RESUMO: Este estudo teve como objetivo detectar a presença e distribuição de mecA em Staphylococcus spp. no ambiente de produção leiteira em fazendas no Brasil. Foram analisadas 335 amostras de leite de vaca com mastite, 15 amostras de swabs de narinas e mãos de ordenhadores, 14 swabs de teteiras e nove swabs de baldes de ordenha. Inicialmente, as amostras foram submetidas a análises microbiológicas para detecção de Staphylococcus spp. e os isolados positivos foram identificados por PCR para S. aureus e mecA. Todos os isolados de S. aureus portadores do gene mecA foram submetidos à análise de macrorrestrição do DNA por Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE). O gene mecA foi detectado em 6/335 (1,78%) de leite de vaca com mastite, 5/15 (33,3%) e 5/15 (33,3%) de swab de narinas e de mãos, e 4/14 (28,5%) de teteiras. A genotipagem de MRSA realizada por PFGE identificou um total de sete pulsotipos, que foram agrupados em dois clusters. Este estudo identificou a ocorrência e disseminação de MRSA no ambiente das fazendas leiteiras, e também a existência de perfis genéticos distintos entre os isolados.

ABSTRACT: This study detected the presence and distribution of mecA in Staphylococcus spp. in the dairy production environment at farm level in Brazil. We analyzed 335 samples of mastitis cow milk, 15 samples of nostrils and hand swabs from milkers, 14 teat cup swabs, and 9 milking buckets swabs. Initially, the samples were subjected to microbiological analysis to detect Staphylococcus spp. and then S. aureus and mecA positive isolates were identified by PCR. All S. aureus isolates carrying the mecA genes were subjected to DNA macro-restriction analysis by Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE). The mecA gene was detected in 6/335 (1.78%) of mastitis cow milk, 5/15 (33.3%), and 5/15 (33.3%) of nostrils and hand swab, and 4/14 (28.5%) of the teat cup isolates. MRSA genotyping was performed by PFGE, a total of seven pulsotypes were grouped in two clusters. This study identified the occurrence and spread of MRSA at dairy environment of farms, and also the existence of distinct genetic profiles between isolates.

RESUMO: Objetivou-se com este estudo investigar a correlação genética de 18 cepas de Staphylococcus aureus isoladas de infecções intramamárias em vacas primíparas e de locais extramamários em cinco propriedades leiteiras através das técnicas de PCR por sequências palindrômicas extragênicas repetitivas (rep-PCR), usando iniciadores RW3A, e de eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), usando a endonuclease SmaI. Os isolados também foram avaliados in vitro quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos beta-lactâmicos (penicilina e oxacilina). A tipagem por rep-PCR foi altamente discriminatória (valor D = 0,9804) e um total de 15 padrões foram detectados. Os isolados de S. aureus foram agrupados em três grupos diferentes (A a C), com 80% de similaridade. A técnica de PFGE também foi altamente discriminatória (valor D = 0,9667) e um total de 13 padrões foi observado. A análise do dendrograma com um coeficiente de similaridade de 80% gerou dois grupos diferentes (A e B). Além disso, cepas clonais isoladas do leite foram identificadas na mesma propriedade pelos dois métodos de tipificação e, apesar da presença de cepas dominantes, nossos resultados sugerem uma alta diversidade genética dentre as cepas de S. aureus analisadas. Um total de 15, dos 18 (83%) isolados, eram resistentes à penicilina e um dos 18 (6%) à oxacilina. Assim, esses achados confirmam a ocorrência de uma alta diversidade genética de cepas de S. aureus nas propriedades e a presença de cepas clonalmente relacionadas apenas na mesma propriedade, enfatizando uma variedade de perfis genotípicos entre os isolados.

