Abstract The present study evaluated the influence of carvacrol, terpinene-4-ol, and chlorhexidine on the physical-chemical properties of titanium surfaces, cell viability, proliferation, adhesion, and spreading of fibroblasts and osteoblasts in vitro. Titanium surfaces (Ti) were treated with Carvacrol (Cvc), Terpinen-4-ol (T4ol), Chlorhexidine (CHX), DMSO, and ultrapure water (Control group). Physical-chemical modifications were evaluated by surface wettability, the surface free energy (SFE) calculated from the contact angle values using the Owens-Wendt-Rabel-Kaeble (OWRK) equation, scanning electron microscopy (SEM) and energy dispersive spectrometry probe (EDS) system. Cells were seeded onto Ti-treated surfaces and incubated for 24 h and 72 h, then evaluated by Alamar blue assay and fluorescence microscopy. Surfaces treated with Cvc and T4ol showed the presence of Na, O, and Cl. All surfaces showed hydrophilic characteristics and SFE values between 5.5 mN/m and 3.4 mN/m. On the other hand, EDS peaks demonstrated the presence of O and Cl after CHX treatment. A reduction of cell viability and adhesion was noted on titanium surfaces treated with CHX after 24 and 72h. In conclusion, the results indicate that the decontamination with Cvc and T4ol on Ti surfaces does not alter the surface proprieties and allows an adequate interaction with cells involved in the re-osseointegration process such as fibroblasts and osteoblasts. carvacrol terpinene4ol, terpinene4ol terpineneol terpinene 4 ol, ol terpinene-4-ol physicalchemical physical chemical proliferation vitro (Ti Cvc, , (Cvc) Terpinen4ol Terpinenol Terpinen T4ol, Tol T (T4ol) CHX, (CHX) DMSO Control group. group . group) Physicalchemical Physical wettability (SFE OwensWendtRabelKaeble Owens Wendt Rabel Kaeble OWRK (OWRK equation SEM (SEM (EDS system Titreated 2 7 Na 55 5 5. mNm mN m 34 3 3. hand treatment 72h conclusion reosseointegration re osseointegration (Cvc (T4ol (CHX

Resumo O presente estudo avaliou a influência do carvacrol, terpineno-4-ol e clorexidina nas propriedades físico-químicas de superfícies de titânio, viabilidade celular, proliferação, adesão e esplhamento de fibroblastos e osteoblastos in vitro. Superfícies de titânio (Ti) foram tratadas com Carvacrol (Cvc), Terpinen-4-ol (T4ol), Clorexidina (CHX), DMSO e água ultrapura (Grupo Controle). As modificações físico-químicas foram avaliadas pela molhabilidade da superfície, a energia livre de superfície (ELS) calculada a partir dos valores do ângulo de contato usando a equação de Owens-Wendt-Rabel-Kaeble (OWRK), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectroscopia de raios X por energia dispersiva (EDS). As células foram semeadas em superfícies tratadas com Ti e incubadas por 24 h e 72 h, e avaliadas pelo ensaio Alamar blue e microscopia de fluorescência. As superfícies tratadas com Cvc e T4ol mostraram a presença de Na, O e Cl. Todas as superfícies apresentaram características hidrofílicas e valores de ELS entre 5,5 mN/m e 3,4 mN/m. Por outro lado, os picos de EDS demonstraram a presença de O e Cl após o tratamento com CHX. Uma redução da viabilidade celular e adesão foi observada em superfícies de titânio tratadas com CHX após 24 e 72h. Em conclusão, os resultados indicam que a descontaminação com Cvc e T4ol em superfícies de Ti não altera as propriedades da superfície e permite uma interação adequada com células envolvidas no processo de reosseointegração como fibroblastos e osteoblastos. carvacrol terpineno4ol terpinenool terpineno 4 ol físicoquímicas físico químicas proliferação vitro (Ti Cvc, , (Cvc) Terpinen4ol Terpinenol Terpinen T4ol, Tol T (T4ol) CHX, (CHX) Grupo Controle. Controle . Controle) (ELS OwensWendtRabelKaeble Owens Wendt Rabel Kaeble OWRK, OWRK (OWRK) MEV (MEV EDS. (EDS) 2 7 fluorescência Na 55 5 5, mNm mN m 34 3 3, lado 72h conclusão (Cvc (T4ol (CHX (OWRK (EDS

