Resumo Este estudo teve como objetivo analisar os níveis de FGF-2 no fluido crevicular peri-implantar durante a terapia de suporte da mucosite. Vinte e seis participantes com prótese protocolo Branemark foram divididos em dois grupos: o grupo controle, caracterizado por saúde peri-implanter, e o grupo mucosite, apresentando diagnóstico de mucosite peri-implantar. Todos os participantes foram submetidos a exame clínico, análise radiográfica, retirada da prótese e terapia não invasiva peri-implantar (debridamento mecânico associado à clorexidina 0,12%) durante um período de 36 dias, dividido em três intervalos. Amostras de fluido crevicular peri-implantar foram coletadas em cada intervalo para análise dos níveis de FGF-2, por ensaio imunoenzimático. Os grupos controle e mucosite não apresentaram diferença nos parâmetros clínicos, exceto para mucosa queratinizada. Ao longo dos intervalos de tratamento, os participantes foram diagnosticados em diferentes grupos, indicando se a terapia não invasiva era ou não capaz de tratar a mucosite peri-implantar. Houve diferença significativa dos níveis de FGF-2 entre os grupos, sendo os níveis de FGF-2 maiores no grupo controle (p = 0.01). Após a terapia de suporte, o grupo com mucosite apresentou níveis de FGF-2 significativamente aumentados (p <0.01) em comparação aos níveis iniciais. Após 36 dias de terapia de suporte, houve redução da mucosite peri-implantar de 70% para 23%. Os resultados clínicos e laboratoriais mostraram uma correlação clara, uma vez que os níveis de FGF-2 aumentaram após 36 dias. O protocolo de terapia foi eficaz e promoveu uma reação regenerativa. O FGF-2 pode ser considerado um alvo futuro para o tratamento da mucosite peri-implantar.

Abstract This study aimed to analyze Fibroblast Growth Factor-2 (FGF-2) levels in the peri-implant crevicular fluid throughout supportive mucositis therapy. Twenty-six participants with Branemark protocol prosthesis were divided into two groups: the control group, characterized by healthy peri-implants, and the mucositis group, presenting a diagnosis of peri-implant mucositis. All participants underwent clinical examination, radiographic analysis, prosthesis removal, and non-invasive peri-implant therapy (mechanical debridement associated with chlorhexidine 0.12%) during a period of 36 days divided into three intervals. Peri-implant crevicular fluid samples were collected at each interval in order to analyze FGF-2 levels by immuno-enzymatic assay. The control and mucositis groups showed difference in keratinized mucosa. The smaller the range of keratinized mucosa the higher susceptibility of peri-implant mucositis. Throughout the treatment intervals, participants were diagnosed in different groups indicating whether or not the non-invasive therapy was able to treat peri-implant mucositis. There was a significant difference of FGF-2 levels between groups, with the higher FGF-2 levels in the control group (p=0.01). After supportive therapy, the mucositis group showed significantly increased FGF-2 levels (p<0.01) compared to initial levels. After 36 days of supportive therapy, there was a reduction of peri-implant mucositis from 70% to 23%. Clinical and laboratory outcomes showed a clear correlation since FGF-2 levels increased after 36 days. It was concluded that the therapy protocol was effective and promoted a regenerative reaction and FGF-2 can be considered a future target for peri-implant mucositis understanding.

