OBJETIVO: Correlacionar os níveis séricos pré-operatórios do antígeno do câncer 125 (Ca-125) e os achados laparoscópicos em mulheres com sintomas dolorosos sugestivos de endometriose. MÉTODOS:Um estudo retrospectivo foi realizado incluindo todas as mulheres com sintomas de dor pélvica suspeitos para endometriose operadas por laparoscopia no período de janeiro de 2010 a março de 2013. As pacientes foram divididas em 2 grupos de acordo com a dosagem de Ca-125 (<35 U/mL e >35 U/mL). Subsequentemente, as pacientes com endometrioma ovariano foram excluídas e uma análise adicional foi conduzida novamente de acordo com os níveis do Ca-125. Os seguintes parâmetros foram comparados entre os grupos: presença de endometrioma, presença e número de lesões de endometriose profunda infiltrativa (EPI) e escore da American Society for Reproductive Medicine. A análise estatística foi realizada com o programa Statistica versão 8.0, usando o teste exato de Fisher, o teste t de Student e o teste Mann-Whitney, quando necessário. Os valores p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. RESULTADOS: Durante o período de estudo, um total de 350 mulheres foram submetidas a tratamento laparoscópico de endometriose. Cento e trinta pacientes (37,1%) apresentaram Ca-125 >35 U mL e 220 (62,9%) apresentaram Ca-125 <35 U/mL. A presença de endometrioma ovariano (47,7 versus 15,9%), lesões de EPI (99,6 versus 78,6%) e lesões de EPI intestinal (60 versus 30,9%) foi mais frequente, e o escore da AFSr foi maior (34 versus 6) no primeiro grupo. Na segunda análise, excluindo as pacientes com endometrioma ovariano (>35 U/mL=68 pacientes e <35 U/mL=185 pacientes), resultados semelhantes foram obtidos. A presença de lesões de EPI (91,2 versus 76,2%), lesões de EPI intestinal (63,2 versus 25,4%), lesões de EPI de bexiga (20,6 versus 4,8%) e lesões de EPI ureteral (7,3 versus 1,6%) foi mais frequente, e o escore da AFSr foi maior (10 versus 6) no grupo Ca-125>35 U/mL. CONCLUSÕES: Em mulheres com sintomas dolorosos pélvicos suspeitos para endometriose com dosagem pré-operatória de Ca-125 >35 U/mL, a investigação de EPI é mandatória, especialmente quando não se identifica endometrioma ovariano em exames de imagem.

PURPOSE: To correlate preoperative serum cancer antigen 125 (Ca-125) levels and laparoscopic findings in women with pelvic pain symptoms suggestive of endometriosis. METHODS: A retrospective study was conducted including all women with pelvic pain symptoms suspected for endometriosis operated by laparoscopy from January 2010 to March 2013. Patients were divided into 2 groups according to preoperative Ca-125 level (<35 U/mL and >35 U/mL). Subsequently, patients with ovarian endometriomas were excluded and a further analysis was conducted again according to the preoperative Ca-125 level. The following parameters were compared between groups: presence of ovarian endometrioma, presence and number of deep infiltrating endometriosis (DIE) lesions and American Society for Reproductive Medicine score. The statistical analysis was performed with Statistica version 8.0, using the Fisher exact test, Student's t-test and Mann-Whitney test, when needed. A p value of <0.05 was considered to be statistically significant. RESULTS: During the study period, a total of 350 women were submitted to laparoscopic treatment of endometriosis. One hundred thirty patients (37.1%) had Ca-125>35 U/mL and 220 (62.9%) had Ca-12<35 U/mL. The presence of ovarian endometriomas (47.7 versus 15.9%), DIE lesions (99.6 versus 78.6%) and intestinal DIE lesions (60 versus 30.9%) was more frequent, and the AFSr score was higher (34 versus 6) in the former group. In the second analysis, excluding the patients with ovarian endometriomas (>35 U/mL=68 patients and <35 U/mL=185 patients), similar results were obtained. The presence of DIE lesions (91.2 versus 76.2%), intestinal DIE lesions (63.2 versus 25.4%), bladder DIE lesions (20.6 versus 4.8%) and ureteral DIE lesions (7.3 versus 1.6%) was more frequent, and the AFSr score was higher (10 versus 6) in the Ca-125 >35 U/mL group. CONCLUSIONS: Investigation for DIE is mandatory in women with pelvic pain symptoms suggestive of endometriosis with a preoperative Ca-125 level >35 U/mL, especially when an ovarian endometrioma is not present.