Abstract Candida infection is an important cause of morbidity and mortality in immunocompromised patients. The increase in its incidence has been associated with resistance to antimicrobial therapy and biofilm formation. The aim of this study was to evaluate the efficacy of tea tree oil (TTO) and its main component – terpinen-4-ol – against resistant Candida albicans strains (genotypes A and B) identified by molecular typing and against C. albicans ATCC 90028 and SC 5314 reference strains in planktonic and biofilm cultures. The minimum inhibitory concentration, minimum fungicidal concentration, and rate of biofilm development were used to evaluate antifungal activity. Results were obtained from analysis of the biofilm using the cell proliferation assay 2,3-Bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide (XTT) and confocal laser scanning microscopy (CLSM). Terpinen-4-ol and TTO inhibited C. albicans growth. CLSM confirmed that 17.92 mg/mL of TTO and 8.86 mg/mL of terpinen-4-ol applied for 60 s (rinse simulation) interfered with biofilm formation. Hence, this in vitro study revealed that natural substances such as TTO and terpinen-4-ol present promising results for the treatment of oral candidiasis.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade antifúngica do Terpinen4-ol associado à nistatina em biofilmes simples e misto, formados por Candida albicans e Candida tropicalis, bem como o efeito do terpinen-4-ol na adesão em células orais e atividade enzimática. As concentrações inibitórias mínimas e as concentrações fungicidas mínimas do terpinen-4-ol e da nistatina em Candida albicans e Candida tropicalis foram determinadas pelo método de microdiluição em caldo, juntamente com a atividade sinérgica (método do tabuleiro de “xadrez”). Biofilmes simples e misto foram preparados usando o modelo de placa de microtitulação estática e quantificados por unidades formadoras de colônias (CFU/mL). O efeito do Terpinen-4-ol na adesão de Candida albicans e Candida tropicalis em co-cultura com queratinócitos orais (NOK Si) foi avaliado, bem como a atividade enzimática, medindo o tamanho da zona de precipitação, após o crescimento em ágar fosfolipase, protease e hemolisina. O terpinen-4-ol (4.53 mg mL-1) e a nistatina (0,008 mg mL-1) conseguiram inibir o crescimento de biofilmes e um efeito antifúngico sinérgico foi demonstrado com a associação de fármaco, reduzindo a concentração inibidora de nistatina até 8 vezes em biofilme simpes de Candida albicans e 2 vezes em biofilme misto. Uma pequena diminuição na adesão de Candida tropicalis em células NOK Si foi mostrada após o tratamento com terpinen-4-ol e a nistatina teve um efeito maior para ambas as espécies. Para a atividade enzimática, as drogas não apresentaram ação. O efeito potencializado pela combinação de terpinen-4-ol e nistatina e a redução de adesão evidenciam seu potencial como agente anti-fúngico.

Abstract The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of Terpinen-4-ol associated with nystatin, on single and mixed species biofilms formed by Candida albicans and Candida tropicalis, as well as the effect of terpinen-4-ol on adhesion in oral cells and the enzymatic activity. The minimum inhibitory concentrations and minimum fungicide concentrations of terpinen-4-ol and nystatin on Candida albicans and Candida tropicalis were determined using the microdilution broth method, along with their synergistic activity (“checkerboard” method). Single and mixed species biofilms were prepared using the static microtiter plate model and quantified by colony forming units (CFU/mL). The effect of Terpinen-4-ol in adhesion of Candida albicans and Candida tropicalis in coculture with oral keratinocytes (NOK Si) was evaluated, as well as the enzymatic activity by measuring the size of the precipitation zone, after the growth agar to phospholipase, protease and hemolysin. Terpinen-4-ol (4.53 mg mL-1) and nystatin (0.008 mg mL-1) were able to inhibit biofilms growth, and a synergistic antifungal effect was showed with the drug association, reducing the inhibitory concentration of nystatin up to 8 times in single biofilm of Candida albicans, and 2 times in mixed species biofilm. A small decrease in the adhesion of Candida tropicalis in NOK Si cells was showed after treatment with terpinen-4-ol, and nystatin had a greater effect for both species. For enzymatic activity, the drugs showed no action. The effect potentiated by the combination of terpinen-4-ol and nystatin and the reduction of adhesion provide evidence of its potential as an anti-fungal agent.