Resumo A história de periodontite crônica (CP) é um fator de risco para falhas na osseointegração. O sistema de osteoclastogênese (RANK, RANKL e OPG) é crucial para o controle da homeostase óssea. O objetivo deste estudo foi investigar os níveis de OPG e RANKL no tecido peri-implantar de voluntários com e sem histórico de CP e sua associação com inflamação da mucosa. Este é um estudo tipo caso-controle. O exame para diagnóstico de CP e na região peri-implantar foi realizado em 46 voluntários, divididos em controle (sem história CP, n=26) e grupo CP (com histórico de CP, n=20). Descartes gengivais foram obtidos durante a exposição do implante. PCR quantitativo avaliou a expressão do RNAm de OPG/RANKL. As proteínas OPG e RANKL foram analisadas por western blot e imunohistoquímica. O teste do qui-quadrado analisou a significância entre as variáveis nominais enquanto as variáveis contínuas foram analisadas pelo teste-t e Mann-Whitney, após o teste de Shapiro-wilk. O método do Livak 2--ΔΔCT avaliou a expressão gênica. Os voluntários com CP apresentaram 23 vezes mais chances de desenvolver inflamação da mucosa. Expressão elevada no RNAm de RANKL (p=0.04) e RANKL/OPG (p=0.001) foram observadas no grupo CP. Voluntários com CP mostraram aumento dos níveis da proteína RANKL em contraste com diminuída expressão de OPG. Mesmo sem periodontite ativa, voluntários com histórico de CP apresentaram elevado nível gengival de RANKL/OPG e alta correlação com inflamação peri-implantar e perda do implante.

Abstract tHistory of chronic periodontitis (CP) is a risk factor for oseointegration failure. The osteoclastogenesis system (RANK, RANKL and OPG) is critical for bone homeostatic control. We investigated the levels of OPG and RANKL in peri-implant tissues from volunteers with and without a history of CP and their association with mucosae inflammation. This is a single-blind case-contro study. Diagnosis of a history of CP and peri-implant examination was performed on 46 volunteers, divided into control (without history of CP, n=26) and CP group (with history of CP, n=20). Gingival biopsies were harvested during implant exposure. Quantitative PCR evaluated OPG/RANKL mRNA expressions. OPG and RANKL proteins were analyzed by western blot and immunohistochemistry assay. The chi-square test analyzed the significance of nominal variables between groups while continuous variables were analyzed by T-test or Mann-Whitney test, after Shapiro-Wilk test evaluation. The 2-ΔΔCT Livak method calculation evaluated the gene expression. Values of p<0.05 were considered statistically significant. Volunteers with CP history had 23 times higher chance of developing mucosae inflammation. High mucosae levels of RANKL (p=0.04) and RANKL/OPG (p=0.001) mRNA expressions were observed in CP group. CP volunteers showed increased RANKL protein levels in opposition to decreased OPG expression. Even without active periodontitis, volunteers with a history of CP had elevated gingival levels of RANKL/OPG and higher correlation with peri-implant mucosae inflammation and implant loss.

Resumo Apesar do alto índice de sucesso em implantodontia, falhas tem aumentado drasticamente, estando associadas ao desenvolvimento de peri-implantite. A perda óssea peri-implantar é influenciada por múltiplos fatores, incluindo causas genéticas e ambientais. As BMPs (proteínas ósseas morfogenéticas) são fatores de crescimento indutores da formação óssea. Os FGFs (fatores de crescimento dos fibroblastos) e seus receptores (FGFRs) desenvolvem importante função na proliferação, diferenciação e migração celular. A relação BMP/FGF é responsável pela regeneração e perda óssea. O objetivo deste estudo foi estudar a possível correlação entre os genes BMP4, FGF3, FGF10 e FGFR1 e a perda óssea peri-implantar. Duzentos e quinze voluntários, com 754 implantes, foram submetidos ao exame oral e divididos em grupo saúde (n=129) e peri-implantite (n=86). Treze polimorfismos nos genes BMP4, FGF3, FGF10 e FGFR1 foram analisados individualmente e como haplótipos. O teste do qui-quadrado correlacionou as frequências dos genótipos, alelos e haplótipos. Valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Voluntários com peri-implantite mostraram alta incidência de edentulismo total (p<0,0001) e biotipo periodontal fino (p<0,04). Sangramento espontâneo, placa e mobilidade do implante foram altamente incidentes no grupo peri-implantite (p<0,0001). O genótipo polimórfico TT para BMP4 rs2761884 foi associado com saúde peri-implantar (p=0,01). FGF3 rs4631909 (genótipos TT+CT) mostraram associação com o grupo controle (p=0,04). A frequência do alelo C para FGF3 rs4631909 mostrou uma tendência de associação com peri-implantite (p=0,08). Os haplótipos FGF10 CCTG (p=0,03), BMP4 GAAA (p=0,05) e GGGA (p=0,02) foram associados com peri-implantite (p=0,03). Sendo assim, conclui-se que os haplótipos BMP4 e FGF10 estão associados com peri-implantite.