OBJETIVO: Analisar a eficácia da suspensão de carvão inerte na marcação de lesões impalpáveis mamárias e as alterações morfológicas associadas ao seu uso, além de determinar se há ou não prejuízo na interpretação destas lesões pelo patologista. MÉTODOS: Foram atendidos 135 casos de lesões impalpáveis mamárias, previamente marcadas com suspensão de carvão. As lâminas coradas pelo método de HE contendo pigmentos de carvão foram analisadas ao microscópio óptico, onde se realizou avaliação quantitativa e qualitativa da resposta inflamatória e determinação da presença ou não de prejuízo ao diagnóstico anatomopatológico. Os índices avaliados quantitativamente quanto à resposta inflamatória foram as contagens de linfócitos, células gigantes e neutrófilos, todos observados e quantificados em campos de grande aumento. Foi, ainda, avaliada a quantidade e distribuição de carvão presente nas lesões. RESULTADOS: Na avaliação quantitativa e qualitativa da resposta inflamatória observou-se, independente da quantidade de carvão, granulomas a "corpo estranho" em todas as amostras. Em relação à resposta inflamatória linfocitária 5,19% das amostras não apresentaram infiltração linfocítica, sendo que em 82,22% ela era de discreta intensidade e em 12,59% de moderada intensidade. Quanto à resposta inflamatória aguda, observou-se ausência total de exsudação neutrofílica em 42,96% dos espécimes, exsudação neutrofílica discreta em 42,22%, moderada em 11,11% e acentuada, sob forma de microabscessos, em 3,7% dos casos. Nesta série foram observados cinco nódulos de carvão, posicionados paralesionalmente, e que não geraram interferência na análise morfológica. CONCLUSÃO: Este método é marcador eficaz de lesões impalpáveis, de baixo custo, alta efetividade, sem prejuízo à análise histológica, além de ser de fácil execução; é confortável para a paciente e de grande auxílio ao cirurgião e patologista na localização destas lesões.

OBJECTIVE: To analyze the efficiency of labeling impalpable breast lesions with inert charcoal suspension; to evaluate the morphological alterations associated with its use and to determine whether the use of charcoal labeling hampers the diagnostic interpretation of the pathologist. METHODS: Was evaluated a total of 135 cases of impalpable breast lesions previously labeled with charcoal suspension. Histological H&E stained slides containing charcoal pigments were analyzed using optical microscopy, by which both quantitative and qualitative evaluations with regards to inflammatory response and interference in diagnosis were performed. Lymphocyte, giant cells and neutrophils were evaluated and quantified. Moreover, the distribution of the charcoal suspension present in the lesions was evaluated. RESULTS: As to the quantitative and qualitative evaluation of the inflammatory response caused by the use of charcoal labeling, granulomas were present in all samples regardless of the quantity of injected charcoal. Lymphocytic inflammatory response was absent in only 5.19% of the samples, 82.22% exhibited discrete intensity and 12.59% were moderate. With regards to acute inflammatory response, 42.96% showed total absence of neutrophilic exudate, whereas 42.22% contained discrete and 11.11% moderate neutrophilic exudate, and only 3.7% of cases had intense neutrophilic exudate. CONCLUSION: This study corroborates the utility and easiness of the charcoal method as a mean of efficient labeling of impalpable breast lesions; this technique is easy to use, has a low cost, high efficiency and does not interfere with the histological analysis. Moreover, it is comfortable for the patient and is of great help in finding and localizing the lesions for both the surgeon and pathologist.