Resumo Introdução O consumo frequente de açucares e a presença de Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus estão correlacionados com maior experiência de cárie. Objetivo Elucidar o efeito de diferentes carboidratos fermentáveis na biomassa e acidogenicidade de biofilmes formados por S. mutans e S. sobrinus. Material e método Biofilmes única e dupla- espécie de S. mutans ATCC 25175 e S. sobrinus ATCC 27607 em concentrações iguais cresceram no fundo de placas de microtitulação por 24 h a 37 °C em microaerofilia. Maltose, sacarose, glicose e lactose foram adicionados a 2%. BHI caldo (0.2% glicose) foi usado como controle negativo. Acidogenicidade foi avaliada por meio da medição do pH do meio de cultura após 24 h, imediatamente após troca de meio e nas próximas 1 h e 2 h. Coloração por cristal violeta foi usada como indicador do total de biomassa aderida, após 24 h de incubação. Os dados foram analisados por teste ANOVA two way e Teste de Bonferroni. O nível de significância foi de 5%. Resultado Todos os carboidratos resultaram em maior formação de biomassa em ambos os tipos de biofilme (única ou dupla- espécie), quando comparado ao grupo controle. Sacarose, lactose e maltose mostraram maior acidogenicidade que o grupo controle após 24 h nos biofilmes única ou dupla-espécie, apenas após 24 h. Conclusão Os achados indicam que o tipo de biofilme (única ou dupla- espécie) e o tipo de carboidrato usado podem influenciar tanto na quantidade de biomassa formada quanto na taxa de redução do pH.

Abstract Introduction Frequent consumption of sugars and the presence of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus are correlated with higher caries experience. Objective The aim of this pilot study was to elucidate the effect of different fermentable carbohydrates on biomass formation and acidogenicity of S. mutans and S. sobrinus biofilms. Material and method Single and dual-species biofilms of S. mutans ATCC 25175 and S. sobrinus ATCC 27607 were grown at the bottom of microtiter plates at equal concentrations for 24 h at 37 °C under micro-aerobic atmosphere. Carbohydrates were added at 2% concentration: maltose, sucrose, glucose and lactose. BHI Broth (0.2% glucose) was used as negative control. Acidogenicity was assessed by measuring the pH of spent culture medium after 24 h, immediately after refreshing the culture medium and for the next 1 h and 2 h. Crystal violet staining was used as an indicator of the total attached biofilm biomass after 24 h incubation. Data were analyzed by two-way ANOVA followed by Bonferroni post hoc test. Significance level was set at 5%. Result All carbohydrates resulted in higher biomass formation in single- and dual-species biofilms when compared to the control group. Sucrose, lactose and maltose showed higher acidogenicity than the control group in both single- and dual-species biofilms after 24 h. Conclusion These findings indicate that the type of biofilm (single- or dual-species) and the carbohydrate used may influence the amount of biomass formed and rate of pH reduction.

The genetic diversity of C. albicans oral isolates from 75 healthy schoolchildren from eight schools located in different geographic areas of Piracicaba city, São Paulo state, Brazil, was established using isoenzymes marker (Multilocus Enzyme Electrophoresis - MLEE) and cluster analysis. Patterns of monoclonal and polyclonal oral colonization by C. albicans within and between groups of schoolchildren were identified. However, significant divergence between the observed and the expected genotypic frequencies (Hardy-Weinberg equilibrium test) was not detected in the geographically adjacent groups, suggesting the hypothesis that populations of healthy schoolchildren do not correspond to the selection factor (differential survival) of strains. Two highly polymorphic and distantly genetically related taxa (A and B) were identified within the total population of yeasts, each contained subgroups (A1, A2, A3, A4, B1 and B2) and clusters of moderately related strains (from I to X), suggesting the existence of strains restricted or not to certain groups of geographically limited, healthy students. However, the coexistence of identical strains in healthy schoolchildren from the same school (geographically related) reinforces the hypothesis of oral transmission, where the sources of propagation could be explored. Furthermore, this could also be used in current and retrospective analyses of C. albicans isolated from immunocompetent and immunocompromised people, in order to detect commensal or potentially pathogenic yeast groups, predominantly in candidiasis, and in the development of strategies to prevent transmission or human propagation.