Abstract Despite the success of osseointegrated implants, failures have increased significantly, associated with development of peri-implantitis. Multiple factors influence the peri-implant bone loss, including environmental and genetic causes. BMPs (Bone morphogenetic proteins) are growth factors that induce bone formation. FGF (fibroblast growth factors) and their receptors (FGFRs) play important roles by controlling the levels of cell proliferation, differentiation and migration. BMP/FGF relationship is responsible for promoting bone regeneration and bone loss. The aim of this study was to analyze the correlation between BMP4, FGF3, FGF10 and FGFR1 genes and peri-implant bone loss. Two hundred and fifteen volunteers, with 754 dental implants, were submitted to oral examination and divided in healthy group (n=129) and peri-implantitis group (n=86). Thirteen polymorphisms in BMP4, FGF3, FGF10 and FGFR1 genes were analyzed individually and in haplotype. The chi-square test correlated genotypes, allelic and haplotype frequencies. Values of p<0.05 were considered significant. Volunteers with peri-implantitis demonstrated high incidence of total edentulism (p<0.0001) and thin peri-implant phenotype (p<0.04). Higher incidence of spontaneous bleeding, plaque and implant mobility was observed in peri-implantitis group (p<0.0001 for all). The TT polymorphic genotype for BMP4 rs2761884 was associated with healthy peri-implant (p=0.01). FGF3 rs4631909 (TT+CT genotype) also showed association with the control group (p=0.04). The frequency of C allele for FGF3 rs4631909 showed a tendency for association with peri-implantitis (p=0.08). FGF10 CCTG (p=0.03), BMP4 GAAA (p=0.05) and GGGA (p=0.02) haplotypes were associated with peri-implantitis (p=0.03). Therefore, it may be concluded that BMP4 and FGF10 haplotypes are associated with peri-implantitis.

Resumo Indivíduos susceptíveis à periodontite crônica (CP) apresentam alto risco para o desenvolvimento de periimplantite (PI). Ambas doenças são multifatoriais e apresentam similaridades na patofisiologia e perfil poligênico. A MMP-13 (metaloproteinase da matriz tipo 13) é uma enzima colagenolítica cuja expressão é induzida por TGF beta 3 (fator transformador do crescimento tipo 3) nos fibroblastos gengivais humanos e inibida por TIMP-2 (inibidor tecidual de metaloproteinase tipo 2). O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de periimplantite em sujeitos com periodontite crônica e a frequência dos polimorfismos nos genes MMP13, TIMP2 e TGFB3. Cento e sessenta e três voluntários submetidos à instalação de implantes endósseos foram analisados clínica e radiograficamente quanto à presença de histórico de CP e PI, sendo divididos em 4 grupos: Controle (sem história de CP e PI, n=72), CP (com CP e sem PI, n=28), PI (com PI e sem CP, n=28) e Doentes (com CP e PI, n=35). O teste do qui-quadrado correlacionou os genótipos nas regiões dos genes MMP13 (rs2252070), TIMP2 (rs7501477) e TGFB3 (rs2268626), considerando a interação entre CP e PI. Os resultados mostraram que voluntários com CP possuem 3.2 vezes mais chances de desenvolver PI (p=0.0004) comparados aos sem CP. Nenhuma associação significativa foi observada entre os genes MMP13, TIMP2 e TGFB3 e CP ou PI. A CP é um fator de risco ao desenvolvimento de PI, no entanto, não há associação entre ambas as doenças com polimorfismos nos genes MMP13, TIMP2 e TGFB3.