OBJETIVOS: Avaliar a ação do bevacizumabe subconjuntival em modelo experimental de neovascularização em córnea de coelho. Analisar se o modelo de avaliação empregado é adequado e comparar entre os grupos a extensão dos vasos, inflamação e re-epitelização da córnea. MÉTODOS: Estudo experimental, prospectivo em 20 coelhos submetidos a trauma químico com hidróxido de sódio a 1 N divididos em dois grupos, Imediatamente após a queimadura, o grupo tratado recebeu injeção subconjuntival de 0,15 ml (3,75 mg) de bevacizumabe e o grupo controle, injeção subconjuntival de 0,15 ml de soro fisiológico a 0,9%. Após 25 dias, foi realizada análise fotográfica digital para avaliar a extensão e inflamação/calibre dos vasos segundo critério pré-estabelecido e estudo histopatológico da córnea, no qual foi avaliado o estado do epitélio e o número de polimorfonucleares. RESULTADOS: A extensão dos neovasos corneanos foi menor no grupo estudo em relação ao controle (p<0,001). Não houve diferença significativa entre os grupos na inflamação/calibre dos vasos. A análise histopatológica mostrou que não ocorreu diferença entre os grupos nas variáveis estado do epitélio e número de polimorfonucleares. A análise de concordância para a variável extensão dos vasos e para a variável inflamação/calibre dos vasos teve uma estimativa do coeficiente de Kappa respectivamente de 0,705 e 0,500 indicando bom grau de concordância nas diferentes avaliações cegadas, validando o método empregado. CONCLUSÕES: O modelo de avaliação foi adequado e pode ser reproduzido para avaliar outras drogas na córnea. O bevacizumabe inibiu a neovascularização corneana, porém não foi eficaz em reduzir o processo inflamatório. A droga não atrasou a re-epitelização da córnea.

PURPOSES: To evaluate the effect of subconjunctival bevacizumab in an experimental model of neovascularization in rabbit cornea. Determine its effect on vessels extension, inflammation, epithelialization of the cornea and whether the evaluation method used is appropriate to compare neovascular models. METHODS: Experimental, prospective, randomized, blinded study in twenty rabbits subjected to chemical trauma with sodium hydroxide at 1N divided into two groups. The study group received subconjunctival injection of 0.15 ml (3.75 mg) of bevacizumab and was compared with the control group that received subconjunctival injection of 0.15 ml saline solution. After 25 days, digital photographic analysis was performed to assess the vessel's extension and inflammation/diameter according to pre-established criteria. Histopathology of the cornea, which evaluated the state of the epithelium and the number of polymorphonuclear cells was also studied. RESULTS: The length of the neovessels was greater in the control group compared to the study group (P=<0.001). There was no difference in inflammation/vessel diameter between groups. Histopathology analysis showed that there was no difference between groups for the variables state of the epithelium and number of polymorphonuclear cells. The concordance analysis for the variable extension of the vessels and the variable inflammation/vessel diameter was estimated with Kappa coefficients of 0.705 and 0.500 respectively, indicating a good level of agreement in different evaluations and validating the method. CONCLUSIONS: The experimental model is adequate and can be reproduced to evaluate other drugs in the cornea. Bevacizumab inhibit the neovessels' growth but was not effective in preventing the inflammatory response. The drug did not delay the reepithelialization of the cornea.

