem e temperatura. O método utilizou como eletrólito, tampão borato 50 mmol L-1, pH 10, voltagem de 15 kV. A separação foi efetuada em capilar de sílica fundida mantida a 32,5 ºC e o comprimento de onda de detecção foi de 214 nm. O método foi validado, demonstrando especificidade, linearidade (r = 0,9995), precisão (desvio padrão relativo inferior a 2%) e exatidão (99,95%). O método demonstrou ser robusto, através de avaliação por planejamento fatorial fracionário. O método CZE proposto foi aplicado com sucesso para a análise quantitativa de carbonato de lodenafila em comprimidos e os resultados, comparados com os métodos por cromatografia líquida de alta eficiência e espectrofotometria no ultravioleta, não apresentaram diferença significativa.

A simple capillary zone electrophoresis (CZE) method was developed and validated for the analysis of lodenafil carbonate in tablets. Response surface methodology was used for optimization of the pH and concentration of the buffer, applied voltage and temperature. The method employed 50 mmol L-1 borate buffer at pH 10 as background electrolyte with an applied voltage of 15 kV. The separation was carried out in a fused-silica capillary maintained at 32.5 ºC and the detection wavelength was 214 nm. The method was validated showing specificity, linearity (r = 0.9995), precision (relative standard deviation less than 2%) and accuracy (99.95%). The method proved to be robust by a fractional factorial design evaluation. The proposed CZE method was successfully applied for the quantitative analysis of lodenafil carbonate in tablets and the results compared to the high performance liquid chromatography and ultraviolet spectrophotometric methods, showed non-significant differences.

An HPLC method was validated to assay lamivudine and zidovudine combined in tablets. The chromatographic separation was carried out using methanol and acetate buffer pH 6.5 (50:50 v/v) and a RP-18 column, as mobile and stationary phase, respectively. The UV detection was at 270 nm. The method was linear in the range of 24 - 36 µg/mL (lamivudine) and 48 - 72 µg/mL (zidovudine). The recovery (accuracy) ranged from 101.35% to 103.04% and the precision (repeatability and intermediate precision) was less than 2%. The method can be also applied to the quantification of these drugs in the dissolution test of tablets containing both drugs.

Realizou-se a identificação do fator estimulador da colônia de granulócitos humanos recombinante em produtos farmacêuticos por eletroforese em gel de poliacrilamida não redutora e imunodetecção com anticorpos específicos, que apresentaram banda única na região de, aproximadamente, 19 kDa. A avaliação de potência baseada na contagem do número de neutrófilos em camundongos com neutropenia forneceu valores entre 88,4 - 122,4 % em relação à potência declarada. A precisão expressa pela ponderação, calculada nos ensaios independentes, forneceu valores entre 141 e 432. As amostras lote-a-lote cumpriram os requisitos dos testes de toxicidade e endotoxinas bacterianas. Os resultados dos ensaios biológicos e imunológicos demonstram a qualidade dos produtos farmacêuticos em uso clínico, e as especificações sugeridas contribuem para assegurar a inocuidade e eficácia terapêutica dos produtos biológicos.

The identification of rhG-CSF was carried out in pharmaceutical preparations by non-reducing polyacrylamide gel electrophoresis and western blotting with specific antibodies, showing a single band in the 19 kDa region. The potency was assessed by the neutropenia mouse bioassay giving values between 88.4 and 122.4% of the stated potency. The precision index expressed by weight was between 141 and 432 for the independent assays. Batch-to-batch, the samples met the requirements for the safety test and bacterial endotoxins test. The biological and immunological results showed the quality of the products in clinical use and the specifications established contribute to assuring the safety and efficacy of biological medicines.