ABSTRACT: This research aimed to investigate the genotypic relatedness of 18 Staphylococcus aureus strains isolated from intramammary infections in primiparous cows and extramammary sites on five dairy herds by rep-PCR using RW3A primers, and by PFGE using the endonuclease SmaI. The isolates were also evaluated in vitro for the susceptibility against beta-lactam antimicrobials drugs (penicillin and oxacillin), considering that beta-lactams are frequently used for treating staphylococcal intrammamary infections. The rep-PCR typing was highly discriminatory (D value= 0.9804) and a total of 15 patterns were detected. The PFGE method was also highly discriminatory (D value= 0.9667) and a total of 13 patterns were observed. A total of 15 out of 18 (83%) isolates were resistant to penicillin and one out of 18 (6%) to oxacillin. In conclusion, these findings confirmed the occurrence of a high genetic diversity of S. aureus strains at the herds and the presence of clonally-related strains only at the same herd, emphasizing a variety of genotypic profiles among the isolates.

RESUMO: Na região Nordeste do Brasil, a cadeia de produção de queijo artesanal é uma atividade local importante para pequenos produtores. Staphylococcus resistentes à meticilina são responsáveis por causar infecções em animais e seres humanos. Neste estudo descreve-se a primeira detecção de S. epidermidis resistente à meticilina isolado da cavidade nasal de um manipulador de queijo coalho elaborado com leite de cabra no Nordeste do Brasil. Este relato destaca a importância da adoção de medidas de biossegurança por manipuladores de queijo, a fim de reduzir possíveis contaminações e a disseminação de patógenos na cadeia produtiva deste tipo de queijo artesanal no Brasil.

ABSTRACT: In the Northeastern Brazil, artisanal cheese production is an important local economic activity for small producers. Methicillin-resistant Staphylococcus is responsible for causing infection in animals and humans. This study described the first detection of methicillin-resistant S. epidermidis isolated in the nasal cavity of a handler of coalho cheese made with goat’s milk in Northeastern Brazil. This brief communication highlighted the importance of adopting biosafety measures by cheese handlers, in order to reduce possible contamination and the spread of pathogens in the production chain of this type of artisanal cheese in Brazil.

RESUMO O alfaherpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) é o agente etiológico responsável por graves infecções que comprometem os tratos respiratório e genital dos bovinos acometidos. Com o objetivo de estimar a soroprevalência de BoHV-1 e identificar os fatores de risco associados em propriedades leiteiras do município de Senador Guiomard, Acre, foi realizado o presente estudo, por meio da análise de 180 amostras de soro sanguíneo submetidas à pesquisa de anticorpos anti-BoHV-1 pelo teste de vírus neutralização (VN) e por meio da avaliação do questionário epidemiológico aplicado nas oito propriedades investigadas. A prevalência de soropositividade para BoHV-1 foi de 61,1% variando de 43,3 a 86,2% entre as propriedades analisadas. A variável ausência de assistência veterinária apresentou associação estatisticamente significativa (odds ratio — OR = 2,10; p < 0,001) com a infecção pelo alfaherpesvírus. Os resultados demonstram que a frequência de BoHV-1 é alta e precisa ser controlada através de medidas profiláticas e de manejo sanitário.

ABSTRACT Bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) is the etiological agent responsible for serious infections that compromise the respiratory and genital tracts of affected cattle. In order to estimate the seroprevalence of BoHV-1 and to identify the associated risk factors in dairy farms in the city of Senador Guiomard, Acre, Brazil, the present study was carried out through the analysis of 180 blood serum samples submitted to the screening of anti-BoHV-1 by the virus neutralization test (VN) and by means of the evaluation of the epidemiological questionnaire applied in the eight investigated properties. The prevalence of seropositivity for BoHV-1 was 61.1%, ranging from 43.3 to 86.2% among the analyzed properties. The variable absence of veterinary assistance showed statistically significant association (odds ratio — OR = 2.10; p < 0.001) with alphaherpesvirus infection. The results demonstrate that the frequency of BoHV-1 is high and needs to be controlled through prophylactic and health management measures.