OBJECTIVE: The aim of this study was to simultaneously monitoring cytomegalovirus and human herpesvirus 6 active infections using nested-polymerase chain reaction and, together with clinical findings, follow the clinical status of patients undergoing liver transplant. INTRODUCTION: The human β-herpesviruses, including cytomegalovirus and human herpesvirus 6, are ubiquitous among human populations. Active infections of human herpesvirus 6 and cytomegalovirus are common after liver transplantation, possibly induced and facilitated by allograft rejection and immunosuppressive therapy. Both viruses affect the success of the transplant procedure. METHODS: Thirty patients submitted to liver transplant at the Liver Transplant Unit, at the Gastro Center, State University of Campinas, SP, Brazil, were studied prospectively from six months to one year, nested-polymerase chain reaction for cytomegalovirus and human herpesvirus 6 DNA detections. Two or more consecutive positive nested-polymerase chain reaction were considered indicative of active infection. RESULTS: Active infection by cytomegalovirus was detected in 13/30 (43.3%) patients, median time to first cytomegalovirus detection was 29 days after transplantation (range: 0-99 days). Active infection by human herpesvirus 6 was detected in 12/30 (40%) patients, median time to first human herpesvirus 6 detection was 23.5 days after transplantation (range: 0-273 days). The time-related appearance of each virus was not statistically different (p = 0.49). Rejection of the transplanted liver was observed in 16.7% (5/30) of the patients. The present analysis showed that human herpesvirus 6 and/or cytomegalovirus active infections were frequent in liver transplant recipients at our center. CONCLUSIONS: Few patients remain free of betaherpesviruses after liver transplantation. Most patients presenting active infection with more than one virus were infected sequentially and not concurrently. Nested-polymerase chain reaction can be considered of limited value for clinically monitoring cytomegalovirus and human herpesvirus 6.

Relatamos o uso de teste genético para decisão terapêutica em um caso de hiperparatireoidismo primário associado com doença de Cushing (DC). Uma jovem de 20 anos foi avaliada por ganho de peso gradual, astenia, mialgias e hipertensão. Os exames complementares confirmaram DC e ela foi submetida à cirurgia transesfenoidal. A análise imuno-histoquímica do microadenoma foi positiva para hormônio adrenocorticotrófico (ACTH). No seguimento, a paciente apresentou hipercalcemia com níveis elevados de hormônio de paratireoide (PTH), nefrolitíase e densidade mineral óssea baixa em coluna e fêmur. A cintilografia de paratireoide mostrou captação do traçador em região inferior do lobo esquerdo da tireoide e a ecografia cervical revelou nódulo heterogêneo na mesma área, sugestivo de adenoma da paratireoide (AP). O teste genético detectou mutação no gene MEN 1 e ela foi submetida à paratireoidectomia total com implante de fragmento de uma das glândulas no antebraço. A patologia confirmou AP e as outras três glândulas normais, sem hiperplasia, apesar do diagnóstico de MEN 1. Esse caso ilustra a importância do teste genético para definir a abordagem terapêutica em um caso esporádico de MEN 1.

We report the use of a genetic test for therapeutic decision making in a case of primary hyperparathyroidism associated with Cushing's disease (CD). A 20-year-old woman was evaluated for gradual weight gain, asthenia, muscle pain, and hypertension. Biochemical and radiologic tests confirmed CD and she underwent transsphenoidal surgery. Immunohistochemistry of the microadenoma was positive for adrenocorticotropic hormone (ACTH). On follow-up, hypercalcemia with high parathyroid hormone (PTH) levels was detected, associated with nephrolithiasis and low bone mineral density in the spine and hip. Parathyroid scintigraphy showed tracer uptake in the inferior region of the left thyroid lobe, and cervical ultrasound showed a heterogeneous nodule in the same area, suggestive of a parathyroid adenoma (PA). Genetic testing detected mutation in the MEN 1 gene and total parathyroidectomy with the implantation of a fragment of one gland in the forearm was performed. Pathology showed a PA and 3 normal parathyroid glands, without hyperplasia, despite the diagnosis of MEN 1. This case illustrates the role of genetic testing in defining the therapeutic approach for sporadic MEN 1.