O objetivo deste estudo foi a avaliação da atividade antimicrobiana de diferentes marcas e composições de cones de guta-percha e pastas à base de hidróxido de cálcio utilizados em endodontia. Os materiais avaliados foram: cones de guta-percha contendo hidróxido de cálcio (RoekoTM), cones de guta-percha contendo clorexidina (RoekoTM), duas marcas de cones de guta-percha (Endo PointsTM e RoekoTM) e duas pastas à base de hidróxido de cálcio (CalenTM e Calen/PMCC TM). Os testes antimicrobianos incluíram 5 espécies de microrganismos: Escherichia coli (ATCC10538), Staphylococcus epidermidis (ATCC12228), Staphylococcus aureus (ATCC6538), Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) e Micrococcus luteus (ATCC9341). O método empregado foi o de difusão em Ágar. As placas foram mantidas em temperatura ambiente por 2 horas para pré-difusão e então incubadas a 37°C por 24 horas. O gel de cloreto de trifeniltetrazólio foi acrescentado para otimização e as zonas de inibição foram medidas. A análise estatística foi realizada pela análise de variância e pelo teste de Tukey. Os resultados obtidos demonstraram que todas as espécies microbianas usadas foram inibidas pelos cones de guta-percha com clorexidina e pelas pastas à base de hidróxido de cálcio (CalenTM e Calen/PMCC TM), com resultados similares entre os materiais (p > 0.05). Nenhuma atividade antimicrobiana foi observada para os demais grupos. Concluiu-se que os cones de guta-percha com clorexidina apresentaram atividade antimicrobiana, enquanto os cones com hidróxido de cálcio não demonstraram esta propriedade.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of different trademarks and compositions of gutta-percha points and calcium hydroxide pastes used in endodontic therapy. The evaluated material consisted of gutta-percha points containing calcium hydroxide (RoekoTM), gutta-percha points containing chlorhexidine (RoekoTM), two convencional gutta-percha points (Endo PointsTM and RoekoTM) and two calcium hydroxide pastes (CalenTM and Calen/PMCC TM). Antimicrobial tests included five species of microorganisms: Escherichia coli (ATCC10538), Staphylococcus epidermidis (ATCC12228), Staphylococcus aureus (ATCC6538), Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853), and Micrococcus luteus (ATCC9341). The Agar difusion method was employed. The plates were kept at room temperature for 2 h for prediffusion and then incubated at 37°C for 24 h. The triphenyltetrazolium chloride gel was added for optimization and the zones of inhibition were measured. Statistical evaluation was carried out using analysis of variance and Tukey Test. The obtained results showed that all microbial species used in the study were inhibited by the gutta-percha points containing chlorhexidine and by the calcium hydroxide pastes (CalenTM and Calen/PMCC TM), with similar results (p > 0.05). No antimicrobial activity was observed for the other groups. It was concluded that the gutta-percha points containing chlorhexidine presented antimicrobial activity, whereas the gutta-percha points containing calcium hydroxide did not.

Ciclosporina A (CsA) é um potente imunossupressor usado no transplante de órgãos e no tratamento de várias doenças auto-imunes. Recentes estudos têm demonstrado que a CsA estimula a deposição de cemento na superfície radicular. O objetivo deste estudo foi de avaliar a espessura do cemento periapical e largura do forame apical em ratos tratados com CsA. Os ratos pesavam 50 g e foram tratados com doses diárias de 10 mg/kg de peso corporal de CsA no período de 60 dias. O cemento do primeiro molar inferior foi examinado histologicamente e morfometricamente por análises de cortes em parafina com 5µm de espessura no sentido vestíbulo-lingual e corados com hematoxilina e eosina. As análises histométricas e estereológicas revelaram a presença de largos depósitos de cemento em todas as superfícies radiculares, particularmente maior na região periapical e obliterando o forame. A densidade volumétrica dos cementoblastos não foi aumentada. No período de 5 a 90 dias após o término da terapia com CsA, não houve redução na espessura do cemento. Estes resultados sugerem que o depósito de cemento não é reversível após o tratamento com CsA ser cessado.

