A análise do polimorfismo de isozimas esterases foi usada para reportar a estrutura genética de duas populações remanecentes da espécie de árvore em extinção Aspidosperma polyneuron Müll.Arg. (Apocynaceae). Variação alélica foi detectada em três locos de isoesterases (Est-3, Est-9, e Est-10). A proporção de locos polimórficos de ambas as populações foi de 30%, sendo observado um desvio do equilíbrio de Hardy-Weinberg no loco Est-3 na população da região norte do Estado do Paraná. Uma distorção na segregação e um mais baixo nível de heterozigosidade observada e esperada nesta população foram atribuídos ao efeito do genótipo fundador. Os valores altos de identidade genética das populações do norte e noroeste do Estado estão de acordo com o baixo nível de divergência genética interpopulacional demonstrado pelo valor de F(ST) (0,03). O valor de F(IS) (0,23) indicou moderado nível de endocruzamentos. A. polyneuron pode ser indicada como um exemplo de espécie em extinção apresentando variação genética alta, contrastando com a variação genética baixa reportada sobre espécies em extinção. As isozimas esterases podem ser um bom marcador genético em estudos de populações naturais de A. polyneuron.

The population genetic structure of the endangered tree species Aspidosperma polyneuron Mull.Arg. (Apocynaceae) was reported based on analysis of esterase polymorphism in two remanant populations. Allelic variation was detected at three isoesterase loci (Est-3, Est-9, and Est-10). The proportion of polymorphic loci for both populations was 30% and deviation from Hardy-Weinberg equilibrium was observed for the Est-3 locus observed in the northern population. Segregation distortion and the lower level of observed and expected heterozygosity in this population were attributed to founder genotype. The high genetic identity values for northern and northwestern populations are in accordance with the low levels of interpopulation genetic divergence demonstrated by the F(ST) (0.03) value. The F(IS) value (0.23) indicated moderate levels of inbreeding. A. polyneuron can be indicated as an example of endangered species suggesting high genetic variation in contrast to the low genetic variation reported for endangered species. The esterase isozymes may be a good genetic marker for studies of natural A. polyneuron populations.

O presente estudo relata um método simples e promissor para multiplicação in vitro de Tabernaemontana fuchsiaefolia, uma espécie abundantemente encontrada no sul do Brasil, utilizada com propósitos medicinais e como fonte de compostos que podem ser usados para desenvolver novas drogas sintéticas. Para estimular o crescimento e a proliferação de caules, os explantes apicais e os hipocótilos foram cultivados em meio MS contendo diferentes concentrações das citocininas 6-benzil-amino-purina (BA) e cinetina (KIN) e suplementado com fluoroglucinol (1, 3, 5-hidroxibenzeno). A micropropagação de T. fuchsiaefolia foi positivamente influenciada por citocininas e a cinetina induziu à formação de mais caules por explantes do que a citoquinina BA. O efeito favorável de fluoroglucinol na indução de gemas apicais e laterais a partir dos hipocótilos foi verificado na ausência de cinetina ou em meio com todas as concentrações de cinetina testadas. Os caules recém-formados foram cortados dos explantes e o enraizamento satisfatório destes caules foi obtido após um tratamento com pulsos breves em 5,0 mg/l da auxina ácido 3-indolbutírico (IBA). A adição de fluoroglucinol no meio MS induziu ao enraizamento em 29% dos segmentos nodais transferidos para o meio MS na ausência de IBA, em 50% dos segmentos nodais transferidos para o meio MS contendo 0,5 mg/l de IBA e em segmentos nodais previamente submetidos aos breves pulsos de IBA.

This study describes a simple and promising for in vitro multiplication of Tabernaemontana fuchsiaefolia, a species abundantly found in southern Brazil utilized for medicinal purposes and as a source of compounds that may be used to develop new synthetic drugs. Apical and hypocotyl explants were cultured in MS medium containing different concentrations of the cytokinins benzylaminopurine (BA) and 6-furfurylaminopurine (kinetin), supplemented with phloroglucinol (1, 3, 5-hydroxybenzene) to stimulate growth and shoot proliferation. Cytokinin added to the culture media positively influenced the micropropagation of T. fuchsiaefolia.and kinetin induced more shoots per explant than BA cytokinin. A favorable effect of phloroglucinol on apical and lateral buds from hypocotyls was also achieved in medium containing no kinetin or in all kinetin concentrations tested. Short pulses of auxin 3-indolebutyric acid (IBA) 5.0 mg/l resulted in satisfactory rooting in apical microcuttings. The addition of phloroglucinol to MS medium induced rhizogenesis in 29% of the nodal segments transferred to MS medium in the absence of IBA and in 50% of the nodal segments transferred to MS medium containing 0.5 mg/l IBA and in nodal segments previously submitted to short pulses of IBA.

Polyacrylamide gel electrophoresis system (PAGE) and inhibition tests for biochemical characterization of alpha- and beta-esterases were used to obtain a functional classification of esterases fromAspidosperma polyneuron. The characterization of alpha- and beta-esterases from young leaves of A. polyneuron by the PAGE system showed fourteen esterase isozymes. The differential staining pattern showed that Est-2 isozyme hydrolyzes beta-naphthyl acetate; Est-6, Est-7 and Est-8 isozymes hydrolyze alpha-naphthyl acetate, and Est-1, Est-3, Est-4, Est-5, Est-9, Est-10, Est-11, Est-12, Est-13, and Est-14 isozymes hydrolyze both alpha- and b-naphthyl acetate. Inhibition pattern of a- and beta-esterases showed that Folidol is a more potent inhibitor that Malathion, while Thiamethoxan (an insecticide with organophosphorus-like action) acts as an Est-4 and Est-6 inhibitor and induces the appearance of Est-5 and Est-7 isozymes as more intensely stained bands. Inhibition tests showed that OPC insecticides inhibit or activate plant esterases. Thus, plant esterases may be used as bioindicators to detect the presence and toxicity of residues of topically applied insecticides in agriculture and may be valuable for monitoring pollutants in the environment.