Os vírus pertencentes ao subgrupo do Sugarcane mosaic virus (SCMV, gênero Potyvirus, família Potyviridae) infectam e causam mosaico em diferentes espécies botânicas da subfamília Panicoideae (família Poaceae), porém apenas o SCMV e o Sorghum mosaic virus (SrMV) infectam naturalmente cana-de-açúcar. No Brasil, a espécie SCMV parece ser o único agente causal da doença. Embora a maioria das variedades comerciais de cana-de-açúcar seja considerada resistente ou tolerante ao SCMV, relatos de incidência de mosaico em tais variedades têm ocorrido no campo. Amostras com sintomas, de diversos clones e variedades, foram coletadas em campos experimentais e comerciais de cana-de-açúcar. Dentre as variedades, a RB72-454, uma das mais plantadas no país e considerada resistente à doença, também apresentou plantas com sintomas de mosaico. As amostras foram testadas por DAS-ELISA, com anti-soros policlonais para as espécies SCMV, Johnsongrass mosaic virus (JGMV) e Maize dwarf mosaic virus (MDMV), apresentando resultados negativos. Porém, sintomas de mosaico foram observados em mudas de sorgo "Rio" e "TX2786" quando inoculadas mecanicamente com os isolados, indicando tratar-se de infecção pelo SCMV. RNA total foi extraído das folhas de cana e submetido a RT-PCR com oligonucleotídeos específicos para SCMV e SrMV. Fragmentos específicos de aproximadamente 880 pares de bases foram amplificados com os oligonucleotídeos para o SCMV, confirmando os resultados da inoculação mecânica. Os produtos de PCR foram clonados e seqüenciados. Um dos isolados de SCMV encontrado constitui uma nova estirpe, mais severa, capaz de infectar plantas da variedade RB72-454 e de outras variedades, consideradas tolerantes, no campo.

Viruses in the Sugarcane mosaic virus (SCMV, genus Potyvirus, family Potyviridae), subgroup cause mosaic in different botanical species in the subfamily Panicoideae (family Poaceae). However, only SCMV and Sorghum mosaic virus (SrMV) naturally infect sugarcane. In Brazil, SCMV seems to be the only causal agent of mosaic in sugarcane. Most sugarcane cultivars are believed to be resistant to mosaic, although new cases have been reported in the field. Symptomatic samples, from several clones and cultivars, were collected in sugarcane crops. Among these cultivars, RB72-454, one of the most grown in Brazil, and considered resistant, showed plants with mosaic symptoms. Samples were tested by DAS-ELISA with antisera to SCMV, Johnsongrass mosaic virus (JGMV) and Maize dwarf mosaic virus (MDMV), showing negative results. However, sorghum "Rio" and "TX2786" showed mosaic symptoms when mechanically inoculated with the viral isolates, indicating infection by SCMV. Total RNA was extracted and submitted to amplification with specific primers to SCMV and SrMV in RT-PCR. Specific bands with ca. 880 bp were amplified with the SCMV-specific primer pair, corroborating results from mechanical inoculation. PCR products were cloned and sequenced. One of the SCMV isolates comprises a new and more severe strain capable of infecting RB72-454 and other tolerant cultivars in the field.

Em levantamentos realizados entre 1998 e 2003, nas principais regiões produtoras de alface (Lactuca sativa) e escarola (Cichorium endivia) no cinturão verde de São Paulo, foram observados sintomas de espessamento de nervuras foliares, clorose, crescimento irregular e ausência de formação da cabeça. Por meio de testes biológicos, DAS-Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) e microscopia eletrônica de transmissão constatou-se a presença do Lettuce big-vein associated virus e Mirafiori lettuce virus, responsáveis pela síndrome do espessamento clorótico das nervuras da alface ("lettuce big-vein").

