O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência de ovinos soropositivos para o vírus da língua azul (VLA) no Estado do Ceará, Brasil, e analisar as proteínas imunogênicas das cepas virais circulantes nesses rebanhos. O teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA) foi utilizado para pesquisar 271 amostras de soro oriundas de 16 rebanhos. Os resultados demonstraram que 27,3% (74/271) das amostras analisadas apresentaram anticorpos contra o agente e 68,8% (11/16) das propriedades tiveram animais positivos. O immunoblotting (IB) foi utilizado para analisar as proteínas imunogênicas do VLA a partir dos soros de animais positivos no IDGA. Os soros demonstraram forte reação contra a proteína viral VP2. Para o VLA, das sete proteínas estruturais, a VP2 é a principal a estimular a resposta imune protetora. Concluiu-se que a soropositividade para a língua azul (LA) nos rebanhos ovinos estudados no Ceará é alta, apesar dos animais não apresentarem sinais clínicos, indicativo de que o vírus ocorra de forma endêmica. Além disso, a resistência à doença apresentada pelos animais pode estar relacionada com a forte reação imunológica desses à proteína VP2. Sendo assim, outros estudos são necessários para melhor esclarecer a situação epidemiológica da LA no país, através da identificação dos vetores e sorotipos virais circulantes nas diferentes regiões.

The objective of this work was to verify the occurrence of sheep serologically positive for bluetongue virus (BTV) in the state of Ceará, Brazil, and analyze immunogenic proteins of circulating viral strains in these flocks. The agar gel immunodifusion test (AGID) was used to examine 271 serum samples from 16 herds. The results demonstrated that 27.3% (74/271) of the analyzed samples presented antibodies for the agent, and that 68.8% (11/16) of the properties presented positive animals. Immunoblotting (IB) was used to analyze the immunogenic proteins of BTV derived from AGID positive sera. Sera showed strong reaction against viral protein VP2. Of the seven BTV structural proteins, VP2 is the major protein to elicit protective immune responses. It was concluded that bluetongue (BT) seropositivity in sheep flocks studied in Ceará is high, despite that the animal's do not show clinical signs, indicating that it occurs in an endemic form. The animals' resistance to the disease may be related to the strong immune response to the protein VP2. Therefore, further studies are needed to better clarify the epidemiological situation of BT in Brazilian sheep flocks, through the identification of viral vectors and serotypes circulating in different regions.

RESUMO Este trabalho teve como objetivo comparar os resultados do diagnóstico do Lentivírus Caprino, por Imunodifusão em Gel de ágar - IDGA, utilizando o kit comercial americano e o kit nacional produzido com cepa CAEV Cork. Foram utilizados dois rebanhos, sendo um da Embrapa Caprinos submetido a doze anos de programa de controle e um outro rebanho infectado pelo CAEV, que não teve nenhuma ação prévia de controle. Analisando os resultados dos antígenos (nacional e americano) no rebanho não controlado, verificou-se que o antígeno comercial americano, quando foi utilizado pela primeira vez para o diagnóstico apresentou resultados mais significativos do que o nacional. Já no rebanho controlado, o antígeno nacional detectou um número maior de positivos. Analisando os dados do trabalho verificou-se a importância da alternância de proteínas imunogênicas presentes no antígeno dos kits de diagnóstico usados em programas de controle da Artrite Encefalite Caprina, haja vista a variação das respostas ao diagnóstico segundo a proteína expressa pelo vírus.

ABSTRACT Caprine arthritis encephalitis is an infection caused by lentivirus and found on all the continents with a high prevalence in the more technified milk production flocks, causing considerable economic losses for goat production. The aim of this work was the comparison, by Agar gel immunodiffusion (AGID), between the diagnosis using a national test produced with the strain CAEV Cork and an American commercial kit in a controlled flock and in another flock without a control program for goat lentivirosis. The controlled flock had been under control for twelve years by Embrapa Goats, while the other flock was infected by CAEV and had not undergone any previous program of control. Analyzing the results of the antigens (national and American) in the uncontrolled flock, it was verified that when the antigen was used for the first time, the American commercial antigen showed more significative results than the national one. In the controlled flock the national antigen detected a higher number of cases. Analysis of the data revealed the importance of the diagnosis kits in caprine arthritis encephalitis control programs, as seen in the variation of the responses to the diagnosis according to the expressed protein for the virus.

RESUMO A Maedi-Visna é uma doença persistente, progressiva e debilitante em ovinos causada por lentivírus que resulta primariamente em pneumonia intersticial e pode estar associada a mamite e encefalite. Este trabalho teve como objetivo produzir antígeno a partir do vírus Maedi-Visna total para utilização em ensaios imunoenzimáticos. Na produção do antígeno foram utilizados cultivos primários de células de membrana sinovial caprina, infectados com amostra padrão (MVVK1514). As suspensões virais foram tituladas e o antígeno semipurificado pela precipitação em PEG (polietilenoglicol) e ultracentrifugação. Foram realizadas eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e Western Blotting (WB). A SDS-PAGE de origem viral e do meio de cultivo resultou em várias bandas protéicas. No WB constatou-se a presença de sete proteínas imunogênicas de pesos moleculares aproximados de 16, 27, 35, 50, 42, 63 e 123 kDa. Destas, três proteínas (16, 27 e 50 kDa) apresentaram boa reação imunogênica. O trabalho abre perspectivas da utilização de testes imunoenzimáticos com maior sensibilidade para lentivírus ovino.

ABSTRACT Maedi-Visna is a persistent, progressive and debilitating disease in sheep caused by lentivirus which results primarily in interstitial pneumonia and may be associated with mastitis and encephalitis. This study aimed to produce antigen from the Maedi-Visna virus for use in immunosorbent assay. The antigen was produced using secondary cultures of cells from sheep synovial membrane, infected with the standard sample (MVV-K1514). The suspensions were titered and the viral antigen was semipurified by precipitation in PEG (polyethylene) and ultracentrifugation. The isolates were then submitted to polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE) and the western blot (WB) technique. The SDS-PAGE of viral origin and of the culture medium resulted in several protein bands. The WB revealed the presence of 7 immunogenic proteins of approximate molecular weights of 16, 27, 35, 50, 42, 63 and 123 kDa. Of these, 3 proteins (16, 27 and 50 kDa) showed good immunogenic reaction. This work opens up prospects of using enzyme immunoassay with greater sensitivity to lentivirus-infected sheep.