ABSTRACT Aspergillus fumigatus is a respiratory pathogen, which has the potential to cause brooder pneumonia in poultry chicks and aspergillosis in birds and farmers. Frequent and irrational use of antifungals has led to the development of resistance in the fungal species. The present study aimed to evaluate the antifungal activity of essential oils (EOs) from four different spices against multi-drug resistant (MDR) A. fumigatus isolated from 40 poultry feed samples. Twenty fungal isolates were identified to be A. fumigatus based on the macroscopic and microscopic characteristics, which were confirmed by targeting and amplifying the species-specific rodA gene (313 bp). Five (5/20) isolates were found to be MDR by the disk diffusion method. EOs were tested as an alternative strategy for 5 MDR isolates of A. fumigatus. Clove EO provided better activity by 6 log10 reduction for 30-90 min exposure as compared to other EOs, therefore, shortlisted for well-diffusion and minimum inhibitory concentration (MIC) method. Clove EO provided promising results as compared to fluconazole, amphotericin B, ketoconazole, nystatin and voriconazole as its mean ZOI (39.6 ± 6.34) were better than all other commercial antifungals (p< 0.001). Mean MIC was reported to be 0.195 ± 0.11 µl/ml. Safety testing of the EO produced 74-82% cell viability for the range of 0.390 - 0.097 µl/ml as compared to DMSO. Findings of the present study highlight that clove EO can be source of a good therapeutic agent for infections of MDR isolates of A. fumigatus. pathogen farmers species (EOs multidrug multi drug (MDR A 4 samples characteristics speciesspecific specific 313 (31 bp. bp . bp) 5/20 520 20 (5/20 method log log1 3090 30 90 30-9 therefore welldiffusion well (MIC fluconazole B ketoconazole 39.6 396 39 (39. 6.34 634 34 p< p (p 0.001. 0001 0.001 0 001 0.001) 0195 195 0.19 011 11 0.1 µlml µl ml 7482% 7482 74 82% 82 74-82 0390 390 0.39 0097 097 0.09 DMSO 31 (3 5/2 52 2 (5/2 309 3 9 30- 39. (39 6.3 63 000 0.00 00 019 19 01 1 0. 748 7 8 74-8 039 0.3 009 09 0.0 ( 5/ (5/ 6. 74- 03 (5
RESUMO Aspergillus fumigatus é um patógeno respiratório, que tem o potencial de causar pneumonia incubadora em pintos e aspergilose em aves e criadores. O uso frequente e irracional de antifúngicos tem levado ao desenvolvimento de resistência nas espécies fúngicas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antifúngica de óleos essenciais (OEs) de quatro diferentes especiarias contra A. fumigatus multirresistente (MDR) isolado de 40 amostras de ração de aves. Vinte isolados fúngicos foram identificados como A. fumigatus com base nas características macroscópicas e microscópicas, que foram confirmadas pelo direcionamento e amplificação do gene rodA espécie-específico (313 pb). Cinco (5/20) isolados foram considerados MDR pelo método de difusão em disco. OEs foram testados como uma estratégia alternativa para 5 isolados MDR de A. fumigatus. Clove EO forneceu melhor atividade por redução de 6 log10 para exposição de 30-90 min em comparação com outros OEs, portanto, pré-selecionado para difusão e método de concentração inibitória mínima (MIC). Clove EO forneceu resultados promissores em comparação com fluconazol, anfotericina B, cetoconazol, nistatina e voriconazol, com ZOI médio (39,6 ± 6,34) melhor do que todos os outros antifúngicos comerciais (p < 0,001). A MIC média foi de 0,195 ± 0,11 µl/ml. O teste de segurança do EO produziu 74-82% de viabilidade celular para a faixa de 0,390 - 0,097 µl/ml em comparação com DMSO. Os resultados do presente estudo destacam que o EO de cravo pode ser fonte de um bom agente terapêutico para infecções de isolados multirresistentes de A. fumigatus. respiratório criadores fúngicas (OEs (MDR 4 microscópicas espécieespecífico espécie específico 313 (31 pb. pb . pb) 5/20 520 20 (5/20 disco log log1 3090 30 90 30-9 portanto préselecionado pré selecionado MIC. (MIC) fluconazol B cetoconazol voriconazol 39,6 396 39 (39, 6,34 634 34 p 0,001. 0001 0,001 0 001 0,001) 0195 195 0,19 011 11 0,1 µlml µl ml 7482% 7482 74 82% 82 74-82 0390 390 0,39 0097 097 0,09 DMSO 31 (3 5/2 52 2 (5/2 309 3 9 30- (MIC 39, (39 6,3 63 000 0,00 00 019 19 01 1 0, 748 7 8 74-8 039 0,3 009 09 0,0 ( 5/ (5/ 6, 74- 03 (5