Cyclosporin A (CsA) is a potent immunosuppressor used in organ transplantation and in the management of various autoimmune diseases. Recent studies have shown that CsA stimulates deposition of cementum on root surfaces. The aim of this study was to evaluate the periapical cementum thickness and the apical foramen width in CsA-treated rats. Rats weighing 50 g were treated with a daily injection of 10 mg/kg body weight of CsA in the chow for 60 days. The cementum of the mandibular 1st molars was histologically and morphometricaly examined by analysis of 5-µm-thick serial buccolingual paraffin sections stained with hematoxylin and eosin. Histometric and stereologic analyses revealed the presence of large amounts of cementum in all root surfaces, particularly abundant in the periapical region and obliterating the foramen. The volume density of cementoblasts did not increase. Five to 90 days after the termination of CsA therapy, there was no reduction of cementum thickness. These results suggest that cementum deposition is not reversible after cessation of CsA treatment.

Este estudo avaliou a transmissão de Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) entre mulheres com periodontite crônica severa e seus filhos. A amostra constituiu-se de 30 mulheres com idade média de 36,1 ± 6,0 anos, mães de filhos com idade entre 7 e 16 anos. Apenas crianças cujas mães haviam sido colonizadas por Aa foram incluídas. Amostras de placa dentária subgengival foram colhidas de três sítios com profundidade de sonagem média de 7,3 ± 1,2 mm e perda de inserção clínica média de 7,9 ±1,5 mm e agrupadas em fluido de transporte reduzido (RTF). Estas amostras foram processadas e semeadas em meio seletivo ágar TSBV e incubados a 37ºC em atmosfera de microaerofilia por 5 dias. Aa foi identificado baseado na morfologia colonial, coloração de Gram e testes da catalase e oxidase. Aa foi detectado em 8 das 30 mulheres . Assim, 8 filhos destas mulheres, com idade média de 12 ± 3,7 anos foram investigados, mas Aa foi detectado em apenas 2 deles. Cepas de Aa dos 2 pares de mães e filhos foram submetidos a análise pela técnica de reação em cadeia de polimerase usando primers arbitrários (AP-PCR), mas os amplitipos de cada par não demonstraram similaridade. Portanto, não foi encontrada transmissão de Aa entre mulheres brasileiras com periodontite crônica severa e seus filhos.

This study evaluated the transmission of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) in women with severe chronic periodontitis and their children. Thirty women (mean age = 36.1±6.0 years) who were mothers of at least one child aged 7 to 16 years were enrolled. In order to investigate mother-child transmission of Aa, the children were also evaluated when their mothers were colonized by the bacterium. Subgingival plaque samples of each woman were collected from 3 sites (mean probing depth of 7.3±1.2 mm and mean clinical attachment level of 7.9±1.5 mm) and pooled in reduced transport fluid (RTF). These samples were processed, inoculated onto TSBV-agar selective medium and incubated at 37°C in microaerophilic atmosphere for 5 days. Aa was identified on the basis of colony morphology, Gram staining, catalase and oxidase reactions. Aa was found in 8 out of 30 women. Therefore, 8 children from these women (mean age= 12 ± 3.7 years) were evaluated, but Aa was found only in 2 of them. Aa strains of the two mother-child pairs were evaluated by arbitrarily-primed polymerase chain reaction (AP-PCR), although it was not found similarity between the amplitypes of each pair. No Aa transmission was found between Brazilian women with severe chronic periodontitis and their children.

A ciclosporina A (CsA) é usada como um agente imunossupressor e promove efeitos colaterais como o crescimento gengival que permanece um problema significante. Alguns fatores de risco podem aumentar esses efeitos, como a duração do tratamento. Ainda não há estudos estereológicos e bioquímicos explorando os efeitos de um longo período de terapia com CsA no tecido gengival. O objetivo do presente estudo foi investigar o nível de TGF-beta1 na saliva e descobrir a densidade de fibroblastos e fibras colágenas no tecido gengival de ratos tratados por um longo período com CsA. Os ratos foram tratados por 60, 120, 180 e 240 dias com injeções subcutâneas diárias de 10 mg/kg de peso corporal de CsA. Ao final dos períodos experimentais, a saliva era coletada para determinação do TGF-beta1. Após o processamento histológico, o epitélio oral e a área do tecido conjuntivo foram medidos, bem como a densidade volumétrica dos fibroblastos (Vf) e das fibras colágenas (Vcf). Após 60 e 120 dias de tratamento com CsA ocorreu um significante aumento de Vf e Vcf, bem como aumento significante de TGF-beta1. Após 180 e 240 dias, houve redução do crescimento gengival associada com decréscimo significante do nível de TGF-beta1, e também diminuição observada de Vf e Vcf. Os dados presentes neste estudo sugerem que, após longo período de terapia, ocorre uma diminuição do nível de TGF-beta1, o que deve contribuir para um aumento na atividade proteolítica dos fibroblastos na gengiva, favorecendo a normalidade da síntese da matriz extracelular.

