RESUMO Conservantes naturais, como exemplo as enterocinas, têm sido foco de diversos estudos para uso na indústria de alimentos. No entanto, os meios comerciais utilizados para obtenção de enterocinas ainda são onerosos, sendo a grande desvantagem para produção em larga escala. Neste estudo foram desenvolvidas quatro formulações de meios de cultura contendo farinha de soja para obtenção de enterocina por Enterococcus durans MF5. A atividade antilisterial da enterocina MF5 obtida em meio soja e MRS (controle) foi testada contra Listeria monocytogenes CLIP2032 e L. innocua CLIP12612. O crescimento de E. durans (UFC/mL) foi significativamente afetado pelo tempo de incubação nos meios soja e MRS (p<0,05), porém a composição do meio não afetou o desenvolvimento celular do microrganismo produtor de enterocina. Ao avaliar os genes que codificam a síntese de enterocina, foram obtidos resultados positivos para enterocina A, B, P e X. Quando tratada com enzimas proteolíticas (α-quimotripsina, protease e proteinase-K), a enterocina foi inativada, confirmando seu caráter proteico. A atividade antilisterial das enterocinas obtidas em meio de soja foi de até 6.400 AU mL-1. Enterocina produzida nos meios de soja M1 e M2 apresentaram atividade antibacteriana na concentração de 1 mg/mL após 6 h de incubação. Assim, mostramos que meios de cultura formulados com farinha de soja são substratos promissores para a produção de enterocinas que permitiriam a expansão do protocolo em larga escala.
ABSTRACT Natural preservatives, such as enterocins, have been the focus of several studies for use in the food industry. However, the commercial media used to obtain enterocins are still expensive, presenting a disadvantage for large-scale production. In this study was developed four formulations of culture media containing soybean flour for obtaining Enterococcus durans enterocins. The antilisterial activity of E. durans MF5 enterocins obtained in soybean and MRS media (control) was characterized, with Listeria monocytogenes CLIP2032 and L. innocua CLIP12612 as the bacterial strains. The growth of E. durans (CFU/mL) was significantly affected by the incubation time in the soybean and MRS media (p <0.05), but the composition of the media did not affect the cell development of the enterocin-producing microorganism. When evaluating the genes encoding enterocin synthesis, positive results were obtained for enterocin A, B, P, and X. When treated with proteolytic enzymes (α-chymotrypsin, protease, and proteinase-K), enterocin was inactivated, confirming its protein character. The antilisterial activity of the enterocins obtained in soybean media was up to 6,400 AU mL-1. Enterocins from soybean media M1 and M2 showed antibacterial activity at a concentration of 1 mg/mL after 6 h incubation. Thus, we show that culture media formulated with soybean flour are promising substrates for enterocin production that would allow the protocol to be expanded on a large scale.