Abstract Subjects susceptible to chronic periodontitis (CP) show a high risk for the development of peiimplantitis (PI). Both diseases are multifactorial, presenting similarities in their pathophysiology and polygenic profile. MMP-13 (matrix metalloproteinases 13/ collagenase 3) is a collagenolytic enzyme, which expression is induced by TGF beta 3 (transforming growth factor type 3) in human gingival fibroblasts and inhibited by TIMP-2 (tissue inhibitor of metalloproteinase type 2). The aim of this study was to investigate the occurrence of peiimplantitis (PI) in subjects with history of chronic periodontitis (CP) and polymorphisms frequency in MMP13, TIMP2 and TGFB3 genes. One hundred and sixty-three volunteers received dental implant placement were submitted to oral and radiographic examination in order to identify past history of CP or presence of PI. Volunteers were divided into 4 groups: Control (without PI and CP, n=72), CP (with CP and without PI, n=28), PI (with PI and without CP, n=28) and diseased (with CP and PI, n=35). The chi-square test correlated genotypes in specific regions of MMP13 (rs2252070), TIMP2 (rs7501477) and TGFB3 (rs2268626) genes, considering the interaction between CP and PI. The results showed that volunteers with CP had 3.2 times more susceptibility to develop PI (p=0.0004) compared to those without CP. No significant association was observed in MMP13, TIMP2 and TGFB3 genes with CP or PI. CP is a risk factor to develop PI, however, there is no association of both diseases with polymorphisms in the MMP13, TIMP2 and TGFB3 genes.

RESUMO Objetivo: Análise do uso do implante tipo cage em poli-éter-éter-cetona (PEEK) no realinhamento e distração facetária atlantoaxial da invaginação basilar pela técnica de Goel. Método: Análise estatística descritiva retrospectiva de estado neurológico, dor, presença de fusão óssea e subsidência com o uso do cage em PEEK em 8 articulações atlantoaxiais de 4 pacientes portadores de invaginação basilar, todos tratados com distração, realinhamento atlantoaxial e artrodese posterior C1-C2 pela técnica de Goel, modificada pela utilização do cage em PEEK. Resultados: Todos os pacientes apresentaram melhora na escala de avaliação neurológica de Nurick e na Escala Visual Analógica (EVA) de dor. Não ocorreu caso de subsidência, migração ou dano à artéria vertebral decorrente da colocação do cage. Cem por cento das articulações evoluíram com fusão óssea, avaliada por radiografia dinâmica e tomografia computadorizada. Dois pacientes evoluíram com dor neuropática no dermátomo de C2 e em um paciente houve lesão unilateral da artéria vertebral durante a instrumentação de C2, tratada com inserção do parafuso pedicular para controle do sangramento. Conclusão: Os resultados da redução vertical da invaginação basilar pela técnica de Goel com a utilização de cage em PEEK mostrou ser eficaz e segura, porém ainda são necessários estudos para confirmar essa utilização.

ABSTRACT Objective: Analysis of the use of polyetheretherketone (PEEK) cages for atlantoaxial facet realignment and distraction for treatment of basilar invagination by Goel technique. Method: Retrospective descriptive statistical analysis of the neurological status, pain, presence of subsidence and bone fusion with the use of PEEK cages in 8 atlantoaxial joints of 4 patients with basilar invagination. All patients were treated with atlantoaxial facet distraction and realignment and subsequent arthrodesis C1-C2 by the technique of Goel modified by the use of PEEK cage. Results: All patients showed improvement in Nurick neurological assessment scale and Visual Analogue Scale (VAS) of pain. There were no cases of subsidence, migration, or damage to the vertebral artery during the insertion of the cage. All joints evolved with bone fusion, assessed by dynamic radiographs, and computed tomography. Two patients developed neuropathic pain in dermatome of C2 and one patient had unilateral vertebral artery injury during C2 instrumentation treated with insertion of pedicle screw to control the bleeding. Conclusion: The results of the treatment of basilar invagination by the Goel technique with the use of PEEK cages shown to be effective and safe although further studies are needed to confirm this use.