During surveys undertaken from 1998 to 2003 in the major vegetable growing areas of the city of São Paulo green belt, lettuce (Lactuca sativa) and endive (Cichorium endivia) plants were observed, which showed chlorotic thickening of foliar veins, defective growth and, in some cases, failure to form complete heads. Biological and serological [DAS-Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa)] tests together with electron microscope observations, revealed the presence of Lettuce big-vein virus and Mirafiori lettuce virus, in these plants both responsible for the lettuce big-vein syndrome.

Plantas de alface (Lactuca sativa) cv. Verônica cultivadas em sistema hidropônico, provenientes dos municípios de Campinas e Sumaré, SP, apresentando sintomas típicos aos induzidos pelos tospovírus, foram coletadas para análise. Partículas pleomórficas arredondadas e envelopadas (80-100 nm de diâmetro) foram visualizadas ao microscópio eletrônico de transmissão. Plantas indicadoras, incluindo a alface, apresentaram sintomas típicos daqueles induzidos pelos tospovírus. Algumas diferenças foram observadas em Gomphrena globosa, que reagiu com sintomas locais e sistêmicos. Nestas amostras, identificaram-se dois isolados do Tomato chlorotic spot virus (TCSV) através de DAS-ELISA e seqüenciamento de produtos de DNA do gene da capa protéica amplificados via RT-PCR. O alinhamento das seqüências indicou elevados níveis de homologia com outros isolados de TCSV do GenBank. Este é o primeiro relato de perdas causadas por tospovírus em cultivos comerciais de alface hidropônico, no Brasil. Os aspectos epidemiológicos envolvidos na dispersão do vírus, nestas condições, ainda precisam ser esclarecidos, uma vez que a disseminação de tospovírus através de solução nutritiva tem sido relatada para o Tomato spotted wilt virus (TSWV).

In the regions of Campinas and Sumaré, São Paulo, Brazil, hidroponically grown crops of Lettuce (Lactuca sativa) cv. Verônica, which showed virus-like symptoms were examined by electron microscope, biological, serological and molecular tests. Pleomorphic, enveloped particles (80-100 nm in diameter) were always detected in these samples. Experimentally inoculated host plants, including lettuce, reacted with tospoviruses-induced symptoms. Some differences were observed in Gomphrena globosa, which reacted by showing local lesions and systemic mosaic. Two isolates of Tomato chlorotic spot virus (TCSV) were identified by DAS-ELISA and by RT-PCR. The sequencing and alignment of the RT-PCR coat protein amplified fragments have indicated a high degree of homology with the TCSV sequences stored in the GenBank. This is the first report of losses due to a virus from the genus Tospovirus in commercial hydroponic lettuce crops in Brazil. Further epidemiological studies are needed for better understanding the spread of the virus in hydroponic crops, since Tomato spotted wilt virus (TSWV) is reported to spread through the nutritive solution.

Os tospovírus são responsáveis por perdas significativas em diversas culturas, principalmente solanáceas. No município de São José dos Campos (SP), plantas de jiló (Solanum gilo) apresentando sintomas de mosaico, bolhosidades, nanismo e queda acentuada da produção foram coletadas para análise. Visando a caracterização do agente causador dos sintomas, testes biológicos, elétrono microscópicos, sorológicos e moleculares foram realizados. Através de inoculação mecânica em plantas indicadoras das famílias Amaranthaceae, Chenopodiaceae e Solanaceae obtiveram-se resultados típicos aos esperados para tospovírus. Ao microscópio eletrônico de transmissão, observaram-se, em contrastação negativa, partículas pleomórficas com diâmetro entre 80 e 110 nm e em cortes ultra-finos partículas presentes em vesículas do retículo endoplasmático. Através de DAS-ELISA, identificou-se o Tomato chlorotic spot virus (TCSV). A partir de RNA total extraído de folhas infetadas, amplificaram-se, via RT-PCR, fragmentos correspondentes ao gene da proteína do capsídeo (cp) os quais foram seqüenciados e comparados com outros depositados no "GenBank". A homologia de nucleotídeos e aminoácidos deduzidos foi respectivamente de 99 e 95% quando comparada com seqüências de isolados de TCSV. A comparação com as outras espécies do gênero Tospovirus apresentou valores de homologia entre 72 e 84%. Estes resultados confirmam a identidade deste vírus como pertencente à espécie TCSV, que é predominante no Estado de São Paulo e importante patógeno de outras plantas cultivadas. Além disso, variedades de jiló quando inoculadas foram susceptíveis tanto ao TCSV como às espécies Tomato spotted wilt virus (TSWV) e Groundnut ringspot virus (GRSV).