Cyclosporin A (CsA) is used as an immunosuppressive agent and its prominent side effect is the induction of gingival overgrowth, which remains a significant problem. The risk factors appraised include the duration of treatment. However, there are no stereological and biochemical studies exploring the effects of long-term CsA therapy on gingival tissue. The purpose of the present study was to investigate the level of TGF-beta1 in saliva and describe the densities of fibroblasts and collagen fibers in the gingival tissue of rats treated with CsA for long periods. Rats were treated for 60, 120, 180 and 240 days with a daily subcutaneous injection of 10 mg/kg of body weight of CsA. At the end of the experimental periods, saliva was collected for the determination of TGF-beta1 levels. After histological processing, the oral epithelium and the connective tissue area were measured as well as the volume densities of fibroblasts (Vf) and collagen fibers (Vcf). After 60 and 120 days of CsA treatment, there was a significant increase in Vf and Vcf as well as a significant increase in TGF-beta1 levels. After 180 and 240 days, reduction in the gingival overgrowth associated with significant decreases in the level of TGF-beta1, and also decreased Vf and Vcf, were observed. The data presented here suggest that after long-term therapy, a decrease in TGF-beta1 levels occurs, which might contribute to an increase in the proteolytic activity of fibroblasts in the gingiva, favoring the normality of extracellular matrix synthesis.

O objetivo desta pesquisa foi avaliar o grau de diversidade genética dentro e entre populações de C. albicans isoladas da cavidade bucal de crianças saudáveis brasileiras classificadas em cinco categorias socioeconômicas (A até E), através da análise de Eletroforese de Enzimas Multilocos (MLEE). Alta diversidade genética foi observada em todas as populações, as quais mostraram predominância de alguns subtipos de C. albicans (Tipos Eletroforéticos - ETs). Contudo, nenhuma correlação foi observada entre ET-específico e população-específica de crianças. A existência de um ou mais grupos de ET altamente relacionados foi mostrada pela análise de agrupamento, o que sugere a existência de rotas de propagação direta e indireta de C. albicans entre crianças saudáveis. Alterações microevolucionárias foram observadas em algumas populações de C. albicans isoladas de crianças que tiveram a mesma, ou muito próxima, condição socioeconômica. Além disso, baixa transição de subtipos de C. albicans podem estar ocorrendo entre certas populações de crianças provenientes de alta e média/alta, ou alta e média/baixa, ou média/alta e média/baixa, categorias socioeconômicas, o que pode ser esclarecido pelas suas próprias características socioeconômica e cultural.

The aim of this research was to evaluate the genetic diversity within and between C. albicans populations isolated from the oral cavity of healthy Brazilian children classified into five socioeconomic categories (A to E). Multilocus Enzyme Electrophoresis (MLEE) analysis was the method used to assess genetic diversity. High genetic diversity was observed in all populations that showed predominance of some C. albicans subtypes (Electrophoretic Types - ETs). However, no correlation was observed between a specific ET and a specific population of children. Clustering analysis showed one or more highly related ET clusters, suggesting the existence of indirect and direct propagation routes of C. albicans among healthy children. Microevolutionary changes were observed in some C. albicans populations isolated from children with the same or very similar socioeconomic condition. Furthermore, low transition of C. albicans subtypes can be occurring among certain populations of children coming from high and medium/high, or high and medium/low, or medium/high and medium/low socioeconomic categories, which can also be explained by their own socioeconomic and cultural characteristics.