RESUMEN Objetivo: Análisis del uso del implante tipo caja en poli-éter-éter-cetona (PEEK) en el realineamiento y distracción facetaria atlantoaxial de la invaginación basilar por la técnica de Goel. Métodos: Fue realizado un análisis estadístico descriptivo retrospectivo del status neurológico, dolor, presencia de fusión ósea y hundimiento con el uso de la caja en PEEK en 8 articulaciones atlantoaxiales de 4 pacientes que presentaban invaginación basilar, todos tratados con distracción y realineamiento atlantoaxial y artrodesis posterior C1-C2 mediante la técnica de Goel. Resultados: Todos los pacientes presentaron mejoría en la escala de evaluación neurológica de Nurick y en la Escala Visual Analógica (EVA) del dolor. No hubo casos de hundimiento, migración o daño a la arteria vertebral debido a la colocación del implante. El 100% de las articulaciones evolucionaron con fusión ósea evaluada por radiografía dinámica y tomografía computarizada. Dos pacientes evolucionaron con dolor neuropático en el dermatomo de C2, y en un paciente hubo lesión unilateral de la arteria vertebral durante la instrumentación de C2, tratada con inserción de un tornillo pedicular para control del sangrado. Conclusión: Los resultados de la reducción vertical de la invaginación basilar por la técnica de Goel con el uso de caja en PEEK han demostrado ser eficaz y segura pero se necesitan más estudios para confirmar este uso.

RESUMO OBJETIVO: O estudo avalia a diferenciação in vitro das células mesenquimais isoladas do estroma da medula óssea em tenócitos após tratamento com extrato de tendão bovino. MÉTODOS: Tendões bovinos foram usados para confecção do extrato e estocados a -80 °C. Células mesenquimais do estroma da medula óssea (BMSCs) de três doadores foram usadas para os testes de citotoxicidade por MTT e diferenciação celular por qPCR. RESULTADOS: Os dados mostram que células mesenquimais do estroma da medula óssea tratadas por até 21 dias em presença do extrato de tendão bovino diluído em concentrações crescentes (1:10, 1:50 e 1:250) promovem a ativação da expressão de biglican, colágeno tipo I e fibromodulina. CONCLUSÃO: Nossos resultados mostram que o extrato de tendão bovino é capaz de promover a diferenciação das BMSCs em tenócitos.

ABSTRACT OBJECTIVE: This study evaluated in vitro differentiation of mesenchymal stromal cells isolated from bone marrow, in tenocytes after treatment with bovine tendon extract. METHODS: Bovine tendons were used for preparation of the extract and were stored at -80 °C. Mesenchymal stromal cells from the bone marrow of three donors were used for cytotoxicity tests by means of MTT and cell differentiation by means of qPCR. RESULTS: The data showed that mesenchymal stromal cells from bone marrow treated for up to 21 days in the presence of bovine tendon extract diluted at diminishing concentrations (1:10, 1:50 and 1:250) promoted activation of biglycan, collagen type I and fibromodulin expression. CONCLUSION: Our results show that bovine tendon extract is capable of promoting differentiation of bone marrow stromal cells in tenocytes.