RACIONAL: O câncer gástrico continua sendo objeto de grande número de estudos que tentam entender melhor sua gênese, e conseqüentemente propor novos tratamentos. Na atualidade destaque especial está sendo dado na marcação imunoistoquímica onde estão sendo utilizados marcadores diversos sem se saber ainda qual ou quais são os mais efetivos no diagnóstico. OBJETIVO: Identificar e quantificar por citometria de imagem a expressão dos marcadores de angiogênese Fator VIII e CD-34 em tumores gástricos. MÉTODOS:Foram utilizados 29 casos de adenocarcinomas gástricos, todos oriundos de material arquivado e conservado em blocos de parafina. Após a desparafinização, realizou-se coloração com marcadores imunoistoquímicos de angiogênese Fator VIII e CD-34, e as lâminas coradas foram submetidas a estudo citofotométrico de imagem em sistema informatizado SAMBA 4000. RESULTADOS: Foram comparados os dois parâmetros oferecidos pelo método, índice de marcagem e densidade óptica, apenas nos 17 casos em que ocorreu identificação de ambos marcadores. Observou-se expressão numericamente significativa de ambos, porém o Fator VIII apresentou melhor média de densidade óptica, enquanto o CD-34 melhor resultado quanto ao índice de marcagem. CONCLUSÃO:A citometria de imagem foi capaz de identificar e quantificar a expressão do Fator VIII e CD-34 de maneira confiável e satisfatória demonstrando presença de angiogênese, sendo que o Fator VIII marcou menores áreas com melhor qualidade e o CD-34 marcou maiores áreas com menor qualidade.

BACKGROUND: Gastric cancer remains a subject of great interest in several studies searching for understanding its genesis and, therefore, proposing new treatments. Currently special credits have been given to immunohistochemistry as various markers are being tested with uncertain efficacy on diagnosis. AIM: To identify and quantify the expression of Factor VIII and CD-34, angiogenesis markers, in gastric tumors by imaging cytometry. METHODS: Twenty-nine 29 gastric adenocarcinomas sampled-tissue in paraffin blocks underwent immunohistochemical angiogenesis markers evaluation for factor VIII and CD-34 and the marked slides were submitted to SAMBA 4000 reading. RESULTS:The investigation method offered two comparison parameters, marking index and optical density, showing up both in 17 cases. Significant numerical expression had been observed for both markers, but Factor VIII showed a better optical density average while CD-34 presented a better result for marking index. CONCLUSIONS: Image cytometry identified and quantified Factor VIII and CD-34 expressions in a reliable and satisfactory manner, revealing the presence of angiogenesis. Factor VIII enhanced in smaller areas with better quality while CD-34 enhanced greater areas with lower quality.

RACIONAL: No câncer gástrico, a incidência, o diagnóstico e as opções terapêuticas apresentaram melhorias nas últimas décadas, porém o prognóstico permanece reservado, especialmente devido à maioria dos pacientes procurarem recurso médico com tumores avançados, metastáticos ou cirurgicamente irressecáveis já no diagnóstico. Biologia molecular é área de conhecimento recente com grandes questionamentos a serem respondidos e a atualidade dos fatos científicos mostra que o caminho deverá ser através da identificação de marcadores tumorais. Os grandes avanços na área da informática aprimoraram a análise da imagem celular através da citofotometria de imagem que possibilita através da imunoistoquímica estudar a proliferação celular e a angiogênese que participa em diversos processos tumorais, sendo pesquisadas por vários marcadores. Atualmente estudos são realizados para demonstrar o valor prognóstico de suas expressões, contudo, no adenocarcinoma gástrico resultados têm sido divergentes e estudos escassos. OBJETIVOS: Identificar e quantificar citofotometricamente a expressão dos marcadores da angiogênese através do fator VIII no adenocarcinoma e comparar suas expressões com fa classificação de Bormann, profundidade de invasão tumoral, grau de diferenciação, envolvimento nodal, padrão histológico e idade. MÉTODOS: Foram estudados 21 pacientes com adenocarcinoma gástrico, identificados de 1998 a 2006. Para a detecção do Fator VIII foi realizada imunoistoquímica, com anticorpo policlonal para Fator VIII. Foi realizada análise citofotométrica informatizada pelo sistema SAMBA 4000. RESULTADOS: Dos 21 pacientes 61,90% eram do sexo masculino e 38,10% do feminino, com idade mediana de 65 anos e apenas um não marcou para o Fator VIII (95,24% de marcação). As médias dos índices de marcagem para o Fator VIII foram de 61,14% (desvio-padrão de 15,06, variando de 29,16 a 73,91). Tumores com classificação III ou IV apresentaram índice de marcagem maiores do que aqueles com Bormann I ou II, porém sem correlação com a profundidade de invasão tumoral, grau de diferenciação, envolvimento nodal e padrão histológico. CONCLUSÕES: O presente estudo identificou e marcou 95,24% das amostras para o Fator VIII. Em relação aos fatores prognósticos não houve correlação significativa exceto entre o Fator VIII e a classificação de Bormann no qual o tipo III ou IV foi maior que o tipo I ou II.