Tospoviruses are responsible for important losses in most crops, mainly Solanaceae. Gilo (Solanum gilo) plants showing mosaic, blistering, stunting and 100% production losses were collected for analysis from São José dos Campos in the State of São Paulo. Biological, electron microscopy, serological and molecular tests were carried out in order to characterize the virus isolate. The mechanical inoculation on Amaranthaceae, Solanaceae and Chenopodiaceae plants showed typical tospovirus-induced symptoms. Pleomorphic particles from 80 to 110 nm were observed in negatively stained preparations and in vesicles of the endoplasmic reticulum of infected cells. Tomato chlorotic spot virus (TCSV) was identified by DAS-ELISA. DNA fragments were amplified by RT-PCR, with specific primers designed to the nucleocapsid gene (N) of the main Tospovirus species, sequenced and compared with others in the GenBank. The nucleotide and amino acid deduced sequences homology was 99 and 95%, respectively, with TCSV. Comparison with other Tospovirus species presented values between 74 and 81%. These results confirmed the identity of this virus isolate as TCSV, the main tospovirus species in São Paulo that also damages other Solanaceous crops. Varieties of gilo have been inoculated showing susceptibility to TCSV, Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Groundnut ringspot virus (GRSV).

Um isolado de Grapevine virus B (GVB), obtido por indexação de Vitis labrusca e V. vinifera na indicadora LN33, foi transmitido mecanicamente para várias espécies do gênero Nicotiana. O vírus foi parcialmente purificado de N. cavicola e a proteína capsídica foi estimada em 23 kDa por SDS-PAGE. Ao microscópio eletrônico, observou-se, em extrato foliar de N. occidentalis e N. cavicola, partículas flexuosas com estriações transversais, predominantemente medindo 750-770 x 12 nm, com comprimento modal de 760 nm. A decoração das partículas indicou reação clara e positiva com anti-soro contra GVB. Em DAS-ELISA, GVB foi detectado em extratos de Nicotiana spp. e de videira (Vitis spp.). Em Western blots foram observadas reações específicas e cruzadas, da proteína capsídica de GVB com os anti-soros contra GVB e GVA, respectivamente. A partir do RNA viral extraído de N. occidentalis, foi amplificado por RT-PCR um fragmento de 594 bp específico de GVB, que codificou 197 aminoácidos do gene da proteína capsídica. As seqüências de nucleotídeos e de aminoácidos deduzidos do gene da proteína capsidial apresentaram alta identidade com isolados italianos e japoneses de GVB.

An isolate of Grapevine virus B (GVB), obtained by indexing Vitis labrusca and V. vinifera grapevines on the indicator LN33, was transmitted mechanically to several Nicotiana species. The virus was partially purified from N. cavicola and the coat protein estimated at 23 kDa by SDS-PAGE. In negatively stained leaf extracts of experimentally inoculated N. cavicola and N. occidentalis, flexuous particles with cross banding were observed, predominantly measuring 750-770 x 12 nm, with a modal length of 760 nm. Decoration indicated a clear, positive reaction against AS-GVB. In DAS-ELISA, GVB was detected in N. cavicola and grapevine extracts, and Western blots showed homologous and cross reaction of GVB and GVA antisera with GVB coat protein. Using specific primers for GVB, a fragment of 594 bp, comprising the coat protein gene coding for 197 amino acids, was amplified by RT-PCR with viral RNA extracted from GVB-infected N. occidentalis. The nucleotide and the deduced amino acid sequences of the coat protein gene showed high identities with Italian and Japanese isolates of GVB.