O objetivo desta pesquisa foi avaliar o grau de diversidade genética dentro e entre populações de C. albicans isoladas da cavidade bucal de crianças saudáveis brasileiras classificadas em cinco categorias socioeconômicas (A até E), através da análise de Eletroforese de Enzimas Multilocos (MLEE). Alta diversidade genética foi observada em todas as populações, as quais mostraram predominância de alguns subtipos de C. albicans (Tipos Eletroforéticos - ETs). Contudo, nenhuma correlação foi observada entre ET-específico e população-específica de crianças. A existência de um ou mais grupos de ET altamente relacionados foi mostrada pela análise de agrupamento, o que sugere a existência de rotas de propagação direta e indireta de C. albicans entre crianças saudáveis. Alterações microevolucionárias foram observadas em algumas populações de C. albicans isoladas de crianças que tiveram a mesma, ou muito próxima, condição socioeconômica. Além disso, baixa transição de subtipos de C. albicans podem estar ocorrendo entre certas populações de crianças provenientes de alta e média/alta, ou alta e média/baixa, ou média/alta e média/baixa, categorias socioeconômicas, o que pode ser esclarecido pelas suas próprias características socioeconômica e cultural.

The aim of this research was to evaluate the genetic diversity within and between C. albicans populations isolated from the oral cavity of healthy Brazilian children classified into five socioeconomic categories (A to E). Multilocus Enzyme Electrophoresis (MLEE) analysis was the method used to assess genetic diversity. High genetic diversity was observed in all populations that showed predominance of some C. albicans subtypes (Electrophoretic Types - ETs). However, no correlation was observed between a specific ET and a specific population of children. Clustering analysis showed one or more highly related ET clusters, suggesting the existence of indirect and direct propagation routes of C. albicans among healthy children. Microevolutionary changes were observed in some C. albicans populations isolated from children with the same or very similar socioeconomic condition. Furthermore, low transition of C. albicans subtypes can be occurring among certain populations of children coming from high and medium/high, or high and medium/low, or medium/high and medium/low socioeconomic categories, which can also be explained by their own socioeconomic and cultural characteristics.

O objetivo deste estudo foi determinar, através da técnica de reação em cadeia da polimerase com primers arbitrários (AP-PCR) a capacidade de diferenciar clones geneticamente distintos de Streptococcus mutans e estabelecer o grau de similaridade intrafamilial para os isolados. Para o presente estudo, foram selecionadas 22 famílias brasileiras. Amostras de saliva foram coletadas de todos os membros das famílias. Das crianças com idade entre 5-18 meses obteve-se amostras de placa dental. Após o isolamento das colônias com características morfológicas, realizou-se a identificação bioquímica com base na fermentação de carboidratos. O polimorfismo genético de Streptococcus mutans foi pesquisado através da técnica de AP-PCR utilizando-se o primer OPA-13. Os fragmentos de DNA obtidos foram amplificados e comparados através de eletroforese em gel de agarose. Dentre as espécies identificadas nas 22 famílias analisadas, o pai apresentou cepas com similaridade genética aos dos bebês em três das famílias analisadas; em 12 famílias a mãe apresentou cepas com similaridade com as cepas de Streptococcus mutans do bebê e 7 bebês apresentaram cepas de S. mutans com similaridade genética das cepas do irmão mais velho. A técnica de AP-PCR foi eficaz em demonstrar a heterogeneidade genética de Streptococcus mutans entre os membros das famílias brasileiras analisadas.

The aim of this study was to determine whether random amplified polymorphic DNA (AP-PCR) analysis is able to differentiate genetically different clones of mutans streptococci, in 22 Brazilian family members. Stimulated saliva samples were collected from fathers, mothers and infants. For 5-18 months babies with erupting primary dentition, plaque samples were collected using sterile tooth pick tips. From these samples, mutans streptococci were isolated on SB-20 agar plates. After growth, representative colonies were identified by biochemical methods on the basis of carbohydrate fermentation. Streptococcus mutans isolates were obtained from all family members and AP-PCR typed separately with a random primer (OPA-13). Bacterial cell lysates were used as template in PCR reactions and the amplified DNA fragments obtained were compared by agarose gel electrophoresis. Results demonstrated that the father shared the baby's genotype in three families and the mother shared the baby's genotype in 12 families seven babies harbored Streptococcus mutans strains similar to those of their siblings. The technique was able to demonstrate the genetic Streptococcus mutans in Brazilian family members.