INTRODUCTION: Regarding gastric cancer, the incidence, diagnosis and therapeutic options showed improvement in the last decades, but prognosis remains gloomy, specially due the fact that most patients, already diagnosed present advanced tumors, metastatic and not liable to be surgically resected. Molecular biology is an area in science, which can give the answer to many questions and current scientific facts show that the this should be through detection of tumoral markers. The great advances in informatics refined cell image analysis by image cytophotometry makes it possible to study cell proliferation and angiogenesis in various tumor processes using immunohistochemistry and several markers. At present, studies are conducted to demonstrate the prognostic value of their expressions, however, in gastric adenocarcinoma the results have been divergent and studies are scarce. AIM: To identify and quantify the expression of cell proliferation markers using Ki-67 and of angiogenesis with Factor VIII in gastric adenocarcinoma using cytophotometry, and compare their expressions with factors such as Bormanns´ classification, tumor invasion depth, degree of differentiation, nodal involvement, histologic pattern and age. METHODS: Twenty-one patients with gastric adenocarcinoma identified between 1998 and 2006 were studied. Ki-67 and Factor VIII expressions were performed using immunohistochemistry with clone MIB-1 primary antibodies, monoclonal for Ki-67 and policlonal for Factor VIII. Cytophotometric analysis was performed using the SAMBA 4000 system. RESULTS: Of the 21 patients 61.90% were males and 38.10% females, with a median age of 65 years. In our study eight patients had no Ki-67 marking (61,90% marking) and only one had no Factor VIII marking (95,24% marking). Means of Ki-67 labelling index was 33,25% (standard deviation 20,08, varying from 5,43 to 75,10) and of Factor VIII, 61,14% (standard deviation 15,06, varying from 29,16 to 73.91). There was no correlation between the two markers regarding gender and age. When compared between the two markers, expression for angiogenesis was significantly greater than that for cell proliferation with a mean difference between labelling index of 20,89 (p<0,001) and 15,26 standard deviation. There was no correlation between Ki-67 labelling index with comparative factors. However, regarding Factor VIII, tumors classified as III or IV present a significantly greater labelling index than those with Bormann I or II, but there was no correlation with tumor invasion depth, differentiation degree, nodal involvement and histologic pattern. CONCLUSIONS: 61,90% of the samples were identified and marked by Ki-67 and 95,24% by Factor VIII. In the marked tumors the mean Ki-67 labelling index was 33,25% and that of the Factor VIII, 61,14%. In the comparative study between the two markers, angiogenesis expression was significantly greater than that of cell proliferation. Regarding prognostic factors there was no significant correlation, except for Factor VIII and Bormanns´ classification in which type III or IV was greater than type I or II.