Resumo O objetivo da pesquisa foi extrair, obter o perfil peptídico e avaliar a atividade antimicrobiana do extrato peptídico bruto de duas amostras de queijo de Coalho artesanal produzidos no município de Venturosa, localizado no Agreste de Pernambuco – Brasil. Nas eletroforeses realizadas, foram evidenciadas de 12 a 15 bandas. Na análise por espectrometria de massa, foram identificados 24 fragmentos peptídeos. O extrato peptídico bruto apresentou atividade antimicrobiana diante dos microrganismos Enterococcus faecalis ATCC 6057, Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC 25922 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 na concentração de 225 mg/mL. Os presentes resultados sugerem que em aproximadamente 5 g do queijo são encontrados peptídeos capazes de inibir o crescimento dos microrganismos patogênicos testados. Sendo assim, pode-se indicar o caráter funcional do queijo de Coalho.

Abstract The aim of this research was to extract the crude peptide extracts from two samples of artisanal “Coalho” cheese produced in the city of Venturosa in the drylands of the State of Pernambuco – Brazil, and evaluate their peptide profile and antimicrobial activity. Electrophoresis showed evidence of 12 to 15 bands and mass spectrometry identified 24 peptide fragments. Furthermore, the crude extract presented antimicrobial activity against Enterococcus faecalis ATCC 6057, Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC 25922 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 at a concentration of 225 mg/mL. The present results suggest that peptides capable of inhibiting the growth of the pathogenic microorganisms tested can be found in approximately 5g of the cheese. Thus “Coalho” cheese can be indicated for its functional character.

A enzima coagulante de leite obtida de látex de raiz de Jacaratia corumbensis O. kuntze foi caracterizada parcialmente e purificada, por precipitação fracionária com sulfato de amônio e cromatografia de troca de íon. Foram utilizadas cinco frações de sulfato de amônio (AS1 - 0-20%; AS2 - 20-40%; AS3 - 40-60%; AS4 - 60-80%; AS5 - 80-100%), a fração 40-60% (AS3) mostrou alta atividade coagulante com um fator de purificação de 1,2 vezes em relação ao extrato bruto. Esta fração foi aplicada em coluna Mono Q obtendo dois picos de proteína (p1 e p2), o p1 mostrou melhor atividade coagulante. O pH ótimo para o extrato bruto e parcialmente purificado foi 6,5 e 7,0, respectivamente. A atividade coagulante foi atingida a 55ºC para ambos os extratos, bruto e parcialmente purificado. A enzima foi inibida por ácido iodoacético que sugere que esta enzima é uma cisteína protease, com peso molecular de 33 kDa.

The partial characterization and purification of milk clotting enzyme obtained from the (root latex) of Jacaratia corumbensis O. kuntze was studied, by fractional precipitation with ammonium sulphate and ion exchange chromatography. The ammonium sulphate precipitate showed five fractions (AS1- 0-20%; AS2 - 20-40%; AS3 - 40-60%; AS4 - 60-80%; AS5 - 80-100%) and among the fractions obtained, the 40-60% fraction (AS3) showed the highest milk clotting activity with a purification factor of 1.2 fold in relation to the crude extract. This fraction when applied on Mono Q column yielded two protein peaks (p1 and p2), but p1 pool showed the best milk-clotting activity. The optimal pH for the crude and partially purified extract was 6.5 and 7.0, respectively. The maximum milk-clotting activity was at 55ºC for the both crude and partially purified extracts. The enzyme was inhibited by iodoacetic acid which suggested that this enzyme was a cysteine protease, with molecular weight of 33 kDa.

O objetivo deste trabalho foi estudar a produção de queratinase por Aspergillus carbonarius URM 1546, tendo-se como substrato penas de galinha, por meio de planejamento fatorial completo 2³. Todos os parâmetros estudados e as interações de segunda ordem foram estatisticamente significativos. A maior atividade queratinolítica (48,9 U mL-1) foi obtida com 120 rpm, 0,5% (p/v) de penas de galinha e sete dias de cultivo.