O objetivo desse trabalho foi determinar a freqüência da infecção por Candida sp. em biópsias de lesões da mucosa bucal, assim como associar a presença de Candida sp. com lesões malignas e lesões com vários graus de displasia. Foram utilizadas 832 biópsias da mucosa bucal, previamente incluídas em parafinas, cujos blocos foram obtidos dos arquivos da Disciplina de Patologia da Faculdade de Odontologia de Araraquara da UNESP, no período entre 1990-2001. Três cortes seqüenciais foram corados pelo ácido periódico de Schiff (PAS). Do total de biópsias 27,2% foram PAS positivas, dessas 83,25% eram provenientes de pacientes do sexo masculino. Houve associação positiva entre infecção com displasia epitelial leve, moderada, severa, carcinoma espinocelular e hiperqueratose (p < 0,05). Não houve associação entre hiperplasia fibrosa inflamatória, líquen plano, granuloma piogênico (p < 0,05) com infecções fúngicas. A língua foi o sítio mais acometido por infecções em relação a outros sítios (p < 0,05). A partir dos dados quantitativos, concluiu-se que houve correlação positiva de infecção por fungos, lesões displásicas e carcinoma, sendo mais freqüente no sexo masculino. Estes dados não permitem inferir se o fungo causa displasia epitelial e carcinoma, mas confirmam a maior presença de Candida nessas lesões.

Candidosis is the most common fungal infection in the oral cavity, and is usually associated with local and systemic predisposing factors. The ocurrence and relevance of Candidal infection in oral lesions such as liquen planus, leukoplakias and carcinomas are still to be understood. The aim of the present study was to define the frequency of infection by Candida sp. on biopsies of oral mucosal lesions and associate its presence with malignant and dysplastic lesions. Histopathology reports issued between 1990 and 2001 inclusive were reviewed. Three sections of each mucosal biopsy were stained using the periodic acid-Schiff (PAS) technique. From the 832 biopsies 27.2% were PAS positive, of which 83.25% were obtained from male patients. There was positive association between fungic infection and mild, moderate and severe epithelial dysplasia, squamous cell carcinoma and hiperqueratosis (p < 0.05). There was no association between fungic infection and inflammatory fibrous hyperplasia, hyperkeratosis, lichen planus and pyogenic granuloma (p < 0.05). The frequency of infection in the tongue was significantly higher (p < 0.05) than in the other sites. Our results do not show a causal relation between Candida sp. and dysplastic lesions and carcinomas, but do confirm the higher presence of that microrganism in those lesions.

O objetivo deste trabalho foi analisar quantitativamente os microrganismos, Streptococcus do grupo mutans e Candida sp, da cavidade bucal de pacientes com carcinoma de orofaringe antes, durante e após o tratamento com radioterapia e correlacionar fatores salivares como pH, capacidade tampão (CT) e fluxo salivar (FS). Amostras de saliva foram coletadas, diluídas e inoculadas em ágar SB-20 e ágar Sabouraud, respectivamente para Streptococcus do grupo mutans e Candida sp. Previamente à diluição, a saliva concentrada foi analisada, determinando-se os fatores salivares. Após crescimento das colônias, o número de microrganismos foi determinado em UFC/ml. A análise dos resultados permitiu concluir que houve correlação positiva entre os fatores salivares e a presença de microrganismos ilustrada pelo aumento no número de UFC/ml dos microrganismos analisados concomitantemente com a diminuição do fluxo salivar. Os efeitos da radiação comprometeram a homeostasia salivar e favoreceram o aumento das infecções por leveduras e bactérias durante o tratamento radioterápico.

The aim of this study was to quantify the microorganisms Streptococcus mutans and Candida sp in the oral cavity of patients with oropharynx carcinoma, before, during and after radiotherapy, and to correlate the results with salivary factors such as pH, buffer capacity (CT) and flow rate (FS). Saliva samples were collected, diluted and inoculated in SB-20 agar and in Sabouraud agar, for Streptococcus mutans and Candida sp, respectively. Previously to dilution, the concentrated saliva was analyzed, and the salivary factors were determined. After the growth of colonies, the number of microorganisms was determined in CFU/ml. The analysis of the results allowed to conclude that the salivary factors are related to the presence of microorganisms, and that the number of CFU/ml increased as salivary flow rate decreased. The effects of radiation compromised salivary homeostasis and favored the increase of infection by yeasts and bacteria.