As far as the periimplant anatomy is considered, the question raised is whether or not healthy periimplant tissues present bleeding on probing (BOP). AIM: To assess if the criterion BOP is strictly related to periimplant disease (PID). METHODS: 134 patients were included in this study. All periimplant regions were clinically and radiographically evaluated. Patients were assigned to 3 groups based on radiographic and clinical aspects in the periimplant region: Group A (healthy-sites) - no signs of mucosal inflammation or bone loss; Group B (mucositis) - red and swollen mucosa, but no radiographic bone loss; Group C (periimplantitis) - radiographically confirmed pathological bone loss. After this classification, all periimplant sulci were probed at 4 sites (mesial, distal, buccal, lingual/palatal). Patients' mean age was 51.7±12.4 years, 77 women and 57 men, with a total of 486 osseointegrated endosseous implants. RESULTS: Groups A and C showed significant difference in age and implant region distribution (p=0.009 and p=0.008, respectively). After initial clinical and radiographic diagnosis of periimplant status, 33 (20.1%) regions showed BOP in group A. All regions in Group B presented BOP. In Group C, 41 (19.9%) regions showed no BOP. All groups differed significantly considering BOP as diagnosis parameter (p<0.0001). CONCLUSIONS: BOP was always present in inflamed mucosa, but it was not always absent in healthy mucosa. Not all periimplantitis regions showed BOP. Clinical and radiographic aspects must always be considered together for diagnosis of PID, even if BOP is absent.

Resumo O índice de sucesso em implantodontia varia significantemente entre indivíduos apresentando história prévia de periodontite. O objetivo deste estudo foi avaliar se pacientes com história de periodontite crônica (CP) são mais susceptíveis ao desenvolvimento de doença peri-implantar (PID) do que pacientes sem história de CP. Duzentos e quinze indivíduos, sob manutenção periodontal, apresentando 754 implantes osseointegrados, foram selecionados para este estudo. Os pacientes foram divididos em 2 grupos de acordo com o estado peri-implantar: Grupo Controle (pacientes sem PID, n=129) e Grupo PID (pacientes com PID, n=86). Todas as regiões peri-implantares foram clinicamente avaliadas, incluindo análise da inflamação na mucosa, edema e mobilidade do implante. Radiografias periapicais avaliaram a presença de perda óssea peri-implantar. De acordo com as características clínico/radiográficas, pacientes nos Grupos Controle e PID foram diagnosticados como tendo CP ou não. As variáveis nominais foram avaliadas pelo teste do qui-quadrado. A distribuição das variáveis numéricas foi avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk. O Teste t e o teste de Mann-Whitney foram utilizados para analisar a significância dos dados, em caso de distribuição normal e não-normal, respectivamente. Valor de p<0,05 foi considerado significante. Os resultados mostraram que há correlação altamente significativa entre história de CP e presença PID (p<0,0001), com risco 4 vezes maior de desenvolver PID para pacientes com CP. Pacientes com CP também mostraram maior sangramento à sondagem (p=0,002) e perda óssea peri-implantar (p=0,004) quando comparados a pacientes sem CP. Concluímos que história de periodontite crônica é um fator de alto risco ao desenvolvimento de doença peri-implantar, independente do gênero ou região de instalação do implante.

The success rates in implant dentistry vary significantly among patients presenting previous history of periodontitis. The aim of this study was to evaluate if patients with history of chronic periodontitis (CP) are more susceptible to peri-implant disease (PID) than those without history of CP. Two hundred and fifteen individuals, under periodontal maintenance, presenting 754 osseointegrated implants, were selected for this study. The patients were divided into two groups according to the peri-implant status: Control group (patients without PID; n=129) and PID group (patients with PID; n=86). All peri-implant regions were clinically evaluated, including analyses of mucosa inflammation, edema and implant mobility. Periapical radiography assessed the presence of peri-implant bone loss. According to the clinical/radiographic characteristics, patients in Control and PID groups were diagnosed as having CP or not. Nominal variables were evaluated by the chi-square test. The distribution of numeric variables was analyzed by Shapiro-Wilk test. Student's t-test and Mann-Whitney test were used to analyze significant differences for parametric and non-parametric data. A p-value <0.05 was considered significant. There was a highly significant correlation between CP history and PID (p<0.0001). Patients with CP had 4 times more chance of developing PID than patients with healthy periodontal tissues. Also, CP patients showed higher bleeding on probing (p=0.002) and bone loss around implant (p=0.004) when compared with patients without CP. In conclusion, history of CP is a high risk factor for the development of PID, irrespective of gender or region of implant placement.