The objective of this work was to evaluate the keratinase production by Aspergillus carbonarius URM 1546, using as substrate poultry feather in a full experimental design 2³. The studied parameters and the second-order interactions were statistically significant. The maximum keratinase activity (48.9 U mL-1) was obtained using 120 rpm, with 0.5% (w/v) poultry feather and seven culture days.

Clostridium perfringensé uma bactéria anaeróbia Gram-positiva, amplamente distribuída no meio ambiente e comumente encontrada no intestino de animais, incluindo o homem. As espécies de C. perfringensestão classificadas em cinco tipos toxigênicos (A, B, C, D, E) em função da produção de quatro toxinas (±, ², µ, ¹). Entretanto, as toxinas teta, delta, lambda e enterotoxina são também sintetizadas por outras espécies dessa bactéria. Muitas metodologias para purificação das toxinas produzidas por C. perfringens têm sido propostas e, portanto, nesta revisão foram apresentados e discutidos os métodos e resultados de purificação dessas toxinas relatados nas últimas quatro décadas.

Clostridium perfringens, a Gram-positive anaerobic bacterium, is widespread in the environment and commonly found in the intestines of animals, including humans. C. perfringens strains are classified into five toxinotypes (A, B, C, D and E) based on the production of four major toxins (±, ², µ, ¹). However the toxins (theta, delta, lambda and enterotoxin) are also synthesized by C. perfringens strain. Many attempts to purify the toxins produced by C. perfringens have been proposed. In this review we discuss the purification methods used to isolate toxins from C. perfringens reported in last four decades.

A caracterização parcial de proteases extracelulares de Streptomyces clavuligerus foi investigada. A produção da enzima foi realizada pela fermentação em batelada utilizando farinha de soja como fonte de nitrogênio. O máximo rendimento foi obtido após 96 horas de fermentação com um pH inicial de 7,0. A enzima foi purificada parcialmente por precipitação com sulfato de amônia. Ambas enzimas reteram 37% de sua atividade inicial a pH 8,0, após 2 horas de incubação a 25ºC. O tempo de meia-vida das enzimas foi de 40,30 e 53,32 minutos, respectivamente para ambos 3585 e 644 (extrato parcialmente purificado) a pH 8,0 e 60ºC. Com relação ao pH, a atividade ótima foi alcançada a pH 7,0-8,0 e 8,4 para enzimas produzidas pelas amostras 3585 e 644 (extrato bruto) respectivamente e 8,4 e 8,0 para as enzimas obtidas a partir dos extratos parcialmente purificados das amostras 3585 e 644, respectivamente. A temperatura ótima para o extrato bruto foi de 21ºC para S. clavuligerus NRRL 3585 e 644. Contudo, para a preparação parcialmente purificada, a temperatura ótima foi de 50 e 40ºC para amostras S. clavuligerus NRRL 3585 e 644 respectivamente.

The partial characterization of extracellular proteases from Streptomyces clavuligerus NRRL 3585 and 644 mutant was investigated. The enzyme production was carried out in batch fermentation using soy bean filtrate as nitrogen source. Maximum activity was obtained after 96h of fermentation with an initial pH of 7.0. The enzyme was partially purified by ammonium sulphate precipitation. Enzymes from the two strains retained 37% of their initial activities at pH 8.0 after 2 h incubation at 25ºC. Enzyme half-life at pH 8.0 and 60ºC was 40.30 and 53.32 min, respectively for both strains (partially purified extract). The optimum pH was obtained at pH 7.0-8.0 and 8.4 for enzymes produced for 3585 and 644 strains (crude extract), respectively, and 8.4 and 8.0 for enzymes from the partially purified extract 3585 and 644 strains, respectively. The optimum temperature for the crude extract was 21ºC for both strains. However, for the partially preparation the optimum temperature was 50ºC and 40°C for S. clavuligerus NRRL 3585 and 644 strains respectively.